Regeneración ósea en animales de experimentación, mediante cemento de fosfato cálcico en combinación con factores de crecimiento plaquetarios y hormona de crecimiento humana | Revista Española de Cirugía Ortopédica y Traumatología

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Se define como «defecto crítico» la dimensión de una cavidad cuyo cierre o regeneración no se produce de forma espontánea.La formulación de las cerámicas de fosfatos de calcio como cementos óseos, ha permitido contar con nuevos materiales para la regeneración ósea, debido a que el producto de su proceso de reacción es, en la mayoría de los casos, una hidroxiapatita muy similar a la biológica.Además de los sustitutos óseos, otra línea de investigación encaminada a facilitar la regeneración ósea es el desarrollo y utilización de diversos factores de crecimiento y hormonas.Los factores de crecimiento más sencillos de aplicar por las características de su obtención son los del plasma rico en plaquetas (PRP)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0005">1</a>.Las plaquetas transportan los factores de crecimiento plaquetarios<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0010">2</a>: «platelet derived growth factor» y el «vascular endothelial growth factor», además de «transforming growth factor-beta» y «bone sialoprotein».Por otro lado, y con respecto al papel de las hormonas en la regeneración ósea, se ha puesto de manifiesto en numerosos estudios la relación entre la hormona de crecimiento (GH) y el metabolismo óseo. En efecto, una acción importante de la hormona de crecimiento a nivel óseo se centra sobre las células formadoras de hueso<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0015">3</a>. El aumento en la proliferación de los osteoblastos llevado a cabo por la GH, se traduciría en la aparición de un mayor número de estas células a nivel del defecto crítico, y la diferenciación celular temprana aceleraría notablemente la síntesis y la mineralización de la matriz osteoide. Todo ello favorecería el proceso de regeneración ósea en el defecto crítico.A pesar del amplio arsenal de injertos y sustitutos óseos, hoy en día, sigue sin haberse resuelto totalmente el problema de la consecución de una regeneración ósea absolutamente satisfactoria tras la utilización de los mismos.Este trabajo es un paso más hacia la búsqueda de nuevos métodos que consigan la regeneración ósea total en situaciones de cavidades óseas con defecto crítico.Materiales y metodologíaMaterialesPara la realización de este trabajo y como animales de experimentación se utilizaron 15 conejos de la raza Nueva Zelanda, sanos, machos y adultos de entre 8 y 12 meses, procedentes del Centro de Experimentación Animal de la Facultad de Medicina de la Universidad de Alcalá que cumple la normativa nacional e internacional sobre experimentación animal.Los animales se mantuvieron vivos y en estado de buena salud hasta transcurridos los 28 días después de la intervención, con acceso directo a agua y comida ad libitum.Instrumental quirúrgico: se utilizó el instrumental habitual para intervenciones quirúrgicas sobre tejido óseo. Se utilizó un contraángulo acoplado a motor quirúrgico con sistema de irrigación y una fresa trefina de 6mm de diámetro adaptada al contraángulo.Se han utilizado los siguientes productos:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0015"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0035">A.Cemento de fosfato tricálcico (Calcibon®): es un cemento basado en fosfato cálcico. Se presenta separado en dos componentes: polvo y líquido. Al realizar la mezcla, en el momento de la intervención quirúrgica, se forma carbonato cálcico fosfato apatito, formado por cristales de pequeño tamaño parecidos a la fase inorgánica del tejido óseo.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0040">B.Hormona de crecimiento. Norditropin Simplex® 15mg/1,5ml. Contiene una hormona de crecimiento humana biosintética, denominada somatropina, idéntica a la hormona de crecimiento humana.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0045">C.PRP. Procedente de la sangre del propio animal y obtenido según el método específico descrito más tarde.</li></ul>Material histológico y morfométrico:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0020"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0050">A.Equipo de corte histológico: EXAKT® Cutting Grinding System (Exakt Apparatebau, Nordersted, Alemania) para tejidos duros, formado por sierra de diamante y pulidora con discos de granos de distintos diámetros.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0055">B.Soluciones de tinción histológica.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0060">C.Software de imagen bidimensional para estudio cuantitativo de las muestras (MIP-45).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0065">D.Microscopio óptico y cámara óptica convencional para estudio histológico.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0070">E.Material morfométrico: microscopio óptico, sistema informático y aplicación informática para MIP-45.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0075">F.Software para estudio estadístico Statgraphics plus v. 5.1.</li></ul>MetodologíaLos animales, se repartieron en tres grupos:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0025"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0080">•Grupo control, formado por 5 animales en los que se utilizó solamente fosfato tricálcico como material de relleno del defecto creado en la metáfisis tibial.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0085">•Grupo PRP, formado por 5 animales utilizando como material de relleno fosfato tricálcico bañado con PRP.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0090">•Grupo GH, formado por 5 animales utilizando como material de relleno fosfato tricálcico bañado con hormona de crecimiento.</li></ul>A. Técnica quirúrgica:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0030"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0095">-La anestesia de todos los animales de experimentación fue realizada mediante clorhidrato de ketamina a dosis de 5mg/kg de peso.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0100">-Preparación de PRP: El grupo PRP, formado por 5 animales, requería la obtención de plasma rico en plaquetas, previo a la intervención quirúrgica. Para conseguir PRP de cada animal se siguió la técnica descrita por Anitua et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0025">4</a>.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0105">-Preparación del fosfato tricálcico (Calcibon®):</li></ul>Para preparar el fosfato tricálcico se mezclan los componentes sólido y líquido del mismo. Se disuelven 3,3 g de polvo en 1 cc. de líquido de Calcibon®, se mezcla durante un minuto y se esperan 4 minutos antes de colocarlo en defecto óseo.En el caso del grupo PRP, el material de relleno se realizó mezclando cemento de fosfato tricálcico con 1 cc. de PRP (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>a) y realizando la mezcla durante un minuto.<elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia>En el caso del grupo GH, se utilizó como material de relleno fosfato tricálcico bañado con hormona de crecimiento (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>b), se añadieron 4 UI de hormona de crecimiento.- Preparación del defecto óseo: cada conejo fue intervenido en ambas tibias sucesivamente realizando sendos defectos óseos. Ambos defectos se trataron con el mismo tipo de relleno en las dos tibias según el grupo experimental al que perteneciese el animal (control, PRP o GH).Tras rasurar la zona operatoria sobre la tibia, se procedió a la desinfección de la superficie cutánea mediante povidona yodada. A continuación, se practicó una incisión sagital, de unos 4cm, a nivel de la cara interna en el extremo proximal de la tibia, separando cuidadosamente el periostio y exponiendo el hueso. Se realizó un defecto circular experimental mediante una fresa trefina de 6mm de diámetro montada en contraángulo (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>c). Se eligió esa zona basándonos en la bibliografía previa, ya que la región metafisaria responde más intensamente a los estímulos que la diáfisis tibial<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155">5</a>.Los defectos óseos se rellenaron posteriormente solo con fosfato tricálcico, o con este y PRP o GH, según el grupo experimental (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>d). La intervención se llevó a cabo en las dos extremidades del animal.La zona del defecto rellenado se marcó con aguja de Kirschner de 1,2×4mm., para identificarla posteriormente en el estudio histológico (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>d).Por último, se suturó cuidadosamente el periostio con sutura reabsorbible y la piel con seda.Obtención de las muestras de estudio: todos los animales fueron sacrificados a los 28 días de la cirugía mediante inyección letal de barbitúricos (pentotal sódico).B. Estudio macroscópico: el estudio macroscópico valoró el aspecto de la región proximal de la tibia de los animales una vez disecadas las partes blandas. Se valoró el aspecto de la porción proximal de la tibia en los 3 grupos de experimentales, comprobando el relleno del defecto crítico en todos los animales.C. Estudio de microscopía ópticaUna vez obtenidas las tibias se fijaron en formol al 5% previamente tamponado a pH 7 para evitar la descalcificación. Posteriormente, las muestras se procesaron en la Unidad de Anatomía y Embriología Humana de la Facultad de Medicina de la Universidad de Alcalá, donde se continuó el control de su fijación en formol.A continuación se estudió la regeneración ósea desde el punto de vista histológico e histomorfométrico en muestras de tejido óseo sin descalcificar. Para ello se utilizó el sistema de corte y pulido Exakt®.El siguiente paso lo constituyó la inclusión de la muestra en un polímero. Se obtuvo así un bloque de metacrilato con las tibias incluidas. A continuación, se cortaron las muestras con la banda de corte diamante del sistema Exakt®, obteniéndose 5 cortes por muestra para su posterior estudio histológico. Los cortes se realizaron perpendiculares al eje longitudinal de la diáfisis tibial, siguiendo un plano transversal, para poder valorar toda la cavidad, desde la profundidad hasta la zona superficial de la misma.Se utilizaron las tinciones habituales para el estudio del tejido óseo en el laboratorio:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0035"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0110">-Tricrómico de Masson.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0115">-Hematoxilina-eosina.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0120">-Azul de toluidina.</li></ul>Se valoraron las siguientes variables histológicas:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0040"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0125">•Tejido óseo maduro: se caracteriza porque su matriz ósea (sustancia intersticial mineralizada) se organiza formando lamelas o laminillas óseas de 3 a 7μm de espesor. Las células del hueso maduro son los osteocitos y ocupan unos espacios denominados lagunas, dispuestos, al igual que las laminillas, de manera concéntrica.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0130">•Las láminas son paralelas y concéntricas.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0135">•Tejido óseo neoformado: contiene una proporción de osteocitos relativamente más alta, con lagunas de tamaño más grandes que las que aparecen en el hueso maduro y las fibras de colágeno siguiendo varias direcciones.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0140">•Cantidad y el aspecto del biomaterial (cemento de fosfato cálcico): también se estudió histológicamente el aspecto que presentaba el biomaterial colocado dentro de cavidad realizada de forma experimental en la tibia.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0145">•Respuesta del tejido óseo al biomaterial: se buscaron signos de reacción inflamatoria como puede ser la aparición de linfocitos o células de cuerpo extraño. Por último, investigó la posible existencia de signos de reacción alérgica, como es la presencia de eosinófilos.</li></ul>D. Estudio morfométricoDespués del estudio histológico cualitativo se realizó el análisis cuantitativo mediante morfometría bidimensional.Este nos permitió cuantificar de forma objetiva la fracción de tejido óseo neoformado que se regeneró en las cavidades de los distintos grupos. Para ello, recurrimos a la utilización de un software, analizador de imágenes, llamado MIP-45.D.1. Técnica de estudio:Como estimador de medida, se utilizó una plantilla de puntos, diseñada de tal modo que cada punto tiene un área asociada de 1mm2. El recuento de los puntos de impacto nos permitió obtener los valores de nuestras variables.D.2. Variables del estudio histomorfométrico. Para la obtención de las variables de estudio, precisamos calcular previamente, las siguientes áreas:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0045"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0150">1.Área total de la muestra: incluye el área ocupada por todo el hueso, y el área ocupada por la cavidad medular.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0155">2.Área del hueso cortical.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0160">3.Área de hueso neoformado que subdividimos en:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0050"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0165">a.