Aportaciones y avances de la genética forense en los sucesos con víctimas múltiples

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Como se introduce en la Guía para la identificación de víctimas, de la Comisión Técnica Nacional para sucesos con víctimas múltiples<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0005">1</a>, «en caso de un suceso con elevado número de víctimas, es prioritaria la labor de recuperación e identificación de los restos mortales para poder entregarlos a sus familiares en el menor tiempo posible».Los mecanismos que ocasionan este tipo de catástrofes son diversos, desde fenómenos naturales hasta la acción del hombre (actos de terrorismo o accidentes). La naturaleza de estos mecanismos, así como la magnitud del evento, tienen un impacto diferente sobre los cuerpos de las víctimas y, por tanto, sobre su integridad, lo que condiciona su identificación. En ocasiones, el grado de afectación de los cuerpos compromete el uso de los procedimientos forenses de identificación clásicos (antropométricos, dactilares u odontológicos), es entonces cuando el uso del análisis genético con fines de identificación puede aportar un valor resolutivo.El éxito en el proceso de identificación mediante análisis genético debe seguir algunas pautas que resultan imprescindibles en este tipo de actuaciones. En este sentido, distintos organismos y grupos de estandarización mundiales han emitido guías y recomendaciones, entre ellas, las publicadas por Interpol<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0010">2</a>, la Sociedad Internacional de Genética Forense (International Society for Forensic Genetics, ISFG)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0015">3</a>, la Cruz Roja Internacional<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0020">4</a>,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0025">5</a>, o el propio Real Decreto 32/2009, del 16 de enero, por el que se aprueba el Protocolo Nacional de Actuación Médico-forense y de Policía Científica en Sucesos con Víctimas Múltiples<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0030">6</a>, cuyos estándares científicos con respecto a la identificación genética fueron revisados por Vallejo y Alonso en 2009<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0035">7</a>. En todas ellas se hace especial mención al carácter multidisciplinar del proceso, en el que distintos colectivos y profesionales, de manera coordinada y pautada, intervienen en el proceso de identificación.Actualmente, la genética forense cuenta con nuevas estrategias de análisis y herramientas bioinformáticas, que aportan una mayor fiabilidad y rapidez en el proceso de identificación genética de víctimas de SVM. En el presente artículo, se desglosan las distintas recomendaciones emitidas por la ISFG en esta materia y se revisan algunos avances metodológicos y tecnológicos, que prometen ser de gran utilidad en la identificación de cadáveres. Por último, se revisa la problemática asociada al paso final del proceso identificativo y la utilidad de las herramientas bioinformáticas en el mismo.Recomendaciones de la Sociedad Internacional de Genética Forense  para el uso de marcadores genéticos en sucesos con víctimas múltiplesLa DNA Comission de la ISFG publicó en el año 2007 una guía de 12 recomendaciones relativas al papel de la genética forense en los procesos de investigación<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0015">3</a>, las cuales quedan encuadradas en 4 bloques principales. El primero de ellos (recomendaciones 1 y 2) hace referencia a la importancia de la planificación de los distintos aspectos relacionados con la intervención en el suceso. En dicha planificación, los laboratorios de identificación genética deben participar de manera activa en aspectos operativos, especialmente en aquellos relacionados con la elección más adecuada de muestras y condiciones de envío y preservación. Además, es necesario que los laboratorios que participan sean capaces de establecer la capacidad operativa de los mismos, en términos de agilidad en la respuesta, y definir el personal responsable de las distintas fases del proceso.Un segundo bloque de recomendaciones está dedicado a la selección de las muestras biológicas de interés (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>). La velocidad en la recogida de muestras post mortem, su correcta preservación y la elección adecuada de las mismas (recomendación 3) son aspectos críticos para poder asegurar el éxito en el proceso de identificación genética. En este sentido, la correcta identificación y trazabilidad de las muestras debe garantizarse durante todo el proceso. Como muestra post mortem es preferible la sangre cuando el cadáver, o el resto a identificar, muestre un aspecto preservado. Por el contrario, cuando se aprecien signos de degradación en los restos, se recomienda el análisis de fragmento de hueso largo (p. ej., fémur, húmero) o molar en buen estado de preservación (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>). La recogida de muestras biológicas post mortem es recomendable incluso cuando el cadáver haya sido identificado por otros medios.<elsevierMultimedia ident="t0005"></elsevierMultimedia>Por su parte, la elección adecuada de las muestras de referencia (recomendación 4) dependerá de los familiares disponibles, prefiriéndose aquellos familiares con vínculo genético directo (p. ej., progenitor/es o descendiente/s en primer grado) (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>). Se recomienda la toma del mayor número posible de familiares. En todos los casos, es necesario contar con un documento de consentimiento informado que incluirá la información y datos, atendiendo a estándares internacionales y locales. En ocasiones, de manera alternativa o complementaria, se recurre a muestras ante mortem, consistentes en objetos usados por la víctima o tomas biológicas extraídas a partir de esta (p. ej., tomas hospitalarias) (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>). Para su uso como muestras atribuidas, es imprescindible asegurar la autenticidad de las mismas.Los genetistas forenses son una pieza fundamental para orientar en la elección de las muestras ante y post mortem más adecuadas, lo cual favorece en la agilidad del resultado y la seguridad de este.La especial complejidad que conlleva el análisis de muestras post mortem hace recomendar la cualificación contrastada de los laboratorios implicados en el análisis de este tipo de muestras (recomendación 5). El alto poder de discriminación que aporta el análisis de marcadores STR autosómicos los convierte en la primera opción analítica. Al menos deben emplearse 12 STR que, llegado el caso, deberán estar consensuados con los países implicados en el suceso (recomendación 6). Actualmente, este tipo de kits comerciales suelen incluir un mayor número de STR consensuados por la comunidad científica internacional, lo cual permite dar una respuesta adecuada a esta recomendación.La naturaleza de este tipo de muestras post mortem, a menudo afectadas por la degradación o presencia de posibles inhibidores, puede ocasionar, tras su análisis genético, la aparición de ciertos artefactos en el perfil (p. ej., pérdidas alélicas), que pueden derivar en la asignación de perfiles genéticos incorrectos y, por tanto, en errores durante el proceso de identificación. Por ello, la recomendación 7 hace referencia a la necesidad de establecer protocolos técnicos que permitan asegurar la asignación alélica realizada sobre la muestra analizada. En ocasiones, el grado de afectación de la muestra o la disponibilidad de familiares no directos impide el empleo de marcadores STR autosómicos. Así, la recomendación 8 propone el uso de polimorfismos de un único nucleótido (SNP, del inglés Single Nucleotide Polymorphisms), de marcadores STR del cromosoma Y o el análisis del ADN mitocondrial (ADNmt), si bien, estos 2 últimos tipos de marcadores genéticos ofrecen un menor poder de discriminación derivado de su patrón de herencia monoparental.El último bloque de recomendaciones abunda en los aspectos relativos al procesamiento de datos. La recomendación 9 alude a la necesidad de contar con bases de datos centralizadas y la importancia del volcado electrónico de los perfiles genéticos para evitar posibles errores de transcripción. En este sentido, en la actualidad existen diferentes herramientas bioinformáticas que permiten dar respuesta a esta importante necesidad, y sobre las que se incidirá con más detalle en el último apartado de este artículo. Por su parte, la recomendación 10 alude a la importancia de contar con otras herramientas de identificación complementarias (p. ej., estudios antropométricos), especialmente en situaciones en las que hay varios miembros de una misma familia entre las víctimas.Cuando se produce una coincidencia genética entre fragmentos post mortem o bien una compatibilidad del resto post mortem con un determinado familiar o grupo familiar es necesario establecer un valor mínimo a partir del cual, estadísticamente, sea posible establecer la identidad como fiable. Se recomienda el empleo del cociente de verosimilitud (likelihood ratio -LR-) (recomendación 11). Ese valor umbral va a depender de varios factores, por ejemplo, del número de víctimas implicadas en el suceso, aumentando a medida que ese número se incrementa<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0040">8</a> u otro tipo de circunstancias (p. ej., población cerrada o abierta). Durante la preparación y ejecución del proceso de identificación se genera gran cantidad de información, registros, muestras o extractos de ADN, por ello, los laboratorios deben tener descrito en sus procedimientos de trabajo como gestionar esta información, así como los datos derivados, la política de comunicación de resultados a los familiares y prever el almacenamiento, entrega o eliminación del material biológico recuperado (recomendación 12).Avances y nuevas herramientas en genética forenseEl análisis de polimorfismos del ADN se ha convertido en el estándar de referencia (gold standard) para la identificación de víctimas tanto en SVM como en casos forenses en los que los restos humanos están muy fragmentados y/o degradados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0045">9</a>,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0050">10</a>. Esto se debe, fundamentalmente, al alto grado de discriminación que puede