Receptor de la hormona de crecimiento humano: características estructurales, estudio de su expresión y regulación génica
HUMAN GROWTH HORMONE RECEPTOR: STRUCTURAL CHARACTERISTICS. EXPRESSION STUDY AND GENE REGULATION
Leído
64014
Vecesse ha leído el artículo
171
Total PDF
63843
Total HTML
Compartir estadísticas
array:18 [ "pii" => "8612" "issn" => "15750922" "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "1999-08-01" "documento" => "article" "crossmark" => 0 "subdocumento" => "fla" "cita" => "Endocrinol Nutr. 1999;46:235" "abierto" => array:3 [ "ES" => false "ES2" => false "LATM" => false ] "gratuito" => false "lecturas" => array:2 [ "total" => 20859 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 9 "HTML" => 20783 "PDF" => 67 ] ] "itemSiguiente" => array:15 [ "pii" => "8613" "issn" => "15750922" "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "1999-08-01" "documento" => "article" "crossmark" => 0 "subdocumento" => "fla" "cita" => "Endocrinol Nutr. 1999;46:241" "abierto" => array:3 [ "ES" => false "ES2" => false "LATM" => false ] "gratuito" => false "lecturas" => array:2 [ "total" => 1820 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 8 "HTML" => 1766 "PDF" => 46 ] ] "en" => array:9 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "DIETAS BAJAS EN CALCIO EN EL HOMBRE Y EN ANIMALES DE EXPERIMENTACIÓN; MODELOS CLÁSICOS PARA ENTENDER LA HOMEÓSTASIS CÁLCICA Y EL SISTEMA ENDOCRINOLÓGICO DE LA VITAMINA D" "tieneTextoCompleto" => "en" "tieneResumen" => array:2 [ 0 => "es" 1 => "en" ] "paginas" => array:1 [ 0 => array:1 [ "paginaInicial" => "241" ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "en" => array:1 [ "titulo" => "Low calcium diets in humans and in experimental animals: classic models to understand calcium homeostasis and vitamin D endocrine system" ] ] "contieneResumen" => array:2 [ "es" => true "en" => true ] "contieneTextoCompleto" => array:1 [ "en" => true ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "N Tolosa de Talamoni, V Centeno" "autores" => array:2 [ 0 => array:2 [ "Iniciales" => "N" "apellidos" => "Tolosa de Talamoni" ] 1 => array:2 [ "Iniciales" => "V" "apellidos" => "Centeno" ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "en" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/8613?idApp=UINPBA00004N" "url" => "/15750922/0000004600000007/v0_201307121157/8613/v0_201307121158/en/main.assets" ] "itemAnterior" => array:15 [ "pii" => "8611" "issn" => "15750922" "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "1999-08-01" "documento" => "article" "crossmark" => 0 "subdocumento" => "fla" "cita" => "Endocrinol Nutr. 1999;46:228" "abierto" => array:3 [ "ES" => false "ES2" => false "LATM" => false ] "gratuito" => false "lecturas" => array:2 [ "total" => 6886 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 8 "HTML" => 6833 "PDF" => 45 ] ] "es" => array:7 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "Aplicación terapéutica de los agonistas adrenérgicos ß3 en la obesidad y la diabetes" "tieneTextoCompleto" => "es" "paginas" => array:1 [ 0 => array:1 [ "paginaInicial" => "228" ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "en" => array:1 [ "titulo" => "THERAPEUTIC APPLICATION OF ß3 ADRENERGIC AGONISTS IN OBESITY AND DIABETES" ] ] "contieneTextoCompleto" => array:1 [ "es" => true ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "FI MILAGRO, L FORGA, JA MARTÍNEZ" "autores" => array:3 [ 0 => array:2 [ "Iniciales" => "FI" "apellidos" => "MILAGRO" ] 1 => array:2 [ "Iniciales" => "L" "apellidos" => "FORGA" ] 2 => array:2 [ "Iniciales" => "JA" "apellidos" => "MARTÍNEZ" ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "es" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/8611?idApp=UINPBA00004N" "url" => "/15750922/0000004600000007/v0_201307121157/8611/v0_201307121158/es/main.assets" ] "es" => array:10 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "Receptor de la hormona de crecimiento humano: características estructurales, estudio de su expresión y regulación génica" "tieneTextoCompleto" => true "paginas" => array:1 [ 0 => array:1 [ "paginaInicial" => "235" ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:3 [ "autoresLista" => "J CAMPIÓN, B MAESTRO, C CALLE, N DÁVILA, B BARCELÓ" "autores" => array:5 [ 0 => array:3 [ "Iniciales" => "J" "apellidos" => "CAMPIÓN" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "affa" ] ] ] 1 => array:3 [ "Iniciales" => "B" "apellidos" => "MAESTRO" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "affa" ] ] ] 2 => array:3 [ "Iniciales" => "C" "apellidos" => "CALLE" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "affa" ] ] ] 3 => array:3 [ "Iniciales" => "N" "apellidos" => "DÁVILA" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">b</span>" "identificador" => "affb" ] ] ] 4 => array:3 [ "Iniciales" => "B" "apellidos" => "BARCELÓ" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">b</span>" "identificador" => "affb" ] ] ] ] "afiliaciones" => array:2 [ 0 => array:3 [ "entidad" => "Departamento de Bioquímica y Biología Molecular. Facultad de Medicina. Universidad Complutense. Madrid." "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "affa" ] 1 => array:3 [ "entidad" => "Servicio de Endocrinología. Hospital Puerta de Hierro." "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">b</span>" "identificador" => "affb" ] ] ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "en" => array:1 [ "titulo" => "HUMAN GROWTH HORMONE RECEPTOR: STRUCTURAL CHARACTERISTICS. EXPRESSION STUDY AND GENE REGULATION" ] ] "textoCompleto" => "<p class="elsevierStylePara"> Se revisan los conocimientos actuales sobre el receptor de la hormona de crecimiento (GHR) humano, exponiendo en primer lugar sus características estructurales, su forma soluble en la circulación y la distribución tisular del receptor. Así mismo, se describen las características hasta ahora conocidas del gen de