metricas
covid
Buscar en
Gastroenterología y Hepatología
Toda la web
Inicio Gastroenterología y Hepatología Valoración de la técnica de PCR-Southern blot para el análisis de la viremia ...
Información de la revista
Vol. 24. Núm. 1.
Páginas 1-4 (enero 2001)
Compartir
Compartir
Descargar PDF
Más opciones de artículo
Vol. 24. Núm. 1.
Páginas 1-4 (enero 2001)
Acceso a texto completo
Valoración de la técnica de PCR-Southern blot para el análisis de la viremia en pacientes con hepatitis aguda A
Detection of hepatitis a virus rna by pcr-southern blot in serum from patients with acute hepatitis A
Visitas
13054
M. Butib,*, R. Jardía, A. Boschc, F. Rodrígueza, G. Sánchezc, R. Pintoc, X. Costaa, J.F. Sánchez-Ávilab, M. Cotrinaa, R. Estebanb, J. Guardiab
a Servicios de Bioquímica Hospital General Vall d'Hebron
b Servicios de Hepatología. Hospital General Vall d'Hebron
c Departamento de Microbiología. Universidad de Barcelona
Contenido relacionado
Gastroenterol Hepatol. 2001;24:13410.1016/S0210-5705(01)70140-9
Este artículo ha recibido
Información del artículo
Resumen

El análisis de la viremia en la infección por el virus de la hepatitis A (VHA) mediante los métodos convencionales es poco utilizado debido a que la determinación viral se realiza habitualmente en heces y a que las técnicas empleadas son laboriosas y tienen baja rentabilidad diagnóstica. Los objetivos de este trabajo son el desarrollo de un método de amplificación génica y Southern blot para la detección de ARNVHA en el suero de los pacientes con infección aguda y relacionar la presencia de ARN-VHA con la detección de anticuerpos anti-VHA de tipo IgM y los valores de la alanina aminotransferasa (ALT). El ARN-VHA se ha estudiado en 26 muestras de suero de 21 pacientes con hepatitis aguda A, en 11 muestras de pacientes con hepatitis aguda B y en 15 con hepatitis aguda no A, no E. El ARN-VHA se detectó en 10 (38%) de las 26 muestras de suero de pacientes con hepatitis aguda A. En cinco muestras fue positivo por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) simple y en 10 mediante la técnica de PCR-Southern blot. El ARN-VHA fue positivo en el 100% de las muestras de suero obtenidas en la primera semana de la sintomatología clínica, en el 50% de las muestras de la segunda semana y no se detectó en ninguna de las muestras obtenidas posteriormente. No se detectó ARN-VHA en ninguno de los 11 casos de hepatitis aguda B ni de los 15 de hepatitis aguda no A, no E. No se observó una relación significativa entre la detección de ARN-VHA y el grado de positividad de los anticuerpos anti-VHA de tipo IgM, pero sí en cambio con el aumento de la ALT.

En conclusión, la presencia de ARN-VHA en la hepatitis aguda A es frecuente, pero su detección es transitoria durante las primeras 2 semanas del inicio de la sintomatología clínica y requiere de una técnica de amplificación génica y Southern blot.

Abstract

Assessment of viremia in hepatitis A virus (HAV) infection is not frequently performed with conventional methods because the techniques used are laborious, have low sensitivity are usually performed in feces. The aims of this study were to develop a polymerase chain reaction (PCR) and Southern blot technique to detect HAV-RNA in the serum of patients with acute HAV infection and to determine the relationship between HAV-RNA and anti-HAV IgM and alanine aminotransferase (ALT) levels. The presence of HAV-RNA was studied in 26 serum samples from 21 patients with acute hepatitis A. We also studied 11 samples from patients with acute hepatitis B and 15 samples from patients with non-A, non-E hepatitis. HAV-RNA was detected in 10 (38%) of the 26 serum samples from patients with acute hepatitis A. Simple PCR was positive in 5 samples and PRC-Southern blot was positive in 10. All the serum samples obtained during the first week of onset were HAV-RNA positive and 50% of those obtained during the second week were positive. None of the serum samples obtained after the second week of onset were HAV-RNA positive. None of the serum samples from the 11 patients with acute hepatitis B or from the 15 patients with non-A, non-E acute hepatitis were positive for HAV-RNA. No significant relationship was detected between HAV-RNA detection and an IgM anti-HAV or ALT positive result. In conclusion, the presence of HAV-RNA in acute hepatitis A is frequent but the PCR Southern blot technique is required for detection, which is transitory during the first weeks after onset.