proporcionar la identificación basada en el ADN. Desde el punto de vista genético existen numerosos retos, entre otros: el elevado número de víctimas, los mecanismos de destrucción, grado de fragmentación, la disponibilidad de familiares o la existencia de muestras ante mortem, que serán cruciales para el proceso final de identificación.En los últimos 20 años, la genética forense ha experimentado importantes avances técnicos y tecnológicos que pueden contribuir en la labor de identificación de las víctimas en SVM. A continuación, se dará una visión general sobre aquellos principales avances desde distintas perspectivas: fuente de ADN, recuperación de ADN, marcadores genéticos y métodos de análisis.Fuente de ADNEn el Protocolo nacional de actuación Médico-forense y de Policía Científica en sucesos con víctimas múltiples (Anexo VII.1)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0030">6</a>, así como en las Normas para la preparación y remisión de muestras objeto de análisis por el INTCF (arts. 30 y 32)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0055">11</a>, se detallan el tipo de muestras necesarias (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>) y las condiciones de envío para este tipo de estudios de identificación en SVM.Aparte del tipo de muestras más adecuadas señaladas en estas referencias, recientes estudios han puesto de manifiesto la disponibilidad de ADN procedente de determinados tejidos y órganos, no considerados previamente a efectos de identificación genética, con resultados prometedores. Además, tales fuentes de ADN pueden ofrecer un ahorro de tiempo y de recursos para los equipos de SVM, en comparación con largos procesos de recolección de muestras, así como de preparación y extracción de ADN a partir de las muestras tradicionalmente empleadas (p. ej., fémur). Así, se ha comprobado que, a partir de restos humanos enterrados durante períodos de tiempo de entre 4 y 42 años, el ADN/ARN es más estable en ciertos órganos, como cerebro o corazón, obteniéndose perfiles genéticos de buena calidad y con menores signos de degradación que a partir de otros órganos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0060">12</a>. 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Son los denominados sistemas de Rapid DNA<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0090">18</a>, completamente portables al lugar de los hechos y que no requieren de una gran formación técnica. Su utilidad y efectividad han quedado demostradas, por ejemplo, en el caso del laboratorio móvil de la Gendarmerie francesa (mobil'DNA), trasladado al lugar del incidente aéreo del vuelo 9525 de Germanwings en 2015<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0095">19</a>, o a Niza en 2016 y Beirut en 2020, con motivo de los respectivos atentados, y del que el gobierno francés ha proporcionado recientemente una unidad a Ucrania para la identificación de víctimas del conflicto bélico actual. Sin embargo, estos sistemas no tienen una gran sensibilidad, por lo que no serían apropiados en aquellos casos con muestras afectadas por la degradación.Otras de las técnicas que pueden ser de interés en este tipo de sucesos son las denominadas Direct-to-PCR<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0100">20</a>, que consisten en añadir directamente las muestras biológicas al tubo de PCR. Este tipo de técnicas reducen considerablemente los tiempos de obtención de resultados, al eliminar el paso de extracción de ADN. No obstante, el éxito y calidad de los perfiles recuperados dependerá, evidentemente, de la naturaleza del material muestreado y de la presencia de inhibidores de la PCR, que generalmente se eliminan durante el proceso de extracción de ADN. Combinados con esta técnica, también se han descrito conservantes que capturan el ADN del tejido recuperado y lo retienen en una solución que puede ser usada directamente en el proceso de PCR<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0105">21</a>.Marcadores genéticosLos marcadores genéticos que habitualmente se utilizan en este tipo de sucesos son los STR autosómicos, que tienen un alto poder de discriminación<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0045">9</a>. Adicionalmente, en algunos casos, dependiendo de los familiares disponibles (p. ej., solo hermanos varones), también pueden ser útiles los marcadores STR del cromosoma Y, que permiten establecer linajes paternos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0110">22</a>, o los STR del cromosoma X<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0115">23</a>. Para estos 3 tipos de marcadores, existen numerosos kits comerciales de distintas empresas, muy estandarizados y validados internamente en la mayor parte de los laboratorios de genética forense<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0070">14</a>. El ADNmt, de herencia materna, también suele ser de gran utilidad en el campo forense, sobre todo en casos de personas desaparecidas y restos no identificados, cuando no se dispone de suficiente ADN nuclear, debido al elevado número de copias de ADNmt por célula y su conformación circular, lo que le hace ser más resistente a la degradación<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0120">24</a>, así como para confirmar/descartar relaciones de parentesco por vía materna con familiares de segundo grado o superior. Sin embargo, el ADNmt tiene muy bajo poder de discriminación, lo que le hace, a pesar de sus ventajas con muestras degradadas, tener limitada resolución en SVM.Más recientemente, para los casos de SVM en los que el ADN recuperado se encuentra degradado y/o con presencia de inhibidores, se dispone de algunos marcadores menos susceptibles a la degradación, lo que puede ayudar en el genotipado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0075">15</a>. Este es el caso de los SNP, que son variaciones de secuencia de una única base, cuyo amplicón (fragmento de ADN resultante de la amplificación) suele ser mucho más corto, lo que ofrece una ventaja frente a muestras degradadas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0125">25</a>. En la actualidad, existen paneles comerciales validados de hasta 90 SNP autosómicos, con probabilidades de coincidencia al azar mejores que para el conjunto de marcadores STR habitualmente usados en el campo forense<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0130">26</a>. Pero su potencialidad aún va más allá, con la implementación de marcadores y metodologías de análisis del pujante campo de la genealogía genética investigativa<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0135">27</a>, en la que se podrían analizar más de 600.000 SNP. No obstante, para su aplicación dentro del campo forense, recientemente se ha desarrollado un panel comercial que cuenta con 10.230 SNP<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0140">28</a>. Gracias a este elevado número de marcadores, potencialmente, es posible establecer relaciones de parentesco más lejanas (p. ej., de primos terceros), lo que facilitaría el estudio en casos de SVM cuando no se dispusiera de familiares más directos (p. ej., padres, hijos o hermanos).Por otro lado, mientras que, tradicionalmente, el análisis de ADN en el contexto de identificación forense se ha basado estrictamente en la comparación con familiares o muestras ante mortem, los avances recientes están permitiendo que, en determinados casos puntuales, se utilicen marcadores de ADN altamente informativos para la predicción de características visibles externamente (EVC, del inglés Externally Visible Characteristics) y de ascendencia biogeográfica (BGA, del inglés BioGeographical Ancestry)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0145">29</a>. Dentro de este campo están los SNP informativos de fenotipo (piSNP) y los SNP informativos de ascendencia (aiSNP), cuyo análisis puede proporcionar información valiosa como, por ejemplo, el color de los ojos, del pelo o de la piel, o indicios sobre la ascendencia biogeográfica del donante del ADN, datos que pueden ser útiles para la identificación de cadáveres cuando no se dispone de muestras de referencia con las que cotejar. En este sentido, está siendo de gran importancia el proyecto internacional VISAGE<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0150">30</a>, para el desarrollo de paneles de SNP y herramientas bioinformáticas.Métodos de análisisEn la actualidad, la mayor parte de los laboratorios de genética forense obtienen sus perfiles de ADN mediante la electroforesis capilar (EC), método estandarizado que se basa en la separación de fragmentos de ADN en función de la carga/tamaño de los mismos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0155">31</a>.Sin embargo, ya son un futuro cada vez más presente las nuevas tecnologías como es la secuenciación masiva en paralelo (MPS, del inglés Massively Parallel Sequencing). La MPS permite un aumento sustancial en el rendimiento, gracias a que se puede analizar simultáneamente un elevado número de marcadores genéticos y de muestras a precios cada vez más asequibles. Además, al tratarse de una secuenciación simultánea, no basada en el tamaño de fragmentos, se han diseñado paneles con tamaños de amplicón más pequeños, con lo que es una tecnología ideal para muestras degradadas, como las que se pueden encontrar en los casos SVM o en identificación de personas desaparecidas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160">32</a>.Por MPS, los marcadores STR forenses comúnmente empleados son más informativos (con mayor poder de discriminación), ya que permiten la detección de SNP, indetectables por EC, tanto dentro de las regiones repetitivas de los STR como en las regiones flanqueantes<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160">32</a>. Además, junto a la información de identificación de los STR, se pueden secuenciar grandes paneles de SNP, para aumentar el poder de discriminación con SNP autosómicos, así como añadir información sobre la ascendencia y el fenotipo del donante de la muestra<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160">32</a>. Con respecto al análisis del ADN mitocondrial, se puede reducir aún más el tamaño de los amplicones, haciéndolos solapantes, y aumentando la región secuenciada, lo que puede aumentar el poder de discriminación de este marcador. Pero, además, permite simplificar el complejo análisis del ADNmt por secuenciación basada en el método de