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Seroprevalencia de anticuerpos frente a Chlamydophila pneumoniae en adultos de la población general
Chlamydophila pneumoniae seroprevalence in adults from the general population
Jesús Bellido-Casadoa, J. Carlos Martín-Escuderob, Juan Tasende-Matac, Javier Mena-Martínb, Fernando Simal-Blancob, Raúl Ortiz de Lejarazud
a Departamento de Medicina. Facultad de Medicina. Valladolid.
b Servicio de Medicina Interna. Hospital Universitario del Río Hortega. Valladolid.
c Servicio de Farmacia. Complejo Hospitalario de Palencia. Palencia.
d Servicio de Microbiología. Hospital Clínico Universitario. Valladolid. España.
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G o Ig totales 1&#58;16&#41; indicar&#237;a una infecci&#243;n pasada&#46; En los estudios realizados en poblaci&#243;n general&#44; en todo el mundo&#44; se ha descrito sistem&#225;ticamente una seroprevalencia superior al 50&#37;&#44; la cual aumenta con la edad y difiere en cuanto al sexo&#46; La consideraci&#243;n de otra inmunoglobulina&#44; como la IgA&#44; presenta m&#225;s dificultades a la hora de interpretar la capacidad de infectar con  C&#46; pneumoniae y de entender los patrones de infecci&#243;n&#44; sobre todo debido a la importante variabilidad descrita en las series que la han analizado&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En Espa&#241;a solamente se ha comunicado la seroprevalencia en poblaci&#243;n general infantil y de adultos j&#243;venes<span class="elsevierStyleSup">1</span>&#44; pero no se ha investigado en el resto de la poblaci&#243;n adulta&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Nuestro objetivo es conocer indirectamente la difusi&#243;n de C&#46; pneumoniae en nuestro medio mediante la descripci&#243;n e interpretaci&#243;n de los perfiles de seroprevalencia que presenta en la poblaci&#243;n adulta&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Material y m&#233;todo</span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Poblaci&#243;n</span></p><p class="elsevierStylePara">Se analiz&#243; 462 muestras de sangre extra&#237;das a individuos de la poblaci&#243;n general mayor de 15 a&#241;os del &#193;rea de Salud Oeste de Valladolid que participaron en un estudio epidemiol&#243;gico de factores de riesgo cardiovascular&#44; realizado entre 1997 y 2000&#46; El estudio se ejecut&#243; en dos fases y la metodolog&#237;a se resume brevemente&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En la primera fase&#44; se realiz&#243; un muestreo aleatorio simple y una encuesta por correo al 20&#37; de la poblaci&#243;n general entre 15 y 82 a&#241;os &#40;33&#46;022 sujetos&#41;&#46; En una segunda fase del estudio &#40;a&#241;o 2000&#41;&#44; se realiz&#243; un nuevo muestreo aleatorio y poliestratificado &#40;por edad&#44; sexo&#44; nivel de educaci&#243;n&#44; &#237;ndice de masa corporal y prevalencia de factores de riesgo cardiovascular hallados en la fase 1&#41;&#44; y en el c&#225;lculo de la n muestral se asegur&#243; la representaci&#243;n de los estratos m&#225;s peque&#241;os&#46; Posteriormente&#44; se procedi&#243; a entrevistar a los individuos seleccionados y a realizar las extracciones de sangre&#44; y se obtuvo muestras sangu&#237;neas en todos los estratos&#46; Mediante la revisi&#243;n de la historia cl&#237;nica se comprob&#243; una frecuencia de enfermedades y factores de riesgo cardiovascular similar en los individuos no respondedores respecto a los respondedores del segundo muestreo&#44; salvo para la diabetes mellitus&#46; Por tanto&#44; los individuos participantes eran representativos de la poblaci&#243;n general&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El estudio obtuvo la aprobaci&#243;n del Comit&#233; de &#201;tica del hospital&#46; Todos los participantes dieron su conformidad para participar en el estudio y firmaron el consentimiento informado&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Muestras</span></p><p class="elsevierStylePara">Se centrifugaron las muestras de sangre recogidas y posteriormente se separ&#243; el suero en al&#237;cuotas y se congelaron a &#173;85 &#186;C&#46; Una vez descongeladas&#44; se realiz&#243; la determinaci&#243;n