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Investigación
Uso de células troncales derivadas de lipoaspirado en un modelo experimental animal de rotura de manguito rotador
Use of adipose-derived stem cells in an experimental rotator cuff fracture animal model
R. Barcoa,
Autor para correspondencia
raulbarco@hotmail.com

Autor para correspondencia.
, C. Encinasa, M. Valenciaa, M.T. Carrascalb, M. García-Arranzc, S. Antuñaa
a Servicio de Cirugía Ortopédica y Traumatología, IDIPAZ, Madrid, España
b Departamento de Medicina. Escuela Técnica Superior Ingeniaría Industrial, UNED, Madrid, España
c Unidad de Terapia Celular, Instituto de Investigación Sanitaria-Fundación Jiménez Díaz, Madrid, España
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entre otros&#44; un incremento en la apoptosis celular y modificaciones en los niveles de metaloproteasas de la matriz y de los distintos factores de crecimiento&#46; La reparaci&#243;n del manguito rotador no consigue recrear la estructura nativa de la entesis ni su resistencia biomec&#225;nica original<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0020"><span class="elsevierStyleSup">4&#44;5</span></a>&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los 2 factores que influyen en la curaci&#243;n de la entesis incluyen la resistencia mec&#225;nica de la reparaci&#243;n y el ambiente biol&#243;gico que influye en la cicatrizaci&#243;n&#46; Se ha realizado mucho esfuerzo en aumentar la resistencia mec&#225;nica de las reparaciones&#44; sin embargo&#44; existe menos informaci&#243;n sobre la modificaci&#243;n del ambiente biol&#243;gico local mediante el uso de terapias que mejore la cicatrizaci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; El uso de c&#233;lulas troncales de origen mesenquimal ha sido una de las estrategias que se ha explorado para aumentar biol&#243;gicamente estas reparaciones<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46; Las c&#233;lulas troncales son c&#233;lulas de tipo fibrobl&#225;stico que son capaces de diferenciarse hacia m&#250;ltiples tipos celulares incluyendo osteoblastos y condrocitos&#46; Las 2 fuentes principales son la m&#233;dula &#243;sea y el tejido adiposo&#44; que es m&#225;s accesible y de mayor poder proliferativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0040"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nuestra hip&#243;tesis es que la aplicaci&#243;n local de c&#233;lulas troncales derivados de lipoaspirado &#40;CTDL&#41; en un modelo animal de manguito rotador mejorar&#237;a la resistencia mec&#225;nica de la reparaci&#243;n y la estructura histol&#243;gica de la entesis&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0070">Material y m&#233;todos</span><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para el estudio de las uniones tend&#243;n-hueso del modelo de manguito rotador se han empleado un total de 24 ratas sing&#233;nicas BDIX con una edad comprendida entre 6-8 semanas para el estudio biomec&#225;nico y 18 animales para el estudio histol&#243;gico&#46; El estudio fue aprobado por el Comit&#233; &#201;tico de Experimentaci&#243;n animal y se siguieron todas las normas de la legislaci&#243;n internacional para la experimentaci&#243;n animal &#40;86&#47;609&#47;CEE&#41;&#46;</p><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0075">Obtenci&#243;n de las c&#233;lulas troncales derivadas de lipoaspirado &#40;Ap&#233;ndice A&#41;</span><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El m&#233;todo para obtener c&#233;lulas troncales derivadas de lipoaspirado ha sido publicado previamente<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; Brevemente&#44; las c&#233;lulas fueron extra&#237;das del epipl&#243;n y grasa subcut&#225;nea 2 animales y se les practic&#243; un m&#233;todo de disgregaci&#243;n mec&#225;nica y digesti&#243;n celular enzim&#225;tica&#46; Seguidamente se seleccion&#243; la fase celular&#44; aisl&#225;ndose las c&#233;lulas troncales&#46; Se comprob&#243; la estirpe celular mediante la diferenciaci&#243;n de las c&#233;lulas a adipocitos&#44; condrocitos y osteocitos y mediante estudios de citometr&#237;a de flujo de los marcadores de membrana &#40;CD 90&#44; CD 73 y CD 105 positivas y CD 34&#44; CD 44 negativas&#41;&#46; Con posterioridad se expandi&#243; las c&#233;lulas en un medio adecuado y se realiz&#243; el recuento celular previamente a la aplicaci&#243;n&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0080">T&#233;cnica quir&#250;rgica</span><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La t&#233;cnica