Caracterizar mediante métodos microbiológicos y moleculares un aislamiento de Pseudomona aeruginosa, productor de la enzima KPC, procedente de una institución hospitalaria de la ciudad de Montería.
MétodosSe determinó la resistencia a los antibióticos (ATB) imipenem y meropenem mediante la técnica de microdilución en caldo; asimismo, se realizaron pruebas de sinergia con EDTA y test 3D para detectar la presencia de enzimas hidrolíticas, las cuales se confirmaron por PCR y secuenciación a partir de ADN plasmídico.
ResultadosLa secuenciación de un fragmento amplificado de 802 pb en el aislamiento de P. aeruginosa (COL27-08) procedente de la ciudad de Montería permitió identificarlo como portador del gen que codifica para la variante de la enzima KPC-2. Este aislamiento presentó multirresistencia y valores de concentración mínima inhibitoria de 126ug/ml y > 1024ug/ml para imipenem y meropenem, respectivamente.
DiscusiónLa detección de este aislamiento de P. aeruginosa, productor de KPC-2, se convierte en el segundo reporte de este tipo en el Caribe colombiano y el primero en esta ciudad. El personal médico y los microbiólogos deben estar atentos a la amenaza planteada por las enzimas KPC, incluso en zonas que no se consideren endémicas de cepas productoras. El uso de la técnica 3D en aislamientos de P. aeruginosa puede tener mayor especificidad que el método de Hodge.
To use molecular and microbiological methods on a P. aerugi nosa isolate to produce the KPC-2 enzyme at a hospital in the city of Monteria.
MethodsAntibiotic resistance to imipenem and meropenem was determined by the broth microdi lution technique. EDTA synergy and 3D tests were performed to detect the pres ence of hydrolytic enzymes, which were confirmed by PCR and sequencing from plasmid DNA.
ResultsSequencing of an amplified fragment of 802pb found in the P. aeruginosa (COL27-08) isolate from the city of Monteria showed it carried the genetic code for the enzyme variant KPC-2. This isolation showed multidrug resistance and MIC values of 126ug/ml and >1024ug/ml to imipenem and meropenem, respectively.
DiscussionThe detection of P. aeruginosa producing KPC-2 in this isolate is the second report of its kind in the Caribbean and the first in this city. Medical staff and microbiologists should be aware of the threat posed by KPC enzymes, even in areas where KPC-producing strains are not endemic.
By using the 3D technique, isolates of P. aeruginosa can have greater specificity than by using the Hodge method.