de anticuerpos IgG e IgA frente a C&#46; pneumoniae mediante inmunofluorescencia indirecta&#44; usando los correspondientes  kits distribuidos por la casa comercial Immunogenetics y elaborados por el laboratorio Vircell SL&#44; siguiendo el procedimiento de ensayo recomendado&#46; La t&#233;cnica consisti&#243; en realizar diluciones seriadas de los sueros de estudio con una soluci&#243;n tamponada con fosfato &#40;PBS&#41;&#46; Se deposit&#243; 5 &#181;l de cada diluci&#243;n en los correspondientes pocillos del portaobjetos que conten&#237;an los ant&#237;genos de CP &#40;cepa 2023&#44; ATCC VR-1356&#41;&#46; A continuaci&#243;n se incubaba en c&#225;mara h&#250;meda durante 30 min a 37 &#186;C&#46; Se lavaba el portaobjetos con PBS y se a&#241;ad&#237;an 5 &#181;l de antiinmunoglobulina humana marcada con fluoresce&#237;na&#46; Se proced&#237;a a incubar y lavar otra vez en las mismas condiciones descritas con anterioridad y se montaba el cubreobjetos tras a&#241;adir una gota de glicerina en cada pocillo de reacci&#243;n&#46; Para la determinaci&#243;n de la IgA se requiri&#243; la realizaci&#243;n de un paso previo al procedimiento descrito&#44; se a&#241;adi&#243; un sorbente de IgG al suero de estudio y se segu&#237;a con el mismo procedimiento&#46; Las lecturas de las determinaciones fueron realizadas en un microscopio de fluorescencia a ƒ1&#46;000 por dos observadores independientes que desconoc&#237;an la procedencia de la muestra&#46; Las muestras que mostraron fluorescencia brillante y homog&#233;nea fueron consideradas positivas&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Si la primera diluci&#243;n era positiva &#40;1&#58;16&#41;&#44; se continuaba con la serie de diluciones del suero &#40;1&#58;32&#44; 1&#58;64&#44; 1&#58;128&#44; 1&#58;256&#44; 1&#58;512&#44; etc&#46;&#41; hasta que se consegu&#237;a la negativizaci&#243;n&#46; En el an&#225;lisis preliminar de los resultados se comprob&#243; en las primeras 50 muestras que todas las determinaciones que presentaban IgG negativas&#44; es decir&#44; sin positividad a la primera diluci&#243;n seriada &#40;1&#58;16&#41;&#44; tambi&#233;n presentaban una IgA negativa&#44; por lo que con el fin de evitar malgastar muestra y reactivo&#44; solamente se continu&#243; realizando las diluciones posteriores de la IgA si la IgG era positiva en la primera diluci&#243;n &#40;1&#58;16&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis estad&#237;stico</span></p><p class="elsevierStylePara">Los resultados obtenidos fueron ponderados seg&#250;n el tama&#241;o de cada estrato&#44; que oscil&#243; entre 0&#44;4108 y 1&#44;9161&#44; y las estimaciones de las seroprevalencias de IgG e IgA se expresaron en porcentaje con su intervalo de confianza &#40;IC&#41; del 95&#37; correspondiente&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se utiliz&#243; la prueba estad&#237;stica de la &#42;<span class="elsevierStyleSup">2</span> para la comparaci&#243;n de categor&#237;as entre las variables cualitativas que conformaban los estratos de edad y sexo&#46; Se acept&#243; un valor de p &#60; 0&#44;05 como estad&#237;sticamente significativo&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Resultados</span></p><p class="elsevierStylePara">La seroprevalencia global estimada para la poblaci&#243;n estudiada fue del 74&#44;1&#37; &#40;IC del 95&#37;&#44; 69&#44;7-78&#44;6&#41; para un t&#237;tulo de IgG 1&#58;16&#44; sin hallarse diferencias estad&#237;sticas en cuanto al sexo &#40;72&#37; en mujeres frente a un 76&#37; en varones&#59; p &#62; 0&#44;05&#41; o la edad &#40;&#60; 35 a&#241;os&#58; 73&#37;&#59; 36-65 a&#241;os&#58; 73&#37;&#59;  66 a&#241;os&#58; 80&#37;&#59; p &#62; 0&#44;05&#41;&#46; A la diluci&#243;n de 1&#58;64 la seroprevalencia fue del 32&#44;2&#37; &#40;IC del 95&#37;&#44; 27&#44;6-36&#44;8&#41;&#44; sin diferencias en el sexo &#40;31&#37; en mujeres frente a un 37&#37; en varones&#59; p &#62; 0&#44;05&#41; o edad &#40;&#190; 35 a&#241;os&#58; 32&#37;&#59; 36-65 a&#241;os&#58; 30&#37;&#59; 66 a&#241;os&#58; 39&#37;&#59; p &#62; 0&#44;05&#41;&#46; Por el contrario&#44; la seroprevalencia global de IgA fue del 21&#44;5&#37; &#40;IC del 95&#37;&#44; 17&#44;7-25&#44;4&#41; para