Área de hueso neoformado dentro de la cavidad medular.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0170">b.Área de hueso neoformado fuera de la cavidad medular.</li></ul></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0175">4.Área ocupada por el biomaterial remanente.</li></ul>Una vez calculadas las áreas anteriores, las variables de estudio fueron determinadas en las cinco secciones o cortes obtenidos de la tibia de cada animal. Estas variables fueron las siguientes:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0055"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0180">1.Densidad de área del biomaterial remanente (% Aa biomaterial):área biomaterialárea total×100</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0185">2.Densidad de área de neoformación ósea en la cavidad medular (% Aa medular):área de neoformación ósea en la cavidad medularárea total×100</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0190">3.Densidad de área de neoformación ósea fuera de la cavidad medular (% Aa perióstica):área de neoformación ósea fuera de la cavidad medularárea total×100</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0195">4.Densidad de área de neoformación ósea total (% Aa total):área de neoformación ósea dentro+área de neoformación ósea fueraárea total×100</li></ul>D.4. Estudio de la fiabilidad del método. Para comprobar el grado de fiabilidad con el que se va a establecer la morfometría, se realizó un estudio piloto previo para muestras dependientes, con el objetivo de valorar la exactitud del estimador o sonda (unidad de medición) utilizado, a través del cálculo del coeficiente de error para esa sonda. Dicho estudio, permitió diseñar una sonda de medición para las muestras, que consistió en una plantilla de puntos con 1mm2 de área asociada al punto.El estudio de fiabilidad, su cálculo y metodología fueron los siguientes:Cálculo de la fiabilidad del muestreo para muestras dependientes: cortes paralelos entre sí, perpendiculares al eje longitudinal de la muestra (cortes Cavalieri): el coeficiente de error, es un concepto estadístico, que nos permite conocer el grado de precisión del estimador utilizado. Su valor dependerá del número de unidades de muestreo y del tamaño del estimador (es decir, de la distancia entre los puntos de la plantilla medidora). Este dato nos permitirá conocer cuál es el valor mínimo que necesitamos de cortes de una misma muestra, así como la distancia mínima entre los puntos utilizados para su medición, de manera que los datos obtenidos utilizando estas dos constantes nos permita realizar un cálculo estadístico fiable.E. Estudio estadístico: se valoraron las diferencias significativas entre los grupos del estudio mediante el análisis de la varianza (ANOVA) utilizando el programa Statgraphics versión 5.1.Resultados<ul class="elsevierStyleList" id="lis0060"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0200">I.Resultados macroscópicos: se realizó un reconocimiento de la zona intervenida en las tibias 28 días antes.<ul class="elsevierStyleList" id="lis0065"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0205">1.En el grupo control (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>a) las muestras no presentaban aspecto de integración del cemento de fosfato cálcico colocado en la intervención. Claramente se diferenciaban la zona del defecto crítico, el cemento aparecía como una masa amorfa que rellenaba el defecto sin ningún tipo de integración.<elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0210">2.En el grupo PRP (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>b), por un lado, se observaba buen relleno del defecto crítico y, por otro, el cemento daba la impresión de haber producido mejor integración ósea que en el grupo control.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0215">3.Al observar el defecto crítico realizado en la tibia de los conejos operados del grupo GH (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>c), macroscópicamente el relleno parecía mejor osteointegrado y era difícil diferenciar el tejido óseo del defecto rellenado. En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">figura 2</a>c se observa la zona del defecto crítico, marcada con aguja de Kirschner, que difícilmente se diferencia del resto de la cortical.</li></ul></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0220">II.Resultados histológicos: el estudio histológico nos permitió valorar y comparar histológicamente la formación de tejido óseo y la presencia de biomaterial dentro del defecto crítico entre los 3 grupos estudiados. En los cortes transversales se observó el hueso maduro, el hueso inmaduro, el biomaterial residual, la aguja de Kirshner, que nos sirvió para marcar el defecto óseo crítico, así como la presencia de tejido conjuntivo y de médula ósea.<ul class="elsevierStyleList" id="lis0070"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0225">1.En el grupo control (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">a-b</a>) se observaron una gran cantidad de partículas del fosfato tricálcico (Calcibon®) repartidos por todo el área de la muestra, teñidos pálidamente por la hematoxilina, con un tono verdoso en las preparaciones de tricrómico de Masson y con un aspecto grisáceo en las preparaciones de azul de toluidina.<elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia>Se observó escasa actividad de neoformación, con algunas trabéculas jóvenes, cortas y aisladas, cercanas a la superficie externa e interna de la cortical, así como entre las partículas del cemento cálcico. No se encontraron osteoblastos ni osteoclastos.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0230">2.En el grupo PRP (relleno de cemento de fosfato cálcico+PRP) (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">figs. 4</a>a-d) se observó mayor formación de tejido óseo inmaduro rellenando, tanto el defecto crítico, como los espacios entre las partículas del biomaterial en comparación con el grupo control. No se encontró tejido inflamatorio y solo escaso tejido conjuntivo. El fosfato tricálcico se presentaba como masa amorfa y no observamos actividad osteoclástica.<elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0235">3.En el grupo GH (relleno de cemento de fosfato cálcico+GH) (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">figs. 5</a>a-d), se observó el mayor grado de neoformación ósea en forma de tejido óseo inmaduro en comparación con los cortes histológicos del grupo control y grupo PRP. Se evidenciaron numerosas trabéculas óseas entre las partículas de biomaterial. Cabe destacar que la formación del tejido óseo era mayor en el defecto y dentro del canal medular en comparación con los cortes del grupo control y PRP. Estas observaciones sugieren mayor actividad osteoblástica debido al efecto de la GH en este grupo. No se observó actividad osteoclástica ni tejido inflamatorio.<elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia></li></ul></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0240">III.Resultados morfométricos: una vez confirmada la fiabilidad del estudio se obtuvieron los resultados de las variables propuestas (<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#tbl0005">tablas 1–3</a>).<elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0015"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0245">IV.Resultados estadísticos de los datos morfométricos: utilizando el software Statgraphics 5.1., aplicamos el test ANOVA buscando diferencias estadísticamente significativas entre los tres grupos de estudio:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0075"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0250">1.Comparación de % Aa total entre los grupos control, PRP y GH: en cuanto al hueso neoformado total en los grupos control, PRP y GH, encontramos valores porcentuales claramente mayores en el grupo GH (p<0,05), (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig. 6</a>a).<elsevierMultimedia ident="fig0030"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0255">2.Comparación de % Aa medular entre los grupos control, PRP y GH: encontramos mayor neoformación ósea dentro del conducto o cavidad medular en el grupo GH en comparación con el grupo control y el grupo PRP, siendo la diferencia estadísticamente significativa (p<0,05). Este resultado demuestra que la GH tiene efecto positivo sobre la neoformación ósea en comparación con PRP (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig. 6</a>b).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0260">3.Comparación % Aa perióstica entre los grupos control, PRP y GH: no encontramos grandes diferencias en el valor porcentual de hueso neoformado fuera del defecto relleno comparando los grupos control, PRP y GH. Esto podría ser explicado por la técnica quirúrgica realizada, en la que se ha llevado a cabo el cierre perióstico a través de la sutura en todos los animales, por lo que no habría salido ningún factor de crecimiento u hormona fuera del periostio. Esto justificaría que la neoformación ósea sea similar en los tres grupos (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig. 6</a>c).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0265">4.Comparación % Aa biomaterial entre los grupos control, PRP y GH: no se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de biomaterial entre el grupo de control, PRP y GH. En el plazo estudiado de 28 días, no parece haberse activado el proceso de reabsorción del cemento de fosfato cálcico (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig. 6</a>d).</li></ul></li></ul>DiscusiónEl tipo de modelo experimental animalA/. Especie de animal:Se eligió el conejo como modelo experimental porque alcanza la «madurez esquelética» en torno a los 8-10 meses y ostenta un verdadero remodelado cortical con un «turnover óseo» más acelerado que el de otras especies<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030">6</a>. Esto lo convierte en un modelo apropiado para el estudio de fármacos que regulan dicho remodelado. El modelo más idóneo lo constituyen algunas especies de primates, pero la investigación con estos modelos es costosa, laboriosa y no exenta de riesgos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030">6</a>.La localización elegida con mayor frecuencia es la tibia del animal por su facilidad de acceso<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035">7,8</a>.B/. Influencia del sexo: la utilización de machos en nuestro estudio se fundamenta en que no están sujetos a cambios cíclicos hormonales. Pensamos que la utilización de hembras podría aumentar la variabilidad de los resultados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045">9</a>.C/. Influencia de la edad: en conejos se han descrito una serie de diferencias morfológicas que pueden explicar una intensidad de regeneración menor en animales viejos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050">10</a>.En nuestro trabajo se han utilizado animales de entre 8 y 12 meses de edad, cuyo crecimiento esquelético ha terminado. A esta edad los conejos ya no muestran la excelente calidad osteorregenerativa que exhiben con menos de 2 meses de vida<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055">11</a>.Zona y tamaño del defecto óseoLos estudios de la regeneración ósea en conejos se han realizado en diferentes localizaciones anatómicas: la mandíbula<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060">12</a>, el fémur<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065">13</a>, y la calvaria<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070">14</a> para valorar la reparación ósea después de un daño provocado.La tibia ha sido utilizada por algunos autores<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0075">15,16</a> para provocar defectos óseos. En particular, la tibia proximal, en su cara medial, tiene una situación anatomoquirúrgica susceptible para poder provocar defectos óseos, debido a que presenta una superficie amplia y ligeramente convexa, que no posee inserciones musculares. Más que de la localización anatómica, la reparación de los defectos óseos dependerá del tamaño del mismo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085">17</a>.En la literatura, los defectos óseos tibiales más utilizados en conejos han sido los defectos de espesor cortical total con forma circular de 3, 6 y 8mm de diámetro<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070">14</a>.Hemos elegido utilizar defectos de 6mm, de acuerdo con autores como Katthagen et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090">18</a> que consideran que estos defectos no regeneran espontáneamente.Biomateriales utilizadosHistóricamente, se han utilizado autoinjertos, aloinjertos óseos además de una gran variedad de biomateriales para poder reparar defectos óseos.El sustituto óseo ideal sería el que fuera biocompatible, biorreabsorbible, osteoconductivo, de estructura similar al hueso, de fácil utilización clínica y económicamente barato.Entre los materiales de mayor interés para reconstruir defectos óseos se encuentran los biomateriales cerámicos, debido a sus reconocidas propiedades osteoconductivas, comprobada biocompatibilidad, capacidad de biodegradación, disponibilidad cuantitativamente ilimitada, aptitud para la vehiculización de fármacos y condiciones apropiadas para ser empleados como moldes para la ingeniería de tejidos. A este grupo pertenece el cemento de fosfato α-tricálcico<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0095">19,20</a>.Sin embargo, tras repasar