Environmental Scanning Electron Microscopy for Biofilm Detection in Tonsils

Introduction and objective

To describe an environmental scanning electron microscopic method for the study of biofilms in clinical samples. A comparison with standard scanning electron microscopy is performed.

Patients and method

Nine patients with a past history of recurrent tonsillitis underwent tonsillectomy. Samples from each patient were obtained for both conventional and environmental scanning electron microscopy. The tonsils removed from 2 patients with sleep apnoea syndrome were used as controls.

Results

Eight of 9 tonsils had biofilms on their surface. Scanning electron microscopy showed accumulations of bacteria covered by fibrillar structures resulting from the sample dehydration process. Environmental scanning electron microscopy provided a view of bacteria embedded in a homogeneous, amorphous substance that was preserved during the examination.

Conclusions

Environmental scanning electron microscopy permits the imaging of wet systems at different degrees of dehydration. It therefore allows researchers to observe biofilms in their natural hydrated state.

Introducción y objetivo

Describir un método ambiental con microscopio electrónico de barrido para el estudio de biopelículas en muestras clínicas. Se realiza una comparación con la microscopia electrónica de barrido convencional.

Pacientes y método

Se intervino de amigdalectomía a 9 pacientes con antecedentes de amigdalitis de repetición. Se obtuvieron muestras de cada uno para microscopia electrónica de barrido tanto convencional como ambiental. Como controles se empleó las amígdalas extirpadas de 2 pacientes intervenidos por síndrome de apnea del sueño.

Resultados

De las 9 amígdalas, 8 mostraron biopelículas en su superficie. La microscopia electrónica de barrido convencional mostró acumulaciones de bacterias cubiertas de estructuras fibrilares, originadas en el procedimiento de deshidratación de las muestras. La técnica ambiental proporcionó una imagen de las bacterias sumergidas en una sustancia homogénea y amorfa, que se pudo conservar durante el examen microscópico.

Conclusiones

La microscopia electrónica de barrido en su modalidad ambiental permite la observación de muestras húmedas en diferentes grados de deshidratación. Por lo tanto, permite al investigador la observación de las biopelículas en su estado natural de hidratación.