El Texto completo está disponible en PDF
Bibliografía
[1.]
S.M. Lemon.
Type A viral hepatitis: epidemiology, diagnosis, and prevention.
Clin Chem, 43 (1997), pp. 1494-1499
[2.]
J.L. Cohen, J.R. Ticehurst, R.H. Purcell, A. Buckler-White, B.M. Baroudy.
Complete nucleotide sequence of wild-type hepatitis A virus: comparison with different strains of hepatitis A virus and other picorna viruses.
J Virol, 61 (1987), pp. 50-59
[3.]
V. Vargas, M. Buti, J.M. Hernández, R. Jardí, A. Portell, R. Esteban.
Prevalencia de los anticuerpos contra el virus de la hepatitis A en la población general. Estudio comparativo, 1977-1985.
Med Clin (Barc), 88 (1987), pp. 144-146
[4.]
J.M. Bayas, M. Bruguera, A. Vilella, J.M. Carbó, J. Vidal, G. Navarro.
Prevalencia de la infección por el virus de la hepatitis B y hepatitis A en estudiantes de profesiones sanitarias en Cataluña.
Med Clin (Barc), 107 (1996), pp. 281-284
[5.]
H. Yotsuyanagi, K. Koike, K. Yasuda, K. Moriya, Y. Shintani, H. Fujie, et al.
Prolonged faecal excretion of hepatitis A virus in adult patients with hepatitis A as determined by polymerase chain reaction.
[6.]
A. Normann, M. Pfisterer, S. Schade, J. Graff, R.L. Chaves, P. Crovari.
Molecular epidemiology of an outbreak of hepatitis A in Italy.
J Med Virol, 47 (1995), pp. 467-471
[7.]
R. Jardí, M. Buti, M. Cotrina, F. Rodríguez-Frías, X. Costa, C. Pascual.
Determinación cuantitativa de ADN-VHB en la hepatitis crónica B. Comparación de tres métodos.
Gastroenterol Hepatol, 21 (1998), pp. 327-331
[8.]
D.R. Gretch, R. Carithers, R. Willson, B. Williams, L. Corey.
Assessment of hepatitis C viremia using molecular amplification technologies: correlations and clinical implications.
Ann Intern Med, 123 (1995), pp. 321-329
[9.]
R. Boom, C.J.A. Sol, C.L. Salimans, P.M. Jansen, P.M. Van Dillen, J. Van der Noordaaa.
Rapid and simple method for purification of nucleic acids.
J Clin Microbiol, 28 (1990), pp. 495-503
[10.]
A. Bosch, G. Sánchez, F. Le Guyader, H. Vanaclocha, L. Hungarreau, R.M. Pinto.
Human enteric viruses in coquina clams associated with a large hepatitis A outbreak.
Wat Sci Tech, (2000),
[11.]
R.W. Janse, J.E. Newbold, S.M. Lemon.
Complete nucleotide sequences of a cell cultureadapted variant of hepatitis A virus: comparison with wild type virus restricted capacity for in vitro replication.
Virology, 163 (1988), pp. 299-307
[12.]
J.I. Cohen, S. Feinstone, R.H. Pucell.
Hepatitis A virus infection in a chimpanzee: duration of viremia and detection of virus in saliva and throat swabs.
J Infect Dis, 5 (1989), pp. 887-890
[13.]
K. Fujiwara, O. Yokosuka, T. Ehata, F. Imazeki, H. Saisho, M. Miki, et al.
Frequent detection of hepatitis A viral RNA in serum during the early convalescent phase of acute hepatitis A.
Hepatology, 26 (1997), pp. 1634-1639
[14.]
R. Oren, D. Shouval, R. Tur-Kaspa.
Detection of hepatitis A virus RNA in serum from patients with acute hepatitis.
J Med Virol, 28 (1989), pp. 261-263
Copyright © 2001. Elsevier España, S.L.. Todos los derechos reservados
Descargar PDF
Opciones de artículo
es en pt

¿Es usted profesional sanitario apto para prescribir o dispensar medicamentos?

Are you a health professional able to prescribe or dispense drugs?

Você é um profissional de saúde habilitado a prescrever ou dispensar medicamentos