Informe breve
Optimización de variables en ensayos de actividad antifúngica fotodinámica frente a especies de Candida
Optimization of variables in photodynamic antifungal assays against Candida species
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The first two principal components account for 47.7% and 39.0% of the total variation, respectively. A total of 25 variables were included in the analysis: 23 volatile compounds (yellow circles)<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>antifungal effect<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>+<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>anti-conidiogenic effect (green circles). The tested EOs are shown in blue circles. Only those compounds with a relative percentage >1.0 were considered in the analysis.</p>" ] ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "Fernanda Achimón, Vanessa D. Brito, Romina P. Pizzolitto, Agripina Ramirez Sanchez, Elisa A. Gómez, Julio A. Zygadlo" "autores" => array:6 [ 0 => array:2 [ "nombre" => "Fernanda" "apellidos" => "Achimón" ] 1 => array:2 [ "nombre" => "Vanessa D." "apellidos" => "Brito" ] 2 => array:2 [ "nombre" => "Romina P." 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Normal morphology of ASP-1 untreated <span class="elsevierStyleItalic">S. aureus</span> ATCC29213 cells (45<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>000×) at different time points (a, d, and g); ASP-1 treated bacterial cells at 0<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h showing smooth cell surfaces with no discernible ultrastructural changes (b and c); ASP-1 treated cells showing deformities and central perforations within 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h of exposure (e and f); the SEM image reveals extensive cell surface damage at 12<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h as indicated by spurting of cellular contents and loss of shape (bending) with the central hollowing (h); several biconcave cells with central depression and cavity showing concomitant leakage of cytoplasmic contents at 1× MBC (16<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>μg/ml); the field also shows some distorted cells lying at the periphery (i), and cells with dents, surface blebs and plicated surfaces have been observed. Several cells appeared as punctured with spewed-off cytoplasmic contents. Black solid arrows have indicated major structural changes.</p>" ] ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "Rehan Deshmukh, Ajay Ghosh Chalasani, Debprasad Chattopadhyay, Utpal Roy" "autores" => array:4 [ 0 => array:2 [ "nombre" => "Rehan" "apellidos" => "Deshmukh" ] 1 => array:2 [ "nombre" => "Ajay Ghosh" "apellidos" => "Chalasani" ] 2 => array:2 [ "nombre" => "Debprasad" "apellidos" => "Chattopadhyay" ] 3 => array:2 [ "nombre" => "Utpal" "apellidos" => "Roy" ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "en" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/S0325754121000031?idApp=UINPBA00004N" "url" => "/03257541/0000005300000004/v1_202112240942/S0325754121000031/v1_202112240942/en/main.assets" ] "es" => array:22 [ "idiomaDefecto" => true "cabecera" => "<span class="elsevierStyleTextfn">Informe breve</span>" "titulo" => "Optimización de variables en ensayos de actividad antifúngica fotodinámica frente a especies de <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span>" "tieneTextoCompleto" => true "paginas" => array:1 [ 0 => array:2 [ "paginaInicial" => "287" "paginaFinal" => "291" ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:4 [ "autoresLista" => "Lucía Bulacio, Silvana Ramadán, Hernán Dalmaso, Alicia Luque, Maximiliano Sortino" "autores" => array:5 [ 0 => array:4 [ "nombre" => "Lucía" "apellidos" => "Bulacio" "email" => array:1 [ 0 => "lcbulacio@hotmail.com" ] "referencia" => array:3 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "aff0005" ] 1 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">1</span>" "identificador" => "fn1" ] 2 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">*</span>" "identificador" => "cor0005" ] ] ] 1 => array:3 [ "nombre" => "Silvana" "apellidos" => "Ramadán" "referencia" => array:2 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "aff0005" ] 1 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">1</span>" "identificador" => "fn1" ] ] ] 2 => array:3 [ "nombre" => "Hernán" "apellidos" => "Dalmaso" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "aff0005" ] ] ] 3 => array:3 [ "nombre" => "Alicia" "apellidos" => "Luque" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "aff0005" ] ] ] 4 => array:3 [ "nombre" => "Maximiliano" "apellidos" => "Sortino" "referencia" => array:2 [ 0 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">a</span>" "identificador" => "aff0005" ] 1 => array:2 [ "etiqueta" => "<span class="elsevierStyleSup">b</span>" "identificador" => "aff0010" ] ] ] ] "afiliaciones" => array:2 [ 0 => array:3 [ "entidad" => "Centro de Referencia de Micología (CEREMIC), Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas, Universidad Nacional de Rosario, Rosario, Santa Fe, Argentina" "etiqueta" => "a" "identificador" => "aff0005" ] 1 => array:3 [ "entidad" => "Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET), Rosario, Santa Fe, Argentina" "etiqueta" => "b" "identificador" => "aff0010" ] ] "correspondencia" => array:1 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "cor0005" "etiqueta" => "⁎" "correspondencia" => "Autor para correspondencia." ] ] ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "en" => array:1 [ "titulo" => "Optimization of variables in photodynamic antifungal assays against <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span> species" ] ] "resumenGrafico" => array:2 [ "original" => 0 "multimedia" => array:7 [ "identificador" => "fig0010" "etiqueta" => "Figura 2" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr2.jpeg" "Alto" => 1172 "Ancho" => 2508 "Tamanyo" => 247970 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0025" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Control de viabilidad luego de la exposición a azul de toluidina con lámpara tipo reflector de 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W e incubación a 37<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C durante 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h, con subcultivo de los pocillos en agar Sabouraud glucosa: <span class="elsevierStyleBold">a</span>) antes de la incubación; <span class="elsevierStyleBold">b</span>) luego de la incubación.</p>" ] ] ] "textoCompleto" => "<span class="elsevierStyleSections"><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las candidiasis, producidas por levaduras de diversas especies pertenecientes al género <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span>, presentan una amplia variedad de cuadros clínicos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a>. Estos hongos forman parte de la microbiota habitual de la boca, el sistema gastrointestinal, la piel y la vagina, y solo producen infección en la mucosa en presencia de factores predisponentes, de ahí que sean considerados hongos oportunistas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>. Generalmente, la candidiasis se origina de manera endógena y suele atribuirse a una de estas dos causas: desequilibrio de la microbiota acompañante o enfermedades y procesos que influyen en la respuesta inmunitaria, como tratamientos prolongados con corticoides, edades extremas, síndrome de inmunodeficiencia adquirida, entre otros. Habitualmente, las candidiasis se manifiestan como enfermedades leves de la mucosa oral y genital, de la piel y de las uñas. En ocasiones, pueden volverse recurrentes y en forma menos frecuente presentarse como candidiasis invasoras en individuos inmunocomprometidos, con morbilidad y mortalidad muy altas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0130"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>.</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La especie más importante desde el punto de vista médico-odontológico es <span class="elsevierStyleItalic">Candida albicans</span>, aunque de acuerdo con diversos autores, se han aislado de la cavidad bucal otras especies, como <span class="elsevierStyleItalic">Candida krusei</span>, <span class="elsevierStyleItalic">Candida tropicalis</span>, <span class="elsevierStyleItalic">Candida glabrata</span>, <span class="elsevierStyleItalic">Candida dubliniensis</span> y <span class="elsevierStyleItalic">Candida parapsilosis</span>, así como levaduras de otros géneros incluyendo <span class="elsevierStyleItalic">Saccharomyces cerevisiae</span><a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">8,12,14</span></a>. En concordancia con esto, un trabajo realizado en 60 pacientes oncológicos en tratamiento con radioterapia y que presentaron lesiones bucales mostró como especie prevalente a <span class="elsevierStyleItalic">C. albicans</span> (22 cepas), seguida de <span class="elsevierStyleItalic">C. tropicalis</span> (13 cepas), <span class="elsevierStyleItalic">C. parapsilosis</span> (6 cepas), <span class="elsevierStyleItalic">C. dubliniensis</span> (1 cepa) y <span class="elsevierStyleItalic">S. cerevisiae</span> (1 cepa). La mayoría de los aislamientos fueron sensibles a clotrimazol y nistatina, fármacos usualmente empleados en forma tópica; no se observó lo mismo con miconazol. En cuanto a la evaluación del comportamiento frente a fármacos de uso sistémico, aunque en general fueron sensibles a anfotericina B, fluconazol, itraconazol y voriconazol, se observaron cepas resistentes a algunos azoles<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>.</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las dificultades que se presentan en el tratamiento de estas infecciones están relacionadas, fundamentalmente, con el reducido número de agentes antifúngicos disponibles en el mercado, la aparición de cepas resistentes y la habilidad de este grupo para desarrollar biopelículas.</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las levaduras en biopelículas presentan una capacidad alrededor de 1.000 veces mayor que las células planctónicas para comportarse como tolerantes a fármacos antifúngicos, aun sin portar genes específicos de resistencia<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>.