Sanger, permitiendo un mayor rendimiento, sin apenas intervención del operario<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160">32</a>.Herramientas bioinformáticas de comparaciónLa fase final del proceso de identificación genética de víctimas de un SVM es el cotejo entre los perfiles genéticos obtenidos a partir de las muestras post mortem y los perfiles genéticos de muestras atribuidas a las personas desaparecidas, o bien de muestras tomadas a sus familiares (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>). Lógicamente, existen diferencias en cuanto a la forma de realizar dicha comparación según el origen de las muestras de referencia. En el caso de muestras atribuidas (ante mortem), se buscarán coincidencias completas con los perfiles genéticos de las muestras post mortem. Cuando el cotejo ha de realizarse frente a los perfiles genéticos de los familiares, el objetivo de la búsqueda es encontrar un familiar o grupo familiar que sea compatible para la relación de parentesco investigada. Así, si se dispone de familiares en primer grado (ascendientes o descendientes directos) y de perfiles genéticos de marcadores STR autosómicos, con la búsqueda se trata de localizar aquel perfil genético que comparta al menos un alelo en todos los marcadores analizados (salvo ocurrencia de mutación). Cuando la relación de parentesco es más lejana, conviene analizar adicionalmente otro tipo de marcadores, p. ej., marcadores haplotípicos, que permiten establecer relaciones de parentesco por vía paterna (haplotipos de marcadores STR del cromosoma Y) o materna (haplotipos de ADNmt) y cuya información nos permitirá reforzar la compatibilidad, o bien excluir una relación de parentesco en casos de compatibilidades fortuitas con los marcadores autosómicos. En el supuesto de que los cuerpos de las víctimas estén fragmentados, conviene hacer previamente una reasociación de todos los fragmentos de un mismo cuerpo y seleccionar el perfil genético más completo disponible para ese conjunto de fragmentos para utilizarlo como perfil representativo de la víctima en cuestión, ya que, reduciendo el número de perfiles intervinientes en las comparaciones, se facilitará el procesamiento de los datos.Hay múltiples factores que influyen en la fase de comparación de perfiles genéticos. Un aspecto importante radica en si el evento es, respecto al conocimiento previo del número e identidad de los fallecidos, de carácter abierto (p. ej., desastre natural) o cerrado (p. ej., accidente de avión, en el que, en principio, la lista de posibles víctimas está disponible). Lógicamente, en el segundo caso será más fácil acceder a todas las muestras de referencia necesarias (sean ante mortem o de familiares) que en el primer caso. Por otro lado, la magnitud del evento, el número de víctimas, la integridad o desmembramiento de los cuerpos, así como determinadas circunstancias del evento que pueden facilitar la degradación de los restos humanos (p. ej., inundación o incendio) y, por tanto, dificultar la obtención de perfiles genéticos completos, influirán también en la complejidad del cotejo y en el resultado final. La accesibilidad a muestras de referencia también puede verse perjudicada en el caso de eventos que afecten a víctimas de ámbito internacional, sin pasar por alto que, en determinados casos, puede ser necesario también recurrir a bases de datos genético-poblacionales diferentes a la usada habitualmente. Asimismo, el tiempo transcurrido entre el evento y la realización de los análisis genéticos y cotejo es un factor que juega en contra, ya que afecta tanto a la conservación de los restos humanos sin identificar y, por tanto, a la posibilidad de obtener la máxima información genética de los mismos, como a la posibilidad de obtención de las muestras de referencia idóneas (muestras atribuidas o de familiares directos). Un ejemplo ilustrativo de este último factor lo encontramos en la actualidad en nuestro país ante el proyecto del Banco Estatal de ADN de Víctimas de la Guerra y la Dictadura (art. 23, Ley 20/2022, de 19 de octubre)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0165">33</a>, con el que se pretende la identificación de víctimas de hechos acaecidos hasta hace 87 años, cuyos principales retos se centran en: 1) la degradación del ADN de los restos, que será muy variable en función de las condiciones de conservación, y 2) la ausencia de familiares directos, que obligará a recurrir a familiares en segundo, tercer o cuarto grado (nietos/as, sobrinos/as, primos/as) y, por lo tanto, al diseño de pedigríes complejos. Asimismo, en este tipo de situaciones, puede sumarse la dificultad añadida de que muchos cuerpos pueden estar en fosas comunes con la consiguiente posibilidad de mezcla de restos de diferentes individuos o, incluso, con individuos no relacionados con el evento en cuestión.La complejidad en el proceso de comparación entre múltiples muestras y las diferentes variables comentadas, hace imprescindible que el proceso sea llevado a cabo mediante el empleo de herramientas bioinformáticas avanzadas que permitan optimizar la detección de eventuales coincidencias/compatibilidades, así como su correspondiente valoración estadística<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0170">34</a>.Actualmente, en España, la base de datos nacional de identificadores obtenidos a partir del ADN (regulada en la LO 10/2007, de 8 de octubre)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0175">35</a> se encuentra alojada en la aplicación CODIS (Combined DNA Index System), cedida gratuitamente por el FBI (Departamento de Justicia de Estados Unidos) al Ministerio del Interior, en cuya Secretaría de Estado de Seguridad reside la administración a nivel nacional de dicha base de datos. Esta base de datos se alimenta con los perfiles genéticos obtenidos en los laboratorios de genética forense de las Fuerzas y Cuerpos de Seguridad, tanto de ámbito estatal (Cuerpo Nacional de Policía y Guardia Civil) como de ámbito autonómico (Mossos d'Esquadra, Ertzaintza y Policía Foral de Navarra), así como del Instituto Nacional de Toxicología y Ciencias Forenses, dependiente del Ministerio de Justicia.En este repositorio, aparte del índice de perfiles genéticos de interés criminal (en el que se almacenan y comparan los perfiles genéticos dubitados e indubitados de todas aquellas muestras recogidas o tomadas en relación con la investigación de los delitos que la propia ley especifica), existe un índice de interés social, en el que se integran tanto los perfiles genéticos ante mortem e indubitados de los familiares de personas desaparecidas como los perfiles genéticos obtenidos a partir de cadáveres o restos humanos sin identificar, con el único fin de la identificación de estos últimos.Como se comentaba anteriormente, el éxito en la identificación va a depender en gran medida de la calidad de los perfiles genéticos obtenidos a partir de los restos post mortem y de la disponibilidad de muestras de referencia idóneas (ver recomendaciones de la ISFG<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0015">3</a>). En el caso de imposibilidad de obtener muestras de ninguno de los familiares recomendados, y tampoco muestras ante mortem fidedignas, puede recurrirse a otros familiares más lejanos, pero, en ese caso, es altamente recomendable disponer del mayor número de familiares posibles.Hoy en día, los programas informáticos que se emplean para realizar las comparaciones disponen de la opción de construir árboles familiares (pedigrís) contra los que realizar las búsquedas comparativas, lo que permite extraer la máxima información posible del grupo familiar y, por tanto, maximizar las posibilidades de identificación. En este sentido, recientemente, los laboratorios integrados en COMSIGENI (COMité para la regulación y coordinación del SIstema de GEstión Nacional de Identificadores obtenidos a partir del ADN) han participado en un ejercicio colaborativo consistente en un simulacro de SVM. La finalidad de dicho ejercicio ha sido que todas las instituciones se familiaricen en el manejo del módulo de gestión de pedigrís disponible en CODIS, además de medir las limitaciones y problemática que podemos encontrar en la identificación genética con fines humanitarios utilizando dicha aplicación. Como fruto de este ejercicio, que ha sido valorado muy positivamente por todas las instituciones, se está elaborando actualmente una Guía para la identificación genética mediante el uso de CODIS en Sucesos con Víctimas Múltiples (SVM) que servirá de manual de referencia en nuestro país para la gestión de perfiles genéticos y su comparación mediante pedigrís en CODIS en relación con este tipo de eventos.La importancia de este tipo de ejercicios colaborativos ya se había puesto de manifiesto en una iniciativa anterior, promovida desde el Grupo de Habla Española y Portuguesa de la ISFG (GHEP-ISFG), en cuyo seno se organizaron 2 ejercicios colaborativos a nivel internacional sobre la identificación de víctimas en desastres (Disaster Victim Identification, DVI)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0180">36</a>,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0185">37</a>. Con estos ejercicios se pretendía explorar la correcta reasociación de restos, la identificación de víctimas a través del análisis de parentesco, incluyendo víctimas relacionadas, el manejo de mutaciones o de un número insuficiente de familiares de referencia, todo ello trabajando dentro de un marco bayesiano, así como valorar el correcto uso de las aplicaciones bioinformáticas empleadas.Aparte de CODIS, existen otras aplicaciones bioinformáticas empleadas en este ámbito, de las cuales, a continuación, se describen las más destacadas. Cabe mencionar el reciente desarrollo de aplicaciones de código abierto (open-source), como SmartRank, ForeStatistics oGENis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0075">15</a> Entre estos desarrollos, merece especial mención la integración del Módulo DVI<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0190">38</a>, específico para la identificación de víctimas de un SVM, en el programa gratuito Familias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0195">39</a>, que posibilita calcular probabilidades y verosimilitudes en casos en los que conocemos los perfiles genéticos de algunos individuos, pero sus relaciones familiares presentan dudas, ya que permite tener en cuenta múltiples pedigrís alternativos