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INFORME BREVE
Evaluación de la transmisión galactógena de Trichinella patagoniensis en ratones BALB/c
Assessment of transmammary transmission of Trichinella patagoniensis in BALB/c mice
Fernando A. Fariñaa,b,
Autor para correspondencia
fernandoaf@fvet.uba.ar

Autor para correspondencia.
, Mariana I. Pasqualettia, Natalia M. Cardilloa,b, Tatiana Aronowicza, Mariano Ercolea, Silvio J. Krivokapichc, Mabel M. Ribicicha
a Cátedra de Parasitología y Enfermedades Parasitarias, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires (FCV-UBA), CABA, Argentina
b Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), CABA, Argentina
c Departamento de Parasitología, INEI, ANLIS, «Dr. Carlos Malbrán», CABA, Argentina
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en la provincia de R&#237;o Negro&#44; Argentina&#46; Este nuevo genotipo hoy es una nueva especie encapsulada&#58; <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella patagoniensis</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; Estudios experimentales con esta nueva especie demostraron que los felinos y los ratones son los animales m&#225;s susceptibles de adquirir la infecci&#243;n&#44; mientras que los cerdos y las ratas presentan una carga parasitaria muy baja<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">6&#44;12</span></a>&#46; Por otro lado&#44; en las aves dom&#233;sticas&#44; representadas por <span class="elsevierStyleItalic">Gallus gallus domesticus</span>&#44; la infecci&#243;n no se desarrolla m&#225;s all&#225; del intestino<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0130"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Debido a su reciente hallazgo&#44; los conocimientos respecto de la biolog&#237;a de esta nueva especie a&#250;n son escasos&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La transmisi&#243;n vertical de helmintos es universalmente materna y se manifiesta a trav&#233;s de mecanismos prenatales o galact&#243;genos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>&#46; Diversos nematodes par&#225;sitos son capaces de emplear esta estrategia como mecanismo de perpetuaci&#243;n de su especie&#46; En 1916 se sugiri&#243; por primera vez la existencia de la transmisi&#243;n vertical de <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella</span> spp&#46;&#44; producto del hallazgo de un gran n&#250;mero de larvas en la leche de una mujer que se encontraba lactando<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>&#46; Desde ese entonces&#44; se sospecha que la transmisi&#243;n vertical de par&#225;sitos del g&#233;nero <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella</span> podr&#237;a ocurrir en mujeres embarazadas o lactantes durante la fase parenteral de la infecci&#243;n&#46; Luego de un brote de trichinellosis en la provincia de Udomxay&#44; de la Rep&#250;blica Democr&#225;tica Popular de Laos&#44; Taybouavone et al&#46; realizaron un estudio de casos y controles&#44; y no pudieron demostrar la transmisi&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella</span> spp&#46; desde las madres hacia sus hijos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0145"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a>&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Dubinsky et al&#46; publicaron en 2001 el hallazgo de larvas y partes de larvas en la placenta&#44; el contenido de las cavidades corporales&#44; los &#243;rganos y los tejidos fetales provenientes de una mujer que result&#243; infectada en la semana 10 de la gestaci&#243;n&#44; y que decidi&#243; practicar el aborto en la semana 22 de gestaci&#243;n&#44; durante un brote por <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella britovi</span> que tuvo lugar en 1998 en la Rep&#250;blica Eslovaca<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0160"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Si bien la infecci&#243;n por par&#225;sitos del g&#233;nero <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella</span> en la mayor&#237;a de los casos responde a mecanismos de transmisi&#243;n horizontal &#40;por consumo de tejido muscular con larvas viables&#41;&#44; distintos autores han demostrado que es factible la transmisi&#243;n vertical en ratas&#44; cobayos&#44; ratones y hurones<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;2&#44;8&#44;15</span></a>&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Dado que esta ruta de transmisi&#243;n alternativa no solo es importante en animales&#44; sino tambi&#233;n en seres