Un método para eliminar nódulos blanquecinos de tejidos fetales conservados en formaldehído
A method to eliminate whitish nodules of fetal tissues preserved in formaldehyde
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En la mayoría de los casos, la sustancia utilizada como fijador adecuado para estos propósitos es el formaldehído simple por actuar rápido, tener una mayor capacidad de penetración, además de ser práctico y fácil de manejar.<span class="elsevierStyleSup">1-6</span> Sin embargo, en ocasiones al consultar publicaciones idóneas a nuestro quehacer académico, se observa la imagen macroscópica de un embrión/feto <span class="elsevierStyleItalic">ex útero,</span> con una cantidad variable de nódulos blanquecinos (NB) en la superficie de sus órganos, inclusive en la piel.<span class="elsevierStyleSup">7,8</span> En nuestra experiencia, al revisar productos como los citados y que se conservan en formaldehído al 10%, utilizando ya sea óptica tradicional o a simple vista, también observamos NB los cuales al intentar retirarlos desafortunadamente se desgarra la superficie donde se encuentran dañándose la pieza, habitualmente de gran valor por la dificultad para volver a obtener otra similar en buenas condiciones.</p><p class="elsevierStylePara"> Al revisar la literatura, donde se citan estudios con diversos enfoques en tejidos embrionarios o fetales y que han sido fijados en formaldehído, no se encontró información que hiciera referencia a la presencia de los depósitos referidos en este trabajo como NB.<span class="elsevierStyleSup">9-14</span> Por otro lado, en nuestro laboratorio al elaborar preparaciones de piezas que presentaban estos NB, con la técnica histológica y utilizando hematoxilina y eosina (H-E) como colorantes, se observó que éstos ya no estaban presentes antes de la inclusión en Paraplast (Leica microsystems) o al final del procesamiento (revisión al microscopio óptico). Para descartar que realmente su ausencia no fuera porque las piezas muestran un aspecto homogéneo en el primer caso, o que realmente se perdieran durante el procesamiento de coloración, nos propusimos investigar en cuál de los pasos de la técnica ocurriría esto, particularmente antes de la microtomía y después del montaje. Empezamos a revisar las piezas después de la fijación tisular en formaldehído de la técnica histológica en mención, este paso es la deshidratación.<span class="elsevierStyleSup">15</span> Para este trabajo se decidió centrar la investigación a una región en particular, enfocándonos en el riñón por su accesibilidad. El objetivo fue eliminar, mediante la deshidratación con alcohol etílico, los NB presentes en la superficie del riñón fetal de productos de aborto humanos conservados en formaldehído al 10%.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Materiales y métodos</span></p><p class="elsevierStylePara"> Acervo de productos de aborto del Departamento de Embriología, registrados desde 2005 al 2009 (n=111). Algunas piezas estaban íntegras o presentaban disección torácica, abdominal o pélvica, pues han sido objeto de otras investigaciones. Su edad gestacional en semanas y su género, se determinaron según estándares de longitud cráneo-caudal y por sus genitales externos o gónadas, respectivamente.<span class="elsevierStyleSup">16,17</span> Siguiendo la fórmula de la muestra aleatoria para una población finita (obtención del tamaño de la muestra), se seleccionaron 10 productos.<span class="elsevierStyleSup">18</span> Se anotó si estaba presente o no algún tipo de anomalía del desarrollo visible.