este receptor y sus isoformas. Por último, se analizan los datos existentes sobre los mecanismos de regulación de la expresión de este gen, por su propia hormona, por la proteína ligadora de la hormona de crecimiento (GHBP), por glucocorticoides y estrógenos. </p><p class="elsevierStylePara"> La hormona de crecimiento (GH) posee una variedad de efectos biológicos en un número considerable de tejidos diana, particularmente efectos metabólicos y de crecimiento sobre el esqueleto y los tejidos blandos. </p><p class="elsevierStylePara"> Las acciones de la GH a nivel celular, tales como efectos mitogénicos, efectos metabólicos insulínicos y antiinsulínicos, así como las acciones reguladoras de su propio gen, están mediadas por receptores. El receptor de la GH (GHR) pertenece a la misma familia de los receptores de prolactina y a muchos receptores de la superfamilia de la citocina/hematopoyetina<span class="elsevierStyleSup">1</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> Los receptores de esta superfamilia tienen en común un dominio extracelular, involucrado en la unión al ligando, una porción transmembranal y un dominio intracelular de longitud variable. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">RECEPTOR DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO HUMANO</span></p><p class="elsevierStylePara"> Este receptor fue clonado por primera vez en 1987 por Leung et al<span class="elsevierStyleSup">2</span>, a partir de una genoteca de ADNc hepático humano. Consta de una glucoproteína de cadena simple que contiene 620 aminoácidos, con un peso molecular de 110.000 D. Posee un dominio extracelular compuesto de 246 aminoácidos, un dominio transmembranal de 24 aminoácidos y un dominio citoplasmático constituido por 350 aminoácidos<span class="elsevierStyleSup">2</span>. El dominio extracelular contiene dos pares de cisteínas unidas por puentes disulfuro y un motivo WS (Trp-Ser-X-Trp-Ser) característico de los receptores de la superfamilia de la citocina. En el dominio citoplasmático, cercano a la membrana, se encuentra una porción compuesta por 8 aminoácidos, rica en prolina, indispensable en importantes funciones como síntesis proteica y lipídica, así como en el transporte de glucosa. </p><p class="elsevierStylePara"><img src="2351.GIF" width="229" height="464"></img></p><p class="elsevierStylePara"> Una característica particular del dominio extracelular es que también se encuentra en el suero como una proteína soluble ligadora de GH, denominada GHBP<span class="elsevierStyleSup">3</span>. Esta proteína posee una alta afinidad por la GH y es idéntica desde un punto de vista antigénico al receptor de membrana de la GH<span class="elsevierStyleSup">4</span>. El análisis directo de su secuencia aminoacídica demostró correspondencia con el dominio extracelular del GHR que está involucrado en la unión a la hormona<span class="elsevierStyleSup">2</span> (fig. 1). </p><p class="elsevierStylePara"> El conocimiento de que la GHBP se encuentra en la sangre y que esta proteína representa el dominio extracelular del receptor de la GH abrió nuevas y accesibles vías para el estudio de este receptor en humanos. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">CARACTERISTICAS DE LA GHBP</span></p><p class="elsevierStylePara"> La GHBP fue descrita por primera vez en el plasma circulante humano en 1986 por Baumann et al<span class="elsevierStyleSup">5</span> y Herington et al<span class="elsevierStyleSup">6</span>. Es una glucoproteína de cadena simple compuesta de 246 aminoácidos y con un peso molecular de 60 kD. Posee una serie de propiedades que le permiten unirse a la GH in vivo, como son: alta especificidad, alta afinidad, una tasa de asociación rápida y una limitada capacidad. </p><p class="elsevierStylePara"> La GHBP en el hombre (y conejo) es generada por una rotura proteolítica del GHR unido a la membrana. El sitio preciso de rotura, así como la proteasa responsable para generar la GHBP, es desconocido hasta el momento. Ninguna de las proteasas clásicas parece estar involucrada. Se ha apuntado que el grupo sulfidrilo de una cisteína libre localizada en la región de la rotura podría desempeñar un papel importante en la proteólisis<span class="elsevierStyleSup">7</span>. En estudios utilizando líneas celulares de hepatoma humano transfectadas con el ADNc del GHR de conejo, en las que se ha analizado un amplio número de inhibidores de proteasas, tampoco se han obtenido resultados concluyentes<span class="elsevierStyleSup">8,9</span>. Un reciente trabajo describe que la liberación de la GHBP a un medio de linfocitos humanos IM-9 es bloqueada por medio de un inhibidor de una metaloproteasa, implicando a miembros de la familia de las metaloproteasas en la generación de la GHBP<span class="elsevierStyleSup">10</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> La función de la GHBP es poco conocida, pero el hecho de que esté presente en el suero humano a concentraciones suficientes para unirse a la GH en una proporción del 30-50%<span class="elsevierStyleSup">11</span> sugiere que puede tener un determinado papel biológico. Numerosas propuestas han sido hechas en apoyo de esta hipótesis. Así, Baumann et al<span class="elsevierStyleSup">11</span> demostraron que la GHBP incrementa la vida media de la GH disminuyendo su tasa de aclaramiento metabólico. Los estudios de Veldhuis et al<span class="elsevierStyleSup">12</span> evidenciaron que la GHBP circulante actúa, de alguna manera, frenando la secreción pulsátil de la GH y elevando la GH libre durante los períodos de interpulso, actuando como un reservorio de la hormona. Aunque estas acciones parecen incrementar la biopotencia de la GH in vivo<span class="elsevierStyleSup">13</span>, in vitro la GHBP se une a la GH formando un complejo e inhibiendo de esta forma la unión de la hormona a sus receptores en los tejidos diana y ciertas respuestas dependientes de GH, tales como mitogénesis y diferenciación<span class="elsevierStyleSup">14</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> Otros importantes aspectos acerca de lo que se conoce de este fragmento circulante del GHR, en los que no entramos en esta revisión, están recogidos en trabajos y revisiones nuestros y de otros autores<span class="elsevierStyleSup">3,15-21</span>. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">DISTRIBUCION TISULAR DEL RECEPTOR DE GH</span></p><p class="elsevierStylePara"> El GHR humano ha sido estudiado principalmente en el hígado, donde se han encontrado sitios de unión somatogénicos en cantidades suficientes que permitan una medida exacta por análisis de radiorreceptores<span class="elsevierStyleSup">22,23</span>. En grado menor, también se han descrito sitios de unión de la GH a fibroblastos humanos<span class="elsevierStyleSup">24</span>, células mononucleares periféricas<span class="elsevierStyleSup">25</span> y adipocitos<span class="elsevierStyleSup">26</span>, pero estos estudios no han sido siempre reproducibles. Así mismo, por análisis inmunohistoquímicos se ha demostrado la existencia del GHR en piel humana y fibroblastos<span class="elsevierStyleSup">27</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> Por estudios en animales, en donde se han demostrado sitios de unión específicos para la GH en una más amplia variedad de tejidos<span class="elsevierStyleSup">28</span>, se ha sugerido la existencia de subtipos del GHR que podrían estar asociados con las múltiples acciones biológicas de esta hormona. En apoyo de esto, existen estudios de inmunoprecipitación y <span class="elsevierStyleItalic">cross-linking</span> en hígado, glándula mamaria y adipocitos de conejo<span class="elsevierStyleSup">29-30</span>, hígado de ratón<span class="elsevierStyleSup">31</span> y una línea celular de insulinoma de rata<span class="elsevierStyleSup">32</span>, que sugieren la posible existencia de tales formas del GHR. </p><p class="elsevierStylePara"><img src="2352.GIF" width="476" height="183"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">GEN DEL RECEPTOR DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO</span></p><p class="elsevierStylePara"> El gen del GHR está presente en el genoma como una sola copia en todas las especies estudiadas y en el genoma humano se encuentra localizado en la región correspondiente a las posiciones 13.1-12 del brazo corto del cromosoma 5 (5p13-p12) con una longitud de al menos 87 kb<span class="elsevierStyleSup">33</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> La caracterización de la estructura del gen del GHR<span class="elsevierStyleSup">34</span> reveló la existencia de 8 exones que codifican para el receptor y varios exones adicionales en la región 5' no traducida. Estos 9 exones que comprenden también la región 3' no traducida son numerados del 2 al 10. Los exones del 2 al 9 están constituidos por pares de bases de tamaño variable que van desde 66 a 179 pb. El exón 2 es prácticamente coincidente con la secuencia señal para la secreción putativa del receptor. La región extracelular del receptor que tiene la capacidad de unirse a la GH está codificada por los exones 3 al 7. El exón 8 se corresponde con el dominio transmembranal y el exón 10 codifica casi todo el dominio citoplasmático del receptor, así como a la región 3' no traducida, y comprende alrededor de 3.400 pb. La mayor parte de la región 5' no traducida parece estar presente en series de exones procesados de forma alternativa que no han sido aún determinados (fig. 2). </p><p class="elsevierStylePara"><img src="2353.GIF" width="229" height="217"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">ARNm(s) DEL GEN DEL RECEPTOR DE HORMONA DE CRECIMIENTO</span></p><p class="elsevierStylePara"> Se ha demostrado que en el hombre, el conejo y otras especies, el principal transcrito del gen del GHR es un ARNm de alrededor de 4,5 kb detectado por análisis Northern. En el hombre, la expresión de este transcrito ha sido detectada principalmente en el hígado, pero también en diferentes zonas del aparato digestivo tales como esófago, intestino y colon, y en fibroblastos<span class="elsevierStyleSup">27,35</span> y en algunas líneas celulares como IM-9, HuH7 y hOB. Por el contrario, se ha demostrado que en ratas y ratones existen dos ARNm(s), uno de 4,5 kb que codifica para el receptor de longitud completa y otro de alrededor de 1,2-1,5 kb que codifica exclusivamente para la porción extracelular<span class="elsevierStyleSup">36,37</span>. Las dos especies han sido encontradas principalmente en tejido hepático, así como en numerosas líneas celulares. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">ISOFORMAS DEL GEN DEL RECEPTOR DE HORMONA DE CRECIMIENTO</span></p><p class="elsevierStylePara"> El exón 3 del gen del GHR humano, por un procesamiento alternativo, da lugar a dos isoformas del receptor: uno que codifica para el receptor de longitud completa (GHR+3), y el otro que codifica para un receptor al que le falta el exón 3 (GHR-3) con una deleción de 22 aminoácidos (residuos del <br></br> 7 al 28) en el dominio extracelular del receptor. Hay evidencias de que esta pérdida de aminoácidos no tiene un impacto aparente sobre la unión al ligando o a las señales de transducción<span class="elsevierStyleSup">38-40</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> Los primeros estudios evidenciando estas dos isoformas fueron realizados en tejidos humanos de placenta, hígado, riñón y leptomeninges, así como en algunas líneas celulares. Urbanek et al<span class="elsevierStyleSup">38</span> encontraron que, en el hígado y riñón, únicamente se expresaba la isoforma GHR+3, mientras que en la placenta, villi y amnion, estaba presente sólo la isoforma GHR-3, concluyendo que las dos isoformas eran específicas de tejido. Posteriormente, Sobrier