humanos&#44; se hace necesario su estudio en esta nueva especie&#46; La placenta del rat&#243;n y del humano exhiben caracter&#237;sticas anat&#243;micas semejantes&#44; ambas son hemocoriales&#44; lo que significa que el tejido trofobl&#225;stico derivado del feto se encuentra ba&#241;ado directamente por la sangre materna&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Considerando la susceptibilidad del rat&#243;n a la infecci&#243;n por <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span>&#44; su corto per&#237;odo generacional y la semejanza de su placenta con la del ser humano&#44; el objetivo del presente trabajo fue evaluar la presencia de larvas L1 de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> en las cr&#237;as de ratones BALB&#47;c infectados experimentalmente en los d&#237;as 15 y 18 de pre&#241;ez&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se emple&#243; una cepa de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> que hab&#237;a sido tipificada previamente<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#44; proveniente de un puma de monta&#241;a &#40;c&#243;digo ISS2311&#41; mantenida en ratones BALB&#47;c en la C&#225;tedra de Parasitolog&#237;a y Enfermedades Parasitarias de la Facultad de Ciencias Veterinarias&#44; Universidad de Buenos Aires &#40;FCV-UBA&#41;&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se emplearon 20 ratones hembra BALB&#47;c de 7 semanas de edad&#44; provenientes del Bioterio Central de la FCV-UBA&#46; Los animales fueron divididos en 2 grupos de estudio de 10 individuos cada uno de acuerdo con el d&#237;a de pre&#241;ez en el que ser&#237;an inoculados&#46; Las hembras se alojaron de a una por jaula con un macho y fueron observadas 2 veces por d&#237;a para verificar la presencia de tap&#243;n mucoso vulvar y una vez por d&#237;a para observar la distenci&#243;n abdominal&#46; Se consider&#243; la aparici&#243;n del tap&#243;n mucoso como el d&#237;a 1 de la pre&#241;ez<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0165"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>&#46; Los machos fueron retirados de las jaulas ante la evidencia del tap&#243;n mucoso&#46; El grupo n&#46;&#176; 1 fue inoculado a los 15 d&#237;as de aparecido el tap&#243;n y el grupo n&#46;&#176; 2 a los 18 d&#237;as de aparecido el tap&#243;n mucoso&#46; Cada grupo fue dividido en 2 subgrupos de 5 animales&#44; que fueron inoculados por v&#237;a oral con 100 o con 500 larvas de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span>&#44; respectivamente&#46; Para preparar el in&#243;culo de larvas para las hembras gestantes&#44; se utiliz&#243; la t&#233;cnica de digesti&#243;n artificial&#46; Se realiz&#243; la eutanasia de 2 ratones BALB&#47;c que hab&#237;an sido previamente inoculados con 500 larvas de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> cada uno&#46; Cada carcasa y lengua se lav&#243; con agua corriente&#44; se sec&#243; con papel absorbente&#44; se cort&#243; con tijera en trozos de aproximadamente 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>cm y se proces&#243; en un procesador tipo familiar&#46; El producto c&#225;rnico obtenido fue pesado para calcular el volumen de la soluci&#243;n de digesti&#243;n &#40;pepsina 1&#58;10&#46;000 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#37; P&#47;V y &#225;cido clorh&#237;drico 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#37; V&#47;V&#41; necesario para liberar las larvas enquistadas&#46; La mezcla rat&#243;n-soluci&#243;n de digesti&#243;n se coloc&#243; en un vaso sobre un agitador magn&#233;tico y se incub&#243; a 37<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#44; con agitaci&#243;n suave hasta su total digesti&#243;n&#46; Se col&#243; con colador de malla met&#225;lica de 80 <span class="elsevierStyleItalic">meshes</span> y se dej&#243; sedimentar 30 min&#46; Luego se aspir&#243; el sobrenadante hasta dejar 10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>ml y se dej&#243; reposar durante 20 min&#46; Se realizaron reducciones volum&#233;tricas del 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#37;&#44; se retir&#243; el sobrenadante y se efectu&#243; el conteo tomando 5 al&#237;cuotas de 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;l entre porta y cubre en un microscopio &#243;ptico con un aumento de 10&#215;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se realiz&#243; el seguimiento de las pre&#241;eces&#46; Luego de nacidas&#44; las cr&#237;as se mantuvieron con las madres hasta el d&#237;a 21&#44; momento en el que se