un t&#237;tulo  1&#58;16&#44; con diferencias estad&#237;sticas en cuanto al sexo &#40;18&#37; en mujeres frente a un 31&#37; en varones&#59;  &#42;<span class="elsevierStyleSup">2</span> &#61; 9&#44;99&#44; p &#60; 0&#44;05&#41; o la edad &#40;&#190; 35 a&#241;os&#58; 13&#37;&#59; 36-65 a&#241;os&#58; 26&#37;&#59; 66 a&#241;os&#58; 29&#37;&#59;  &#42;<span class="elsevierStyleSup">2</span> &#61; 8&#44;08&#44; p &#60; 0&#44;05&#41;&#46; La seroprevalencia fue del 5&#44;2&#37; &#40;IC del 95&#37;&#44; 3&#44;3-7&#44;2&#41; para una IgA  1&#58;32&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La figuras 1 y 2 muestran por separado&#44; m&#225;s detalladamente&#44; las seroprevalencias alcanzadas para las diluciones 1&#58;16 y 1&#58;64 de IgG&#44; y 1&#58;16 y  1&#58;32 de IgA&#44; en funci&#243;n de la edad y el sexo&#46; Para la IgG se observ&#243; un discreto aumento de la seroprevalencia con la edad&#44; m&#225;s lineal para los varones que para las mujeres&#44; mientras que para la IgA el aumento fue mayor en los varones a partir de los 36 a&#241;os de edad respecto al aumento hallado para las mujeres &#40;p &#60; 0&#44;05&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="2v126n20-13089108tab01.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig&#46; 1&#46; Seroprevalencias de inmunoglobulina &#40;Ig&#41; G &#40;diluciones de 1&#58;16 y 1&#58;64&#41; y de IgA &#40;diluciones 1&#58;16 y 1&#58;32&#41; frente a Chlamydophila pneumoniae por estratos de edad en las mujeres&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="2v126n20-13089108tab02.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig&#46; 2&#46; Seroprevalencias de inmunoglobulina &#40;Ig&#41; G &#40;diluciones de 1&#58;16 y 1&#58;64&#41; y de IgA &#40;diluciones 1&#58;16 y 1&#58;32&#41; por estratos de edad en los varones&#46;&#42;p &#60; 0&#44;05 para las diferencias de seroprevalencias de la diluci&#243;n  1&#58;16 IgA con la edad&#46; </p><br></br><br></br><p class="elsevierStylePara">Solamente el 3&#44;6&#37; &#40;IC del 95&#37;&#44; 1&#44;9-5&#44;3&#41; y el 0&#44;7&#37; &#40;IC del 95&#37;&#44; 0&#44;03-1&#44;4&#41; de los sujetos presentaron unos t&#237;tulos de IgG 1&#58;256 o 1&#58;512&#44; respectivamente&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Discusi&#243;n</span></p><p class="elsevierStylePara">En el presente estudio confirmamos que  C&#46; pneumoniae muestra en la poblaci&#243;n general espa&#241;ola adulta una alta seroprevalencia de infecci&#243;n pasada&#58; 74&#44;1&#37; para una IgG 1&#58;16&#44; con un incremento lineal a partir de los 36 a&#241;os&#44; y ligeramente superior en los varones&#46; Esta elevada seroprevalencia&#44; por encima del 50&#37;&#44; corrobora la hallada previamente para la poblaci&#243;n espa&#241;ola entre 6 y 20 a&#241;os<span class="elsevierStyleSup">1</span>&#44; y coincide tambi&#233;n con la descrita en diferentes estudios epidemiol&#243;gicos realizados en poblaci&#243;n general mayor de 20 a&#241;os<span class="elsevierStyleSup">2-8</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La seroprevalencia hallada para la diluci&#243;n de IgG 1&#58;64 tambi&#233;n fue elevada &#40;32&#44;2&#37;&#41;&#46; Este nivel de titulaci&#243;n es interpretado por algunos autores como &#171;infecci&#243;n persistente&#187; si se acompa&#241;a&#44; adem&#225;s&#44; de una IgA positiva&#44; aunque este criterio no es totalmente aceptado y se debe&#44; en parte&#44; a la dificultad que hay en interpretar la corta duraci&#243;n de los anticuerpos espec&#237;ficos<span class="elsevierStyleSup">5</span> y tambi&#233;n a la dificultad de establecer una sensibilidad y una especificidad adecuadas en un contexto de diagn&#243;stico epidemiol&#243;gico&#46; En este sentido&#44; aproximadamente una cuarta parte de nuestra poblaci&#243;n present&#243; positividad a ambas inmunoglobulinas&#44; lo que supone una estimaci&#243;n muy superior a la descrita&#44; por ejemplo&#44; en la poblaci&#243;n israel&#237;<span class="elsevierStyleSup">6</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Pocos estudios han evaluado la seroprevalencia de IgA&#44; y presentan resultados discordantes entre s&#237;<span class="elsevierStyleSup">2&#44;3</span>&#46; La