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Vol. 106. Issue 3.
Pages 77-84 (January 2009)
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Vol. 106. Issue 3.
Pages 77-84 (January 2009)
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Descifrando la anatomía molecular de un tejido mediante análisis lipidómico por espectrometría de masas
Unraveling the molecular anatomy of a tissue by mass spectrometry lipid profiling
Ehun baten anatomia molekularraren azterketa masa-espektrometria bidezko analisi lipidomikoa eginez
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Antonio Veloso(1), Egoitz Astigarraga(1), Olatz Fresnedo(2), Lino Arisketa(2), Gabriel Barreda-Gómez(3), Laura Lombardero(3), María Teresa Giralt(3), Rafael Rodríguez-Puertas(3),, Bego˜a Ochoa(2),**, José A. Fernández(1),
(1) Departamento de Química Física, Facultad de Ciencia y Tecnología. Universidad del País Vasco, Leioa. Bizkaia. Euskadi. Espa˜a UE.
(2) Departamento de Fisiología; Universidad del País Vasco, Leioa. Bizkaia. Euskadi. Espa˜a UE.
(3) Departamento de Farmacología; Facultad de Medicina y Odontología. Universidad del País Vasco, Leioa. Bizkaia. Euskadi. Espa˜a UE.
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Resumen

La lipidómica está emergiendo como una ciencia imprescindible para la comprensión del funcionamiento de células y tejidos, dado que complementa el conocimiento obtenido mediante la genómica y la proteómica. La caracterización de los lípidos que componen una muestra biológica es una tarea compleja, debido a su enorme variedad y variabilidad, y por tanto necesita del empleo de técnicas de alto rendimiento para su consecución. La espectrometría de masas está demostrando ser la técnica ideal para llevar a cabo dicha tarea, especialmente desde el desarrollo de la imagen por espectrometría de masas. En el presente trabajo se presentan los resultados del empleo de una nueva matriz, 2-mercaptobenzotiazol, en el análisis lipidómico de extractos de hígado quiescente y regenerante de roedor mediante espectrometría de masas MALDI-TOF. La buena reproducibilidad entre individuos, permite la observación de diferencias en las especies lipídicas mayoritarias del hígado normal y el afectado de esteatosis. Se muestran además imágenes de la disposición anatómica de ciertas moléculas en el cerebro de rata, obtenidas representando la distribución de las concentraciones de diversas especies de lípidos a lo largo de los cortes de tejido. Por último, se discute la aplicación de estas técnicas a la investigación experimental y clínica.

Palabras Clave:
Lipidómica
espectrometría de masas
imagen
enfermedades hepáticas
técnicas de alto rendimiento
Summary

Lipidomics is emerging as an essential science to understand the functioning of cells and tissues, as it complements the knowledge obtained by genomics and proteomics. The characterization of lipid components in a biological sample is a complex task, due to its enormous variety and variability, and therefore requires of high throughput techniques. The employment of mass spectrometry is becoming the reference technique to carry out such task, specially since the development of the imaging mass spectrometry. In the present work, we present the results obtained using a new matrix: 2-mercaptobenzothiazole, in the lipidomic analysis of rodent quiescent and regenerating liver extracts. The good reproducibility between individuals allows the observation of differences in the main lipidic species in normal and steatotic liver. In addition, images of the distribution of several species in rat brain are shown, representing the distribution of some lipid species across tissue slices. Finally, the applicability of these techniques to experimental and clinical research is discussed.

Keyword:
Lipidomics
Mass spectrometry
imaging
hepatic disseases
high-throughput techniques
Laburpena

Lipidomika zelula eta ehunen funtzionamenduaren ulerpenerako ezinbesteko zientzia bezala ernetzen ari da, genomikaren eta proteomikaren bidez lortutako ezagutza osatzen baitu. Lipidoen aniztasun eta aldakortasunarengatik, mota honetako biomolekulen karakterizazioa zeregin konplexua da lagin biologikoetan, eta horretarako errendimendu handiko teknikak erabili behar dira. Zeregin hau betetzeko masen espektrometria teknika hobe ezina suertatzen ari da, bereziki masen espektrometria bidezko irudikapenaren garapenarekin. Lan honetan matrize berri batekin lortutako emaitzak aurkezten ditugu: 2-merkaptobentzotiazola erabili dugu birsorkuntzan eta egoera geldikorrean dauden gibelen erauzkien azterketa lipidomikoa egiteko karraskarietan. Indibiduoen arteko errepikakortasun onak, gibel normalaren eta esteatosia duenaren arteko desberdintasunak behatu ahal izatea ahalbidetzen du lipidoen espezie nagusietan. Gainera, arratoi-garuneko zenbait molekularen kokapen anatomikoak erakusten dira, ehunaren ebaketa histologikotan zeharreko lipidoen espezie desberdinen kontzentrazioen banaketa adieraziz lorturikoak. Azkenik, teknika hauek ikerkuntza experimentalean eta klinikoan eduki ditzaketen aplikazioak eztabaidatzen dira.

Hitz gakoak:
Masa-espektrometria
irudi-eraikuntza
gaixotasun hepatikoak
errendimendu handiko teknikak
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