realiz&#243; el destete&#46; A los 30 d&#237;as de vida&#44; se realiz&#243; la eutanasia de las cr&#237;as&#46;</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las madres fueron sacrificadas 48 d&#237;as postinoculaci&#243;n&#46; Se realiz&#243; digesti&#243;n artificial<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> de cada una de las cr&#237;as y de cada una de las madres&#46; Se utiliz&#243; el m&#233;todo f&#237;sico de eutanasia&#44; la t&#233;cnica de dislocaci&#243;n cervical manual&#46; Previo a la dislocaci&#243;n&#44; se inyect&#243; a cada animal por v&#237;a intraperitoneal una soluci&#243;n de 60<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;kg de ketamina y 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;kg de xilacina<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0180"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46; Una vez digeridas las cr&#237;as y las madres&#44; se estim&#243; el grado de infecci&#243;n alcanzado por cada rat&#243;n determinando la carga parasitaria muscular por recuento de larvas en m&#250;sculo&#44; seg&#250;n la t&#233;cnica descripta por Kapel y Gamble<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> modificada&#46; Se proces&#243; la carcasa de cada animal empleando la misma metodolog&#237;a descripta anteriormente&#46; El resultado se expres&#243; como carga parasitaria muscular relativa&#44; que se calcul&#243; como el n&#250;mero de par&#225;sitos recuperados por gramo de tejido fresco &#40;LPG&#41;&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las hembras BALB&#47;c infectadas durante la gestaci&#243;n no evidenciaron signos compatibles con trichinellosis&#44; el parto de todas ellas fue normal&#44; sin complicaciones &#40;distocias&#41;&#46; Las pre&#241;eces tuvieron una duraci&#243;n promedio de 18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2 d&#237;as&#46; No se encontraron larvas L1 de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> en ninguna de las cr&#237;as analizadas&#46; Los resultados del an&#225;lisis por medio de la t&#233;cnica de digesti&#243;n artificial de las madres se resumen en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El estudio demostr&#243; que si bien las madres adquirieron la infecci&#243;n por <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> con ambas dosis &#40;100 y 500 larvas&#41; inoculadas en los d&#237;as 15 o 18 de la pre&#241;ez &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>&#41;&#44; ninguna cr&#237;a fue capaz de hospedar larvas L1 en sus m&#250;sculos&#46; Esto concuerda con lo publicado por Cui et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#44; quienes no hallaron evidencia de transmisi&#243;n vertical de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; spiralis</span> en cr&#237;as de ratones BALB&#47;c nacidas de madres infectadas en los d&#237;as 15 o 17 &#40;&#250;ltimo tercio de la gestaci&#243;n&#41;&#46; En este sentido&#44; cabe destacar que tanto en la experiencia de Cui et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a> como en la presente&#44; las infecciones experimentales se llevaron a cabo en momentos similares y con la misma cepa de rat&#243;n&#46; La ausencia de transmisi&#243;n galact&#243;gena podr&#237;a deberse&#44; en parte&#44; a la mayor expresi&#243;n de interleucina-2 en el intestino delgado de este tipo de rat&#243;n&#44; lo que favorecer&#237;a la expulsi&#243;n de par&#225;sitos del g&#233;nero <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Matenga et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> reportaron la transmisi&#243;n experimental de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; zimbabwensis</span> por la v&#237;a galact&#243;gena en <span class="elsevierStyleItalic">Rattus norvegicus</span>&#44; al realizar la inoculaci&#243;n 40 d&#237;as antes de la concepci&#243;n&#46; Estos resultados contrastan con los obtenidos en el presente trabajo&#44; pero cabe se&#241;alar que tanto la especie animal como el momento de la infecci&#243;n son diferentes&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las distintas especies animales no presentan la misma capacidad de transmisi&#243;n vertical de <span class="elsevierStyleItalic">Trichinella</span> spp<span class="elsevierStyleItalic">&#46;</span> Cosoroaba y Orjanu<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a>&#44; Webster y Kapel<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a> y Cui et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a> encontraron larvas infectantes