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Estudio de estabilidad de las concentraciones de cortisol, 25-hidroxivitamina D y corticotropina (ACTH)
Study of the stability of Cortisol, 25 OH vitamin D and adrenocorticotrophic hormone (ACTH) in plasma
Angeles Aniel-Quiroga Rodrígueza,
Autor para correspondencia
angeles.anielquiroga@osakidetza.net

Autor para correspondencia.
, Lorea Martinez-Indartb, Maria Luisa Granada Ybernc, Arancha Arza Ruesgaa, Juan Múgica Garaya, Antonio López-Urrutia Fernándeza
a Laboratorio de Hormonas, Servicio de Bioquímica, Hospital de Cruces, Barakaldo, Vizcaya, España
b Unidad de Epidemiología Clínica, Hospital de Cruces, Barakaldo, Vizcaya, España
c Servicio de Bioquímica, Hospital Universitario Germans Trias i Pujol, Badalona, Barcelona, España
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    "textoCompleto" => "<span class="elsevierStyleSections"><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Introducci&#243;n</span><p id="par0005" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados anal&#237;ticos de las determinaciones hormonales pueden modificarse en funci&#243;n de distintas variables a lo largo de todo el proceso anal&#237;tico&#46; La mayor&#237;a de los errores en el laboratorio cl&#237;nico se producen en la fase preanal&#237;tica del proceso&#46; La variabilidad dependiente de la fase preanal&#237;tica ha cobrado especial importancia en los &#250;ltimos tiempos debido al cambio al que se han visto sujetos la mayor&#237;a de los laboratorios en la organizaci&#243;n de su trabajo&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la actualidad existe una clara tendencia a centralizar la fase anal&#237;tica en laboratorios que reciben muestras de diferentes centros perif&#233;ricos m&#225;s o menos alejados del laboratorio&#46; Esto ha sido posible gracias a la introducci&#243;n de potentes sistemas automatizados para el tratamiento de las muestras&#44; tanto en la fase preanal&#237;tica como en la fase anal&#237;tica&#44; lo cual permite procesar un elevado n&#250;mero de muestras con un extenso panel de pruebas en un per&#237;odo de tiempo relativamente corto&#46; Esta elevada capacidad permite&#44; as&#237; mismo&#44; procesar las muestras y obtener los resultados el mismo d&#237;a de su obtenci&#243;n en un elevado porcentaje de casos&#46; En este flujo de trabajo de las plataformas autom&#225;ticas se han introducido gran parte de las pruebas hormonales m&#225;s frecuentes&#46; Por tanto&#44; es importante conocer la estabilidad de las magnitudes hormonales en las condiciones en las que se procesan las muestras en laboratorios con este nivel de automatizaci&#243;n&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se define la estabilidad de una magnitud como el &#171;per&#237;odo de tiempo en que la magnitud mantiene su valor dentro de unos l&#237;mites establecidos&#44; conservando la muestra en la que se realiza la medici&#243;n en unas condiciones espec&#237;ficas&#187;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a>&#46; Los l&#237;mites de estabilidad de una magnitud dependen del criterio matem&#225;tico empleado para calcularlos&#46; La Sociedad Espa&#241;ola de Bioqu&#237;mica Cl&#237;nica y Patolog&#237;a Molecular &#40;SEQC&#41; elabor&#243; un criterio para definir el l&#237;mite de variaci&#243;n que implique p&#233;rdida de estabilidad bas&#225;ndose en una combinaci&#243;n del criterio estad&#237;stico&#44; metrol&#243;gico y biol&#243;gico<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0010"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#46; Adem&#225;s la SEQC defini&#243; un protocolo para estudiar la influencia de diferentes variables en la estabilidad de las magnitudes biol&#243;gicas humanas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46; La Comisi&#243;n de Calidad Extraanal&#237;tica de la SEQC propone posteriormente un cambio en la f&#243;rmula a aplicar en el c&#225;lculo de la estabilidad de una magnitud biol&#243;gica&#44; cambio que aporta mayor sensibilidad a dicho c&#225;lculo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0020"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>&#46; Siguiendo estos modelos y como continuaci&#243;n de dos estudios previos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0025"><span class="elsevierStyleSup">5&#44;6</span></a>&#44; se ha realizado un estudio para evaluar el efecto del tiempo transcurrido desde la extracci&#243;n hasta la obtenci&#243;n del resultado con o sin centrifugaci&#243;n previa de la muestra en la estabilidad de tres magnitudes hormonales&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El objetivo del estudio fue evaluar la estabilidad en suero de cortisol y 25OH-vit&#46; D y de ACTH en plasma siguiendo los protocolos de la SEQC que m&#225;s se ajustaban a las condiciones de trabajo del laboratorio&#46;</p><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Variables a estudiar</span><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se evalu&#243; el efecto de la variable tiempo en la estabilidad de las tres magnitudes&#44; seg&#250;n el momento de la centrifugaci&#243;n y la temperatura de almacenamiento de las muestras&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tiempo&#58; intervalo de tiempo desde la extracci&#243;n hasta la obtenci&#243;n del resultado&#44; con o sin centrifugaci&#243;n previa de la muestra&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se estudiaron los siguientes tiempos&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0005"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0005"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T1&#58; 90-120 minutos &#40;15-30 minutos en el caso de ACTH&#41;&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0010"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T2&#58; 210-240 