la literatura, no hemos encontrado estudios en los que se lleve a cabo una evaluación y comparación del efecto que producen la mezcla de cemento de fosfato cálcico con factores plaquetarios u hormona de crecimiento sobre la regeneración ósea espontánea, utilizando una metodología cuantitativa y un modelo de defecto óseo en animales.Factores de crecimiento utilizadosA/. El PRP: el PRP se considera como un biomaterial regenerativo que favorece la circulación de las células madres, proliferación de fibroblastos y síntesis de colágeno tipo I<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105">21</a>.Nuestros resultados morfométricos no demostraron un efecto positivo de la PRP sobre la regeneración ósea. Coincidimos con trabajos de otros autores que tampoco han demostrado efecto positivo de la PRP sobre la regeneración ósea<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110">22</a>.Teniendo en cuenta el comprobado efecto positivo de los factores de crecimiento plaquetarios sobre los procesos de la regeneración ósea, parece ser que la causa de las diferencias entre los trabajos se debe a los distintos procedimientos de obtención de PRP utilizados por los autores. Se ha comprobado una gran variación de la concentración de factores de crecimiento según la metodología de obtención<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115">23</a>.En el futuro parece ser necesario protocolizar esta metodología para conseguir la concentración exacta de factores de crecimiento plaquetario necesaria para obtener un efecto óptimo sobre la regeneración ósea.B/. Hormona de crecimiento: la GH estimula la producción de colágeno y de proteínas no colágenas por los osteoblastos; y, además, al estimular la síntesis de los factores de crecimiento semejantes a la insulina (IGF) por el hígado y los propios osteoblastos, favorece la diferenciación de los preosteoblastos y la proliferación de osteoblastos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0120">24,25</a>.El interés de estas acciones sobre el tejido óseo a nivel de defectos críticos radica en la posibilidad de la aplicación local de la GH a nivel clínico.Los datos obtenidos en nuestro trabajo de investigación, con la aplicación local de GH, han mostrado diferencias histomorfométricas significativas entre el grupo control y el grupo GH. A los 28 días de la cirugía, la GH en una dosis de 4UI (1,2mg.), local aumentó significativamente los parámetros de osteorregeneración: la densidad de área de neoformación ósea en la cavidad medular.En este sentido, coincidimos con los datos obtenidos por Blom y Tresguerres<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0130">26,27</a>.En la bibliografía hemos encontrado referencias de la utilización de la GH<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140">28</a> como agente terapéutico, mediante aplicación sistémica, en tratamiento de fracturas. Todos los autores coinciden en su efecto positivo sobre la curación de las fracturas, no obstante, la mayoría han reportado efectos sistémicos adversos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0140">28,29</a>. Sin embargo, hay pocos estudios sobre su utilización local, y los que se han encontrado, no informan de efectos sistémicos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150">30</a>. Este hecho podría justificar su interés clínico mediante su uso a través de aplicación local, con lo que se obtendrían los beneficios que esta hormona aporta a la curación de las lesiones óseas, y se evitarían los efectos secundarios que podría tener si se aplicara vía sistémica.ConclusionesDe acuerdo con los resultados obtenidos de este estudio, se pueden extraer las siguientes conclusiones:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0080"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0270">1.El aspecto macroscópico del defecto crítico, tras su tratamiento, es mejor en el grupo con PRP y en el grupo con GH que en el grupo control.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0275">2.Histológicamente se observó neoformación ósea, tanto dentro del defecto como fuera del mismo, en los tres grupos.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0280">3.El estudio cuantitativo morfométrico no detectó, sin embargo, diferencias estadísticamente significativas entre la neoformación ósea habida en el grupo con PRP y el grupo control.</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0285">4.Se detectaron diferencias estadísticamente significativas que indicaban mayor neoformación ósea en el grupo con GH frente a los otros dos grupos.</li></ul>Conclusión final: la GH facilita la regeneración ósea en defectos críticos, rellenos con cemento de fosfato cálcico, en el período de tiempo estudiado en conejos de raza Nueva Zelanda.Nivel de evidenciaNivel de evidencia I.Responsabilidades éticasProtección de personas y animalesLos autores declaran que los procedimientos seguidos se conformaron a las normas éticas del comité de experimentación humana responsable y de acuerdo con la Asociación Médica Mundial y la Declaración de Helsinki.Confidencialidad de los datosLos autores declaran que en este artículo no aparecen datos de pacientes.Derecho a la privacidad y consentimiento informadoLos autores declaran que en este artículo no aparecen datos de pacientes.Conflicto de interesesLos autores declaran no tener ningún conflicto de intereses." "textoCompletoSecciones" => array:1 [ "secciones" => array:13 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "xres476346" "titulo" => "Resumen" "secciones" => array:5 [ 0 => array:1 [ "identificador" => "abst0005" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "abst0010" "titulo" => "Materiales" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "abst0015" "titulo" => "Método" ] 3 => array:2 [ "identificador" => "abst0020" "titulo" => "Resultados" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "abst0025" "titulo" => "Conclusión" ] ] ] 1 => array:2 [ "identificador" => "xpalclavsec498390" "titulo" => "Palabras clave" ] 2 => array:3 [ "identificador" => "xres476345" "titulo" => "Abstract" "secciones" => array:5 [ 0 => array:1 [ "identificador" => "abst0030" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "abst0035" "titulo" => "Materials" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "abst0040" "titulo" => "Methods" ] 3 => array:2 [ "identificador" => "abst0045" "titulo" => "Results" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "abst0050" "titulo" => "Conclusion" ] ] ] 3 => array:2 [ "identificador" => "xpalclavsec498389" "titulo" => "Keywords" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "sec0005" "titulo" => "Introducción" ] 5 => array:3 [ "identificador" => "sec0010" "titulo" => "Materiales y metodología" "secciones" => array:2 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "sec0015" "titulo" => "Materiales" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "sec0020" "titulo" => "Metodología" ] ] ] 6 => array:2 [ "identificador" => "sec0025" "titulo" => "Resultados" ] 7 => array:3 [ "identificador" => "sec0030" "titulo" => "Discusión" "secciones" => array:4 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "sec0035" "titulo" => "El tipo de modelo experimental animal" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "sec0040" "titulo" => "Zona y tamaño del defecto óseo" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "sec0045" "titulo" => "Biomateriales utilizados" ] 3 => array:2 [ "identificador" => "sec0050" "titulo" => "Factores de crecimiento utilizados" ] ] ] 8 => array:2 [ "identificador" => "sec0055" "titulo" => "Conclusiones" ] 9 => array:2 [ "identificador" => "sec0060" "titulo" => "Nivel de evidencia" ] 10 => array:3 [ "identificador" => "sec0065" "titulo" => "Responsabilidades éticas" "secciones" => array:3 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "sec0070" "titulo" => "Protección de personas y animales" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "sec0075" "titulo" => "Confidencialidad de los datos" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "sec0080" "titulo" => "Derecho a la privacidad y consentimiento informado" ] ] ] 11 => array:2 [ "identificador" => "sec0090" "titulo" => "Conflicto de intereses" ] 12 => array:1 [ "titulo" => "Bibliografía" ] ] ] "pdfFichero" => "main.pdf" "tienePdf" => true "fechaRecibido" => "2014-05-23" "fechaAceptado" => "2014-07-22" "PalabrasClave" => array:2 [ "es" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Palabras clave" "identificador" => "xpalclavsec498390" "palabras" => array:6 [ 0 => "Defecto óseo crítico" 1 => "Regeneración ósea" 2 => "Cemento de fosfato cálcico" 3 => "Plasma rico en plaquetas" 4 => "Hormona de crecimiento" 5 => "Morfometría" ] ] ] "en" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Keywords" "identificador" => "xpalclavsec498389" "palabras" => array:6 [ 0 => "Critical bone defect" 1 => "Bone regeneration" 2 => "Calcium phosphate cements" 3 => "Platelet-rich plasma" 4 => "Growth hormone" 5 => "Morphometry" ] ] ] ] "tieneResumen" => true "resumen" => array:2 [ "es" => array:3 [ "titulo" => "Resumen" "resumen" => "Determinadas sustancias (factores de crecimiento y hormonas) tienen propiedades osteoinductivas y añadidas a un biomaterial osteoconductivo aumentan sus propiedades de neoformación ósea. MaterialesQuince conejos de la raza Nueva Zelanda.Los biomateriales y factores utilizados fueron: cemento de fosfato tricálcico (Calcibon®), hormona de crecimiento humana y plasma rico en plaquetas PRP. MétodoCada conejo fue intervenido en ambas tibias donde se le realizó un defecto de 6mm.Los animales de experimentación se repartieron en los siguientes grupos:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0005"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0005">-Grupo control (regeneración solo con TCP).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0010">-Grupo PRP (regeneración con TCP+PRP).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0015">-Grupo GH (regeneración con TCP+GH).</li></ul>Todos los animales fueron sacrificados a los 28 días. Se valoró el aspecto del defecto crítico comprobando su relleno. Histológicamente valoramos la respuesta tisular, la presencia de tejido óseo neoformado, y el aspecto del biomaterial. Se realizó la morfometría con analizador de imágenes MIP 45. Usamos el test ANOVA para el estudio estadístico mediante el programa Statgraphics. ResultadosEl aspecto macroscópico del defecto crítico, fue mejor en el grupo PRP y en el grupo GH que en el grupo control. Histológicamente se observó mayor neoformación ósea en los grupos PRP y GH.El estudio morfométrico no detectó diferencias significativas en la neoformación ósea entre el grupo PRP y control. Se detectó mayor neoformación ósea en el grupo GH (p = 0,03) frente a los otros dos grupos. ConclusiónLa GH facilita la regeneración ósea en defectos críticos, rellenos con cemento de fosfato cálcico, en el período de tiempo estudiado en conejos de Nueva Zelanda." "secciones" => array:5 [ 0 => array:1 [ "identificador" => "abst0005" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "abst0010" "titulo" => "Materiales" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "abst0015" "titulo" => "Método" ] 3 => array:2 [ "identificador" => "abst0020" "titulo" => "Resultados" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "abst0025" "titulo" => "Conclusión" ] ] ] "en" => array:3 [ "titulo" => "Abstract" "resumen" => "Many substances (growth factors and hormones) have osteoinduction properties and when added to some osteoconduction biomaterial they accelerate bone neoformation properties. MaterialsThe materials included 15 New Zealand rabbits, calcium phosphate cement (Calcibon®), human growth hormone (GH), and plasma rich in platelets (PRP). MethodsEach animal was operated on in both proximal tibias and a critical size bone defect of 6mm of diameter was made.The animals were separated into the following study groups:<ul class="elsevierStyleList" id="lis0010"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0020">-Control (regeneration only by Calcibon®).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0025">-PRP (regeneration by Calcibon® and PRP).</li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0030">-GH (regeneration by Calcibon® and GH).