y puede computar qué pedigrí es más probable, y cuánto más probable lo es respecto al resto de pedigríes. Una característica que diferencia a Familias es su capacidad para tratar con casos complejos, en los que se ha de tener en cuenta la posibilidad de que ocurran mutaciones, junto con la posibilidad de manejar diferentes pedigrís simultáneamente.De gran aplicación en este campo es también el programa M-FISys® (Mass Fatality Identification System)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0200">40</a>, desarrollado por la compañía estadounidense Gene Codes Corp. para la identificación de las víctimas del atentado contra el World Trade Center en 2001. M-FISys® es capaz de integrar y filtrar una amplia variedad de datos (como descripciones antropológicas, ubicación donde se recuperaron los restos -incluidos GPS o coordenadas de cuadrícula- e identificaciones realizadas por huellas dactilares, métodos dentales u otros, con acceso a documentos de respaldo que incluyen imágenes y archivos PDF asociados con cada muestra). Este software fue el primero en combinar datos de marcadores STR, ADNmt y SNP de manera integrada, con informes de progreso y gestión de flujo de trabajo, incluidas herramientas de revisión administrativa para establecer la cadena de custodia de las muestras y registros de auditoría en operaciones críticas. Incluye herramientas de control de calidad que le permiten detectar inconsistencias que pueden ser el resultado de restos mezclados, cambios de muestra o contaminación y reducen en gran medida la posibilidad de una identificación falsa.Por último, otra aplicación de gran versatilidad es Bonaparte<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0205">41</a> (de la compañía holandesa SMART Research BV). Bonaparte ha sido validado en el ámbito forense en distintos escenarios internacionales (NFI, Netherlands Forensic Institute; ACIC, Australian Criminal Intelligence Commission) y ha sido adquirido recientemente por INTERPOL dentro del programa internacional I-Familia, para la identificación de personas desaparecidas en todo el mundo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0210">42</a>. Este software permite la creación de pedigrís complejos y emplea un algoritmo matemático abierto basado en un modelo de inferencia bayesiana para el cálculo de LR (Likelihood Ratio, cociente de verosimilitud) adaptable a cualquier tipo de relación familiar investigada. Además, es escalable a miles de marcadores SNP, de gran utilidad en el análisis de muestras degradadas, y que, como se comentó anteriormente, usados en un número elevado permiten establecer, con un alto grado de fiabilidad, relaciones de parentesco con familiares lejanos." 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entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">No descompuesto, cuerpo entero \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Sangre (en tarjeta o hisopo) e hisopos bucales</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">No descompuesto, fragmentado \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Si está disponible, sangre</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Tejido muscular de color rojo intenso (∽1 g)</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Cuerpos enteros y restos fragmentados descompuestos \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Huesos largos y compactos (cortes de 4–6 cm en ventana, sin separar la diáfisis)</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Dientes sanos sin empastes (preferiblemente molares)</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Cualquier hueso disponible (∽10 g, si es posible; preferiblemente hueso cortical denso)</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cuerpos severamente quemados \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="2" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cualquiera de las muestras anteriores</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " colspan="3" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="3" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Muestras de referencia de familiares (por orden de preferencia)</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="3" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Ambos progenitores</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="3" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Un progenitor</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="3" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Hijos y cónyuge</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_colgroup " colspan="3" align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Hijos</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; 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entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Calidad del ADN \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Habitualmente disponibles \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Podrían estar disponibles \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Óptima \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Cepillos de dientes; maquinillas de afeitar eléctricas y manuales; cepillos y peines de pelo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Muestras de donaciones y/o biobancos (sangre, médula ósea, esperma, cordón umbilical); otras muestras clínicas (sangre o suero) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Límite \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Peines; barras de labios; desodorantes en barra; ropa interior usada; fundas de almohada; tazas y/o vasos usados \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Bloques de parafina; frotis cervicales; recortes de uñas; colillas de cigarro; protector bucal o férula dental; cascos, gorras o sombreros; tapones para los oídos, auriculares; gafas; bolígrafos o lápices con marcas de dientes; sobres o postales. \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Escasa \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Joyas; relojes de pulsera; ropas; toallas; zapatos; bandas para el pelo u orejeras \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Pelo de bebé; dentadura postiza; rulos; cortaúñas o tijeras \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab3244010.png" ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Muestras recomendadas para analizar en los casos de sucesos con víctimas múltiples según tipo: muestras post mortem, muestras de referencia de familiares y muestras ante mortem" ] ] ] "bibliografia" => array:2 [ "titulo" => "Bibliografía" "seccion" => array:1 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "bs0005" "bibliografiaReferencia" => array:42 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "bb0005" "etiqueta" => "1." 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Artículo especial

Aportaciones y avances de la genética forense en los sucesos con víctimas múltiples

Contributions and advances of forensic genetics in mass fatality incidents

Manuel Crespillo Márqueza,

Autor para correspondencia

manuel.crespillo@justicia.es

Autor para correspondencia.

, Pedro A. Barrio Caballerob, María José Farfán Espunyb

a Servicio de Biología, Instituto Nacional de Toxicología y Ciencias Forenses, Barcelona, España

b Servicio de Biología, Instituto Nacional de Toxicología y Ciencias Forenses, Madrid, España

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desde fen&#243;menos naturales hasta la acci&#243;n del hombre &#40;actos de terrorismo o accidentes&#41;&#46; La naturaleza de estos mecanismos&#44; as&#237; como la magnitud del evento&#44; tienen un impacto diferente sobre los cuerpos de las v&#237;ctimas y&#44; por tanto&#44; sobre su integridad&#44; lo que condiciona su identificaci&#243;n&#46; En ocasiones&#44; el grado de afectaci&#243;n de los cuerpos compromete el uso de los procedimientos forenses de identificaci&#243;n cl&#225;sicos &#40;antropom&#233;tricos&#44; dactilares u odontol&#243;gicos&#41;&#44; es entonces cuando el uso del an&#225;lisis gen&#233;tico con fines de identificaci&#243;n puede aportar un valor resolutivo&#46;</p><p id="p0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El &#233;xito en el proceso de identificaci&#243;n mediante an&#225;lisis gen&#233;tico debe seguir algunas pautas que resultan imprescindibles en este tipo de actuaciones&#46; En este sentido&#44; distintos organismos y grupos de estandarizaci&#243;n mundiales han emitido gu&#237;as y recomendaciones&#44; entre ellas&#44; las publicadas por Interpol<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0010"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#44; la Sociedad Internacional de Gen&#233;tica Forense &#40;<span class="elsevierStyleItalic">International Society for Forensic Genetics</span>&#44; ISFG&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0015"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#44; la Cruz Roja Internacional<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0020"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0025"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#44; o el propio Real Decreto 32&#47;2009&#44; del 16 de enero&#44; por el que se aprueba el Protocolo Nacional de Actuaci&#243;n M&#233;dico-forense y de Polic&#237;a Cient&#237;fica en Sucesos con V&#237;ctimas M&#250;ltiples<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#44; cuyos est&#225;ndares cient&#237;ficos con respecto a la identificaci&#243;n gen&#233;tica fueron revisados por Vallejo y Alonso en 2009<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0035"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46; En todas ellas se hace especial menci&#243;n al car&#225;cter multidisciplinar del proceso&#44; en el que distintos colectivos y profesionales&#44; de manera coordinada y pautada&#44; intervienen en el proceso de identificaci&#243;n&#46;</p><p id="p0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Actualmente&#44; la gen&#233;tica forense cuenta con nuevas estrategias de an&#225;lisis y herramientas bioinform&#225;ticas&#44; que aportan una mayor fiabilidad y rapidez en el proceso de identificaci&#243;n gen&#233;tica de v&#237;ctimas de SVM&#46; En el presente art&#237;culo&#44; se desglosan las distintas recomendaciones emitidas por la ISFG en esta materia y se revisan algunos avances metodol&#243;gicos y tecnol&#243;gicos&#44; que