et al<span class="elsevierStyleSup">39</span> encontraron que ambas isoformas se expresaban igualmente en hígado, tejido mamario y placenta, mientras que en la próstata, pulmón y tejido adiposo el transcrito predominante era GHR+3. En estos estudios, se utilizó una sola clase de <span class="elsevierStyleItalic">primers sense/antisense</span> para detectar las dos isoformas. En un trabajo realizado por nuestro grupo utilizando un <span class="elsevierStyleItalic">primer antisense</span> común a las dos isoformas y dos <span class="elsevierStyleItalic">primers sense</span> diferentes, diseñados para reconocer específica e independientemente cualquiera de las dos isoformas, se encontró que en los 18 tejidos examinados estaban presentes las dos isoformas y que las proporciones de cada una variaba considerablemente dependiendo del tejido<span class="elsevierStyleSup">41</span> (tabla 1). Por otro lado, hay trabajos que encuentran que la expresión de las dos isoformas varía entre individuos, mientras que diferentes tejidos de un mismo sujeto muestran un similar patrón de expresión<span class="elsevierStyleSup">42</span>. Más recientemente, el estudio de Zogopoulus et al<span class="elsevierStyleSup">43</span> en tejidos humanos fetales y posnatales describe que las dos isoformas están presentes ya en el primer trimestre de la vida fetal en múltiples tejidos y que el patrón de expresión de estos transcritos es específico de individuo y puede ser regulado por el desarrollo. </p><p class="elsevierStylePara"> Las disparidades existentes entre los diferentes estudios acerca de estas dos isoformas, independientemente de que puedan deberse a razones técnicas, sugieren que el procesamiento alternativo del exón 3 podría también estar determinado por factores distintos a los relacionados con especificidad de tejido, tales como condiciones metabólicas. Además, queda por determinar su significación fisiológica o en qué grado la expresión diferencial de estas dos isoformas desempeña un papel en la modulación de los numerosos efectos de la GH. </p><p class="elsevierStylePara"> Cabe mencionar, por último, que recientes estudios han identificado una tercera isoforma del gen del GHR en varios tejidos humanos. Su secuencia es idéntica a la del GHR, con la excepción de una deleción de 26 pb en la porción citoplasmática del receptor que lleva a la creación de un codón <span class="elsevierStyleItalic">stop</span> en la posición 280 aminoacídica y, en consecuencia, a una proteína-receptor gravemente truncada con pérdida del 97,5% del dominio intracelular<span class="elsevierStyleSup">44,45</span>. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">REGULACION DE LA EXPRESION DEL GEN DEL RECEPTOR DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO HUMANO</span></p><p class="elsevierStylePara"> El conocimiento sobre la regulación de la expresión del gen del GHR humano es todavía escaso, mientras que la mayoría de los datos existentes a este respecto son los derivados de estudios del gen del GHR en animales. No obstante esto, en este apartado nos vamos a referir exclusivamente a los datos en humanos. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Regulación por la hormona de crecimiento</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los efectos de la GH sobre la regulación de la expresión del gen de su propio receptor han sido analizados en la línea celular del hepatoma humano HuH7<span class="elsevierStyleSup">46</span>. En estos experimentos, las células fueron tratadas con diferentes dosis de GH humana a determinados tiempos, después de lo cual se midieron las concentraciones del ARNm del GHR por <span class="elsevierStyleItalic">RNAase protection assays</span> empleando una sonda que codifica para las regiones transmembranal y citoplasmática del receptor. Las células tratadas con GH a concentraciones fisiológicas (12,5, 25 y 50 ng/ml) dieron como resultado un aumento en las concentraciones del ARNm del GHR dentro de las primeras 3 h de adición de la hormona, aumento que se mantuvo estable hasta al menos 48 h. Por el contrario, el tratamiento con concentraciones tanto suprafisiológicas de GH (150 y 500 ng/ml) como intrafisiológicas (1,4 ng/ml) llevó primero, en el caso de dosis altas de GH, a una disminución transitoria llegando a un nadir en las primeras 3 h, a partir de lo cual la expresión fue restaurada, presentando posteriormente un progresivo aumento de la expresión del gen, y en segundo lugar, en el caso de dosis muy bajas de GH, las concentraciones de ARNm del GHR presentaron una disminución constante, en las condiciones del estudio<span class="elsevierStyleSup">46</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> Por análisis nucleares <span class="elsevierStyleItalic">run-on assays</span>, que fueron realizados por estos autores bajo las mismas condiciones de tiempo de los empleados para medir las concentraciones de ARNm, se constató que los cambios en la expresión del gen del GHR tras el tratamiento con GH eran debidos a alteraciones en su tasa de transcripción génica. El tratamiento con cicloheximida no modificó significativamente los cambios observados en la tasa de transcripción, lo que indicaría que el incremento no es dependiente de una nueva síntesis proteica. </p><p class="elsevierStylePara"> En un trabajo posterior<span class="elsevierStyleSup">47</span>, estos mismos autores realizaron una serie de experimentos similares, pero esta vez utilizando una sonda correspondiente al dominio extracelular del receptor que codifica para la GHBP. Los resultados indicaron que los cambios producidos en las concentraciones del ARNm del GHR por efecto del tratamiento con GH eran idénticos a los detectados anteriormente usando la sonda que codificaba a las secuencias transmembranales y citoplasmáticas del GHR. Estos datos corroboran, por un lado, que la GH es capaz de regular el gen de su propio receptor, siendo esta regulación dependiente de dosis y tiempo y, por otro, que en humanos el dominio extracelular (GHBP) y los dominios transmembranal/citoplasmático del GHR son codificados por un solo ARNm del gen del GHR. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Regulación por la GHBP</span></p><p class="elsevierStylePara"> Como se ha mencionado anteriormente, la GHBP es una variante truncada del GHR. El hecho que esta proteína no es solamente conservada a través de la evolución, sino que también es producida por diferentes mecanismos, lleva a la presunción de que tiene una importante función biológica. Con el objeto de estudiar si la GHBP sérica desempeña un papel activo dentro de la acción de la GH y si es capaz de regular la transcripción génica del GHR, los investigadores antes citados<span class="elsevierStyleSup">46,47</span> han examinado recientemente el efecto de diferentes concentraciones de GHBP y GH contenidos en el suero de pacientes con síndrome de enanismo tipo Laron (LTD), patología que cursa generalmente con concentraciones normales o altas de GH y bajas o ausentes de GHBP sobre las concentraciones de ARNm del GHR. El suero fue añadido al medio de cultivo de células hepáticas humanas HuH7 y la expresión del gen del GHR fue analizada después de 3 h de la adición del suero a las células<span class="elsevierStyleSup">48</span>. En el suero de los pacientes con LTD que contenían tanto concentraciones de GH muy altas (media: 128 ng/ml) como normales-bajas (media: 1,4 ng/ml) y ausencia de GHBP, se observó una disminución de los niveles de expresión del gen del GHR, después de las 3 h de incubación, corroborando los experimentos citados anteriormente sobre la regulación del GHR por su propia hormona<span class="elsevierStyleSup">46,47</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> El efecto de altas concentraciones de GHBP sobre la transcripción génica del GHR fue observada en un grupo de pacientes obesos que cursaban con bajas concentraciones <br></br> de GH (inferior a 0,5 ng/ml) y altos valores de GHBP (2,5 veces por encima del rango normal). En estos experimentos, se observó un descenso aún más pronunciado en las concentraciones del ARNm del GHR. Estos datos indicarían que la GHBP podría tener algún efecto sobre la transcripción génica del GHR. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Regulación por glucocorticoides</span></p><p class="elsevierStylePara"> Es conocido que mientras concentraciones altas de glucocorticoides causan osteoporosis, la GH a concentraciones fisiológicas es necesaria para una normal remodelación ósea<span class="elsevierStyleSup">49-51</span>. Por esto, el estudio de la interacción de la GH y los glucocorticoides en la regulación del metabolismo óseo humano tiene gran interés. En este sentido, se ha demostrado que en células osteoblásticas humanas cultivadas (hOB) hay receptores de GH y que esta hormona a través de estos receptores ejerce una acción estimuladora directa sobre la formación del hueso<span class="elsevierStyleSup">52-54</span>. </p><p class="elsevierStylePara"> Recientemente, Swolin-Eide et al<span class="elsevierStyleSup">55</span> han estudiado el efecto del cortisol sobre la expresión del gen del GHR en células hOB. En estos experimentos, las células fueron incubadas con diferentes concentraciones de cortisol por un período de 16 h, después de lo cual se midieron las concentraciones de ARNm del GHR por <span class="elsevierStyleItalic">RNAase protection assay</span>, utilizando una sonda que reconoce el dominio intracelular del receptor de GH. Los resultados indicaron un incremento en las concentraciones del ARNm del GHR, que fue dependiente de la dosis utilizada, observándose el máximo efecto a una concentración de 10<span class="elsevierStyleSup">­6</span> M. Además, este efecto estimulador del cortisol sobre la expresión del gen del GHR fue también dependiente del tiempo, y se observó el máximo incremento a las 12 h después de la adición de la hormona. El incremento en las concentraciones de ARNm del GHR fue acompañado por un aumento de la unión de <span class="elsevierStyleSup">125</span>I GH a sus receptores en estas células, alcanzando el valor máximo a las 24 h. </p><p class="elsevierStylePara"> Estos resultados demuestran, por primera vez, los efectos de los glucocorticoides sobre la expresión del gen del GHR en células humanas y abren una nueva vía a posteriores estudios encaminados a clarificar si la regulación en la expresión del gen del GHR mediado por glucocorticoides puede tener importancia en la fisiología ósea humana. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Regulación por estrógenos</span></p><p class="elsevierStylePara"> Como ya hemos dicho en el párrafo anterior, la GH es un factor importante en la regulación de la masa ósea. Se ha observado que pacientes con deficiencia de GH tienen una masa ósea reducida<span class="elsevierStyleSup">51,56</span>, que puede ser tratada con una terapia de sustitución de GH<span class="elsevierStyleSup">51</span>. Por otro lado, es conocido que la pérdida de masa ósea en mujeres posmenopáusicas es debida principalmente a una deficiencia estrogénica. </p><p class="elsevierStylePara"> Recientemente, Slootweg et al<span class="elsevierStyleSup">57</span> han presentado la primera evidencia de que los estrógenos en células osteoblásticas humanas son capaces de estimular tanto la unión de la GH a sus receptores como las concentraciones del ARNm del GHR, así como la actividad proliferativa de la GH en estas células. El efecto estimulador del 17 ß -estradiol fue dependiente de dosis y tiempo, alcanzando un efecto máximo a las 12 h de incubación de las células con una concentración de 10<span class="elsevierStyleSup">­12</span> M de 17 ß -estradiol. </p><p class="elsevierStylePara"> Esta modulación positiva inducida por los estrógenos indicaría que estas hormonas potencian el efecto de la GH en el receptor. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">CONCLUSIONES</span></p><p class="elsevierStylePara"> En conclusión, hemos revisado los datos existentes sobre el GHR humano, comentando los principales aspectos de su estructura, niveles de expresión y regulación génica. </p><p class="elsevierStylePara"> Dado que los estudios más extensos de este receptor están realizados en animales y que los datos existentes en humanos, especialmente los referidos a mecanismos de regulación génica, son escasos, sería necesario el desarrollo de nuevas líneas celulares humanas que aportarán modelos útiles para clarificar la regulación del receptor hormonal. </p>" "tienePdf" => false "PalabrasClave" => array:1 [ "es" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Palabras clave" "identificador" => "xpalclavsec204436" "palabras" => array:2 [ 0 => "Receptor de GH" 1 => "Expresión y regulación génica" ] ] ] ] "bibliografia" => array:2 [ "titulo" => "Bibliografía" "seccion" => array:1 [ 0 => array:1 [ "bibliografiaReferencia" => array:18 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "bib1" "etiqueta" => "1" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "The prolactin/growth hormone receptor family." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:4 [ 0 => "Kelly PA" 1 => "Djiane J" 2 => "Postel-Vinay MC" 3 => "Edery M." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:1 [ "Revista" => array:5 [ "tituloSerie" => "Endocrine Rev" "fecha" => "1991" "volumen" => "12" "paginaInicial" => "235" "paginaFinal" => "251" ] ] ] ] ] ] 1 => array:3 [ "identificador" => "bib2" "etiqueta" => "2" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Growth hormone receptor and serum binding protein: purification, cloning and expression." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:3 [ 0 => "Leung DW" 1 => "Spencer SA" 2 => "Cachianes G." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:1 [ "Revista" => array:5 [ "tituloSerie" => "Nature (Lond)" "fecha" => "1987" "volumen" => "330" "paginaInicial" => "537" "paginaFinal" => "543" ] ] ] ] ] ] 2 => array:3 [ "identificador" => "bib3" "etiqueta" => "3" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Minireview: growth hormone-binding proteins." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:1 [ 0 => "Baumann G." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:1 [ "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Proc Soc Exp Biol Med" "fecha" => "1993" "volumen" => "202" "paginaInicial" => "392" "paginaFinal" => "400" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8456102" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 3 => array:3 [ "identificador" => "bib4" "etiqueta" => "4" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Serum and liver cytosolic growth hormone-binding proteins are antigenically identical with liver membrane "receptor" types 1 and 2." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:2 [ 0 => "Barnard R" 1 => "Waters MJ." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:1 [ "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Biochem J" "fecha" => "1986" "volumen" => "237" "paginaInicial" => "885" "paginaFinal" => "892" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2432878" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 4 => array:3 [ "identificador" => "bib5" "etiqueta" => "5" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "A specific growth hormone-binding protein in human plasma: initial characterization." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:5 [ 0 => "Baumann G" 1 => "Stolar MW" 2 => "Amburn K" 3 => "Barsano CP" 4 => "De Vries BC." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/jcem-62-1-134" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Endocrinol Metab" "fecha" => "1986" "volumen" => "62" "paginaInicial" => "134" "paginaFinal" => "141" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3940261" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 5 => array:3 [ "identificador" => "bib6" "etiqueta" => "6" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Identification and characterization of specific binding proteins for human growth hormone in normal human sera." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:3 [ 0 => "Herington AC" 1 => "Ymer S" 2 => "Stevenson J." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1172/JCI112507" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Invest" "fecha" => "1986" "volumen" => "77" "paginaInicial" => "1817" "paginaFinal" => "1823" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3711337" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 6 => array:3 [ "identificador" => "bib7" "etiqueta" => "7" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Release of growth hormone binding protein from IM-9 lymphocytes by endopeptidase is dependent on sulphydryl group inactivation." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:2 [ 0 => "Trivedi B" 1 => "Daughaday WH." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/endo-123-5-2201" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Endocrinology" "fecha" => "1988" "volumen" => "123" "paginaInicial" => "2201" "paginaFinal" => "2206" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2844506" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 7 => array:3 [ "identificador" => "bib8" "etiqueta" => "8" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Control of growth hormone (GH) binding protein release from human hepatoma cells expressing full-length GH receptor." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:5 [ 0 => "Harrison SM" 1 => "Barnard R" 2 => "Ho YK" 3 => "Rajkovic I" 4 => "Waters MJ." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/endo.136.2.7835299" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Endocrinology" "fecha" => "1995" "volumen" => "136" "paginaInicial" => "651" "paginaFinal" => "659" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7835299" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 8 => array:3 [ "identificador" => "bib9" "etiqueta" => "9" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Comparative studies on the inhibition of trypsin, plasmin and thrombin by derivatives of benzylamine and benzamidine." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:3 [ 0 => "Markwardt F" 1 => "Landmann H" 2 => "Walsmann P." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:1 [ "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Eur J Biochem" "fecha" => "1968" "volumen" => "6" "paginaInicial" => "502" "paginaFinal" => "506" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/5701967" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 9 => array:3 [ "identificador" => "bib10" "etiqueta" => "10" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Blockade of growth hormone receptor sheding by a metalloprotease inhibitor." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:6 [ 0 => "Alele J" 1 => "Jiang J" 2 => "Goldsmith JF" 3 => "Yang X" 4 => "Maheshwari HG" 5 => "Black RA et al." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/endo.139.4.5906" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Endocrinology" "fecha" => "1998" "volumen" => "139" "paginaInicial" => "1927" "paginaFinal" => "1935" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9528979" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 10 => array:3 [ "identificador" => "bib11" "etiqueta" => "11" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "The effect of circulating growth hormone binding protein on metabolic clearance distribution and degradation of human growth hormone." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:3 [ 0 => "Baumann G" 1 => "Amburn KD" 2 => "Buchanan TA." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/jcem-64-4-657" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Endocrinol Metab" "fecha" => "1987" "volumen" => "64" "paginaInicial" => "657" "paginaFinal" => "662" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/3818897" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 11 => array:3 [ "identificador" => "bib12" "etiqueta" => "12" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Influence of the high affinity GHBP on plasma profiles of free and bound GH on the apparent high-life of GH: modeling analisis and clinical applications." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:5 [ 0 => "Veldhuis JD" 1 => "Johnson ML" 2 => "Faunt ML" 3 => "Mercado M" 4 => "Baumann G." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1172/JCI116243" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Invest" "fecha" => "1993" "volumen" => "91" "paginaInicial" => "629" "paginaFinal" => "641" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/8432866" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 12 => array:3 [ "identificador" => "bib13" "etiqueta" => "13" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "GHBP enhances the growth promoting activity of GH in the rat [resumen 73]." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:6 [ 0 => "Clark RG" 1 => "Cunningham B" 2 => "Moore JA" 3 => "Mulkerrin MG" 4 => "Carlsson ML" 5 => "Spencer SA et al." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:1 [ "Revista" => array:4 [ "tituloSerie" => "Washington, DC: Program of the 73rd Annual Meeting of the Endocrine Society," "fecha" => "1991" "volumen" => "433(abstract" "paginaInicial" => "73)" ] ] ] ] ] ] 13 => array:3 [ "identificador" => "bib14" "etiqueta" => "14" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Regulation of growth hormone (GH) bioactivity by a recombinant human GH-binding protein." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:4 [ 0 => "Lein L" 1 => "Spencer SA" 2 => "McKay P" 3 => "Waters MJ." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/endo-127-3-1287" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "Endocrinology" "fecha" => "1990" "volumen" => "127" "paginaInicial" => "1287" "paginaFinal" => "1291" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2387255" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 14 => array:3 [ "identificador" => "bib15" "etiqueta" => "15" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Serum growth hormone (GH)-binding protein/receptor: an important determinant of GH responsiveness." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:6 [ 0 => "Martha PM Jr" 1 => "Reiter EO" 2 => "Dávila N" 3 => "Shaw MA" 4 => "Holcombe JH" 5 => "Baumann G." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/jcem.75.6.1464648" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Endocrinol Metab" "fecha" => "1992" "volumen" => "75" "paginaInicial" => "1464" "paginaFinal" => "1469" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1464648" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 15 => array:3 [ "identificador" => "bib16" "etiqueta" => "16" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "The role of body mass in response to growth hormone therapy." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:6 [ 0 => "Martha PM Jr" 1 => "Reiter EO" 2 => "Dávila N" 3 => "Shaw MA" 4 => "Holcombe H" 5 => "Baumann G." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/jcem.75.6.1464649" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Endocrinol Metab" "fecha" => "1992" "volumen" => "75" "paginaInicial" => "1470" "paginaFinal" => "1476" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1464649" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 16 => array:3 [ "identificador" => "bib17" "etiqueta" => "17" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "Serum growth hormone-binding protein is unchanged in adult panhypopituitarism." "idioma" => "en" "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:6 [ 0 => "Dávila N" 1 => "Alcañiz J" 2 => "Salto L" 3 => "Estrada J" 4 => "Barceló B" 5 => "Bauman G." ] ] ] ] ] "host" => array:1 [ 0 => array:2 [ "doi" => "10.1210/jcem.79.5.7962328" "Revista" => array:6 [ "tituloSerie" => "J Clin Endocrinol Metab" "fecha" => "1994" "volumen" => "79" "paginaInicial" => "1347" "paginaFinal" => "1351" "link" => array:1 [ 0 => array:2 [ "url" => "https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7962328" "web" => "Medline" ] ] ] ] ] ] ] ] 17 => array:3 [ "identificador" => "bib18" "etiqueta" => "18" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "referenciaCompleta" => "Serum growth hormone-binding protein is decreased in prepubertal children with idiopa" "contribucion" => array:1 [ 0 => array:1 [ "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etal" => false "autores" => array:4 [ 0 => "Dávila N" 1 => "Moreira-Andrés M" 2 => "Alcañiz J" 3 => "Barceló B." ] ] ] ] ] ] ] ] ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "es" "url" => "/15750922/0000004600000007/v0_201307121157/8612/v0_201307121158/es/main.assets" "Apartado" => array:4 [ "identificador" => "15215" "tipo" => "SECCION" "es" => array:2 [ "titulo" => "Revisiones" "idiomaDefecto" => true ] "idiomaDefecto" => "es" ] "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/8612?idApp=UINPBA00004N" ]
Información del artículo
ISSN: 15750922Idioma original: Español
Datos actualizados diariamente
| año/Mes | Html | Total | |
|---|---|---|---|
| 2099 Julio | 2052 | 0 | 2052 |
| 2024 Noviembre | 193 | 0 | 193 |
| 2024 Octubre | 1523 | 0 | 1523 |
| 2024 Septiembre | 919 | 0 | 919 |
| 2024 Agosto | 588 | 0 | 588 |
| 2024 Julio | 467 | 0 | 467 |
| 2024 Junio | 703 | 0 | 703 |
| 2024 Mayo | 1153 | 0 | 1153 |
| 2024 Abril | 1391 | 0 | 1391 |
| 2024 Marzo | 1647 | 1 | 1648 |
| 2024 Febrero | 2372 | 5 | 2377 |
| 2024 Enero | 1632 | 4 | 1636 |
| 2023 Diciembre | 1445 | 3 | 1448 |
| 2023 Noviembre | 2018 | 8 | 2026 |
| 2023 Octubre | 1221 | 11 | 1232 |
| 2023 Septiembre | 908 | 0 | 908 |
| 2023 Agosto | 675 | 4 | 679 |
| 2023 Julio | 510 | 3 | 513 |
| 2023 Junio | 724 | 2 | 726 |
| 2023 Mayo | 1126 | 9 | 1135 |
| 2023 Abril | 151 | 0 | 151 |
| 2023 Marzo | 880 | 0 | 880 |
| 2023 Febrero | 716 | 0 | 716 |
| 2023 Enero | 555 | 0 | 555 |
| 2022 Diciembre | 344 | 0 | 344 |
| 2022 Noviembre | 714 | 0 | 714 |
| 2022 Octubre | 646 | 1 | 647 |
| 2022 Septiembre | 653 | 0 | 653 |
| 2022 Agosto | 512 | 0 | 512 |
| 2022 Julio | 355 | 2 | 357 |
| 2022 Junio | 520 | 0 | 520 |
| 2022 Mayo | 546 | 0 | 546 |
| 2022 Abril | 491 | 0 | 491 |
| 2022 Marzo | 489 | 0 | 489 |
| 2022 Febrero | 462 | 0 | 462 |
| 2022 Enero | 375 | 0 | 375 |
| 2021 Diciembre | 400 | 0 | 400 |
| 2021 Noviembre | 634 | 1 | 635 |
| 2021 Octubre | 672 | 0 | 672 |
| 2021 Septiembre | 507 | 1 | 508 |
| 2021 Agosto | 472 | 1 | 473 |
| 2021 Julio | 394 | 1 | 395 |
| 2021 Junio | 425 | 1 | 426 |
| 2021 Mayo | 624 | 4 | 628 |
| 2021 Abril | 848 | 1 | 849 |
| 2021 Marzo | 629 | 5 | 634 |
| 2021 Febrero | 392 | 1 | 393 |
| 2021 Enero | 453 | 0 | 453 |
| 2020 Diciembre | 445 | 4 | 449 |
| 2020 Noviembre | 611 | 2 | 613 |
| 2020 Octubre | 365 | 0 | 365 |
| 2020 Septiembre | 432 | 2 | 434 |
| 2020 Agosto | 455 | 1 | 456 |
| 2020 Julio | 455 | 3 | 458 |
| 2020 Junio | 593 | 1 | 594 |
| 2020 Mayo | 823 | 9 | 832 |
| 2020 Abril | 890 | 12 | 902 |
| 2020 Marzo | 877 | 0 | 877 |
| 2020 Febrero | 753 | 1 | 754 |
| 2020 Enero | 471 | 0 | 471 |
| 2019 Diciembre | 366 | 0 | 366 |
| 2019 Noviembre | 780 | 2 | 782 |
| 2019 Octubre | 808 | 3 | 811 |
| 2019 Septiembre | 738 | 0 | 738 |
| 2019 Agosto | 520 | 0 | 520 |
| 2019 Julio | 746 | 0 | 746 |
| 2019 Junio | 809 | 2 | 811 |
| 2019 Mayo | 1073 | 3 | 1076 |
| 2019 Abril | 941 | 0 | 941 |
| 2019 Marzo | 671 | 3 | 674 |
| 2019 Febrero | 560 | 1 | 561 |
| 2019 Enero | 451 | 3 | 454 |
| 2018 Diciembre | 576 | 3 | 579 |
| 2018 Noviembre | 668 | 5 | 673 |
| 2018 Octubre | 753 | 0 | 753 |
| 2018 Septiembre | 478 | 0 | 478 |
| 2018 Agosto | 201 | 0 | 201 |
| 2018 Julio | 142 | 0 | 142 |
| 2018 Junio | 279 | 0 | 279 |
| 2018 Mayo | 261 | 0 | 261 |
| 2018 Abril | 280 | 1 | 281 |
| 2018 Marzo | 133 | 0 | 133 |
| 2018 Febrero | 164 | 0 | 164 |
| 2018 Enero | 77 | 0 | 77 |
| 2017 Diciembre | 74 | 0 | 74 |
| 2017 Noviembre | 189 | 0 | 189 |
| 2017 Octubre | 167 | 0 | 167 |
| 2017 Septiembre | 92 | 0 | 92 |
| 2017 Agosto | 115 | 0 | 115 |
| 2017 Julio | 101 | 0 | 101 |
| 2017 Junio | 183 | 1 | 184 |
| 2017 Mayo | 257 | 13 | 270 |
| 2017 Abril | 236 | 10 | 246 |
| 2017 Marzo | 301 | 0 | 301 |
| 2017 Febrero | 426 | 0 | 426 |
| 2017 Enero | 148 | 0 | 148 |
| 2016 Diciembre | 184 | 3 | 187 |
| 2016 Noviembre | 256 | 0 | 256 |
| 2016 Octubre | 281 | 2 | 283 |
| 2016 Septiembre | 328 | 0 | 328 |
| 2016 Agosto | 200 | 5 | 205 |
| 2016 Julio | 91 | 0 | 91 |
| 2016 Junio | 196 | 2 | 198 |
| 2016 Mayo | 186 | 0 | 186 |
| 2016 Abril | 134 | 3 | 137 |
| 2016 Marzo | 186 | 0 | 186 |
| 2016 Febrero | 100 | 1 | 101 |
| 2016 Enero | 55 | 0 | 55 |
| 2015 Diciembre | 51 | 0 | 51 |
| 2015 Noviembre | 104 | 0 | 104 |
| 2015 Octubre | 115 | 0 | 115 |
| 2015 Septiembre | 70 | 0 | 70 |
| 2015 Agosto | 106 | 0 | 106 |
| 2015 Julio | 62 | 0 | 62 |
| 2015 Junio | 48 | 0 | 48 |
| 2015 Mayo | 44 | 0 | 44 |
| 2015 Abril | 34 | 0 | 34 |
| 2015 Marzo | 36 | 0 | 36 |
| 2015 Febrero | 12 | 0 | 12 |
| 2015 Enero | 23 | 0 | 23 |
| 2014 Diciembre | 14 | 0 | 14 |
| 2014 Noviembre | 16 | 0 | 16 |
| 2014 Octubre | 16 | 0 | 16 |
| 2014 Septiembre | 16 | 0 | 16 |
| 2014 Agosto | 23 | 0 | 23 |
| 2014 Julio | 32 | 0 | 32 |
| 2014 Junio | 13 | 0 | 13 |
| 2014 Mayo | 6 | 0 | 6 |
| 2014 Abril | 37 | 0 | 37 |
| 2014 Marzo | 11 | 0 | 11 |
| 2014 Febrero | 10 | 0 | 10 |
| 2014 Enero | 9 | 0 | 9 |
| 2013 Diciembre | 5 | 0 | 5 |
| 2013 Noviembre | 9 | 0 | 9 |
| 2013 Octubre | 10 | 0 | 10 |
| 2013 Septiembre | 9 | 0 | 9 |
| 2013 Agosto | 6 | 0 | 6 |
Mostrar todo