minutos&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0015"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T3&#58; 330-360 minutos&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0020"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T4&#58; 450-480 minutos&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0025"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T5&#58; 24 horas&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0030"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T6&#58; 48 horas&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0035"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">T7&#58; 7 d&#237;as&#46;</p></li></ul></p></span></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Material y m&#233;todos</span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Sujetos</span><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las muestras de sangre se obtuvieron de 25 voluntarios sanos &#40;20 mujeres y 5 hombres&#41; con edades comprendidas entre 21 y 60 a&#241;os&#46; Todas las muestras fueron extra&#237;das en el propio laboratorio entre las 8&#58;00 y las 10&#58;00 de la ma&#241;ana&#46; A todos los participantes se les inform&#243; de los objetivos del estudio y manifestaron por escrito su consentimiento&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Protocolo</span><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A cada sujeto participante en el estudio se le extrajeron 6 tubos en el propio laboratorio &#40;M1&#44; M2&#44; M3&#41; para determinar cortisol y 25OH-vit D en suero y &#40;M4&#44; M5&#44; M6&#41; para determinar ACTH en plasma&#46;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0010"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0040"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M1&#46; Un tubo BD Vacutainer&#174; SST&#8482; II Advance 8&#46;5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL&#46; Ref&#46; 367955&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0045"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M2-M3&#46; Dos tubos BD Vacutainer&#174; SST&#8482; II Advance 5&#46;0<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL&#46; Ref&#46; 367955&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0050"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M4&#46; Un tubo BD Vacutainer&#174; K2E 18&#46;0<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg 10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL&#46; Ref&#46; 367525&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0055"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M5-M6&#46; Dos tubos BD Vacutainer&#174; K2E 5&#46;4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg 3<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mL&#46; Ref&#46;368856&#46;</p></li></ul></p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Cortisol y 25OH-vit D en suero</span><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M1&#58; el tubo se trat&#243; como muestra de referencia&#44; se centrifug&#243; a los 30-60 minutos de la extracci&#243;n a 3&#46;000<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>rpm durante 5 minutos&#46; El tubo primario centrifugado &#40;M1&#41; se analiz&#243; en el tiempo T1 &#40;tiempo de referencia&#41; y posteriormente en T2&#44; T3&#44; T4&#44; T5&#44; T6 y T7&#46; Entre los tiempos T1 y T4 la muestra permaneci&#243; a una temperatura entre 22-25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#46; A partir del tiempo T4 la muestra se almacen&#243; a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C hasta los tiempos T5&#44; T6 y T7&#44; condiciones habituales de conservaci&#243;n de estas muestras en el laboratorio&#46; De todas las muestras M1&#44; tras la centrifugaci&#243;n se separ&#243; una al&#237;cuota de suero &#40;S1<span class="elsevierStyleInf">c</span>&#41; que se congel&#243; a -20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C y se analiz&#243; en el tiempo T7&#46;</p><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M2&#58; el tubo se mantuvo a 22-25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C en el laboratorio y se centrifug&#243; inmediatamente antes de su procesamiento en el tiempo T2&#46;</p><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M3&#58; el tubo se mantuvo en el laboratorio entre 22-25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C y se centrifug&#243; inmediatamente antes de su procesamiento en el tiempo T3&#46;</p><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Todas las muestras se almacenaron tapadas&#46;</p></span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">ACTH en plasma</span><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A cada sujeto participante en el estudio se le extrajeron tres tubos &#40;M4&#44; M5&#44; M6&#41; en el propio laboratorio&#46;</p><p id="par0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M4&#58; inmediatamente despu&#233;s de la extracci&#243;n el tubo se coloc&#243; en hielo hasta la centrifugaci&#243;n en fr&#237;o que se realiz&#243; 10-15 minutos despu&#233;s de la extracci&#243;n&#46; Tras la centrifugaci&#243;n se separaron de este tubo dos al&#237;cuotas de plasma&#44; una &#40;P1<span class="elsevierStyleInf">C</span>&#41; que se congel&#243; a -20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C inmediatamente y se proces&#243; en el tiempo T7 y la otra &#40;P1&#41; se proces&#243; en el tiempo T1 &#40;tiempo de referencia&#41; y posteriormente en los tiempos T2&#44; T3&#44; T4&#44; T5&#44; T6 y T7&#44; manteniendo la muestra a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C durante todos estos tiempos&#46;</p><p id="par0135" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M5&#58; el tubo se mantuvo en hielo y se centrifug&#243; y separ&#243; el plasma &#40;P2&#41; inmediatamente antes de su procesamiento en T2&#46;</p><p