prometen ser de gran utilidad en la identificaci&#243;n de cad&#225;veres&#46; Por &#250;ltimo&#44; se revisa la problem&#225;tica asociada al paso final del proceso identificativo y la utilidad de las herramientas bioinform&#225;ticas en el mismo&#46;</p></span><span id="s0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0030">Recomendaciones de la Sociedad Internacional de Gen&#233;tica Forense&#160; para el uso de marcadores gen&#233;ticos en sucesos con v&#237;ctimas m&#250;ltiples</span><p id="p0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La <span class="elsevierStyleItalic">DNA Comission</span> de la ISFG public&#243; en el a&#241;o 2007 una gu&#237;a de 12 recomendaciones relativas al papel de la gen&#233;tica forense en los procesos de investigaci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0015"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#44; las cuales quedan encuadradas en 4 bloques principales&#46; El primero de ellos &#40;recomendaciones 1 y 2&#41; hace referencia a la importancia de la planificaci&#243;n de los distintos aspectos relacionados con la intervenci&#243;n en el suceso&#46; En dicha planificaci&#243;n&#44; los laboratorios de identificaci&#243;n gen&#233;tica deben participar de manera activa en aspectos operativos&#44; especialmente en aquellos relacionados con la elecci&#243;n m&#225;s adecuada de muestras y condiciones de env&#237;o y preservaci&#243;n&#46; Adem&#225;s&#44; es necesario que los laboratorios que participan sean capaces de establecer la capacidad operativa de los mismos&#44; en t&#233;rminos de agilidad en la respuesta&#44; y definir el personal responsable de las distintas fases del proceso&#46;</p><p id="p0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Un segundo bloque de recomendaciones est&#225; dedicado a la selecci&#243;n de las muestras biol&#243;gicas de inter&#233;s &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>&#41;&#46; La velocidad en la recogida de muestras <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span>&#44; su correcta preservaci&#243;n y la elecci&#243;n adecuada de las mismas &#40;recomendaci&#243;n 3&#41; son aspectos cr&#237;ticos para poder asegurar el &#233;xito en el proceso de identificaci&#243;n gen&#233;tica&#46; En este sentido&#44; la correcta identificaci&#243;n y trazabilidad de las muestras debe garantizarse durante todo el proceso&#46; Como muestra <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> es preferible la sangre cuando el cad&#225;ver&#44; o el resto a identificar&#44; muestre un aspecto preservado&#46; Por el contrario&#44; cuando se aprecien signos de degradaci&#243;n en los restos&#44; se recomienda el an&#225;lisis de fragmento de hueso largo &#40;p&#46; ej&#46;&#44; f&#233;mur&#44; h&#250;mero&#41; o molar en buen estado de preservaci&#243;n &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>&#41;&#46; La recogida de muestras biol&#243;gicas <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> es recomendable incluso cuando el cad&#225;ver haya sido identificado por otros medios&#46;</p><elsevierMultimedia ident="t0005"></elsevierMultimedia><p id="p0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por su parte&#44; la elecci&#243;n adecuada de las muestras de referencia &#40;recomendaci&#243;n 4&#41; depender&#225; de los familiares disponibles&#44; prefiri&#233;ndose aquellos familiares con v&#237;nculo gen&#233;tico directo &#40;p&#46; ej&#46;&#44; progenitor&#47;es o descendiente&#47;s en primer grado&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>&#41;&#46; Se recomienda la toma del mayor n&#250;mero posible de familiares&#46; En todos los casos&#44; es necesario contar con un documento de consentimiento informado que incluir&#225; la informaci&#243;n y datos&#44; atendiendo a est&#225;ndares internacionales y locales&#46; En ocasiones&#44; de manera alternativa o complementaria&#44; se recurre a muestras <span class="elsevierStyleItalic">ante mortem&#44;</span> consistentes en objetos usados por la v&#237;ctima o tomas biol&#243;gicas extra&#237;das a partir de esta &#40;p&#46; ej&#46;&#44; tomas hospitalarias&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>&#41;&#46; Para su uso como muestras atribuidas&#44; es imprescindible asegurar la autenticidad de las mismas&#46;</p><p id="p0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los genetistas forenses son una pieza fundamental para orientar en la elecci&#243;n de las muestras <span class="elsevierStyleItalic">ante</span> y <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> m&#225;s adecuadas&#44; lo cual favorece en la agilidad del resultado y la seguridad de este&#46;</p><p id="p0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La especial complejidad que conlleva el an&#225;lisis de muestras <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> hace recomendar la cualificaci&#243;n contrastada de los laboratorios implicados en el an&#225;lisis de este tipo de muestras &#40;recomendaci&#243;n 5&#41;&#46; El alto poder de discriminaci&#243;n que aporta el an&#225;lisis de marcadores STR autos&#243;micos los convierte en la primera opci&#243;n anal&#237;tica&#46; Al menos deben emplearse 12 STR que&#44; llegado el caso&#44; deber&#225;n estar consensuados con los pa&#237;ses implicados en el suceso &#40;recomendaci&#243;n 6&#41;&#46; Actualmente&#44; este tipo de kits comerciales suelen incluir un mayor n&#250;mero de STR consensuados por la comunidad cient&#237;fica internacional&#44; lo cual permite dar una respuesta adecuada a esta recomendaci&#243;n&#46;</p><p id="p0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La naturaleza de este tipo de muestras <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span>&#44; a menudo afectadas por la degradaci&#243;n o presencia de posibles inhibidores&#44; puede ocasionar&#44; tras su an&#225;lisis gen&#233;tico&#44; la aparici&#243;n de ciertos artefactos en el perfil &#40;p&#46; ej&#46;&#44; p&#233;rdidas al&#233;licas&#41;&#44; que pueden derivar en la asignaci&#243;n de perfiles gen&#233;ticos incorrectos y&#44; por tanto&#44; en errores durante el proceso de identificaci&#243;n&#46; Por ello&#44; la recomendaci&#243;n 7 hace referencia a la necesidad de establecer protocolos t&#233;cnicos que permitan asegurar la asignaci&#243;n al&#233;lica realizada sobre la muestra analizada&#46; En ocasiones&#44; el grado de afectaci&#243;n de la muestra o la disponibilidad de familiares no directos impide el empleo de marcadores STR autos&#243;micos&#46; As&#237;&#44; la recomendaci&#243;n 8 propone el uso de polimorfismos de un &#250;nico nucle&#243;tido &#40;SNP&#44; del ingl&#233;s <span class="elsevierStyleItalic">Single Nucleotide Polymorphisms</span>&#41;&#44; de marcadores STR del cromosoma Y o el an&#225;lisis del ADN mitocondrial &#40;ADNmt&#41;&#44; si bien&#44; estos 2 &#250;ltimos tipos de marcadores gen&#233;ticos ofrecen un menor poder de discriminaci&#243;n derivado de su patr&#243;n de herencia monoparental&#46;</p><p id="p0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El &#250;ltimo bloque de recomendaciones abunda en los aspectos relativos al procesamiento de datos&#46; La recomendaci&#243;n 9 alude a la necesidad de contar con bases de datos centralizadas y la importancia del volcado electr&#243;nico de los perfiles gen&#233;ticos para evitar posibles errores de transcripci&#243;n&#46; En este sentido&#44; en la actualidad existen diferentes herramientas bioinform&#225;ticas que permiten dar respuesta a esta importante necesidad&#44; y sobre las que se incidir&#225; con m&#225;s detalle en el &#250;ltimo apartado de este art&#237;culo&#46; Por su parte&#44; la recomendaci&#243;n 10 alude a la importancia de contar con otras herramientas de identificaci&#243;n complementarias &#40;p&#46; ej&#46;&#44; estudios antropom&#233;tricos&#41;&#44; especialmente en situaciones en las que hay varios miembros de una misma familia entre las v&#237;ctimas&#46;</p><p id="p0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Cuando se produce una coincidencia gen&#233;tica entre fragmentos <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> o bien una compatibilidad del resto <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> con un determinado familiar o grupo familiar es necesario establecer un valor m&#237;nimo a partir del cual&#44; estad&#237;sticamente&#44; sea posible establecer la identidad como fiable&#46; Se recomienda el empleo del cociente de verosimilitud &#40;<span class="elsevierStyleItalic">likelihood ratio -</span>LR<span class="elsevierStyleItalic">-</span>&#41; &#40;recomendaci&#243;n 11&#41;<span class="elsevierStyleItalic">&#46;</span> Ese valor umbral va a depender de varios factores&#44; por ejemplo&#44; del n&#250;mero de v&#237;ctimas implicadas en el suceso&#44; aumentando a medida que ese n&#250;mero se incrementa<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0040"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> u otro tipo de circunstancias &#40;p&#46; ej&#46;&#44; poblaci&#243;n cerrada o abierta&#41;&#46; Durante la preparaci&#243;n y ejecuci&#243;n del proceso de identificaci&#243;n se genera gran cantidad de informaci&#243;n&#44; registros&#44; muestras o extractos de ADN&#44; por ello&#44; los laboratorios deben tener descrito en sus procedimientos de trabajo como gestionar esta informaci&#243;n&#44; as&#237; como los datos derivados&#44; la pol&#237;tica de comunicaci&#243;n de resultados a los familiares y prever el almacenamiento&#44; entrega o eliminaci&#243;n del material biol&#243;gico recuperado &#40;recomendaci&#243;n 12&#41;&#46;</p></span><span id="s0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0035">Avances y nuevas herramientas en gen&#233;tica forense</span><p id="p0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El an&#225;lisis de polimorfismos del ADN se ha convertido en el est&#225;ndar de referencia <span class="elsevierStyleItalic">&#40;gold standard&#41;</span> para la identificaci&#243;n de v&#237;ctimas tanto en SVM como en casos forenses en los que los restos humanos est&#225;n muy fragmentados y&#47;o degradados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46; Esto se debe&#44; fundamentalmente&#44; al alto grado de discriminaci&#243;n que puede proporcionar la identificaci&#243;n basada en el ADN&#46; Desde el punto de vista gen&#233;tico existen numerosos retos&#44; entre