</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La terapia antifúngica fotodinámica, llamada también terapia fotosensitiva o fotoquimioterapia, adquirió gran relevancia en los últimos años en respuesta a la demanda de tratamientos eficaces contra algunas infecciones<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>. Este proceso utiliza compuestos fotosensibilizantes seguido de una activación con una lámpara de luz específica<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a> en presencia de oxígeno molecular. De este modo se generan especies reactivas del oxígeno, que son nocivas para los microorganismos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a>, con la ventaja de que los efectos secundarios son escasos (por lo común, picazón, ardor, calor o dolor, que se alivian con la aplicación de aire frío, agua fría o algún anestésico de uso local), predecibles y manejables. Este tratamiento no afecta al tejido sano<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>; además, ha demostrado ser efectivo tanto frente a células planctónicas como a aquellas que se encuentran formando biopelículas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>.</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El objetivo del presente trabajo fue evaluar la efectividad de diferentes colorantes, fuentes de irradiación y tiempos de exposición, a fin de establecer las condiciones óptimas que permitan su aplicación en terapia fotodinámica.</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se utilizaron 39 cepas de <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span> aisladas de candidiasis orofaríngea, provenientes de la Colección de Cultivos del Centro de Referencia de Micología (CEREMIC) dependiente de la Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas de la Universidad Nacional de Rosario. Las levaduras se sembraron en agar Sabouraud glucosa (ASG) (Britania) y se incubaron a 28<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C por 24-48<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h. Se realizó un inóculo en solución fisiológica estéril, que se ajustó a 1-5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>×<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>10<span class="elsevierStyleSup">3</span><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>UFC/ml.</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La actividad antifúngica fotodinámica se determinó siguiendo los lineamientos del documento M27-Ed4 emitido por el Instituto de Normas Clínicas y de Laboratorio (CLSI, <span class="elsevierStyleItalic">Clinical and Laboratory Standards Institute</span>)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>. Las determinaciones fueron realizadas en paralelo, bajo irradiación con luz blanca proveniente de diferentes lámparas de uso comercial para iluminación domiciliaria y en oscuridad. Se ensayaron lámparas bajo consumo tipo espiral de 15<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W y 23<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W, lámparas de diodos emisores de luz [<span class="elsevierStyleItalic">light-emitting diode</span> (LED)] tipo bulbo de 15<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W y 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W; lámparas LED tipo dicroicas de 7<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W y 11<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W, y reflectores LED de 10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W y 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W. Se evaluaron 12 colorantes: violeta de genciana, azul de metileno, rojo de metilo, azul de toluidina, heliantina, rosa de bengala, rojo fenol, naranja de acridina, verde de malaquita, azul de anilina, púrpura de bromocresol y sangre de dragón.</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Con los colorantes se prepararon soluciones madre de 12,5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg/ml en dimetilsulfóxido (DMSO). Con diluciones 1/25 de estas soluciones se completó la primera hilera de pocillos de microplacas de 96, y luego se hicieron diluciones al medio en forma seriada en el medio Roswell Park Memorial Institute-1640 (RPMI-1640) (SIGMA), a los efectos de obtener, luego de realizados los inóculos, concentraciones finales en el rango 250-0,12<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>μg/ml (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>). A continuación, se colocó el inóculo de las levaduras y se expusieron las placas a radiación con las diferentes fuentes de luz visible durante 30, 60 y 90<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>minutos. Posteriormente se incubaron durante 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h a 37<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C. Se realizaron los siguientes controles: control de viabilidad del microorganismo en medio de cultivo sin ningún colorante, control de esterilidad de los compuestos ensayados y control de esterilidad del medio de cultivo. La máxima concentración de DMSO utilizada en los ensayos, que correspondió a la primera hilera de pocillos, fue del 2%; la misma concentración se reprodujo en los pocillos de control de viabilidad; sin que se afecte el desarrollo fúngico en ningún caso. Paralelamente, se realizaron ensayos bajo las mismas condiciones, pero en microplacas cubiertas con papel aluminio para evitar la exposición a la luz. Todas las determinaciones se llevaron a cabo por duplicado.