</li></ul>All the animals were sacrificed at 28 days. An evaluation was made of the appearance of the proximal extreme of rabbit tibiae in all the animals, and to check the filling of the critical size defect. A histological assessment was made of the tissue response, the presence of new bone formation, and the appearance of the biomaterial. Morphometry was performed using the MIP 45 image analyser. ANOVA statistical analysis was performed using the Statgraphics software application. ResultsThe macroscopic appearance of the critical defect was better in the PRP and the GH group than in the control group. Histologically greater new bone formation was found in the PRP and GH groups.No statistically significant differences were detected in the morphometric study between bone formation observed in the PRP group and the control group. Significant differences in increased bone formation were found in the GH group (p=0.03) compared to the other two groups. ConclusionGH facilitates bone regeneration in critical defects filled with calcium phosphate cement in the time period studied in New Zealand rabbits." "secciones" => array:5 [ 0 => array:1 [ "identificador" => "abst0030" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "abst0035" "titulo" => "Materials" ] 2 => array:2 [ "identificador" => "abst0040" "titulo" => "Methods" ] 3 => array:2 [ "identificador" => "abst0045" "titulo" => "Results" ] 4 => array:2 [ "identificador" => "abst0050" "titulo" => "Conclusion" ] ] ] ] "multimedia" => array:9 [ 0 => array:7 [ "identificador" => "fig0005" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr1.jpeg" "Alto" => 1119 "Ancho" => 1501 "Tamanyo" => 274670 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "a) PRP con cemento. b) GH con cemento. c) Defecto óseo. d) Identificación del defecto mediante aguja Kirschner." ] ] 1 => array:7 [ "identificador" => "fig0010" "etiqueta" => "Figura 2" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr2.jpeg" "Alto" => 1848 "Ancho" => 700 "Tamanyo" => 209127 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Estudio macroscópico. a) Defecto rellenado con fosfato cálcico. Grupo control. b) Defecto rellenado con fosfato cálcico+PRP. Grupo PRP. c) Aspecto del defecto crítico del grupo GH. En estos casos nos resultó útil localizar la zona gracias a la aguja Kirschner." ] ] 2 => array:7 [ "identificador" => "fig0015" "etiqueta" => "Figura 3" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr3.jpeg" "Alto" => 601 "Ancho" => 1401 "Tamanyo" => 159793 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Histología grupo control. a) Conejo grupo control 15 aumentos. Corte transversal tinción de tricrómico de Masson. Aspecto general. Se diferencia el tejido óseo de la cortical (a), el cemento de fosfato cálcico que rellena el canal medular (b) y el defecto crítico cortical marcado con aguja de Kirschner (c). b) Conejo grupo control 30 aumentos. Tinción de tricrómico de Masson. Aguja de Kirschner utilizada como marcador (a), rodeado de biomaterial (b) en la zona del defecto crítico. No se observa formación de tejido óseo." ] ] 3 => array:7 [ "identificador" => "fig0020" "etiqueta" => "Figura 4" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr4.jpeg" "Alto" => 806 "Ancho" => 1501 "Tamanyo" => 240106 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "a) Corte transversal. Tinción tricrómico de Masson. Aspecto global de fosfato cálcico+PRP: se observa mayor formación ósea en la zona del defecto crítico y entre las partículas del cemento cálcico. b) Conejo grupo PRP, 30 aumentos. Al doble de aumento que en la imagen anterior. (a) Hueso neoformado (inmaduro) rellenando el defecto. (b) Hueso maduro de la cortical. (c) Hueso entre las partículas del biomaterial. c) Conejo grupo PRP 15 aumentos. Corte transversal. Tinción de Masson. Aspecto general: (a) cortical, (b) hueso neoformado y (c) biomaterial. d) Conejo grupo PRP, 30 aumentos. Hueso inmaduro entre las partículas del fosfato cálcico. El color de esta figura solo puede apreciarse en la versión electrónica del artículo." ] ] 4 => array:7 [ "identificador" => "fig0025" "etiqueta" => "Figura 5" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr5.jpeg" "Alto" => 887 "Ancho" => 1500 "Tamanyo" => 244544 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Histología grupo GH. a) Conejo grupo GH, 15 aumentos. Imagen general tinción hematoxilina eosina. (a) tejido óseo neoformado entre las partículas del biomaterial (b) en la zona del defecto cortical, marcado con aguja de Kirschner (c). b) Conejo grupo GH, 30 aumentos. Tinción hematoxilina eosina. Tejido óseo neoformado en contacto con biomaterial. c) Conejo grupo GH, 60 aumentos. Tejido óseo neoformado (flechas) en contacto con el biomaterial (fosfato tricálcico+GH). d) Conejo grupo GH, 100 aumentos. Tinción azul toluidina. Frente de osteoblastos (flechas). El color de esta figura solo puede apreciarse en la versión electrónica del artículo." ] ] 5 => array:7 [ "identificador" => "fig0030" "etiqueta" => "Figura 6" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr6.jpeg" "Alto" => 1537 "Ancho" => 2234 "Tamanyo" => 189383 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Resultados estadísticos del estudio morfométrico. a) ANOVA de la densidad de área de neoformación ósea total. b) ANOVA de la densidad de área de neoformación ósea en la cavidad medular. c) ANOVA de la densidad de área de neoformación ósea fuera del canal medular. d) ANOVA de la densidad de área del biomaterial persistente." ] ] 6 => array:7 [ "identificador" => "tbl0005" "etiqueta" => "Tabla 1" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "tabla" => array:1 [ "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:2 [ "tabla" => array:1 [ 0 => """ <table border="0" frame="\n \t\t\t\t\tvoid\n \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Referencia tratamiento \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa biomaterial \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa medular \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa perióstica \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa total \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 3 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">23,3 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,51 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,51 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 3 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">19,2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,33 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,33 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 5 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">25,7 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,34 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,34 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 5 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">21,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,55 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,55 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 10 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">24,4 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,62 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,62 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 10 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">24,5 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,77 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,63 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,40 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 12 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">15,1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,91 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,91 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 12 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">22,5 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,26 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,67 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,92 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 13 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">25,1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">7,03 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">7,03 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Control 13 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">18,4 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,57 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,42 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" 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style="border-bottom: 2px solid black">% Aa medular \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa perióstica \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa total \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 2 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">20,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 2 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">19,4 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,84 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,18 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,02 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 4 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,6 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,40 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,83 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,23 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 4 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">13,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,30 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,30 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 6 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">13,4 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,33 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,46 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,78 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 6 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">32,6 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,93 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,93 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 9 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">23,3 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,51 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,51 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 9 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">16,2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,33 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,33 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 11 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">22,7 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,44 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,44 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">PRP 11 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">22,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,54 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,54 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab752657.png" ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Resultados de la morfometría grupo PRP" ] ] 8 => array:7 [ "identificador" => "tbl0015" "etiqueta" => "Tabla 3" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "tabla" => array:1 [ "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:2 [ "tabla" => array:1 [ 0 => """ <table border="0" frame="\n \t\t\t\t\tvoid\n \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Referencia tratamiento \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa biomaterial \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa medular \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa perióstica \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% Aa total \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 14 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">28,1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,26 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,77 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">6,03 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 14 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">30,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,76 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,76 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 15 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">19,8 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,10 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,67 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,77 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 15 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">20,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,52 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,73 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">6,25 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 16 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">23,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,63 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,63 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 16 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">27,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,49 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">9,99 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 17 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">17,8 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,03 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,52 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,55 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 17 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">20,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">3,77 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,96 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,72 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 18 dcha \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">18,5 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">1,86 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">4,13 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">5,99 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">GH 18 izda \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">28,0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,17 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">0,00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="char" valign="top">2,17 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" 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INVESTIGACIÓN