otros&#58; el elevado n&#250;mero de v&#237;ctimas&#44; los mecanismos de destrucci&#243;n&#44; grado de fragmentaci&#243;n&#44; la disponibilidad de familiares o la existencia de muestras <span class="elsevierStyleItalic">ante mortem</span>&#44; que ser&#225;n cruciales para el proceso final de identificaci&#243;n&#46;</p><p id="p0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En los &#250;ltimos 20 a&#241;os&#44; la gen&#233;tica forense ha experimentado importantes avances t&#233;cnicos y tecnol&#243;gicos que pueden contribuir en la labor de identificaci&#243;n de las v&#237;ctimas en SVM&#46; A continuaci&#243;n&#44; se dar&#225; una visi&#243;n general sobre aquellos principales avances desde distintas perspectivas&#58; fuente de ADN&#44; recuperaci&#243;n de ADN&#44; marcadores gen&#233;ticos y m&#233;todos de an&#225;lisis&#46;</p><span id="s0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0040">Fuente de ADN</span><p id="p0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el Protocolo nacional de actuaci&#243;n M&#233;dico-forense y de Polic&#237;a Cient&#237;fica en sucesos con v&#237;ctimas m&#250;ltiples &#40;Anexo VII&#46;1&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0030"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#44; as&#237; como en las Normas para la preparaci&#243;n y remisi&#243;n de muestras objeto de an&#225;lisis por el INTCF &#40;arts&#46; 30 y 32&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>&#44; se detallan el tipo de muestras necesarias &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>&#41; y las condiciones de env&#237;o para este tipo de estudios de identificaci&#243;n en SVM&#46;</p><p id="p0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Aparte del tipo de muestras m&#225;s adecuadas se&#241;aladas en estas referencias&#44; recientes estudios han puesto de manifiesto la disponibilidad de ADN procedente de determinados tejidos y &#243;rganos&#44; no considerados previamente a efectos de identificaci&#243;n gen&#233;tica&#44; con resultados prometedores&#46; Adem&#225;s&#44; tales fuentes de ADN pueden ofrecer un ahorro de tiempo y de recursos para los equipos de SVM&#44; en comparaci&#243;n con largos procesos de recolecci&#243;n de muestras&#44; as&#237; como de preparaci&#243;n y extracci&#243;n de ADN a partir de las muestras tradicionalmente empleadas &#40;p&#46; ej&#46;&#44; f&#233;mur&#41;&#46; As&#237;&#44; se ha comprobado que&#44; a partir de restos humanos enterrados durante per&#237;odos de tiempo de entre 4 y 42 a&#241;os&#44; el ADN&#47;ARN es m&#225;s estable en ciertos &#243;rganos&#44; como cerebro o coraz&#243;n&#44; obteni&#233;ndose perfiles gen&#233;ticos de buena calidad y con menores signos de degradaci&#243;n que a partir de otros &#243;rganos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#46; Tambi&#233;n se ha encontrado que peque&#241;os huesos esponjosos &#40;p&#46; ej&#46;&#44; huesos de las manos&#44; los pies o los tobillos&#41; tienen concentraciones de ADN m&#225;s altas&#44; por unidad de masa&#44; que huesos corticales densos como el f&#233;mur<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0065"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>&#46;</p></span><span id="s0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0045">Recuperaci&#243;n de ADN</span><p id="p0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Con respecto a los m&#233;todos de obtenci&#243;n de ADN &#40;extracci&#243;n&#41;&#44; cada vez est&#225;n m&#225;s optimizados y automatizados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0070"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0075"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a>&#44; utilizando t&#233;cnicas de alto rendimiento mediante el uso de part&#237;culas paramagn&#233;ticas&#44; que incluyen pasos previos de desmineralizaci&#243;n &#40;en el caso de restos esquel&#233;ticos&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0080"><span class="elsevierStyleSup">16</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a>&#44; que minimizan la intervenci&#243;n humana y el posible riesgo de contaminaci&#243;n o errores de manipulaci&#243;n&#46;</p><p id="p0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Asimismo&#44; existen algunas soluciones actuales&#44; especialmente indicadas para muestras de referencia&#44; pero que tambi&#233;n se han ensayado en muestras cadav&#233;ricas&#44; que reducen a&#250;n m&#225;s los tiempos de extracci&#243;n&#44; integrando en un &#250;nico paso hasta el proceso de obtenci&#243;n del perfil en poco m&#225;s de 90 minutos&#46; Son los denominados sistemas de <span class="elsevierStyleItalic">Rapid DNA</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0090"><span class="elsevierStyleSup">18</span></a>&#44; completamente portables al lugar de los hechos y que no requieren de una gran formaci&#243;n t&#233;cnica&#46; Su utilidad y efectividad han quedado demostradas&#44; por ejemplo&#44; en el caso del laboratorio m&#243;vil de la Gendarmerie francesa <span class="elsevierStyleItalic">&#40;mobil&#39;DNA&#41;</span>&#44; trasladado al lugar del incidente a&#233;reo del vuelo 9525 de Germanwings en 2015<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0095"><span class="elsevierStyleSup">19</span></a>&#44; o a Niza en 2016 y Beirut en 2020&#44; con motivo de los respectivos atentados&#44; y del que el gobierno franc&#233;s ha proporcionado recientemente una unidad a Ucrania para la identificaci&#243;n de v&#237;ctimas del conflicto b&#233;lico actual&#46; Sin embargo&#44; estos sistemas no tienen una gran sensibilidad&#44; por lo que no ser&#237;an apropiados en aquellos casos con muestras afectadas por la degradaci&#243;n&#46;</p><p id="p0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Otras de las t&#233;cnicas que pueden ser de inter&#233;s en este tipo de sucesos son las denominadas <span class="elsevierStyleItalic">Direct-to-PCR</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0100"><span class="elsevierStyleSup">20</span></a>&#44; que consisten en a&#241;adir directamente las muestras biol&#243;gicas al tubo de PCR&#46; Este tipo de t&#233;cnicas reducen considerablemente los tiempos de obtenci&#243;n de resultados&#44; al eliminar el paso de extracci&#243;n de ADN&#46; No obstante&#44; el &#233;xito y calidad de los perfiles recuperados depender&#225;&#44; evidentemente&#44; de la naturaleza del material muestreado y de la presencia de inhibidores de la PCR&#44; que generalmente se eliminan durante el proceso de extracci&#243;n de ADN&#46; Combinados con esta t&#233;cnica&#44; tambi&#233;n se han descrito conservantes que capturan el ADN del tejido recuperado y lo retienen en una soluci&#243;n que puede ser usada directamente en el proceso de PCR<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0105"><span class="elsevierStyleSup">21</span></a>&#46;</p></span><span id="s0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0050">Marcadores gen&#233;ticos</span><p id="p0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los marcadores gen&#233;ticos que habitualmente se utilizan en este tipo de sucesos son los STR autos&#243;micos&#44; que tienen un alto poder de discriminaci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; Adicionalmente&#44; en algunos casos&#44; dependiendo de los familiares disponibles &#40;p&#46; ej&#46;&#44; solo hermanos varones&#41;&#44; tambi&#233;n pueden ser &#250;tiles los marcadores STR del cromosoma Y&#44; que permiten establecer linajes paternos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0110"><span class="elsevierStyleSup">22</span></a>&#44; o los STR del cromosoma X<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0115"><span class="elsevierStyleSup">23</span></a>&#46; Para estos 3 tipos de marcadores&#44; existen numerosos kits comerciales de distintas empresas&#44; muy estandarizados y validados internamente en la mayor parte de los laboratorios de gen&#233;tica forense<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0070"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a>&#46; El ADNmt&#44; de herencia materna&#44; tambi&#233;n suele ser de gran utilidad en el campo forense&#44; sobre todo en casos de personas desaparecidas y restos no identificados&#44; cuando no se dispone de suficiente ADN nuclear&#44; debido al elevado n&#250;mero de copias de ADNmt por c&#233;lula y su conformaci&#243;n circular&#44; lo que le hace ser m&#225;s resistente a la degradaci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0120"><span class="elsevierStyleSup">24</span></a>&#44; as&#237; como para confirmar&#47;descartar relaciones de parentesco por v&#237;a materna con familiares de segundo grado o superior&#46; Sin embargo&#44; el ADNmt tiene muy bajo poder de discriminaci&#243;n&#44; lo que le hace&#44; a pesar de sus ventajas con muestras degradadas&#44; tener limitada resoluci&#243;n en SVM&#46;</p><p id="p0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">M&#225;s recientemente&#44; para los casos de SVM en los que el ADN recuperado se encuentra degradado y&#47;o con presencia de inhibidores&#44; se dispone de algunos marcadores menos susceptibles a la degradaci&#243;n&#44; lo que puede ayudar en el genotipado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0075"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a>&#46; Este es el caso de los SNP&#44; que son variaciones de secuencia de una &#250;nica base&#44; cuyo amplic&#243;n &#40;fragmento de ADN resultante de la amplificaci&#243;n&#41; suele ser mucho m&#225;s corto&#44; lo que ofrece una ventaja frente a muestras degradadas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0125"><span class="elsevierStyleSup">25</span></a>&#46; En la actualidad&#44; existen paneles comerciales validados de hasta 90 SNP autos&#243;micos&#44; con probabilidades de coincidencia al azar mejores que para el conjunto de marcadores STR habitualmente usados en el campo forense<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0130"><span class="elsevierStyleSup">26</span></a>&#46; Pero su potencialidad a&#250;n va m&#225;s all&#225;&#44; con la implementaci&#243;n de marcadores y metodolog&#237;as de an&#225;lisis del pujante campo de la genealog&#237;a gen&#233;tica investigativa<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0135"><span class="elsevierStyleSup">27</span></a>&#44; en la que se podr&#237;an