id="par0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M6&#58; el tubo se mantuvo en hielo y se centrifug&#243; y separ&#243; el plasma &#40;P3&#41; inmediatamente antes de su procesamiento en T3&#46;</p><p id="par0145" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Todas las muestras se almacenaron tapadas&#46;</p></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">An&#225;lisis de los datos</span><p id="par0150" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los datos se analizaron seg&#250;n los criterios de la Sociedad Espa&#241;ola de Bioqu&#237;mica Cl&#237;nica y Patolog&#237;a Molecular<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;4</span></a>&#46;</p><p id="par0155" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se calcul&#243; la estabilidad &#40;EST&#41; seg&#250;n la f&#243;rmula&#58;<elsevierMultimedia ident="eq0005"></elsevierMultimedia></p><p id="par0160" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se tomaron como datos de coeficiente de variaci&#243;n anal&#237;tico inter-ensayo los obtenidos en el control de calidad del laboratorio en el per&#237;odo de seis meses anteriores a la realizaci&#243;n del estudio&#46;</p><p id="par0165" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para cada magnitud y cada tiempo &#40;T2&#8211;T7&#41; se calcul&#243; la diferencia porcentual &#40;DP&#41; observada respecto a la muestra de referencia &#40;T1&#41; seg&#250;n la f&#243;rmula&#58;<elsevierMultimedia ident="eq0010"></elsevierMultimedia></p><p id="par0170" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Siendo <span class="elsevierStyleItalic">Y</span><span class="elsevierStyleInf"><span class="elsevierStyleItalic">i</span></span> el resultado de la muestra <span class="elsevierStyleItalic">i</span> en los diferentes tiempos y <span class="elsevierStyleItalic">X</span><span class="elsevierStyleInf"><span class="elsevierStyleItalic">i</span></span> su correspondiente valor de referencia<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0020"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>&#46;</p><p id="par0175" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se consider&#243; que en un tiempo se sobrepasaba la estabilidad cuando en ese tiempo DP<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#62;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>EST&#46; Si la diferencia calculada era superior al l&#237;mite de estabilidad propuesto se consider&#243; que la variable estudiada produc&#237;a p&#233;rdida de estabilidad que podr&#237;a alterar la significaci&#243;n cl&#237;nica del resultado&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">An&#225;lisis estad&#237;stico</span><p id="par0180" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las variables se describieron mediante la media y la desviaci&#243;n est&#225;ndar&#46;</p><p id="par0185" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para valorar el efecto del tiempo sobre las concentraciones se utiliz&#243; un modelo lineal general de medidas repetidas &#40;ANOVA de medidas repetidas&#41;&#46; Para la comparaci&#243;n entre la concentraci&#243;n media de cada tiempo respecto a la muestra de referencia&#44; as&#237; como para valorar el efecto de la centrifugaci&#243;n se utiliz&#243; la prueba no param&#233;trica de Wilcoxon&#46; Para estos an&#225;lisis se utiliz&#243; el software estad&#237;stico SPSS vs 19&#46;0&#46;</p></span><span id="sec0050" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Ensayos</span><p id="par0190" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las determinaciones de cortisol&#44; vitamina D &#40;25OH Vit D Total&#41; y ACTH se realizaron por inmunoan&#225;lisis de quimioluminiscencia en el analizador LIAISON&#174; de DiaSorin &#40;Saluggia-Vercelli&#44; Italia&#41;&#46; La imprecisi&#243;n interensayo para cortisol&#44; 25OH-vit D y ACTH fue 5&#44;80&#44; 8&#44;6 y 7&#44;69&#37;&#44; respectivamente&#46;</p><p id="par0195" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Todas las medidas se realizaron por duplicado&#46;</p></span></span><span id="sec0055" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Resultados</span><p id="par0200" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El estudio de estabilidad de cortisol se llev&#243; a cabo con los resultados de las 25 muestras recogidas&#46; Para la 25OH-vit D se utilizaron solosolo 22 debido a que en tres de las muestras el resultado inicial estaba pr&#243;ximo o era inferior al l&#237;mite de sensibilidad del ensayo utilizado&#46; El estudio de estabilidad de ACTH se realiz&#243; en 15 muestras&#46; Para valorar el efecto de la congelaci&#243;n en ACTH se analizaron los resultados de 14 muestras debido a que en una muestra no fue posible medir ACTH tras congelaci&#243;n&#46;</p><p id="par0205" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a> se muestran las concentraciones medias &#40;&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>DS&#41; de las diferentes magnitudes en cada muestra y cada tiempo estudiado&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0210" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El an&#225;lisis de los resultados se realiz&#243; en base a la media obtenida de los duplicados&#44; compar&#225;ndolas con la media obtenida para la muestra de referencia&#46;</p><p id="par0215" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se calcul&#243; el l&#237;mite de estabilidad a partir de los datos del coeficiente de variaci&#243;n anal&#237;tico obtenido durante los &#250;ltimos seis meses en el control de calidad interno del laboratorio para cada una de las magnitudes estudiadas &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0010">tabla 2</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia><span id="sec0060" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Efecto del tiempo</span><p id="par0220" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se