de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; spiralis</span> en las cr&#237;as de hurones&#44; cobayos&#44; ratones CF1&#44; BALB&#47;c y ratas que hab&#237;an sido infectados de forma experimental&#44; antes o inmediatamente despu&#233;s de la concepci&#243;n&#44; lo que indica que la transmisi&#243;n vertical ocurrir&#237;a por un pasaje transplacentario de larvas&#46; En la infecci&#243;n por <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span>&#44; la ausencia de recuperaci&#243;n de larvas en cr&#237;as provenientes de hembras inoculadas en gestaci&#243;n tard&#237;a no descartar&#237;a la posibilidad de transmisi&#243;n transplacentaria&#44; lo que refuerza la necesidad de intensificar los estudios al respecto&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Cabe destacar que <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; spiralis</span>&#44; a diferencia de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span>&#44; posee una patogenicidad mayor debido a su alto &#237;ndice de capacidad reproductiva &#40;RCI&#41; y a la reacci&#243;n inmunol&#243;gica que desencadena en el hospedador<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46; Esto podr&#237;a ser una explicaci&#243;n&#44; en parte&#44; al hecho de que no haya habido transmisi&#243;n de larvas hacia las cr&#237;as&#46; Al tener un RCI mayor &#40;<span class="elsevierStyleItalic">T&#46; spiralis</span>&#41;&#44; la producci&#243;n de larvas reci&#233;n nacidas &#40;LRN&#41; por hembra ser&#237;a mayor&#44; lo que incrementar&#237;a las chances de que a una misma dosis de infecci&#243;n <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; spiralis</span> pueda transmitirse hacia las cr&#237;as y <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> no&#46;</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Adem&#225;s de la diferencia en la patogenicidad&#44; tambi&#233;n son fundamentales para explicar esta situaci&#243;n las cargas larvarias utilizadas&#46; En este trabajo&#44; se emplearon 2 cargas larvarias &#40;una baja y otra media&#41; con el objeto de simular una situaci&#243;n que ocurre en la naturaleza&#46; Por el contrario&#44; en los trabajos realizados por otros grupos de investigaci&#243;n se emplearon cargas muy superiores<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;2&#44;8&#44;15</span></a>&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En conclusi&#243;n&#44; a partir de los resultados obtenidos no ser&#237;a factible la transmisi&#243;n galact&#243;gena de <span class="elsevierStyleItalic">T&#46; patagoniensis</span> en el rat&#243;n BALB&#47;c&#44; es decir&#44; que esta v&#237;a no desempe&#241;ar&#237;a un papel en la transmisi&#243;n y la perpetuaci&#243;n de este par&#225;sito&#46;</p><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0025">Responsabilidades &#233;ticas</span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0030">Protecci&#243;n de personas y animales</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que los procedimientos seguidos se conformaron a las normas &#233;ticas del comit&#233; de experimentaci&#243;n humana responsable y de acuerdo con la Asociaci&#243;n M&#233;dica Mundial y la Declaraci&#243;n de Helsinki&#46; El presente estudio experimental fue aprobado bajo el n&#250;mero 2014&#47;01 por el Comit&#233; para el Uso y Cuidado de Animales de Laboratorio &#40;CICUAL&#41; de la FCV-UBA&#46;</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0035">Confidencialidad de los datos</span><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que en este art&#237;culo no a parecen datos de pacientes&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0040">Derecho a la privacidad y consentimiento informado</span><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que en este art&#237;culo no aparecen datos de pacientes&#46;</p></span></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0045">Financiaci&#243;n</span><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este trabajo fue financiado por los proyectos MINCyT PICT 2013-0965 y UBACyT 20020130100336BA&#46;</p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0050">Conflicto de intereses</span><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Dosis infectiva &#40;n&#46;&#176; de larvas&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Carga parasitaria &#40;LPG<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005"><span class="elsevierStyleSup">a</span></a>&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo
ISSN: 03257541
Idioma original: Español
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