Regeneración ósea en animales de experimentación, mediante cemento de fosfato cálcico en combinación con factores de crecimiento plaquetarios y hormona de crecimiento humana

Bone regeneration in experimental animals using calcium phosphate cement combined with platelet growth factors and human growth hormone

K. Emilov-Veleva,

Autor para correspondencia

kaloyanvelev@yahoo.es

Autor para correspondencia.

, C. Clemente-de-Arribab, M.Á. Alobera-Garcíac, E.M. Moreno-Sansalvadord, J. Campo-Loartea

a Servicio de Traumatología, Hospital Universitario Puerta de Hierro, Majadahonda, Madrid, España

b Unidad de Embriología y Anatomía Humana, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, Madrid, España

c Práctica privda, Alcalá de Henares, Madrid, España

d Centro de Atención Primaria María de Guzmán, Alcalá de Henares, Madrid, España

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ha permitido contar con nuevos materiales para la regeneraci&#243;n &#243;sea&#44; debido a que el producto de su proceso de reacci&#243;n es&#44; en la mayor&#237;a de los casos&#44; una hidroxiapatita muy similar a la biol&#243;gica&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Adem&#225;s de los <span class="elsevierStyleItalic">sustitutos &#243;seos</span>&#44; otra l&#237;nea de investigaci&#243;n encaminada a facilitar la regeneraci&#243;n &#243;sea es el desarrollo y utilizaci&#243;n de diversos <span class="elsevierStyleItalic">factores de crecimiento y hormonas</span><span class="elsevierStyleBold">&#46;</span></p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los factores de crecimiento m&#225;s sencillos de aplicar por las caracter&#237;sticas de su obtenci&#243;n son los del plasma rico en plaquetas &#40;PRP&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a>&#46;</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las plaquetas transportan los factores de crecimiento plaquetarios<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0010"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#58; &#171;platelet derived growth factor&#187; y el &#171;vascular endothelial growth factor&#187;&#44; adem&#225;s de &#171;transforming growth factor-beta&#187; y &#171;bone sialoprotein&#187;&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por otro lado&#44; y con respecto al papel de las hormonas en la regeneraci&#243;n &#243;sea&#44; se ha puesto de manifiesto en numerosos estudios la relaci&#243;n entre la hormona de crecimiento &#40;GH&#41; y el metabolismo &#243;seo&#46; En efecto&#44; una acci&#243;n importante de la hormona de crecimiento a nivel &#243;seo se centra sobre las c&#233;lulas formadoras de hueso<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46; El aumento en la proliferaci&#243;n de los osteoblastos llevado a cabo por la GH&#44; se traducir&#237;a en la aparici&#243;n de un mayor n&#250;mero de estas c&#233;lulas a nivel del defecto cr&#237;tico&#44; y la diferenciaci&#243;n celular temprana acelerar&#237;a notablemente la s&#237;ntesis y la mineralizaci&#243;n de la matriz osteoide&#46; Todo ello favorecer&#237;a el proceso de regeneraci&#243;n &#243;sea en el defecto cr&#237;tico&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A pesar del amplio arsenal de injertos y sustitutos &#243;seos&#44; hoy en d&#237;a&#44; sigue sin haberse resuelto totalmente el problema de la consecuci&#243;n de una regeneraci&#243;n &#243;sea absolutamente satisfactoria tras la utilizaci&#243;n de los mismos&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este trabajo es un paso m&#225;s hacia la b&#250;squeda de nuevos m&#233;todos que consigan la regeneraci&#243;n &#243;sea total en situaciones de cavidades &#243;seas con defecto cr&#237;tico&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0070">Materiales y metodolog&#237;a</span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0075">Materiales</span><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para la realizaci&#243;n de este trabajo y como animales de experimentaci&#243;n se utilizaron 15 conejos de la raza Nueva Zelanda&#44; sanos&#44; machos y adultos de entre 8 y 12 meses&#44; procedentes del Centro de Experimentaci&#243;n Animal de la Facultad de Medicina de la Universidad de Alcal&#225; que cumple la normativa nacional e internacional sobre experimentaci&#243;n animal&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los animales se mantuvieron vivos y en estado de buena salud hasta transcurridos los 28 d&#237;as despu&#233;s de la intervenci&#243;n&#44; con acceso directo a agua y comida ad libitum&#46;</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Instrumental quir&#250;rgico&#58; se utiliz&#243; el instrumental habitual para intervenciones quir&#250;rgicas sobre tejido &#243;seo&#46; Se utiliz&#243; un contra&#225;ngulo acoplado a motor quir&#250;rgico con sistema de irrigaci&#243;n y una fresa trefina de 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm de di&#225;metro adaptada al contra&#225;ngulo&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se han utilizado los siguientes productos&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0015"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0035"><span class="elsevierStyleLabel">A&#46;</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Cemento de fosfato tric&#225;lcico &#40;Calcibon<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#41;&#58; es un cemento basado en fosfato c&#225;lcico&#46; Se presenta separado en dos componentes&#58; polvo y l&#237;quido&#46; Al realizar la mezcla&#44; en el momento de la intervenci&#243;n quir&#250;rgica&#44; se forma carbonato c&#225;lcico fosfato apatito&#44; formado por cristales de peque&#241;o tama&#241;o parecidos a la fase inorg&#225;nica del tejido &#243;seo&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0040"><span class="elsevierStyleLabel">B&#46;</span><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hormona de crecimiento&#46; Norditropin Simplex<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> 15<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;1&#44;5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>ml&#46; Contiene una hormona de crecimiento humana biosint&#233;tica&#44; denominada somatropina&#44; id&#233;ntica a la hormona de crecimiento humana&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0045"><span class="elsevierStyleLabel">C&#46;</span><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">PRP&#46; Procedente de la sangre del propio animal y obtenido seg&#250;n el m&#233;todo espec&#237;fico descrito m&#225;s tarde&#46;</p></li></ul></p><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Material histol&#243;gico y morfom&#233;trico&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0020"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0050"><span class="elsevierStyleLabel">A&#46;</span><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Equipo de corte histol&#243;gico&#58; EXAKT<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> Cutting Grinding System &#40;Exakt Apparatebau&#44; Nordersted&#44; Alemania&#41; para tejidos duros&#44; formado por sierra de diamante y pulidora con discos de granos de distintos di&#225;metros&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0055"><span class="elsevierStyleLabel">B&#46;</span><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Soluciones de tinci&#243;n histol&#243;gica&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0060"><span class="elsevierStyleLabel">C&#46;</span><p id="par0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Software de imagen bidimensional para estudio cuantitativo de las muestras &#40;MIP-45&#41;&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0065"><span class="elsevierStyleLabel">D&#46;</span><p id="par0135" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Microscopio &#243;ptico y c&#225;mara &#243;ptica convencional para estudio histol&#243;gico&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0070"><span class="elsevierStyleLabel">E&#46;</span><p id="par0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Material morfom&#233;trico&#58; microscopio &#243;ptico&#44; sistema inform&#225;tico y aplicaci&#243;n inform&#225;tica para MIP-45&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0075"><span class="elsevierStyleLabel">F&#46;</span><p id="par0145" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Software para estudio estad&#237;stico Statgraphics plus v&#46; 5&#46;1&#46;</p></li></ul></p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0080">Metodolog&#237;a</span><p id="par0150" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los animales&#44; se repartieron en tres grupos&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0025"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0080"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0155" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Grupo control</span>&#44; formado por 5 animales en los que se utiliz&#243; solamente fosfato tric&#225;lcico como material de relleno del defecto creado en la met&#225;fisis tibial&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0085"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0160" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Grupo PRP</span>&#44; formado por 5 animales utilizando como material de relleno fosfato tric&#225;lcico ba&#241;ado con PRP&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0090"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0165" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Grupo GH</span>&#44; formado por 5 animales utilizando como material de relleno fosfato tric&#225;lcico ba&#241;ado con hormona de crecimiento&#46;</p></li></ul></p><p id="par0170" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A&#46; T&#233;cnica quir&#250;rgica&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0030"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0095"><span class="elsevierStyleLabel">-</span><p id="par0175" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">La anestesia</span> de todos los animales de experimentaci&#243;n fue realizada mediante clorhidrato de ketamina a dosis de 5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;kg de peso&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0100"><span class="elsevierStyleLabel">-</span><p id="par0180" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Preparaci&#243;n de PRP&#58;</span> El grupo PRP&#44; formado por 5 animales&#44; requer&#237;a la obtenci&#243;n de plasma rico en plaquetas&#44; previo a la intervenci&#243;n quir&#250;rgica&#46; Para conseguir PRP de cada animal se sigui&#243; la t&#233;cnica descrita por Anitua et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0025"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0105"><span class="elsevierStyleLabel">-</span><p id="par0185" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Preparaci&#243;n del fosfato tric&#225;lcico &#40;Calcibon</span><span class="elsevierStyleSup"><span class="elsevierStyleItalic">&#174;</span></span><span class="elsevierStyleItalic">&#41;&#58;</span></p></li></ul></p><p id="par0190" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para preparar el fosfato tric&#225;lcico se mezclan los componentes s&#243;lido y l&#237;quido del mismo&#46; Se disuelven 3&#44;3 g de polvo en 1 cc&#46; de l&#237;quido de Calcibon<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#44; se mezcla durante un minuto y se esperan 4 minutos antes de colocarlo en defecto &#243;seo&#46;</p><p id="par0195" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el caso del grupo PRP&#44; el material de relleno se realiz&#243; mezclando cemento de fosfato tric&#225;lcico con 1 cc&#46; de PRP &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>a&#41; y realizando la mezcla durante un minuto&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0200" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el caso del grupo GH&#44; se utiliz&#243; como material de relleno fosfato tric&#225;lcico ba&#241;ado con hormona de crecimiento &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>b&#41;&#44; se a&#241;adieron 4 UI de hormona de crecimiento&#46;- <span class="elsevierStyleItalic">Preparaci&#243;n del defecto &#243;seo&#58;</span> cada conejo fue intervenido en ambas tibias sucesivamente realizando sendos defectos &#243;seos&#46; Ambos defectos se trataron con el mismo tipo de relleno en las dos tibias seg&#250;n el grupo experimental al que perteneciese el animal &#40;control&#44; PRP o GH&#41;&#46;</p><p id="par0205" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tras rasurar la zona operatoria sobre la tibia&#44; se procedi&#243; a la desinfecci&#243;n de la superficie cut&#225;nea mediante povidona yodada&#46; A continuaci&#243;n&#44; se practic&#243; una incisi&#243;n sagital&#44; de unos 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>cm&#44; a nivel de la cara interna en el extremo proximal de la tibia&#44; separando cuidadosamente el periostio y exponiendo el hueso&#46; Se realiz&#243; un defecto circular experimental mediante una fresa trefina de 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm de di&#225;metro montada en contra&#225;ngulo &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>c&#41;&#46; Se eligi&#243; esa zona bas&#225;ndonos en la bibliograf&#237;a previa&#44; ya que la regi&#243;n metafisaria responde m&#225;s intensamente a los est&#237;mulos que la di&#225;fisis tibial<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#46;</p><p id="par0210" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los defectos &#243;seos se rellenaron posteriormente solo con fosfato tric&#225;lcico&#44; o con este y PRP o GH&#44; seg&#250;n el grupo experimental &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>d&#41;&#46; La intervenci&#243;n se llev&#243; a cabo en las dos extremidades del animal&#46;</p><p id="par0215" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La zona del defecto rellenado se marc&#243; con aguja de Kirschner de 1&#44;2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm&#46;&#44; para identificarla posteriormente en el estudio histol&#243;gico &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>d&#41;&#46;</p><p id="par0220" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por &#250;ltimo&#44; se sutur&#243; cuidadosamente el periostio con sutura reabsorbible y la piel con seda&#46;</p><p id="par0225" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Obtenci&#243;n de las muestras de estudio&#58; todos los animales fueron sacrificados a los 28 d&#237;as de la cirug&#237;a mediante inyecci&#243;n letal de barbit&#250;ricos &#40;pentotal s&#243;dico&#41;&#46;</p><p id="par0230" class="elsevierStylePara elsevierViewall">B&#46; Estudio macrosc&#243;pico&#58; el estudio macrosc&#243;pico valor&#243; el aspecto de la regi&#243;n proximal de la tibia de los animales una vez disecadas las partes blandas&#46; Se valor&#243; el aspecto de la porci&#243;n proximal de la tibia en los 3 grupos de experimentales&#44; comprobando el relleno del defecto cr&#237;tico en todos los animales&#46;</p><p id="par0235" class="elsevierStylePara elsevierViewall">C&#46; Estudio de microscop&#237;a &#243;ptica</p><p id="par0240" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Una vez obtenidas las tibias se fijaron en formol al 5&#37; previamente tamponado a pH 7 para evitar la descalcificaci&#243;n&#46; Posteriormente&#44; las muestras se procesaron en la Unidad de Anatom&#237;a y Embriolog&#237;a Humana de la Facultad de Medicina de la Universidad de Alcal&#225;&#44; donde se continu&#243; el control de su fijaci&#243;n en formol&#46;</p><p id="par0245" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A continuaci&#243;n se estudi&#243; la regeneraci&#243;n &#243;sea desde el punto de vista histol&#243;gico e histomorfom&#233;trico en muestras de tejido &#243;seo sin descalcificar&#46; Para ello se utiliz&#243; el sistema de corte y pulido Exakt<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#46;</p><p id="par0250" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El siguiente paso lo constituy&#243; la inclusi&#243;n de la muestra en un pol&#237;mero&#46; Se obtuvo as&#237; un bloque de metacrilato con las tibias incluidas&#46; A continuaci&#243;n&#44; se cortaron las muestras con la banda de corte diamante del sistema Exakt<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#44; obteni&#233;ndose 5 cortes por muestra para su posterior estudio histol&#243;gico&#46; Los cortes se realizaron perpendiculares al eje longitudinal de la di&#225;fisis tibial&#44; siguiendo un plano transversal&#44; para poder valorar toda la cavidad&#44; desde la profundidad hasta la zona superficial de la misma&#46;</p><p id="par0255" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se utilizaron las tinciones habituales para el estudio del tejido &#243;seo en el laboratorio&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0035"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0110"><span class="elsevierStyleLabel">-</span><p id="par0260" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tricr&#243;mico de Masson&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0115"><span class="elsevierStyleLabel">-</span><p id="par0265" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hematoxilina-eosina&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0120"><span class="elsevierStyleLabel">-</span><p id="par0270" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Azul de toluidina&#46;</p></li></ul></p><p id="par0275" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se valoraron las siguientes variables histol&#243;gicas&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0040"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0125"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0280" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Tejido &#243;seo maduro</span>&#58; se caracteriza porque su matriz &#243;sea &#40;sustancia intersticial mineralizada&#41; se organiza formando lamelas o laminillas &#243;seas de 3 a 7<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;m de espesor&#46; Las c&#233;lulas del hueso maduro son los osteocitos y ocupan unos espacios denominados lagunas&#44; dispuestos&#44; al igual que las laminillas&#44; de manera conc&#233;ntrica&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0130"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0285" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las l&#225;minas son paralelas y conc&#233;ntricas&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0135"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0290" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Tejido &#243;seo neoformado</span>&#58; contiene una proporci&#243;n de osteocitos relativamente m&#225;s alta&#44; con lagunas de tama&#241;o m&#225;s grandes que las que aparecen en el hueso maduro y las fibras de col&#225;geno siguiendo varias direcciones&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0140"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0295" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Cantidad y el aspecto del biomaterial &#40;cemento de fosfato c&#225;lcico&#41;</span>&#58; tambi&#233;n se estudi&#243; histol&#243;gicamente el aspecto que presentaba el biomaterial colocado dentro de cavidad realizada de forma experimental en la tibia&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0145"><span class="elsevierStyleLabel">&#8226;</span><p id="par0300" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Respuesta del tejido &#243;seo al biomaterial</span>&#58; se buscaron signos de reacci&#243;n inflamatoria como puede ser la aparici&#243;n de linfocitos o c&#233;lulas de cuerpo extra&#241;o&#46; Por &#250;ltimo&#44; investig&#243; la posible existencia de signos de reacci&#243;n al&#233;rgica&#44; como es la presencia de eosin&#243;filos&#46;</p></li></ul></p><p id="par0305" class="elsevierStylePara elsevierViewall">D&#46; Estudio morfom&#233;tricoDespu&#233;s del estudio histol&#243;gico cualitativo se realiz&#243; el an&#225;lisis cuantitativo mediante morfometr&#237;a bidimensional&#46;</p><p id="par0310" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este nos permiti&#243; cuantificar de forma objetiva la fracci&#243;n de tejido &#243;seo neoformado que se regener&#243; en las cavidades de los distintos grupos&#46; Para ello&#44; recurrimos a la utilizaci&#243;n de un software&#44; analizador de im&#225;genes&#44; llamado MIP-45&#46;</p><p id="par0315" class="elsevierStylePara elsevierViewall">D&#46;1&#46; T&#233;cnica de estudio&#58;</p><p id="par0320" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Como estimador de medida&#44; se utiliz&#243; una plantilla de puntos&#44; dise&#241;ada de tal modo que cada punto tiene un &#225;rea asociada de 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46; El recuento de los puntos de impacto nos permiti&#243; obtener los valores de nuestras variables&#46;</p><p id="par0325" class="elsevierStylePara elsevierViewall">D&#46;2&#46; Variables del estudio histomorfom&#233;trico&#46; Para la obtenci&#243;n de las variables de estudio&#44; precisamos calcular previamente&#44; las siguientes &#225;reas&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0045"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0150"><span class="elsevierStyleLabel">1&#46;</span><p id="par0330" class="elsevierStylePara elsevierViewall">&#193;rea total de la muestra&#58; incluye el &#225;rea ocupada por todo el hueso&#44; y el &#225;rea ocupada por la cavidad medular&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0155"><span class="elsevierStyleLabel">2&#46;</span><p id="par0335" class="elsevierStylePara elsevierViewall">&#193;rea del hueso cortical&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0160"><span class="elsevierStyleLabel">3&#46;</span><p id="par0340" class="elsevierStylePara elsevierViewall">&#193;rea de hueso neoformado que subdividimos en&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0050"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0165"><span class="elsevierStyleLabel">a&#46;</span><p id="par0345" class="elsevierStylePara elsevierViewall">&#193;rea de hueso neoformado dentro de la cavidad medular&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0170"><span class="elsevierStyleLabel">b&#46;</span><p id="par0350" class="elsevierStylePara elsevierViewall">&#193;rea de hueso neoformado fuera de la cavidad medular&#46;</p></li></ul></p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0175"><span class="elsevierStyleLabel">4&#46;</span><p id="par0355" class="elsevierStylePara elsevierViewall">&#193;rea ocupada por el biomaterial remanente&#46;</p></li></ul></p><p id="par0360" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Una vez calculadas las &#225;reas anteriores&#44; las variables de estudio fueron determinadas en las cinco secciones o cortes obtenidos de la tibia de cada animal&#46; Estas variables fueron las siguientes&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0055"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0180"><span class="elsevierStyleLabel">1&#46;</span><p id="par0365" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Densidad de &#225;rea del biomaterial remanente &#40;&#37; Aa biomaterial&#41;&#58;&#225;rea&#8201;biomaterial&#225;rea&#8201;total&#215;100</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0185"><span class="elsevierStyleLabel">2&#46;</span><p id="par0370" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Densidad de &#225;rea de neoformaci&#243;n &#243;sea en la cavidad medular &#40;&#37; Aa medular&#41;&#58;&#225;rea&#8201;de&#8201;neoformaci&#243;n&#8201;&#243;sea&#8201;en&#8201;la&#8201;cavidad&#8201;medular&#225;rea&#8201;total&#215;100</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0190"><span class="elsevierStyleLabel">3&#46;</span><p id="par0375" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Densidad de &#225;rea de neoformaci&#243;n &#243;sea fuera de la cavidad medular &#40;&#37; Aa peri&#243;stica&#41;&#58;&#225;rea&#8201;de&#8201;neoformaci&#243;n&#8201;&#243;sea&#8201;fuera&#8201;de&#8201;la&#8201;cavidad&#8201;medular&#225;rea&#8201;total&#215;100</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0195"><span class="elsevierStyleLabel">4&#46;</span><p id="par0380" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Densidad de &#225;rea de neoformaci&#243;n &#243;sea total &#40;&#37; Aa total&#41;&#58;&#225;rea&#8201;de&#8201;neoformaci&#243;n&#8201;&#243;sea&#8201;dentro&#43;&#225;rea&#8201;de&#8201;neoformaci&#243;n&#8201;&#243;sea&#8201;fuera&#225;rea&#8201;total&#215;100</p></li></ul></p><p id="par0385" class="elsevierStylePara elsevierViewall">D&#46;4&#46; Estudio de la fiabilidad del m&#233;todo&#46; Para comprobar el grado de fiabilidad con el que se va a establecer la morfometr&#237;a&#44; se realiz&#243; un estudio piloto previo para muestras dependientes&#44; con el objetivo de valorar la exactitud del estimador o sonda &#40;unidad de medici&#243;n&#41; utilizado&#44; a trav&#233;s del c&#225;lculo del coeficiente de error para esa sonda&#46; Dicho estudio&#44; permiti&#243; dise&#241;ar una sonda de medici&#243;n para las muestras&#44; que consisti&#243; en una plantilla de puntos con 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm<span class="elsevierStyleSup">2</span> de &#225;rea asociada al punto&#46;</p><p id="par0390" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El estudio de fiabilidad&#44; su c&#225;lculo y metodolog&#237;a fueron los siguientes&#58;</p><p id="par0395" class="elsevierStylePara elsevierViewall">C&#225;lculo de la fiabilidad del muestreo para muestras dependientes&#58; cortes paralelos entre s&#237;&#44; perpendiculares al eje longitudinal de la muestra &#40;cortes Cavalieri&#41;&#58; el coeficiente de error&#44; es un concepto estad&#237;stico&#44; que nos permite conocer el grado de precisi&#243;n del estimador utilizado&#46; Su valor depender&#225; del n&#250;mero de unidades de muestreo y del tama&#241;o del estimador &#40;es decir&#44; de la distancia entre los puntos de la plantilla medidora&#41;&#46; Este dato nos permitir&#225; conocer cu&#225;l es el valor m&#237;nimo que necesitamos de cortes de una misma muestra&#44; as&#237; como la distancia m&#237;nima entre los puntos utilizados para su medici&#243;n&#44; de manera que los datos obtenidos utilizando estas dos constantes nos permita realizar un c&#225;lculo estad&#237;stico fiable&#46;</p><p id="par0400" class="elsevierStylePara elsevierViewall">E&#46; Estudio estad&#237;stico&#58; se valoraron las diferencias significativas entre los grupos del estudio mediante el an&#225;lisis de la varianza &#40;ANOVA&#41; utilizando el programa Statgraphics versi&#243;n 5&#46;1&#46;</p></span></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0085">Resultados</span><p id="par0405" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><ul class="elsevierStyleList" id="lis0060"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0200"><span class="elsevierStyleLabel">I&#46;</span><p id="par0410" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Resultados macrosc&#243;picos</span>&#58; se realiz&#243; un reconocimiento de la zona intervenida en las tibias 28 d&#237;as antes&#46;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0065"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0205"><span class="elsevierStyleLabel">1&#46;</span><p id="par0415" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el <span class="elsevierStyleItalic">grupo control</span> &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>a&#41; las muestras no presentaban aspecto de integraci&#243;n del cemento de fosfato c&#225;lcico colocado en la intervenci&#243;n&#46; Claramente se diferenciaban la zona del defecto cr&#237;tico&#44; el cemento aparec&#237;a como una masa amorfa que rellenaba el defecto sin ning&#250;n tipo de integraci&#243;n&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0210"><span class="elsevierStyleLabel">2&#46;</span><p id="par0420" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el <span class="elsevierStyleItalic">grupo PRP</span> &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>b&#41;&#44; por un lado&#44; se observaba buen relleno del defecto cr&#237;tico y&#44; por otro&#44; el cemento daba la impresi&#243;n de haber producido mejor integraci&#243;n &#243;sea que en el grupo control&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0215"><span class="elsevierStyleLabel">3&#46;</span><p id="par0425" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Al observar el defecto cr&#237;tico realizado en la tibia de los conejos operados del <span class="elsevierStyleItalic">grupo GH</span> &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>c&#41;&#44; macrosc&#243;picamente el relleno parec&#237;a mejor osteointegrado y era dif&#237;cil diferenciar el tejido &#243;seo del defecto rellenado&#46; En la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">figura 2</a>c se observa la zona del defecto cr&#237;tico&#44; marcada con aguja de Kirschner&#44; que dif&#237;cilmente se diferencia del resto de la cortical&#46;</p></li></ul></p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0220"><span class="elsevierStyleLabel">II&#46;</span><p