</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Transcurrida la incubación, se evaluó la viabilidad en los pocillos mediante la realización de subcultivos en ASG. De este modo se determinó la concentración fungicida mínima (CFM), interpretada como la menor concentración de colorante que inhibió totalmente el desarrollo fúngico (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>). Se consideraron fotosensibilizantes aquellos colorantes que demostraron actividad (CFM<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span><<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>μg/ml) solamente bajo irradiación.</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">No se observó actividad antifúngica fotosensibilizante en los experimentos irradiados con lámparas de LED tipo bulbo y tipo dicroicas, mientras que fueron eficaces las lámparas bajo consumo tipo espiral (23<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W flujo luminoso 1.450<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>lm, eficacia lumínica η<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>63<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>lm/W luz clara 6.500<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>K) y los reflectores LED (18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>×<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm, de 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W, flujo luminoso 1.800<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>lm, luz clara, ángulo de incidencia 120°, 6.000<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>K). Bajo estas condiciones, la mayor actividad antifúngica fotosensibilizante se observó con el azul de toluidina (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>), en tanto que el verde de malaquita y el naranja de acridina presentaron solo actividad marginal. El violeta de genciana demostró actividad tanto bajo irradiación como en oscuridad (CFM<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>125<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>μg/ml), por lo que esta no puede relacionarse con fotosensibilización, mientras que el resto de los colorantes fueron inactivos bajo ambas condiciones (CFM<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>μg/ml). El menor tiempo de exposición que permitió obtener resultados satisfactorios fue 60<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>minutos.</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En pacientes oncológicos, trasplantados o con otros estados de inmunocompromiso, son frecuentes las complicaciones orales, entre ellas, las infecciones producidas por levaduras. Esto último pone de manifiesto la necesidad de buscar nuevas estrategias para el abordaje de estas patologías, en especial, para aquellos pacientes sometidos a múltiples protocolos de tratamiento por su enfermedad de base, que presentan infecciones con sensibilidad disminuida a los fármacos de uso común.</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Si bien las terapias fotodinámicas fueron descriptas hace más de un siglo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>, el desarrollo de nuevas fuentes de radiación representa un avance novedoso en el tema. Los resultados de este estudio, en concordancia con lo descripto por Qin et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> respecto de infecciones bacterianas, muestran que el azul de toluidina puede ser útil en el tratamiento de pacientes con candidiasis orofaríngeas, utilizando como fuentes de radiación para la terapia antifúngica fotodinámica láseres y fuentes de luz no coherente. Sin embargo, para la dermatología, las fuentes no láser son superiores a los sistemas láser debido a su gran campo de iluminación, menor costo, tamaño, confiabilidad y fácil configuración<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>.</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para minimizar o incluso evitar los efectos adversos de esta terapia, entre los que se incluyen las ya mencionadas molestias como ardor o dolor, es altamente promisorio el hecho de disponer en la actualidad de nuevos sistemas que emplean lámparas de LED, las que proporcionan una luz visible de banda estrecha, de elevada pureza de espectro y sin producción de calor, con lo que se presentan mínimas o incluso ninguna molestia, ya que al ser una emisión de baja potencia, no es un sistema invasivo; de esta forma, los efectos indeseados se limitarían solo a una coloración transitoria de la zona de aplicación del colorante fotosensible.</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El establecimiento de protocolos que incluyan una correcta combinación de la fuente de radiación y el colorante apropiado redundará en el éxito de la terapia, especialmente si se tiene en consideración que los fotosensibilizantes eficientes deben tener la capacidad de absorber la radiación, excitarse y transferir su energía al oxígeno molecular, y que ciertos colorantes, al poseer estructuras con un alto grado de conjugación<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>, cumplen con las características mencionadas.