analizar m&#225;s de 600&#46;000 SNP&#46; No obstante&#44; para su aplicaci&#243;n dentro del campo forense&#44; recientemente se ha desarrollado un panel comercial que cuenta con 10&#46;230 SNP<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0140"><span class="elsevierStyleSup">28</span></a>&#46; Gracias a este elevado n&#250;mero de marcadores&#44; potencialmente&#44; es posible establecer relaciones de parentesco m&#225;s lejanas &#40;p&#46; ej&#46;&#44; de primos terceros&#41;&#44; lo que facilitar&#237;a el estudio en casos de SVM cuando no se dispusiera de familiares m&#225;s directos &#40;p&#46; ej&#46;&#44; padres&#44; hijos o hermanos&#41;&#46;</p><p id="p0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por otro lado&#44; mientras que&#44; tradicionalmente&#44; el an&#225;lisis de ADN en el contexto de identificaci&#243;n forense se ha basado estrictamente en la comparaci&#243;n con familiares o muestras <span class="elsevierStyleItalic">ante mortem</span>&#44; los avances recientes est&#225;n permitiendo que&#44; en determinados casos puntuales&#44; se utilicen marcadores de ADN altamente informativos para la predicci&#243;n de caracter&#237;sticas visibles externamente &#40;EVC&#44; del ingl&#233;s <span class="elsevierStyleItalic">Externally Visible Characteristics</span>&#41; y de ascendencia biogeogr&#225;fica &#40;BGA&#44; del ingl&#233;s <span class="elsevierStyleItalic">BioGeographical Ancestry</span>&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0145"><span class="elsevierStyleSup">29</span></a>&#46; Dentro de este campo est&#225;n los SNP informativos de fenotipo &#40;piSNP&#41; y los SNP informativos de ascendencia &#40;aiSNP&#41;&#44; cuyo an&#225;lisis puede proporcionar informaci&#243;n valiosa como&#44; por ejemplo&#44; el color de los ojos&#44; del pelo o de la piel&#44; o indicios sobre la ascendencia biogeogr&#225;fica del donante del ADN&#44; datos que pueden ser &#250;tiles para la identificaci&#243;n de cad&#225;veres cuando no se dispone de muestras de referencia con las que cotejar&#46; En este sentido&#44; est&#225; siendo de gran importancia el proyecto internacional VISAGE<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0150"><span class="elsevierStyleSup">30</span></a>&#44; para el desarrollo de paneles de SNP y herramientas bioinform&#225;ticas&#46;</p></span><span id="s0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0055">M&#233;todos de an&#225;lisis</span><p id="p0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la actualidad&#44; la mayor parte de los laboratorios de gen&#233;tica forense obtienen sus perfiles de ADN mediante la electroforesis capilar &#40;EC&#41;&#44; m&#233;todo estandarizado que se basa en la separaci&#243;n de fragmentos de ADN en funci&#243;n de la carga&#47;tama&#241;o de los mismos<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0155"><span class="elsevierStyleSup">31</span></a>&#46;</p><p id="p0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Sin embargo&#44; ya son un futuro cada vez m&#225;s presente las nuevas tecnolog&#237;as como es la secuenciaci&#243;n masiva en paralelo &#40;MPS&#44; del ingl&#233;s <span class="elsevierStyleItalic">Massively Parallel Sequencing</span>&#41;&#46; La MPS permite un aumento sustancial en el rendimiento&#44; gracias a que se puede analizar simult&#225;neamente un elevado n&#250;mero de marcadores gen&#233;ticos y de muestras a precios cada vez m&#225;s asequibles&#46; Adem&#225;s&#44; al tratarse de una secuenciaci&#243;n simult&#225;nea&#44; no basada en el tama&#241;o de fragmentos&#44; se han dise&#241;ado paneles con tama&#241;os de amplic&#243;n m&#225;s peque&#241;os&#44; con lo que es una tecnolog&#237;a ideal para muestras degradadas&#44; como las que se pueden encontrar en los casos SVM o en identificaci&#243;n de personas desaparecidas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160"><span class="elsevierStyleSup">32</span></a>&#46;</p><p id="p0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por MPS&#44; los marcadores STR forenses com&#250;nmente empleados son m&#225;s informativos &#40;con mayor poder de discriminaci&#243;n&#41;&#44; ya que permiten la detecci&#243;n de SNP&#44; indetectables por EC&#44; tanto dentro de las regiones repetitivas de los STR como en las regiones flanqueantes<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160"><span class="elsevierStyleSup">32</span></a>&#46; Adem&#225;s&#44; junto a la informaci&#243;n de identificaci&#243;n de los STR&#44; se pueden secuenciar grandes paneles de SNP&#44; para aumentar el poder de discriminaci&#243;n con SNP autos&#243;micos&#44; as&#237; como a&#241;adir informaci&#243;n sobre la ascendencia y el fenotipo del donante de la muestra<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160"><span class="elsevierStyleSup">32</span></a>&#46; Con respecto al an&#225;lisis del ADN mitocondrial&#44; se puede reducir a&#250;n m&#225;s el tama&#241;o de los amplicones&#44; haci&#233;ndolos solapantes&#44; y aumentando la regi&#243;n secuenciada&#44; lo que puede aumentar el poder de discriminaci&#243;n de este marcador&#46; Pero&#44; adem&#225;s&#44; permite simplificar el complejo an&#225;lisis del ADNmt por secuenciaci&#243;n basada en el m&#233;todo de Sanger&#44; permitiendo un mayor rendimiento&#44; sin apenas intervenci&#243;n del operario<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0160"><span class="elsevierStyleSup">32</span></a>&#46;</p></span></span><span id="s0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="st0060">Herramientas bioinform&#225;ticas de comparaci&#243;n</span><p id="p0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La fase final del proceso de identificaci&#243;n gen&#233;tica de v&#237;ctimas de un SVM es el cotejo entre los perfiles gen&#233;ticos obtenidos a partir de las muestras <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> y los perfiles gen&#233;ticos de muestras atribuidas a las personas desaparecidas&#44; o bien de muestras tomadas a sus familiares &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#t0005">tabla 1</a>&#41;&#46; L&#243;gicamente&#44; existen diferencias en cuanto a la forma de realizar dicha comparaci&#243;n seg&#250;n el origen de las muestras de referencia&#46; En el caso de muestras atribuidas <span class="elsevierStyleItalic">&#40;ante mortem&#41;</span>&#44; se buscar&#225;n coincidencias completas con los perfiles gen&#233;ticos de las muestras <span class="elsevierStyleItalic">post mortem&#46;</span> Cuando el cotejo ha de realizarse frente a los perfiles gen&#233;ticos de los familiares&#44; el objetivo de la b&#250;squeda es encontrar un familiar o grupo familiar que sea compatible para la relaci&#243;n de parentesco investigada&#46; As&#237;&#44; si se dispone de familiares en primer grado &#40;ascendientes o descendientes directos&#41; y de perfiles gen&#233;ticos de marcadores STR autos&#243;micos&#44; con la b&#250;squeda se trata de localizar aquel perfil gen&#233;tico que comparta al menos un alelo en todos los marcadores analizados &#40;salvo ocurrencia de mutaci&#243;n&#41;&#46; Cuando la relaci&#243;n de parentesco es m&#225;s lejana&#44; conviene analizar adicionalmente otro tipo de marcadores&#44; p&#46; ej&#46;&#44; marcadores haplot&#237;picos&#44; que permiten establecer relaciones de parentesco por v&#237;a paterna &#40;haplotipos de marcadores STR del cromosoma Y&#41; o materna &#40;haplotipos de ADNmt&#41; y cuya informaci&#243;n nos permitir&#225; reforzar la compatibilidad&#44; o bien excluir una relaci&#243;n de parentesco en casos de compatibilidades fortuitas con los marcadores autos&#243;micos&#46; En el supuesto de que los cuerpos de las v&#237;ctimas est&#233;n fragmentados&#44; conviene hacer previamente una reasociaci&#243;n de todos los fragmentos de un mismo cuerpo y seleccionar el perfil gen&#233;tico m&#225;s completo disponible para ese conjunto de fragmentos para utilizarlo como perfil representativo de la v&#237;ctima en cuesti&#243;n&#44; ya que&#44; reduciendo el n&#250;mero de perfiles intervinientes en las comparaciones&#44; se facilitar&#225; el procesamiento de los datos&#46;</p><p id="p0135" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hay m&#250;ltiples factores que influyen en la fase de comparaci&#243;n de perfiles gen&#233;ticos&#46; Un aspecto importante radica en si el evento es&#44; respecto al conocimiento previo del n&#250;mero e identidad de los fallecidos&#44; de car&#225;cter abierto &#40;p&#46; ej&#46;&#44; desastre natural&#41; o cerrado &#40;p&#46; ej&#46;&#44; accidente de avi&#243;n&#44; en el que&#44; en principio&#44; la lista de posibles v&#237;ctimas est&#225; disponible&#41;&#46; L&#243;gicamente&#44; en el segundo caso ser&#225; m&#225;s f&#225;cil acceder a todas las muestras de referencia necesarias &#40;sean <span class="elsevierStyleItalic">ante mortem</span> o de familiares&#41; que en el primer caso&#46; Por otro lado&#44; la magnitud del evento&#44; el n&#250;mero de v&#237;ctimas&#44; la integridad o desmembramiento de los cuerpos&#44; as&#237; como determinadas circunstancias del evento que pueden facilitar la degradaci&#243;n de los restos humanos &#40;p&#46; ej&#46;&#44; inundaci&#243;n o incendio&#41; y&#44; por tanto&#44; dificultar la obtenci&#243;n de perfiles gen&#233;ticos completos&#44; influir&#225;n tambi&#233;n en la complejidad del cotejo y en el resultado final&#46; La accesibilidad a muestras de referencia tambi&#233;n puede verse perjudicada en el caso de eventos que afecten a v&#237;ctimas de &#225;mbito internacional&#44; sin pasar por alto que&#44; en determinados casos&#44; puede ser necesario tambi&#233;n recurrir a bases de datos gen&#233;tico-poblacionales diferentes a la usada habitualmente&#46; Asimismo&#44; el tiempo transcurrido entre el evento y la realizaci&#243;n de los an&#225;lisis gen&#233;ticos y cotejo es un factor que juega en contra&#44; ya que afecta tanto a la conservaci&#243;n de los restos humanos sin identificar y&#44; por tanto&#44; a la posibilidad de obtener la m&#225;xima informaci&#243;n gen&#233;tica de los mismos&#44; como a la posibilidad de obtenci&#243;n de las muestras de referencia id&#243;neas &#40;muestras atribuidas o de familiares directos&#41;&#46; Un ejemplo ilustrativo de este &#250;ltimo factor lo encontramos en la actualidad en nuestro pa&#237;s ante el proyecto del Banco Estatal de ADN de V&#237;ctimas de