<span class="elsevierStyleSup">19-24</span> Los productos fueron revisados bajo un estereomicroscopio Zeiss<span class="elsevierStyleSup">®</span>, Stemi III B. Una vez que fueron retiradas las vísceras abdominales, se visualizaron los riñones seleccionándose la superficie frontal visible de ambos órganos para la detección de los NB (<span class="elsevierStyleBold">Figura 1</span>). Aquellos que los presentaban fueron sometidos a deshidratación, iniciando con alcohol etílico 35°, 50°, 70°, 80°, 90° y 100°, por 24 horas en cada uno de estos alcoholes, para luego iniciar su rehidratación en orden inverso. Una vez que se llegaba a los 35°, nuevamente se conservaron los productos en formaldehído al 10%. En cada uno de los pasos de este procedimiento de deshidratación-rehidratación, se guardó registro gráfico mediante fotografías tomadas con una cámara digital Sony<span class="elsevierStyleSup">®</span>, analizándose los hallazgos. Además, se hizo un análisis histológico y químico de los NB, en otras piezas. En el primer caso, se procesaron muestras representativas con la técnica de H-E; para el segundo caso, previos lavados por 24 horas con agua destilada, se hizo una determinación cualitativa con reacción de color para el formol. En estos dos últimos tratamientos se utilizaron especímenes sin NB, como control.</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 1. Feto humano masculino, de 12 semanas de gestación. Se han retirado las vísceras abdominales para mostrar la superficie frontal de ambos riñones con los NB (flechas)." src="304v15n60-90249609fig1.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 1.</span> Feto humano masculino, de 12 semanas de gestación. Se han retirado las vísceras abdominales para mostrar la superficie frontal de ambos riñones con los NB (flechas).</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Resultados</span></p><p class="elsevierStylePara"> La <span class="elsevierStyleBold">Tabla 1</span> muestra las características de los productos revisados, así como también resume el tratamiento al cual fueron sometidos cada uno de ellos.</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Tabla 1. Relación de los fetos revisados según edad, género, presencia de NB, defectos del desarrollo, así como el tratamiento al que se sometieron cada uno de ellos." src="304v15n60-90249609fig2.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"> En uno de los productos se observaron precipitados de aspecto de cristal, no nodulares en ambos riñones, pero recordaban a los NB por lo que fueron considerados como tales. Después de la deshidratación con alcohol 70°, los riñones se observaron ya casi libres de los NB y seguían íntegros sin distorsión en su morfología. Sin embargo, consideramos que no es sino hasta el final de la deshidratación-rehidratación de las piezas, en que éstas mostraron la superficie de los riñones más limpia y un aspecto más nítido (<span class="elsevierStyleBold">Figura 2</span>). Cuando la rehidratación no se lleva a cabo, aunque ya se hayan eliminado los NB con la deshidratación, la imagen fotográfica no es tan clara, probablemente debido a que el tejido está inmerso en soluciones de diferente densidad a la alcanzada después de la rehidratación, hallazgo observado en nuestro laboratorio con otros fetos, fuera de esta serie.</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 2. Riñón de un feto masculino de 16 semanas de gestación. A) Muestra la superficie frontal con presencia de NB antes de la deshidratación. B) La misma superficie renal, después del proceso de deshidratación-rehidratación, se observa completamente libre de NB, la imagen es más nítida. 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A) Corte histológico del riñón de un feto femenino de 20 semanas que presentó NB (recuadro). B) Corte histológico del riñón de un feto masculino de 16 semanas sin NB -control- (recuadro). En ambas microfotografías el tejido conjuntivo que cubre la superficie renal muestra un aspecto muy semejante (H-E, 5X). R: riñón; TC: tejido conjuntivo." src="304v15n60-90249609fig4.