calcul&#243; la diferencia porcentual entre cada tiempo &#40;T2-T7&#41; y el tiempo de referencia &#40;T1&#41; y se compar&#243; con el l&#237;mite de estabilidad calculado para cada magnitud &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015">tabla 3</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0015"></elsevierMultimedia><p id="par0225" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados con asterisco muestran una DP que sobrepasa el l&#237;mite de estabilidad establecido&#46;</p><p id="par0230" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las concentraciones de cortisol&#44; aunque mostraron diferencias estad&#237;sticamente significativas en los tiempos T4&#44; T6 y T7 respecto a la muestra de referencia&#44; sin embargo&#44; no sobrepasaron el l&#237;mite de estabilidad en ninguno de los tiempos estudiados&#46; En el caso de la 25OH-vit D se obtuvo una diferencia significativa en el tiempo T4&#44; pero tampoco se sobrepas&#243; el l&#237;mite de estabilidad a lo largo de todo el estudio&#46; Los resultados obtenidos para ACTH mostraron diferencias significativas entre los tiempos T4&#44; T5&#44; T6 y T7 respecto a la muestra de referencia&#44; pero solo se sobrepas&#243; el l&#237;mite de estabilidad establecido a partir del tiempo T5&#44; por lo que se consider&#243; que el ACTH es estable hasta el tiempo T4 en las condiciones del estudio &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0235" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para las tres magnitudes estudiadas no se observa p&#233;rdida de estabilidad cuando las muestras se almacenan congeladas a -20<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C durante siete d&#237;as&#46;</p></span><span id="sec0065" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Efecto de la centrifugaci&#243;n</span><p id="par0240" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0020">tabla 4</a> se muestra la diferencia porcentual &#40;DP&#41; respecto a la muestra de referencia para las muestras M2 y M3 en el caso de cortisol y 25OH-vit D y en las muestras P2 y P3 para ACTH analizadas seg&#250;n el protocolo citado&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0020"></elsevierMultimedia><p id="par0245" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Comparando las muestras analizadas a igualdad de tiempo con centrifugaci&#243;n tras la obtenci&#243;n de la muestra o inmediatamente antes de su procesamiento no se observaron diferencias significativas para ninguna de las tres magnitudes analizadas &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0025">tabla 5</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0025"></elsevierMultimedia><p id="par0250" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados obtenidos indican que cortisol y 25OH-vit D permanecen estables a 22-25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C sin centrifugar hasta 6 horas&#46; ACTH permanece estable sin centrifugar hasta 6 horas manteniendo la muestra a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#46;</p></span></span><span id="sec0070" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Discusi&#243;n</span><p id="par0255" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este estudio se valor&#243; el efecto del tiempo transcurrido desde la toma de muestra en unas condiciones de temperatura preestablecidas hasta la obtenci&#243;n del resultado&#46; As&#237; mismo&#44; se valor&#243; el efecto sobre el resultado obtenido del tiempo transcurrido desde la obtenci&#243;n de la muestra hasta su centrifugaci&#243;n&#46; En el caso de cortisol y 25OH-vit D no se super&#243; el l&#237;mite de estabilidad en ninguno de los tiempos analizados&#46; En la valoraci&#243;n del retraso en el tiempo centrifugaci&#243;n no se observaron diferencias significativas entre las muestras analizadas en los tiempos T2 y T3 con y sin centrifugaci&#243;n previa&#46; Por tanto&#44; para las pruebas cortisol y 25OH-vit D las muestras son estables cuando se centrifugan tras su obtenci&#243;n&#44; se conservan a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C y se procesan hasta al menos una semana despu&#233;s&#46; As&#237; mismo&#44; la estabilidad de estas hormonas no se ve afectada durante al menos 6 horas cuando la muestra permanece a temperatura ambiente &#40;22-25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#41; sin centrifugar&#46;</p><p id="par0260" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Estos resultados coinciden con los publicados en estudios previos&#46; En el estudio de Wielders y Wijnberg<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#44; la 25OH-vit D se mantiene estable durante siete d&#237;as cuando el suero se almacena a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#46; En este estudio valoran tambi&#233;n el efecto del almacenamiento de la muestra sin centrifugar durante 72 horas a temperatura ambiente encontrando solo una disminuci&#243;n media de un 2&#44;3&#37; en los resultados obtenidos&#44; lo cual les lleva a considerar la vitamina D s&#243;lida &#171;como una roca&#187; a temperatura ambiente y bajo las condiciones preanal&#237;ticas habituales en los laboratorios cl&#237;nicos&#46; En el estudio de Schneider et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0040"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> se conservan las muestras congeladas durante per&#237;odos de tiempo m&#225;s prolongados pero tambi&#233;n encuentran que el retraso de 4 horas en la centrifugaci&#243;n de la muestra no afecta a los resultados obtenidos para cortisol&#46;</p><p id="par0265" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La disminuci&#243;n en los resultados obtenidos para ACTH para tiempos de almacenamiento superiores a 8 horas cuando la muestra se mantiene a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C