quir&#250;rgica ha sido descrita con anterioridad<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46; Brevemente&#44; a los animales se les practic&#243; una incisi&#243;n longitudinal sobre la parte proximal de la pata delantera con una secci&#243;n horizontal del deltoides&#44; exponiendo el manguito rotador de la rata&#46; Se les practic&#243; la secci&#243;n del tend&#243;n del supraespinoso del troqu&#237;ter y se aleatoriz&#243; a uno de 3 grupos por un sistema generado electr&#243;nicamente &#40;Excel&#44; Microsoft&#44; Redmond&#44; VA&#44; EE&#46; UU&#46;&#41;&#46; El primer grupo consisti&#243; en la reparaci&#243;n del tend&#243;n supraespinoso al troqu&#237;ter a trav&#233;s de un t&#250;nel &#243;seo anteroposterior utilizando una sutura irreabsorbible monofilamento de 5&#47;0&#46; El segundo grupo consisti&#243; en una reparaci&#243;n id&#233;ntica con un veh&#237;culo de fibrina aplicado sobre la zona de reparaci&#243;n &#40;Tissucol&#44; Baxter&#44; Deerfield&#44; IL&#44; EE&#46; UU&#46;&#41;&#46; El tercer grupo consisti&#243; en la reparaci&#243;n tendinosa y aplicaci&#243;n de 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>x<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>10<span class="elsevierStyleSup">6</span> c&#233;lulas troncales embebidas en el veh&#237;culo de fibrina&#46; Despu&#233;s de la asignaci&#243;n al tipo del grupo experimental se realiz&#243; el cierre del deltoides con sutura reabsorbible y el cierre de la piel con sutura de seda 3&#47;0&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0085">Estudio histol&#243;gico y biomec&#225;nico &#40;Ap&#233;ndice B&#41;</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los animales fueron sacrificados a las 4 y las 8 semanas despu&#233;s de la reparaci&#243;n&#46; Para preparar los espec&#237;menes para el estudio biomec&#225;nico se individualiz&#243; la esc&#225;pula&#44; la unidad miotendinosa supraespinosa y el h&#250;mero y se introdujo en una jeringa de 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>ml en un medio de cemento &#243;seo de polimetilmetacrilato &#40;PMMA&#41; &#40;CMW-1&#44; De-Puy&#44; Johnson &#38; Johnson&#44;Warsaw&#44; IN&#44; EE&#46; UU&#46;&#41; para poder incluirla en una c&#233;lula de carga electrohidr&#225;ulica lineal &#40;ControlTest&#44; Servosis&#44; Madrid&#44; Espa&#241;a&#41;&#46; Los espec&#237;menes se precargaban a 0&#44;1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>N y se probaban hasta el fracaso a una velocidad de 14 micras&#47;s&#46; Se recogi&#243; la carga m&#225;xima hasta el fracaso y el sitio de fracaso&#46; La rigidez de la muestra se calcul&#243; determinando la parte lineal de la pendiente ascendente de la curva de carga-desplazamiento<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para el estudio histol&#243;gico se individualiz&#243; la esc&#225;pula y miembro superior hasta el codo y se fij&#243; en una soluci&#243;n de formalina al 10&#37;&#44; se descalcific&#243; con una soluci&#243;n decalcificante &#40;EDTA&#41; y se embebi&#243; en parafina para la realizaci&#243;n de los cortes histol&#243;gicos&#46; Se realizaron cortes de 5 micras en el plano coronal y se ti&#241;eron con hematoxilina y eosina&#46; El estudio histol&#243;gico se realiz&#243; por un pat&#243;logo que desconoc&#237;a el grupo experimental al que pertenec&#237;a la muestra&#46; Se realiz&#243; el estudio en 2 momentos diferentes para dar mayor homogeneidad al estudio&#46; Cuando hubo discrepancias se realiz&#243; una tercera lectura del estudio&#46; Se prest&#243; especial inter&#233;s el troqu&#237;ter&#44; la inserci&#243;n de la reparaci&#243;n tend&#243;n-hueso y el tend&#243;n supraespinoso <span class="elsevierStyleItalic">per se</span> utilizando un microscopio &#243;ptico&#46; Se procedi&#243; al estudio de las cualidades histol&#243;gicas microsc&#243;picas como infiltrado infla matorio&#44; vascularizaci&#243;n y organizaci&#243;n celular y fibrilar de la entesis&#46;</p></span></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0090">Resultados</span><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Dos animales fallecieron a consecuencia de complicaciones anest&#233;sicas y fueron repuestos para completar el n&#250;mero experimental predeterminado&#46; Todos los animales hab&#237;an conseguido una marcha normal a los 7 d&#237;as de la intervenci&#243;n&#46; No hubo otras complicaciones postoperatorias&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el estudio biomec&#225;nico no hubo diferencias significativas entre ninguno de los