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 3.</span> Riñones fetales. <span class="elsevierStyleBold">A)</span> Corte histológico del riñón de un feto femenino de 20 semanas que presentó NB (recuadro). <span class="elsevierStyleBold">B)</span> Corte histológico del riñón de un feto masculino de 16 semanas sin NB -control- (recuadro). En ambas microfotografías el tejido conjuntivo que cubre la superficie renal muestra un aspecto muy semejante (H-E, 5X). R: riñón; TC: tejido conjuntivo.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Discusión</span></p><p class="elsevierStylePara"> Ni la edad, el género, la manipulación, la coexistencia de algún trastorno en el desarrollo o el tiempo de contacto de los productos con el formaldehído al 10% (en este estudio el máximo fue de cinco años), fueron factores que marcaran diferencia en la presencia de los NB.</p><p class="elsevierStylePara"> El reporte negativo de la presencia de formol en el análisis químico descartó la posibilidad de que los NB representaran un precipitado de dicho fijador, lo que inicialmente había sido considerado, por ser este químico, la única sustancia a la cual estuvieron expuestos los fetos por tiempo prolongado, además de no presentarse los NB en el proceso normal de desarrollo intrauterino. Por otro lado, histológicamente tampoco se observó tejido de aspecto nodular en la superficie renal, el cual se pudo haber eliminado durante el proceso de deshidratación inherente a la técnica histológica con H-E.</p><p class="elsevierStylePara"> Cabe señalar también, que después de la deshidratación-rehidratación de los riñones, el resto de los tejidos fetales también mostraron mejoramiento en la imagen. Una vez alcanzado el objetivo inicial del estudio, el resto de los pasos de la técnica histológica en mención ya no fueron revisados, pues como ya se ha mencionado, a la revisión histológica tampoco estarían presentes.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Conclusiones</span></p><p class="elsevierStylePara"> Aunque está por determinar la naturaleza de los NB, ensayos previos en nuestro laboratorio, también con fetos humanos de edades semejantes, revelan hallazgos y resultados similares a los del presente estudio en otros órganos o regiones corporales. Siendo en nuestro caso, el principal campo de interés la biología del desarrollo/ embriología, la morfología ya sea macro o microscópica, juega un papel muy importante como parámetro para detectar alguna malformación o para señalar el grado de desarrollo de una determinada parte embrionaria o fetal, más tratándose de material humano, por lo que al liberarlas de artefactos como los son los NB, este método representa un gran apoyo para la enseñanza e investigación de nuestra disciplina.</p><p class="elsevierStylePara"> Por lo anterior, al momento se propone esta técnica de deshidratación-rehidratación con alcohol etílico, fácil de realizar y que no daña a los tejidos, como método efectivo para mejorar la imagen macroscópica de productos embrionarios/fetales u órganos, lo que permitiría además una descripción de su desarrollo más apegada a la realidad; e incluso evitaría la edición fotográfica de este tipo de piezas valiosas por la dificultad para su obtención y que requieren de conservarse, incluso por tiempos prolongados, para propósito de complementar el aprendizaje de la biología del desarrollo/embriología.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Conflicto de intereses</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los autores declaran no tener conflicto de intereses.