id="par0430" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Resultados histol&#243;gicos</span>&#58; el estudio histol&#243;gico nos permiti&#243; valorar y comparar histol&#243;gicamente la formaci&#243;n de tejido &#243;seo y la presencia de biomaterial dentro del defecto cr&#237;tico entre los 3 grupos estudiados&#46; En los cortes transversales se observ&#243; el hueso maduro&#44; el hueso inmaduro&#44; el biomaterial residual&#44; la aguja de Kirshner&#44; que nos sirvi&#243; para marcar el defecto &#243;seo cr&#237;tico&#44; as&#237; como la presencia de tejido conjuntivo y de m&#233;dula &#243;sea&#46;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0070"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0225"><span class="elsevierStyleLabel">1&#46;</span><p id="par0435" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el <span class="elsevierStyleItalic">grupo control</span> &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">a-b</a>&#41; se observaron una gran cantidad de part&#237;culas del fosfato tric&#225;lcico &#40;Calcibon<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#41; repartidos por todo el &#225;rea de la muestra&#44; te&#241;idos p&#225;lidamente por la hematoxilina&#44; con un tono verdoso en las preparaciones de tricr&#243;mico de Masson y con un aspecto gris&#225;ceo en las preparaciones de azul de toluidina&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia><p id="par0440" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se observ&#243; escasa actividad de neoformaci&#243;n&#44; con algunas trab&#233;culas j&#243;venes&#44; cortas y aisladas&#44; cercanas a la superficie externa e interna de la cortical&#44; as&#237; como entre las part&#237;culas del cemento c&#225;lcico&#46; No se encontraron osteoblastos ni osteoclastos&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0230"><span class="elsevierStyleLabel">2&#46;</span><p id="par0445" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el <span class="elsevierStyleItalic">grupo PRP</span> &#40;relleno de cemento de fosfato c&#225;lcico<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>PRP&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">figs&#46; 4</a>a-d&#41; se observ&#243; mayor formaci&#243;n de tejido &#243;seo inmaduro rellenando&#44; tanto el defecto cr&#237;tico&#44; como los espacios entre las part&#237;culas del biomaterial en comparaci&#243;n con el grupo control&#46; No se encontr&#243; tejido inflamatorio y solo escaso tejido conjuntivo&#46; El fosfato tric&#225;lcico se presentaba como masa amorfa y no observamos actividad osteocl&#225;stica&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0235"><span class="elsevierStyleLabel">3&#46;</span><p id="par0450" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el <span class="elsevierStyleItalic">grupo GH</span> &#40;relleno de cemento de fosfato c&#225;lcico<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#43;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>GH&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">figs&#46; 5</a>a-d&#41;&#44; se observ&#243; el mayor grado de neoformaci&#243;n &#243;sea en forma de tejido &#243;seo inmaduro en comparaci&#243;n con los cortes histol&#243;gicos del grupo control y grupo PRP&#46; Se evidenciaron numerosas trab&#233;culas &#243;seas entre las part&#237;culas de biomaterial&#46; Cabe destacar que la formaci&#243;n del tejido &#243;seo era mayor en el defecto y dentro del canal medular en comparaci&#243;n con los cortes del grupo control y PRP&#46; Estas observaciones sugieren mayor actividad osteobl&#225;stica debido al efecto de la GH en este grupo&#46; No se observ&#243; actividad osteocl&#225;stica ni tejido inflamatorio&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia></li></ul></p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0240"><span class="elsevierStyleLabel">III&#46;</span><p id="par0455" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Resultados morfom&#233;tricos</span>&#58; una vez confirmada la fiabilidad del estudio se obtuvieron los resultados de las variables propuestas &#40;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#tbl0005">tablas 1&#8211;3</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0015"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0245"><span class="elsevierStyleLabel">IV&#46;</span><p id="par0460" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Resultados estad&#237;sticos de los datos morfom&#233;tricos&#58;</span> utilizando el software Statgraphics 5&#46;1&#46;&#44; aplicamos el test ANOVA buscando diferencias estad&#237;sticamente significativas entre los tres grupos de estudio&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0075"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0250"><span class="elsevierStyleLabel">1&#46;</span><p id="par0465" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Comparaci&#243;n de &#37; Aa total entre los grupos control&#44; PRP y GH</span>&#58; en cuanto al hueso neoformado total en los grupos control&#44; PRP y GH&#44; encontramos valores porcentuales claramente mayores en el grupo GH &#40;p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#41;&#44; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig&#46; 6</a>a&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0030"></elsevierMultimedia></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0255"><span class="elsevierStyleLabel">2&#46;</span><p id="par0470" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Comparaci&#243;n de &#37; Aa medular entre los grupos control&#44; PRP y GH&#58;</span> encontramos mayor neoformaci&#243;n &#243;sea dentro del conducto o cavidad medular en el grupo GH en comparaci&#243;n con el grupo control y el grupo PRP&#44; siendo la diferencia estad&#237;sticamente significativa &#40;p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#41;&#46; Este resultado demuestra que la GH tiene efecto positivo sobre la neoformaci&#243;n &#243;sea en comparaci&#243;n con PRP &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig&#46; 6</a>b&#41;&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0260"><span class="elsevierStyleLabel">3&#46;</span><p id="par0475" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Comparaci&#243;n &#37; Aa peri&#243;stica entre los grupos control&#44; PRP y GH&#58;</span> no encontramos grandes diferencias en el valor porcentual de hueso neoformado fuera del defecto relleno comparando los grupos control&#44; PRP y GH&#46; Esto podr&#237;a ser explicado por la t&#233;cnica quir&#250;rgica realizada&#44; en la que se ha llevado a cabo el cierre peri&#243;stico a trav&#233;s de la sutura en todos los animales&#44; por lo que no habr&#237;a salido ning&#250;n factor de crecimiento u hormona fuera del periostio&#46; Esto justificar&#237;a que la neoformaci&#243;n &#243;sea sea similar en los tres grupos &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig&#46; 6</a>c&#41;&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0265"><span class="elsevierStyleLabel">4&#46;</span><p id="par0480" class="elsevierStylePara elsevierViewall"><span class="elsevierStyleItalic">Comparaci&#243;n &#37; Aa biomaterial entre los grupos control&#44; PRP y GH&#58;</span> no se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de biomaterial entre el grupo de control&#44; PRP y GH&#46; En el plazo estudiado de 28 d&#237;as&#44; no parece haberse activado el proceso de reabsorci&#243;n del cemento de fosfato c&#225;lcico &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig&#46; 6</a>d&#41;&#46;</p></li></ul></p></li></ul></p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0090">Discusi&#243;n</span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0095">El tipo de modelo experimental animal</span><p id="par0485" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A&#47;&#46; Especie de animal&#58;</p><p id="par0490" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se eligi&#243; el conejo como modelo experimental porque alcanza la &#171;madurez esquel&#233;tica&#187; en torno a los 8-10 meses y ostenta un verdadero remodelado cortical con un &#171;turnover &#243;seo&#187; m&#225;s acelerado que el de otras especies<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; Esto lo convierte en un modelo apropiado para el estudio de f&#225;rmacos que regulan dicho remodelado&#46; El modelo m&#225;s id&#243;neo lo constituyen algunas especies de primates&#44; pero la investigaci&#243;n con estos modelos es costosa&#44; laboriosa y no exenta de riesgos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46;</p><p id="par0495" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La localizaci&#243;n elegida con mayor frecuencia es la tibia del animal por su facilidad de acceso<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a>&#46;</p><p id="par0500" class="elsevierStylePara elsevierViewall">B&#47;&#46; Influencia del sexo&#58; la utilizaci&#243;n de machos en nuestro estudio se fundamenta en que no est&#225;n sujetos a cambios c&#237;clicos hormonales&#46; Pensamos que la utilizaci&#243;n de hembras podr&#237;a aumentar la variabilidad de los resultados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46;</p><p id="par0505" class="elsevierStylePara elsevierViewall">C&#47;&#46; Influencia de la edad&#58; en conejos se han descrito una serie de diferencias morfol&#243;gicas que pueden explicar una intensidad de regeneraci&#243;n menor en animales viejos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46;</p><p id="par0510" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En nuestro trabajo se han utilizado animales de entre 8 y 12 meses de edad&#44; cuyo crecimiento esquel&#233;tico ha terminado&#46; A esta edad los conejos ya no muestran la excelente calidad osteorregenerativa que exhiben con menos de 2 meses de vida<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>&#46;</p></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0100">Zona y tama&#241;o del defecto &#243;seo</span><p id="par0515" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los estudios de la regeneraci&#243;n &#243;sea en conejos se han realizado en diferentes localizaciones anat&#243;micas&#58; la mand&#237;bula<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#44; el f&#233;mur<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>&#44; y la calvaria<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a> para valorar la reparaci&#243;n &#243;sea despu&#233;s de un da&#241;o provocado&#46;</p><p id="par0520" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La tibia ha sido utilizada por algunos autores<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">15&#44;16</span></a> para provocar defectos &#243;seos&#46; En particular&#44; la tibia proximal&#44; en su cara medial&#44; tiene una situaci&#243;n anatomoquir&#250;rgica susceptible para poder provocar defectos &#243;seos&#44; debido a que presenta una superficie amplia y ligeramente convexa&#44; que no posee inserciones musculares&#46; M&#225;s que de la localizaci&#243;n anat&#243;mica&#44; la reparaci&#243;n de los defectos &#243;seos depender&#225; del tama&#241;o del mismo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a>&#46;</p><p id="par0525" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la literatura&#44; los defectos &#243;seos tibiales m&#225;s utilizados en conejos han sido los defectos de espesor cortical total con forma circular de 3&#44; 6 y 8<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm de di&#225;metro<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a>&#46;</p><p id="par0530" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hemos elegido utilizar defectos de 6<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm&#44; de acuerdo con autores como Katthagen et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">18</span></a> que consideran que estos defectos no regeneran espont&#225;neamente&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0105">Biomateriales utilizados</span><p id="par0535" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hist&#243;ricamente&#44; se han utilizado autoinjertos&#44; aloinjertos &#243;seos adem&#225;s de una gran variedad de biomateriales para poder reparar defectos &#243;seos&#46;</p><p id="par0540" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El sustituto &#243;seo ideal ser&#237;a el que fuera biocompatible&#44; biorreabsorbible&#44; osteoconductivo&#44; de estructura similar al hueso&#44; de f&#225;cil utilizaci&#243;n cl&#237;nica y econ&#243;micamente barato&#46;</p><p id="par0545" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Entre los materiales de mayor inter&#233;s para reconstruir defectos &#243;seos se encuentran los biomateriales cer&#225;micos&#44; debido a sus reconocidas propiedades osteoconductivas&#44; comprobada biocompatibilidad&#44; capacidad de biodegradaci&#243;n&#44; disponibilidad cuantitativamente ilimitada&#44; aptitud para la vehiculizaci&#243;n de f&#225;rmacos y condiciones apropiadas para ser empleados como moldes para la ingenier&#237;a de tejidos&#46; A este grupo pertenece el cemento de fosfato &#945;-tric&#225;lcico<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">19&#44;20</span></a>&#46;</p><p id="par0550" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Sin embargo&#44; tras repasar la literatura&#44; no hemos encontrado estudios en los que se lleve a cabo una evaluaci&#243;n y comparaci&#243;n del efecto que producen la mezcla de cemento de fosfato c&#225;lcico con factores plaquetarios u hormona de crecimiento sobre la regeneraci&#243;n &#243;sea espont&#225;nea&#44; utilizando una metodolog&#237;a cuantitativa y un modelo de defecto &#243;seo en animales&#46;</p></span><span id="sec0050" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0110">Factores de crecimiento utilizados</span><p id="par0555" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A&#47;&#46; El PRP&#58; el PRP se considera como un biomaterial regenerativo que favorece la circulaci&#243;n de las c&#233;lulas madres&#44; proliferaci&#243;n de fibroblastos y s&#237;ntesis de col&#225;geno tipo <span class="elsevierStyleSmallCaps">I</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">21</span></a>&#46;</p><p id="par0560" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nuestros resultados morfom&#233;tricos no demostraron un efecto positivo de la PRP sobre la regeneraci&#243;n &#243;sea&#46; Coincidimos con trabajos de otros autores que tampoco han demostrado efecto positivo de la PRP sobre la regeneraci&#243;n &#243;sea<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">22</span></a>&#46;</p><p id="par0565" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Teniendo