grupos para ninguna de las variables estudiadas&#46; La carga hasta el fracaso media fue de 12&#44;83<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>N para el grupo 1&#44; 11&#44;57<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>N para el grupo 2 y 11&#44;72 para el grupo 3 a las 4 semanas &#40;p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;67&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>&#41;&#46; En el grupo analizado a las 8 semanas la carga hasta el fracaso fue de 15&#44;11<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>N para el grupo 1&#44; 15&#44;94<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>N para el grupo 2 y 14&#44;35<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>N para el grupo 3 &#40;p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#61;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;88&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0010">tabla 2</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El examen de necropsia no revel&#243; diferencias significativas entre los grupos de estudio&#44; si bien se apreciaba una mayor robustez del tejido en los grupos sacrificados a las 8 semanas comparados con los de 4 semanas de evoluci&#243;n&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el estudio histol&#243;gico se observ&#243; una entesis inmadura en los grupos de 4 semanas de evoluci&#243;n con una estructura m&#225;s desorganizada y altamente celular con abundancia de c&#233;lulas inflamatorias&#44; en comparaci&#243;n con los grupos de 8 semanas de evoluci&#243;n que presentaban una estructura algo m&#225;s organizada con una mejor alineaci&#243;n de las fibras de col&#225;geno sin diferencias entre grupos &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#46; Las muestras analizadas con c&#233;lulas mesenquimales &#250;nicamente presentaban una menor respuesta inflamatoria a las 4 semanas aunque no realizamos ning&#250;n estudio adicional para cuantificar esa diferencia&#46; Esta diferencia desaparec&#237;a en los grupos a las 8 semanas &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>&#41;&#46; Se observ&#243; la presencia de c&#233;lulas marcadas con prote&#237;na verde fluorescente a las 4 semanas&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0095">Discusi&#243;n</span><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La alta tasa de fracaso tras la reparaci&#243;n quir&#250;rgica ha planteado la existencia de un problema biol&#243;gico intr&#237;nseco del tend&#243;n&#46; La entesis no se regenera con la reparaci&#243;n quir&#250;rgica sino que es sustituida por un tejido cicatricial con menor resistencia mec&#225;nica que el tejido nativo lo cual puede predisponer al mismo a sufrir nuevas roturas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0025"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#46; El objetivo de las terapias biol&#243;gicas es mejorar el entorno biol&#243;gico alrededor de la reparaci&#243;n para restaurar la estructura microsc&#243;pica de la inserci&#243;n nativa&#46; Se han utilizado factores de crecimiento y matrices extracelulares con resultados modestos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11&#8211;15</span></a>&#46; La terapia celular podr&#237;a desempe&#241;ar un papel importante en el tratamiento de lesiones de los tendones del manguito rotador<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;16&#44;17</span></a>&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El presente trabajo planteaba la hip&#243;tesis de que la aplicaci&#243;n local de c&#233;lulas troncales derivadas de lipoaspirado mejorar&#237;a la resistencia biomec&#225;nica de la reparaci&#243;n como consecuencia de una organizaci&#243;n celular mejorada&#46; Sin embargo&#44; los resultados del estudio no apoyan esta hip&#243;tesis&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las c&#233;lulas madre mesenquimales provenientes de m&#233;dula &#243;sea han mejorado la cicatrizaci&#243;n de tend&#243;n al hueso en modelos experimentales previos de ligamento cruzado de rodilla y de <span class="elsevierStyleItalic">flexor hallucislongus</span> en conejos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">16&#44;17</span></a>&#46; El uso aislado de c&#233;lulas madre derivadas de m&#233;dula &#243;sea aisladas no mejoraba la histolog&#237;a ni las propiedades biomec&#225;nicas de una reparaci&#243;n del manguito rotador en ratas&#46; Las posibles causas aducidas inclu&#237;an la existencia de un &#225;rea de contacto peque&#241;a entre el tend&#243;n y el