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Financiamiento</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los autores no recibieron ningún patrocinio para llevar a cabo este artículo.</p><hr></hr><p class="elsevierStylePara"> Recibido: Mayo 2012.<br></br> Aceptado: Junio 2013</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleItalic">Correspondencia</span>:<br></br> Dr. med. María Esthela Morales Pérez.<br></br> Departamento de Embriología, Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Nuevo León.<br></br> Edificio de Ciencias Morfológicas I. Dr. Eduardo Aguirre Pequeño y Calzada Francisco I.<br></br> Madero s/n, Colonia Mitras Centro, C.P. 64460, Monterrey, N. 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En la literatura y en nuestra experiencia, hemos observado imágenes de embriones/fetos, conservados en este fijador, con una cantidad variable de nódulos blanquecinos (NB) en sus órganos incluida la piel.</p> <p class="elsevierStylePara"> Objetivo: Eliminar mediante la deshidratación con alcohol etílico, los NB presentes en la superficie del riñón fetal.</p> <p class="elsevierStylePara"> Material y métodos: Mediante fórmula aleatoria, fueron seleccionados productos de aborto, de la colección del Departamento de Embriología, recibidos entre los años 2005-2009. Se determinó su edad, género y presencia o no de anomalía(s), según estándares internacionales. Bajo estereomicroscopía, los riñones con NB fueron sometidos a deshidratación-rehidratación, análisis químico de color para formol o a cortes histológicos coloreados con H-E; para los dos últimos tratamientos se utilizó un control.</p> <p class="elsevierStylePara"> Resultados: Después de la deshidratación los riñones no mostraron NB, pero sólo hasta después de la rehidratación su imagen fue más nítida. El análisis químico para formol fue negativo. Histológicamente, la imagen renal entre los especímenes con/sin NB fue semejante.</p> <p class="elsevierStylePara"> Conclusiones: Siendo para la biología del desarrollo/embriología la morfología un parámetro importante para determinar calidad del desarrollo intrauterino, se propone esta técnica de deshidratación-rehidratación, que no daña los tejidos, como método efectivo para eliminar artefactos como lo son los NB; al mejorar la imagen macroscópica, la descripción del desarrollo de embriones/fetos será más apegada a la realidad, evitándose incluso la edición fotográfica.</p>" ] "en" => array:1 [ "resumen" => "<p class="elsevierStylePara"> Introduction: Tissue fixation is a must if you want to preserve the structural and chemical conditions similar to those in vivo. The most widely used chemical for this purpose is formaldehyde. 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For the last two procedures a control was used.</p> <p class="elsevierStylePara"> Results: After dehydration, the kidneys were WN free, but it was until after hydration that the image was sharper. The histological images after the procedure were very similar between the specimens with WN and the control.</p> <p class="elsevierStylePara"> Discussion: Therefore, the dehydration-hydration procedure, which does not damage the tissues, is proposed as an effective method to improve the macroscopic aspect of tissues preserved in formaldehyde avoiding a possible photo editing.</p>" ] ] "multimedia" => array:8 [ 0 => array:8 [ "identificador" => "fig1" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "copyright" => "Elsevier España" "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "304v15n60-90249609fig1.jpg" "Alto" => 637 "Ancho" => 920 "Tamanyo" => 75571 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Feto humano masculino, de 12 semanas de gestación. 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Información del artículo