en cuenta el comprobado efecto positivo de los factores de crecimiento plaquetarios sobre los procesos de la regeneraci&#243;n &#243;sea&#44; parece ser que la causa de las diferencias entre los trabajos se debe a los distintos procedimientos de obtenci&#243;n de PRP utilizados por los autores&#46; Se ha comprobado una gran variaci&#243;n de la concentraci&#243;n de factores de crecimiento seg&#250;n la metodolog&#237;a de obtenci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">23</span></a>&#46;</p><p id="par0570" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el futuro parece ser necesario protocolizar esta metodolog&#237;a para conseguir la concentraci&#243;n exacta de factores de crecimiento plaquetario necesaria para obtener un efecto &#243;ptimo sobre la regeneraci&#243;n &#243;sea&#46;</p><p id="par0575" class="elsevierStylePara elsevierViewall">B&#47;&#46; Hormona de crecimiento&#58; la GH estimula la producci&#243;n de col&#225;geno y de prote&#237;nas no col&#225;genas por los osteoblastos&#59; y&#44; adem&#225;s&#44; al estimular la s&#237;ntesis de los factores de crecimiento semejantes a la insulina &#40;IGF&#41; por el h&#237;gado y los propios osteoblastos&#44; favorece la diferenciaci&#243;n de los preosteoblastos y la proliferaci&#243;n de osteoblastos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">24&#44;25</span></a>&#46;</p><p id="par0580" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El inter&#233;s de estas acciones sobre el tejido &#243;seo a nivel de defectos cr&#237;ticos radica en la posibilidad de la aplicaci&#243;n local de la GH a nivel cl&#237;nico&#46;</p><p id="par0585" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los datos obtenidos en nuestro trabajo de investigaci&#243;n&#44; con la aplicaci&#243;n local de GH&#44; han mostrado diferencias histomorfom&#233;tricas significativas entre el grupo control y el grupo GH&#46; A los 28 d&#237;as de la cirug&#237;a&#44; la GH en una dosis de 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>UI &#40;1&#44;2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#46;&#41;&#44; local aument&#243; significativamente los par&#225;metros de osteorregeneraci&#243;n&#58; la densidad de &#225;rea de neoformaci&#243;n &#243;sea en la cavidad medular&#46;</p><p id="par0590" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este sentido&#44; coincidimos con los datos obtenidos por Blom y Tresguerres<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0130"><span class="elsevierStyleSup">26&#44;27</span></a>&#46;</p><p id="par0595" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la bibliograf&#237;a hemos encontrado referencias de la utilizaci&#243;n de la GH<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">28</span></a> como agente terap&#233;utico&#44; mediante aplicaci&#243;n sist&#233;mica&#44; en tratamiento de fracturas&#46; Todos los autores coinciden en su efecto positivo sobre la curaci&#243;n de las fracturas&#44; no obstante&#44; la mayor&#237;a han reportado efectos sist&#233;micos adversos<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0140"><span class="elsevierStyleSup">28&#44;29</span></a>&#46; Sin embargo&#44; hay pocos estudios sobre su utilizaci&#243;n local&#44; y los que se han encontrado&#44; no informan de efectos sist&#233;micos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">30</span></a>&#46; Este hecho podr&#237;a justificar su inter&#233;s cl&#237;nico mediante su uso a trav&#233;s de aplicaci&#243;n local&#44; con lo que se obtendr&#237;an los beneficios que esta hormona aporta a la curaci&#243;n de las lesiones &#243;seas&#44; y se evitar&#237;an los efectos secundarios que podr&#237;a tener si se aplicara v&#237;a sist&#233;mica&#46;</p></span></span><span id="sec0055" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0115">Conclusiones</span><p id="par0600" class="elsevierStylePara elsevierViewall">De acuerdo con los resultados obtenidos de este estudio&#44; se pueden extraer las siguientes conclusiones&#58;<ul class="elsevierStyleList" id="lis0080"><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0270"><span class="elsevierStyleLabel">1&#46;</span><p id="par0605" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El aspecto macrosc&#243;pico del defecto cr&#237;tico&#44; tras su tratamiento&#44; es mejor en el grupo con PRP y en el grupo con GH que en el grupo control&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0275"><span class="elsevierStyleLabel">2&#46;</span><p id="par0610" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Histol&#243;gicamente se observ&#243; neoformaci&#243;n &#243;sea&#44; tanto dentro del defecto como fuera del mismo&#44; en los tres grupos&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0280"><span class="elsevierStyleLabel">3&#46;</span><p id="par0615" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El estudio cuantitativo morfom&#233;trico no detect&#243;&#44; sin embargo&#44; diferencias estad&#237;sticamente significativas entre la neoformaci&#243;n &#243;sea habida en el grupo con PRP y el grupo control&#46;</p></li><li class="elsevierStyleListItem" id="lsti0285"><span class="elsevierStyleLabel">4&#46;</span><p id="par0620" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se detectaron diferencias estad&#237;sticamente significativas que indicaban mayor neoformaci&#243;n &#243;sea en el grupo con GH frente a los otros dos grupos&#46;</p></li></ul></p><p id="par0625" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Conclusi&#243;n final&#58; la GH facilita la regeneraci&#243;n &#243;sea en defectos cr&#237;ticos&#44; rellenos con cemento de fosfato c&#225;lcico&#44; en el per&#237;odo de tiempo estudiado en conejos de raza Nueva Zelanda&#46;</p></span><span id="sec0060" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0120">Nivel de evidencia</span><p id="par0630" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Nivel de evidencia <span class="elsevierStyleSmallCaps">I</span>&#46;</p></span><span id="sec0065" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0125">Responsabilidades &#233;ticas</span><span id="sec0070" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0130">Protecci&#243;n de personas y animales</span><p id="par0635" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que los procedimientos seguidos se conformaron a las normas &#233;ticas del comit&#233; de experimentaci&#243;n humana responsable y de acuerdo con la Asociaci&#243;n M&#233;dica Mundial y la Declaraci&#243;n de Helsinki&#46;</p></span><span id="sec0075" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0135">Confidencialidad de los datos</span><p id="par0640" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que en este art&#237;culo no aparecen datos de pacientes&#46;</p></span><span id="sec0080" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0140">Derecho a la privacidad y consentimiento informado</span><p id="par0645" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran que en este art&#237;culo no aparecen datos de pacientes&#46;</p></span></span><span id="sec0090" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0145">Conflicto de intereses</span><p id="par0655" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa biomaterial&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa total&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">23&#44;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;51&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;51&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 3 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">19&#44;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;33&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;33&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 5 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">25&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;34&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;34&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 5 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">21&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;55&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;55&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 10 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">24&#44;4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;62&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;62&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 10 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">24&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;77&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;63&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;40&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 12 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">15&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;91&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;91&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 12 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">22&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;26&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;67&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;92&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 13 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">25&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">7&#44;03&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">7&#44;03&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control 13 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">18&#44;4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;57&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;42&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">7&#44;99&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></tbody></table>
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                  \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Referencia tratamiento&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa biomaterial&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa medular&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa peri&#243;stica&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa total&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 2 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">20&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 2 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">19&#44;4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;84&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;18&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;02&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 4 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;6&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;40&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;83&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;23&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 4 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">13&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;30&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;30&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 6 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">13&#44;4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;33&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;46&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;78&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 6 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">32&#44;6&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;93&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;93&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 9 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">23&#44;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;51&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;51&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 9 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">16&#44;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;33&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;33&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 11 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">22&#44;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;44&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;44&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">PRP 11 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">22&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;54&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa biomaterial&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa medular&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa peri&#243;stica&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37; Aa total&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 14 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">28&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">1&#44;26&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;77&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">6&#44;03&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 14 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">30&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;76&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 15 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">19&#44;8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;10&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">0&#44;67&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">5&#44;77&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 15 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">20&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;52&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">2&#44;73&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 16 dcha&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">23&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 16 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">27&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">4&#44;49&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">17&#44;8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">GH 17 izda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">20&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">3&#44;77&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="char" valign="top">28&#44;0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo

ISSN: 18884415
Idioma original: Español

DOI:10.1016/j.recot.2014.07.011

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2023 Junio	64	23	87
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