</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El uso de la terapia antifúngica fotodinámica para el tratamiento de infecciones localizadas representa un novedoso campo de investigación abocado a hallar las ventajas de este tipo de tratamiento frente a los tratamientos antimicóticos convencionales, que muchas veces resultan poco eficaces y originan una alta tasa de fracasos terapéuticos, como se puede observar frecuentemente en la clínica.</p><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Asimismo, estos resultados abren la posibilidad de realizar nuevos estudios diseñados para conocer en mayor profundidad qué impacto tiene la terapia fotodinámica sobre la expresión de los diferentes factores de virulencia asociados a la agresividad de las candidiasis, o incluso a la frecuencia de recidivas relacionadas con el fracaso terapéutico.</p><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0030">Conflicto de intereses</span><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.</p></span></span>" "textoCompletoSecciones" => array:1 [ "secciones" => array:8 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "xres1635318" "titulo" => "Highlights" "secciones" => array:1 [ 0 => array:1 [ "identificador" => "abst0005" ] ] ] 1 => array:3 [ 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elsevierViewall">El azul de toluidina mostró actividad antifúngica frente a 39 cepas de <span class="elsevierStyleItalic">Candida.</span></p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0015"><span class="elsevierStyleLabel">•</span><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se establecieron condiciones óptimas de irradiación, fuente y tiempo de exposición.</p></li></ul></p></span>" ] "resumen" => array:2 [ "es" => array:2 [ "titulo" => "Resumen" "resumen" => "<span id="abst0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><p id="spar0010" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Las infecciones orales causadas por levaduras del género <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span> son muy comunes en pacientes con factores predisponentes, ya sea por estados fisiológicos o ciertas patologías de base. Estos cuadros pueden, además, evolucionar hacia formas diseminadas. En este trabajo se evaluaron <span class="elsevierStyleItalic">in vitro</span> algunos protocolos de terapia antifúngica fotodinámica contra levaduras del género <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span>, para establecer las condiciones óptimas de radiación luego de aplicar compuestos fotosensibilizantes. Se evaluaron 39 cepas de distintas especies de <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span>, que se expusieron a 12 colorantes, 8 fuentes de radiación y 3 tiempos de exposición. El azul de toluidina combinado con la exposición a luz proveniente de lámpara de diodo emisor de luz (LED) tipo reflector de 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W durante 60<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>minutos mostró una buena actividad fotodinámica. Dadas las desventajas asociadas al uso de antifúngicos convencionales, como la aparición de cepas resistentes, de recidivas y de efectos adversos, la terapia antifúngica fotodinámica es una estrategia promisoria para el tratamiento de infecciones localizadas.</p></span>" ] "en" => array:2 [ "titulo" => "Abstract" "resumen" => "<span id="abst0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><p id="spar0015" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Oral infections due to yeasts of the genus <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span> are very common in patients with predisposing factors, such as physiological conditions or certain underlying diseases. Moreover, oral candidiasis can also evolve into disseminated forms. In this work, strains of the genus <span class="elsevierStyleItalic">Candida</span> were studied to establish the optimal radiation conditions for photosensitizing compounds, in a photodynamic antifungal therapy protocol. A total of 39 isolates were evaluated. The strains were exposed to twelve dyestuffs, eight radiation sources and three different exposure times. Orthotoluidine blue exhibited good photodynamic activity, in combination with exposure to a 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W reflector lamp LED (light-emitting diode) light for 60<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>minutes. When considering the difficulties of using conventional antifungal drugs, the emergence of resistant strains, recurrences, and adverse reactions of certain commonly used drugs, the photodynamic antifungal therapy is a promising strategy for the treatment of localized infections.</p></span>" ] ] "NotaPie" => array:1 [ 0 => array:3 [ "etiqueta" => "1" "nota" => "<p class="elsevierStyleNotepara" id="npar0005"><span class="elsevierStyleItalic">Ex aequo</span>.