ISSN: 16655796Idioma original: Español
Datos actualizados diariamente
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|---|---|---|---|
| 2024 Noviembre | 13 | 0 | 13 |
| 2024 Octubre | 128 | 7 | 135 |
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| 2022 Noviembre | 53 | 18 | 71 |
| 2022 Octubre | 31 | 5 | 36 |
| 2022 Septiembre | 47 | 12 | 59 |
| 2022 Agosto | 45 | 8 | 53 |
| 2022 Julio | 33 | 7 | 40 |
| 2022 Junio | 22 | 12 | 34 |
| 2022 Mayo | 49 | 10 | 59 |
| 2022 Abril | 24 | 10 | 34 |
| 2022 Marzo | 56 | 11 | 67 |
| 2022 Febrero | 31 | 5 | 36 |
| 2022 Enero | 57 | 7 | 64 |
| 2021 Diciembre | 29 | 13 | 42 |
| 2021 Noviembre | 39 | 7 | 46 |
| 2021 Octubre | 63 | 11 | 74 |
| 2021 Septiembre | 54 | 10 | 64 |
| 2021 Agosto | 38 | 7 | 45 |
| 2021 Julio | 39 | 5 | 44 |
| 2021 Junio | 22 | 6 | 28 |
| 2021 Mayo | 40 | 5 | 45 |
| 2021 Abril | 86 | 15 | 101 |
| 2021 Marzo | 59 | 8 | 67 |
| 2021 Febrero | 46 | 9 | 55 |
| 2021 Enero | 57 | 10 | 67 |
| 2020 Diciembre | 59 | 8 | 67 |
| 2020 Noviembre | 50 | 5 | 55 |
| 2020 Octubre | 38 | 6 | 44 |
| 2020 Septiembre | 35 | 12 | 47 |
| 2020 Agosto | 38 | 11 | 49 |
| 2020 Julio | 31 | 8 | 39 |
| 2020 Junio | 29 | 19 | 48 |
| 2020 Mayo | 27 | 6 | 33 |
| 2020 Abril | 34 | 5 | 39 |
| 2020 Marzo | 47 | 1 | 48 |
| 2020 Febrero | 36 | 10 | 46 |
| 2020 Enero | 36 | 7 | 43 |
| 2019 Diciembre | 29 | 13 | 42 |
| 2019 Noviembre | 47 | 6 | 53 |
| 2019 Octubre | 39 | 6 | 45 |
| 2019 Septiembre | 38 | 11 | 49 |
| 2019 Agosto | 27 | 6 | 33 |
| 2019 Julio | 37 | 15 | 52 |
| 2019 Junio | 67 | 36 | 103 |
| 2019 Mayo | 160 | 45 | 205 |
| 2019 Abril | 91 | 16 | 107 |
| 2019 Marzo | 25 | 6 | 31 |
| 2019 Febrero | 28 | 6 | 34 |
| 2019 Enero | 19 | 8 | 27 |
| 2018 Diciembre | 17 | 4 | 21 |
| 2018 Noviembre | 33 | 0 | 33 |
| 2018 Octubre | 29 | 6 | 35 |
| 2018 Septiembre | 20 | 8 | 28 |
| 2018 Agosto | 20 | 9 | 29 |
| 2018 Julio | 14 | 3 | 17 |
| 2018 Junio | 13 | 8 | 21 |
| 2018 Mayo | 18 | 9 | 27 |
| 2018 Abril | 18 | 5 | 23 |
| 2018 Marzo | 13 | 3 | 16 |
| 2018 Febrero | 9 | 0 | 9 |
| 2018 Enero | 7 | 0 | 7 |
| 2017 Diciembre | 18 | 1 | 19 |
| 2017 Noviembre | 14 | 4 | 18 |
| 2017 Octubre | 18 | 3 | 21 |
| 2017 Septiembre | 21 | 5 | 26 |
| 2017 Agosto | 10 | 2 | 12 |
| 2017 Julio | 14 | 3 | 17 |
| 2017 Junio | 20 | 1 | 21 |
| 2017 Mayo | 34 | 5 | 39 |
| 2017 Abril | 14 | 0 | 14 |
| 2017 Marzo | 25 | 21 | 46 |
| 2017 Febrero | 57 | 2 | 59 |
| 2017 Enero | 7 | 0 | 7 |
| 2016 Diciembre | 18 | 2 | 20 |
| 2016 Noviembre | 17 | 2 | 19 |
| 2016 Octubre | 24 | 6 | 30 |
| 2016 Septiembre | 5 | 4 | 9 |
| 2016 Agosto | 13 | 3 | 16 |
| 2016 Julio | 19 | 7 | 26 |
| 2016 Junio | 51 | 20 | 71 |
| 2016 Mayo | 62 | 29 | 91 |
| 2016 Abril | 49 | 21 | 70 |
| 2016 Marzo | 59 | 17 | 76 |
| 2016 Febrero | 50 | 26 | 76 |
| 2016 Enero | 43 | 13 | 56 |
| 2015 Diciembre | 38 | 13 | 51 |
| 2015 Noviembre | 60 | 12 | 72 |
| 2015 Octubre | 50 | 16 | 66 |
| 2015 Septiembre | 62 | 18 | 80 |
| 2015 Agosto | 92 | 20 | 112 |
| 2015 Julio | 126 | 8 | 134 |
| 2015 Junio | 76 | 5 | 81 |
| 2015 Mayo | 60 | 5 | 65 |
| 2015 Abril | 48 | 12 | 60 |
| 2015 Marzo | 79 | 10 | 89 |
| 2015 Febrero | 35 | 17 | 52 |
| 2015 Enero | 19 | 8 | 27 |
| 2014 Diciembre | 16 | 7 | 23 |
| 2014 Noviembre | 9 | 4 | 13 |
| 2014 Octubre | 16 | 3 | 19 |
| 2014 Septiembre | 23 | 3 | 26 |
| 2014 Agosto | 13 | 6 | 19 |
| 2014 Julio | 17 | 3 | 20 |
| 2014 Junio | 9 | 6 | 15 |
| 2014 Mayo | 14 | 7 | 21 |
| 2014 Abril | 12 | 7 | 19 |
| 2014 Marzo | 40 | 3 | 43 |
| 2014 Febrero | 41 | 14 | 55 |
| 2014 Enero | 47 | 8 | 55 |
| 2013 Diciembre | 36 | 16 | 52 |
| 2013 Noviembre | 44 | 9 | 53 |
| 2013 Octubre | 15 | 6 | 21 |
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