hueso&#44; la no existencia de una inmovilizaci&#243;n postoperatoria y la posible insuficiente se&#241;alizaci&#243;n molecular necesaria para lograr la cicatrizaci&#243;n de un &#225;rea tan compleja&#44; lo cual se&#241;ala la complejidad biol&#243;gica de la reparaci&#243;n de estas lesiones&#46; La utilizaci&#243;n de varias terapias biol&#243;gicas combinadas parecen mejorar los resultados biomec&#225;nicos e histol&#243;gicos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;18&#44;19</span></a>&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las CTDL son accesibles f&#225;cilmente mediante una lipoaspiraci&#243;n&#44; gen&#233;ticamente estables&#44; con un potencial proliferativo casi ilimitado e inmunoprivilegiadas al carecer del haplotipo HLA-DR&#46; Guilak et al&#46; han demostrado que estas c&#233;lulas son capaces de reducir la inflamaci&#243;n&#44; de diferenciarse y de inducir la revascularizaci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">20</span></a>&#46; En estudios en humanos han demostrado ser seguras y eficaces en el tratamiento de f&#237;stulas perianales y traqueoesof&#225;gicas<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">21&#44;22</span></a>&#46; No hemos observado complicaciones derivadas del uso de las c&#233;lulas troncales y confirma la experiencia de otros autores<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">23&#44;24</span></a>&#46; Asumiendo una igualdad de resultados con las c&#233;lulas madre derivadas de m&#233;dula &#243;sea&#44; estas ventajas las hacen atractivas para su uso en la reparaci&#243;n del manguito rotador&#46;</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las CTDL en nuestro modelo experimental no han mejorado la resistencia mec&#225;nica de la reparaci&#243;n ni la apariencia histol&#243;gica de las mismas&#46; A pesar de que algunos autores suger&#237;an la posible influencia de las c&#233;lulas mesenquimales a las 8 semanas de evoluci&#243;n&#44; nosotros no hemos sido capaces de demostrar ninguna diferencia<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46; Tampoco encontramos diferencias significativas a las 4 semanas&#46; Quiz&#225; un an&#225;lisis a las 2 semanas demostrara una diferencia que nosotros no hemos podido detectar&#46; El n&#250;mero de c&#233;lulas utilizado ha sido igual a otros modelos utilizados y validados previamente pero existe la posibilidad de que el n&#250;mero de c&#233;lulas sea insuficiente o bien que el sitio de reparaci&#243;n carezca de las se&#241;ales moleculares necesarias para inducir la diferenciaci&#243;n de las c&#233;lulas que aplicamos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;13&#44;16</span></a>&#46; Otros autores han se&#241;alado la dificultad en conocer la dosis correcta y el veh&#237;culo adecuado para conseguir una verdadera regeneraci&#243;n tendinosa y no una cicatrizaci&#243;n de la entesis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">25</span></a>&#46; Es posible que la dispersi&#243;n de las c&#233;lulas en un veh&#237;culo de fibrina no sea capaz de contener a las c&#233;lulas localmente o que la dosis utilizada sea insuficiente o bien&#44; que la complejidad de las se&#241;ales moleculares necesarias para la reparaci&#243;n sin cicatriz no pueda ser reproducida con la adici&#243;n de c&#233;lulas aisladamente&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Son necesarios m&#225;s estudios dedicados a combinar distintos inductores de la diferenciaci&#243;n celular para aumentar nuestro conocimiento actual sobre las particularidades de la cicatrizaci&#243;n del manguito rotador&#46;</p></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0100">Nivel de evidencia</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nivel de evidencia <span class="elsevierStyleSmallCaps">I</span>&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0105">Responsabilidades &#233;ticas</span><span id="sec0050" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0110">Protecci&#243;n de personas y animales</span><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que los procedimientos seguidos se conformaron a las normas &#233;ticas del comit&#233; de experimentaci&#243;n humana responsable y de acuerdo con la Asociaci&#243;n M&#233;dica Mundial y la Declaraci&#243;n de Helsinki&#46;</p></span><span id="sec0055" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0115">Confidencialidad de los datos</span><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que en este art&#237;culo no aparecen datos de pacientes&#46;</p></span><span