VPH y metilación del gen htert en pacientes con cáncer cervical invasivo

Introducción

Diversos estudios han demostrado que la desregulación en la expresión de hTERT en cáncer cervical está medida por la patogénesis del virus del papiloma humano, sin embargo se sabe poco sobre el papel de la metilación del gen hTERT y su asociación con la infección por VPH en la carcinogénesis cervical.

Objetivo

Analizar la posible asociación entre el estado de metilación del gen hTERT y la infección por VPH en pacientes con cáncer cervical invasivo.

Materiales y métodos

87 muestras de mujeres con cáncer cervical invasivo fueron tipificadas para infecciones por VPH de alto riesgo (AR) y analizadas para determinar el estado de metilación del gen hTERT, utilizando el ensayo PCR-GP5+/GP6+-Reverse Line Blot (RLB) que permite la identificación de 14 tipos de VPH-AR, y un nuevo ensayo de metilación mediante modificación con bisulfito-PCR-RLB en dos regiones del gen que flanquean el centro del promotor y parte del primer exón (−240 a 120).

Resultados

81 muestras (93%) fueron VPH positivas. 74 de ellas presentaron infecciones simples (91,4%) y 7 infecciones múltiples (8,6%). En las infecciones simples el VPH 16 fue el tipo más frecuente en el 62,2% de las muestras, seguido por el VPH 18 (6.8%), VPH 35, 45, 52 (5,4%), VPH 31 (4,1%), VPH 56, 58, 59 (2,7%) y los VPH 39, 66 (1,3%). En infecciones múltiples el VPH 16 también fue el tipo más frecuente encontrándose en 5 de 7 muestras. Para el análisis de metilación 85 muestras fueron positivas (97,7%). En la región uno, 67 presentaron un patrón no metilado (78.8%) y 18 presentaron un patrón parcialmente metilado (21,2%). En la región dos 58 presentaron un patrón no metilado (68,2%) y 27 presentaron metilación parcial (31,8%). Ninguna de las regiones analizadas presentó metilación completa. El VPH 16 fue el más frecuente en las muestras no metiladas.

Conclusiones

Estos resultados sugieren que hay una posible asociación entre las infecciones por VPHs-AR y un patrón no metilado principalmente en la región uno (Core Promotor), como lo describen Jing Jiang et al en 2011, quienes reportaron que el VPH 16 se asocia con una baja metilación alrededor del sitio de inicio de la transcripción de hTERT. Estos datos concuerdan con lo reportado en la literatura, donde se ha demostrado que en la región dos (primer exón) existe un nivel de metilación mayor comparado con la región uno. Este es el primer trabajo que describe la asociación entre diferentes VPHs-AR y el estado de metilación del gen hTERT.