</p>" "identificador" => "fn1" ] ] "multimedia" => array:3 [ 0 => array:7 [ "identificador" => "fig0005" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr1.jpeg" "Alto" => 978 "Ancho" => 2508 "Tamanyo" => 274993 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0020" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Microplacas con concentraciones decrecientes de los colorantes ensayados: violeta de genciana (<span class="elsevierStyleBold">VG</span>), azul de metileno (<span class="elsevierStyleBold">AM)</span>, rojo de metilo (<span class="elsevierStyleBold">RM</span>), azul de toluidina (<span class="elsevierStyleBold">AT</span>), heliantina (<span class="elsevierStyleBold">HE</span>), rosa de bengala (<span class="elsevierStyleBold">RB</span>), rojo fenol (<span class="elsevierStyleBold">RF</span>), naranja de acridina (<span class="elsevierStyleBold">NA</span>), verde de malaquita (<span class="elsevierStyleBold">VM</span>), sangre de dragón (<span class="elsevierStyleBold">SD</span>), azul de anilina (<span class="elsevierStyleBold">AA</span>) y púrpura de bromocresol (<span class="elsevierStyleBold">PB</span>).</p>" ] ] 1 => array:7 [ "identificador" => "fig0010" "etiqueta" => "Figura 2" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr2.jpeg" "Alto" => 1172 "Ancho" => 2508 "Tamanyo" => 247970 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0025" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Control de viabilidad luego de la exposición a azul de toluidina con lámpara tipo reflector de 20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W e incubación a 37<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C durante 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>h, con subcultivo de los pocillos en agar Sabouraud glucosa: <span class="elsevierStyleBold">a</span>) antes de la incubación; <span class="elsevierStyleBold">b</span>) luego de la incubación.</p>" ] ] 2 => array:8 [ "identificador" => "tbl0005" "etiqueta" => "Tabla 1" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "detalles" => array:1 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "at1" "detalle" => "Tabla " "rol" => "short" ] ] "tabla" => array:2 [ "leyenda" => "<p id="spar0035" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">CFM: concentración fungicida mínima.</p>" "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:2 [ "tabla" => array:1 [ 0 => """ <table border="0" frame="\n \t\t\t\t\tvoid\n \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col">Especie \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col">Rango CFM (μg/ml) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th></tr><tr title="table-row"><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Tipo espiral (23<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Tipo reflector LED (20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>W) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Oscuridad \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">C. albicans</span> (n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>21) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1,95-7,81 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,48-7,81 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">C. parapsilosis</span> (n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">3,95-15,63 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,98-3,95 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">C. tropicalis</span> (n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>9) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,98-3,95 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,48-3,95 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">C. krusei</span> (n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">0,98 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">3,95 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">C. glabrata</span> (n<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>=<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">7,81 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">3,95 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>250 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab2786443.png" ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0030" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Concentración fungicida mínima de azul de toluidina con exposición a diferentes fuentes de luz y sin exposición a la luz</p>" ] ] ] "bibliografia" => array:2 [ "titulo" => "Bibliografía" "seccion" => array:1 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "bibs0015" "bibliografiaReferencia" => array:15 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "bib0080" "etiqueta" => "1" "referencia" => array:1 [ 0 => array:1 [ "referenciaCompleta" => "Bonifaz A. 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| 2024 Noviembre | 2 | 0 | 2 |
| 2024 Octubre | 26 | 3 | 29 |
| 2024 Septiembre | 31 | 12 | 43 |
| 2024 Agosto | 45 | 7 | 52 |
| 2024 Julio | 39 | 4 | 43 |
| 2024 Junio | 28 | 3 | 31 |
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| 2024 Abril | 24 | 3 | 27 |
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| 2021 Noviembre | 5 | 11 | 16 |
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