tambi&#233;n coinciden con la mayor&#237;a de los estudios publicados y justifica la necesidad de congelar y enviar congeladas todas las muestras que no se procesen en el d&#237;a de su obtenci&#243;n&#46; En el estudio de Evans et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> encontraron disminuciones significativas cuando las muestras para ACTH se conservaron a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C durante 24 horas&#46; En el estudio de Ellis et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> se encontr&#243; una ca&#237;da significativa de los valores de ACTH cuando las muestras de plasma-EDTA se almacenaron a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C durante 18 horas&#46; Tambi&#233;n encontraron cambios significativos en los valores de ACTH cuando las muestras de plasma se obtuvieron de muestras de sangre mantenidas a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C y 24<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C sin centrifugar durante 24 horas&#46; En nuestro estudio no se encontraron diferencias cuando la muestra se manten&#237;a a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C sin centrifugar pero solo por un per&#237;odo m&#225;ximo de 6 horas&#46;</p><p id="par0270" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las posibles limitaciones de este estudio se deben al n&#250;mero limitado de muestras analizadas &#40;la SEQC aconseja un m&#237;nimo de 30 muestras&#41; y que las muestras proceden de voluntarios sanos&#46; Ser&#237;a interesante&#44; aunque en la pr&#225;ctica resulta muy costoso&#44; realizar los estudios de estabilidad con un n&#250;mero mayor de muestras e incluyendo muestras patol&#243;gicas que no necesariamente se comportan como las muestras procedentes de sujetos normales&#46; Adem&#225;s&#44; hay que tener en cuenta que estos resultados solo son v&#225;lidos para los ensayos a los que nos hemos referido debido principalmente a que la p&#233;rdida de estabilidad a veces est&#225; relacionada con cambios en la proporci&#243;n de distintos fragmentos hormonales que no son igualmente detectados por todos los m&#233;todos de ensayo&#46;</p></span><span id="sec0075" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Conflicto de intereses</span><p id="par0275" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t">22&#44;54<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>8&#44;35&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&#40;P1&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">17&#44;14<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;34&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">18&#44;63<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;6&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">T2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;02<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;72&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">23&#44;26<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>8&#44;08&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">16&#44;50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;27&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">T3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;17<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;60&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">21&#44;54<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;01&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">17&#44;19<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;04&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">T4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">11&#44;94<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;66&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">20&#44;84<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>6&#44;85&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">16&#44;07<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;45&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t">T5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;26<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;92&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">21&#44;66<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;31&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">13&#44;15&#177; 8&#44;81&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t">T6&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;94<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>5&#44;62&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">23&#44;22<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>8&#44;10&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">9&#44;95&#177; 5&#44;86&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t">T7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">11&#44;94<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;54&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">22&#44;30<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>8&#44;12&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#44;99&#177; 5&#44;12&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">T7 &#40;S1c&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;74<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;94&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">22&#44;14<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>6&#44;84&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#40;P1<span class="elsevierStyleInf">C</span>&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">19&#44;61<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>12&#44;31&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">T2 &#40;M2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;04<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">23&#44;42<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#40;P2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">17&#44;14<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;06&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;23<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;45&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">21&#44;77<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;52&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#40;P3&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">17&#44;31<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>13&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">CVa &#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">EST &#40;CVa&#42;&#44;65&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">Cortisol&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5&#44;80&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">8&#44;10&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">DP&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">EST&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">Cortisol</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T2&#40;12&#44;02&#41;-T1&#40;12&#44;24&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T7&#40;11&#44;94&#41;-T1&#40;12&#44;24&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T7c&#40;12&#44;74&#41;-T1&#40;12&#44;24&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">25OH-vit D</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T2&#40;23&#44;28&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T3&#40;21&#44;54&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T4&#40;20&#44;84&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">-5&#44;84&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">13&#44;36&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T5&#40;21&#44;66&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">-1&#44;61&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">13&#44;36&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T6&#40;23&#44;22&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">5&#44;11&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">13&#44;36&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T7&#40;22&#44;31&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;92&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">13&#44;36&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T7c&#40;22&#44;14&#41;-T1&#40;22&#44;54&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">1&#44;70&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">13&#44;36&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " colspan="4" align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " colspan="4" align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">ACTH</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T2&#40;16&#44;50&#41;-T1&#40;17&#44;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
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                  \t\t\t\t">-4&#44;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T3&#40;17&#44;19&#41;-T1&#40;17&#44;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">-0&#44;64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T4&#40;16&#44;07&#41;-T1&#40;17&#44;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">-8&#44;15&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T5&#40;13&#44;15&#41;-T1&#40;17&#44;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>T6&#40;9&#44;95&#41;-T1&#40;17&#44;14&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">-37&#44;31&#42;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">-60&#44;65&#42;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">11&#44;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">EST &#40;CVa&#42;1&#44;65&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">Cortisol</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">ACTH</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>P3-P1&#40;T1&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">-0&#44;23&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">T2</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">T3</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">M2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">M1&#40;T2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">M3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">M1&#40;T3&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">Cortisol&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;04<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;02<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;72&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">12&#44;23<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;45&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&#44;17<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;60&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">23&#44;42<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">23&#44;26<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>8&#44;08&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">21&#44;77<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;52&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">21&#44;54<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>7&#44;01&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
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                  \t\t\t\t">n&#46;s&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">P2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">P1&#40;T2&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">P3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">P1&#40;T3&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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Información del artículo
ISSN: 18884008
Idioma original: Español
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