id="sec0085" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0120">Derecho a la privacidad y consentimiento informado</span><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que en este art&#237;culo no aparecen datos de pacientes&#46;</p></span></span><span id="sec0060" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0125">Financiaci&#243;n</span><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este proyecto ha sido financiado con una beca de la Sociedad Espa&#241;ola de Cirug&#237;a Ortop&#233;dica y Traumatolog&#237;a &#40;Beca N&#46;&#176; BE67322009&#41;&#46;</p></span><span id="sec0065" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0130">Conflicto de intereses</span><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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            "apendice" => "<p id="par0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En los tiempos predeterminados se realiz&#243; la eutanasia con una inyecci&#243;n intracardiaca de potasio clorh&#237;drico bajo anestesia general y se obten&#237;an los espec&#237;menes para el estudio histol&#243;gico&#46; El esp&#233;cimen consist&#237;a en la articulaci&#243;n glenohumeral completa incluyendo el m&#250;sculo deltoides&#46; Se fijaba mediante una soluci&#243;n de formaldeh&#237;do al 4&#37; y se descalcificaba en una soluci&#243;n EDTA durante 14-21 d&#237;as y se embeb&#237;a en parafina&#46; Las muestras se analizaban en un microscopio &#243;ptico convencional&#46; Las muestras marcadas con prote&#237;na verde fluorescente se analizaron con un microscopio invertido Leyca DMI 6000&#46;</p>"
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                  \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Grupo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Carga hasta el fracaso &#40;n&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Deformidad m&#225;xima &#40;mm&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Rigidez &#40;n&#47;mm&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Energ&#237;a absorbida &#40;J&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">12&#44;83<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;79&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;99<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;11&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;27<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;11&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;069<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;035&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Fibrina&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">11&#44;57<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;08&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;21<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;72&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;68&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;051<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;019&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">CMDL&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">11&#44;72<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>3&#44;98&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;13<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;78&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;93<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;07&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;080<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;080&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">p&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;67&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;41&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;11&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;47&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Carga hasta el fracaso &#40;n&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Deformidad m&#225;xima &#40;mm&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Rigidez &#40;n&#47;mm&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Energ&#237;a absorbida &#40;J&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">15&#44;11<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>5&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">8&#44;32<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4&#44;83&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;90&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo
ISSN: 18884415
Idioma original: Español
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