seroprevalencia hallada en nuestro estudio fue del 21&#44;5&#37; para una IgA 1&#58;16 y del 5&#44;2&#37; para una IgA 1&#58;32&#44; y es superior en el sexo masculino y para los sujetos de m&#225;s edad&#46; Esta seroprevalencia es similar a las descritas por Paltiel et al<span class="elsevierStyleSup">3</span> en Jerusal&#233;n y Leowattana et al<span class="elsevierStyleSup">9</span> en Tailandia&#44; pero difiere de la hallada en Finlandia por Tuuminen et al<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#44; superior al 70&#37;&#46; Esta variabilidad&#44; dependiente de la zona geogr&#225;fica que se estudie&#44; podr&#237;a indicar diferencias en el grado de reinfecci&#243;n&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La interpretaci&#243;n de los perfiles serol&#243;gicos de nuestro estudio nos induce a pensar que tanto la contribuci&#243;n de una &#250;nica determinaci&#243;n de IgA o en combinaci&#243;n con la IgG no ser&#237;a relevante en cuanto al establecimiento del diagn&#243;stico de contacto sucesivo&#44; de reinfecci&#243;n o de &#171;infecci&#243;n persistente&#187;&#44; sobre todo si la seroprevalencia de IgG en la zona geogr&#225;fica estudiada es muy elevada&#44; como ya se ha indicado previamente<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Solamente el 3&#44;6&#37; de las muestras analizadas presentaron una IgG 1&#58;256 y s&#243;lo un 0&#44;7&#37; mostr&#243; una IgG 1&#58;512&#44; seroprevalencias que consideramos ligeramente inferiores al intervalo de las descritas en otros estudios<span class="elsevierStyleSup">1&#44;5-7</span>&#44; y que se han determinado principalmente en sujetos entre 6 y 20 a&#241;os<span class="elsevierStyleSup">1&#44;5&#44;6</span>&#46; Se ha indicado una mayor capacidad de infecci&#243;n de C&#46; pneumoniae en edades tempranas&#44; pero sin poderse diferenciar con claridad del grado de influencia que otros factores pueden desempe&#241;ar&#44; tambi&#233;n&#44; en la variabilidad de las seroprevalencias<span class="elsevierStyleSup">3&#44;10</span>&#46; Nuestros datos permiten inferir&#44; de una manera indirecta &#40;figs&#46; 1 y 2&#41;&#44; la asociaci&#243;n lineal positiva entre t&#237;tulos elevados y edad&#44; debida a la mayor exposici&#243;n que tiene un individuo de presentar infecciones reiteradas por C&#46;  pneumoniae en el transcurso del tiempo&#46; Miyashita et al<span class="elsevierStyleSup">7</span>&#44; en la descripci&#243;n anual de seroprevalencias de IgG realizadas durante una d&#233;cada en Jap&#243;n&#44; ha confirmado esta circunstancia de manera directa y precisa&#46; Su estudio permiti&#243; constatar una alta variabilidad de las seroprevalencias con picos epid&#233;micos peri&#243;dicos en la endemia de C&#46;  pneumoniae<span class="elsevierStyleSup">7</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Debido a la variabilidad de las seroprevalencias descritas en los diferentes estudios&#44; halladas para las inmunoglubulinas&#44; resulta dif&#237;cil determinar si el patr&#243;n serol&#243;gico presente en un grupo de poblaci&#243;n concreto representa una infecci&#243;n &#171;persistente&#187; o una reinfecci&#243;n&#46; Creemos que su diferenciaci&#243;n desde el punto de vista epidemiol&#243;gico de la infecci&#243;n pasada no es posible hacerla s&#243;lo mediante el uso de los patrones serol&#243;gicos&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El presente estudio tiene las limitaciones propias de los estudios de dise&#241;o transversal&#44; pero sus resultados son representativos y de amplia validez externa&#44; por lo que consideramos que este estudio retrata la infecci&#243;n pasada y &#171;persistente&#187; por C&#46; pneumoniae en nuestro medio&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En definitiva&#44; a pesar de que C&#46; pneumoniae presenta una interacci&#243;n compleja con el sistema inmunitario con respues-ta humoral heterog&#233;nea&#44; este pat&#243;geno intracelular mantiene una alta seroprevalencia de infecci&#243;n en la poblaci&#243;n&#46;</p>"
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ISSN: 00257753
Idioma original: Español
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