Evaluación de una técnica de Western-blot (Helicoblot 2.0) para la detección de anticuerpos frente a antígenos específicos de Helicobacter pylori en niños

Fundamento: El objetivo del presente trabajo fue evaluar la utilidad diagnóstica de la detección de anticuerpos frente a diferentes antígenos específicos de H. pylori (Hp) en los niños mediante un método de Western-blot comercialmente disponible (Helicoblot 2.0).
Material y métodos: Se incluyeron dos grupos de niños sintomáticos sometidos a endoscopia digestiva alta: 48pacientes (edad media, 10,19±3,40 años; 27 niños y 21niñas) con cultivo y/o histología positiva para Hp (Hp+) y 48 (edad media, 9,31±3,15 años; 34 niños y 14 niñas) con resultados simultáneamente negativos para ambos procedimientos (Hp-). La detección cualitativa de inmunoglobulina G (IgG), frente a los antígenos proteicos bacterianos de 19,5 kD (ureasa E), 26,5 kD (ureasa A), 30 kD (ureasa H), 35 kD y 89 kD (toxina vacuolizante VacA) y 116 kD (proteína CagA) se realizó mediante Western-blot (Helicoblot 2.0, Genelabs, Singapur).
Resultados: La detección de la reactividad en solitario de IgG frente a la proteína de 19,5 kD (ureasa E) aportó una especificidad del 100%. Sin embargo, los mejores niveles de exactitud por bandas aisladas se obtuvieron con la detección de la reactividad frente a los antígenos de 26,5 kD (ureasa A) y 30 kD (ureasa H). El criterio diagnóstico recomendado por esta técnica (positividad para al menos una banda de 116, 89 o 35 kD, o positividad para al menos 2 bandas de 30, 26,5 o 19,5 kD) demostró una exactitud del 88,5%.
Conclusiones: Helicoblot 2.0 es un método válido para el diagnóstico serológico de la infección por Hp en niños. Parece recomendable la adopción de un criterio que combine la detección de IgG frente a dos antígenos de ureasa (incluyendo preferentemente ureasa A) o de un antígeno de ureasa y una proteína asociada con virulencia (CagA o VacA).

Background: The aim of this study was to evaluate the diagnosis usefulness of antibodies detection against different specific antigens of H. pylori (Hp) in children by a Western-blot commercially available (Helicoblot 2.0)
Material and methods: 96 symptomatic paediatric patients in two groups were studied. Group 1: 48 patients Hp positive by culture and/or histology (mean age, 10.19±3.40 years; 27 boys and 21 girls) and group 2: 48 patients Hp negative by both culture and histology (mean age, 9.31±3.15 years; 34 boys and 14 girls). Qualitative IgG detection against the protein antigens of 19.5 kD (urease E), 26.5 kD (urease D), 30 kD (urease H), 35 kD, 89 kD (vacuolating toxin VacA) and 116 kD (cagA protein) was determined by a Western-blot assay (Helicoblot 2.0, Genelabs, Singapur).
Results: A specificity of 100% was obtained when reactivity against 19.5 kD protein (urease E) was considered alone. However, the best accuracy levels were observed with 26.5 kD (urease A) and 30 kD (urease H) antigens. An accuracy of 88.5% was observed when the manufacturer's recommended criteria was used (positivity of at least 116, 89 or 35 kD single bands or positivity of at least 2 bands of the 30, 26.5 or 19.5 kD).
Conclusions.: Helicoblot 2.0 is a good method to diagnosis Hp infection in children. A criteria combining IgG against 2urease antigens (preferentially urease A) or one urease antigen and a virulence associated protein (CagA o VacA) is recommended