la Guerra y la Dictadura &#40;art&#46; 23&#44; Ley 20&#47;2022&#44; de 19 de octubre&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0165"><span class="elsevierStyleSup">33</span></a>&#44; con el que se pretende la identificaci&#243;n de v&#237;ctimas de hechos acaecidos hasta hace 87 a&#241;os&#44; cuyos principales retos se centran en&#58; 1&#41; la degradaci&#243;n del ADN de los restos&#44; que ser&#225; muy variable en funci&#243;n de las condiciones de conservaci&#243;n&#44; y 2&#41; la ausencia de familiares directos&#44; que obligar&#225; a recurrir a familiares en segundo&#44; tercer o cuarto grado &#40;nietos&#47;as&#44; sobrinos&#47;as&#44; primos&#47;as&#41; y&#44; por lo tanto&#44; al dise&#241;o de pedigr&#237;es complejos&#46; Asimismo&#44; en este tipo de situaciones&#44; puede sumarse la dificultad a&#241;adida de que muchos cuerpos pueden estar en fosas comunes con la consiguiente posibilidad de mezcla de restos de diferentes individuos o&#44; incluso&#44; con individuos no relacionados con el evento en cuesti&#243;n&#46;</p><p id="p0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La complejidad en el proceso de comparaci&#243;n entre m&#250;ltiples muestras y las diferentes variables comentadas&#44; hace imprescindible que el proceso sea llevado a cabo mediante el empleo de herramientas bioinform&#225;ticas avanzadas que permitan optimizar la detecci&#243;n de eventuales coincidencias&#47;compatibilidades&#44; as&#237; como su correspondiente valoraci&#243;n estad&#237;stica<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0170"><span class="elsevierStyleSup">34</span></a>&#46;</p><p id="p0145" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Actualmente&#44; en Espa&#241;a&#44; la base de datos nacional de identificadores obtenidos a partir del ADN &#40;regulada en la LO 10&#47;2007&#44; de 8 de octubre&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0175"><span class="elsevierStyleSup">35</span></a> se encuentra alojada en la aplicaci&#243;n CODIS <span class="elsevierStyleItalic">&#40;Combined DNA Index System&#41;</span>&#44; cedida gratuitamente por el FBI &#40;Departamento de Justicia de Estados Unidos&#41; al Ministerio del Interior&#44; en cuya Secretar&#237;a de Estado de Seguridad reside la administraci&#243;n a nivel nacional de dicha base de datos&#46; Esta base de datos se alimenta con los perfiles gen&#233;ticos obtenidos en los laboratorios de gen&#233;tica forense de las Fuerzas y Cuerpos de Seguridad&#44; tanto de &#225;mbito estatal &#40;Cuerpo Nacional de Polic&#237;a y Guardia Civil&#41; como de &#225;mbito auton&#243;mico &#40;Mossos d&#39;Esquadra&#44; Ertzaintza y Polic&#237;a Foral de Navarra&#41;&#44; as&#237; como del Instituto Nacional de Toxicolog&#237;a y Ciencias Forenses&#44; dependiente del Ministerio de Justicia&#46;</p><p id="p0150" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este repositorio&#44; aparte del &#237;ndice de perfiles gen&#233;ticos de inter&#233;s criminal &#40;en el que se almacenan y comparan los perfiles gen&#233;ticos dubitados e indubitados de todas aquellas muestras recogidas o tomadas en relaci&#243;n con la investigaci&#243;n de los delitos que la propia ley especifica&#41;&#44; existe un &#237;ndice de inter&#233;s social&#44; en el que se integran tanto los perfiles gen&#233;ticos <span class="elsevierStyleItalic">ante mortem</span> e indubitados de los familiares de personas desaparecidas como los perfiles gen&#233;ticos obtenidos a partir de cad&#225;veres o restos humanos sin identificar&#44; con el &#250;nico fin de la identificaci&#243;n de estos &#250;ltimos&#46;</p><p id="p0155" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Como se comentaba anteriormente&#44; el &#233;xito en la identificaci&#243;n va a depender en gran medida de la calidad de los perfiles gen&#233;ticos obtenidos a partir de los restos <span class="elsevierStyleItalic">post mortem</span> y de la disponibilidad de muestras de referencia id&#243;neas &#40;ver recomendaciones de la ISFG<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0015"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#41;&#46; En el caso de imposibilidad de obtener muestras de ninguno de los familiares recomendados&#44; y tampoco muestras <span class="elsevierStyleItalic">ante mortem</span> fidedignas&#44; puede recurrirse a otros familiares m&#225;s lejanos&#44; pero&#44; en ese caso&#44; es altamente recomendable disponer del mayor n&#250;mero de familiares posibles&#46;</p><p id="p0160" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hoy en d&#237;a&#44; los programas inform&#225;ticos que se emplean para realizar las comparaciones disponen de la opci&#243;n de construir &#225;rboles familiares &#40;pedigr&#237;s&#41; contra los que realizar las b&#250;squedas comparativas&#44; lo que permite extraer la m&#225;xima informaci&#243;n posible del grupo familiar y&#44; por tanto&#44; maximizar las posibilidades de identificaci&#243;n&#46; En este sentido&#44; recientemente&#44; los laboratorios integrados en COMSIGENI &#40;COMit&#233; para la regulaci&#243;n y coordinaci&#243;n del SIstema de GEsti&#243;n Nacional de Identificadores obtenidos a partir del ADN&#41; han participado en un ejercicio colaborativo consistente en un simulacro de SVM&#46; La finalidad de dicho ejercicio ha sido que todas las instituciones se familiaricen en el manejo del m&#243;dulo de gesti&#243;n de pedigr&#237;s disponible en CODIS&#44; adem&#225;s de medir las limitaciones y problem&#225;tica que podemos encontrar en la identificaci&#243;n gen&#233;tica con fines humanitarios utilizando dicha aplicaci&#243;n&#46; Como fruto de este ejercicio&#44; que ha sido valorado muy positivamente por todas las instituciones&#44; se est&#225; elaborando actualmente una Gu&#237;a para la identificaci&#243;n gen&#233;tica mediante el uso de CODIS en Sucesos con V&#237;ctimas M&#250;ltiples &#40;SVM&#41; que servir&#225; de manual de referencia en nuestro pa&#237;s para la gesti&#243;n de perfiles gen&#233;ticos y su comparaci&#243;n mediante pedigr&#237;s en CODIS en relaci&#243;n con este tipo de eventos&#46;</p><p id="p0165" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La importancia de este tipo de ejercicios colaborativos ya se hab&#237;a puesto de manifiesto en una iniciativa anterior&#44; promovida desde el Grupo de Habla Espa&#241;ola y Portuguesa de la ISFG &#40;GHEP-ISFG&#41;&#44; en cuyo seno se organizaron 2 ejercicios colaborativos a nivel internacional sobre la identificaci&#243;n de v&#237;ctimas en desastres &#40;<span class="elsevierStyleItalic">Disaster Victim Identification</span>&#44; DVI&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0180"><span class="elsevierStyleSup">36</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0185"><span class="elsevierStyleSup">37</span></a>&#46; Con estos ejercicios se pretend&#237;a explorar la correcta reasociaci&#243;n de restos&#44; la identificaci&#243;n de v&#237;ctimas a trav&#233;s del an&#225;lisis de parentesco&#44; incluyendo v&#237;ctimas relacionadas&#44; el manejo de mutaciones o de un n&#250;mero insuficiente de familiares de referencia&#44; todo ello trabajando dentro de un marco bayesiano&#44; as&#237; como valorar el correcto uso de las aplicaciones bioinform&#225;ticas empleadas&#46;</p><p id="p0170" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Aparte de CODIS&#44; existen otras aplicaciones bioinform&#225;ticas empleadas en este &#225;mbito&#44; de las cuales&#44; a continuaci&#243;n&#44; se describen las m&#225;s destacadas&#46; Cabe mencionar el reciente desarrollo de aplicaciones de c&#243;digo abierto <span class="elsevierStyleItalic">&#40;open-source&#41;</span>&#44; como <span class="elsevierStyleItalic">SmartRank</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">ForeStatistics o</span><span class="elsevierStyleItalic">GENis</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0075"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a> Entre estos desarrollos&#44; merece especial menci&#243;n la integraci&#243;n del M&#243;dulo DVI<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0190"><span class="elsevierStyleSup">38</span></a>&#44; espec&#237;fico para la identificaci&#243;n de v&#237;ctimas de un SVM&#44; en el programa gratuito Familias<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0195"><span class="elsevierStyleSup">39</span></a>&#44; que posibilita calcular probabilidades y verosimilitudes en casos en los que conocemos los perfiles gen&#233;ticos de algunos individuos&#44; pero sus relaciones familiares presentan dudas&#44; ya que permite tener en cuenta m&#250;ltiples pedigr&#237;s alternativos y puede computar qu&#233; pedigr&#237; es m&#225;s probable&#44; y cu&#225;nto m&#225;s probable lo es respecto al resto de pedigr&#237;es&#46; Una caracter&#237;stica que diferencia a Familias es su capacidad para tratar con casos complejos&#44; en los que se ha de tener en cuenta la posibilidad de que ocurran mutaciones&#44; junto con la posibilidad de manejar diferentes pedigr&#237;s simult&#225;neamente&#46;</p><p id="p0175" class="elsevierStylePara elsevierViewall">De gran aplicaci&#243;n en este campo es tambi&#233;n el programa M-FISys&#174; <span class="elsevierStyleItalic">&#40;Mass Fatality Identification System&#41;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0200"><span class="elsevierStyleSup">40</span></a>&#44; desarrollado por la compa&#241;&#237;a estadounidense <span class="elsevierStyleItalic">Gene Codes Corp&#46;</span> para la identificaci&#243;n de las v&#237;ctimas del atentado contra el <span class="elsevierStyleItalic">World Trade Center</span> en 2001&#46; M-FISys&#174; es capaz de integrar y filtrar una amplia variedad de datos &#40;como descripciones antropol&#243;gicas&#44; ubicaci&#243;n donde se recuperaron los restos -incluidos GPS o coordenadas de cuadr&#237;cula- e identificaciones realizadas por huellas dactilares&#44; m&#233;todos dentales u otros&#44; con acceso a documentos de respaldo que incluyen im&#225;genes y archivos PDF asociados con cada muestra&#41;&#46; Este <span class="elsevierStyleItalic">software</span> fue el primero en combinar datos de marcadores STR&#44; ADNmt y SNP de manera integrada&#44; con informes de progreso y gesti&#243;n de flujo de trabajo&#44; incluidas herramientas de revisi&#243;n administrativa para establecer la cadena de custodia de las muestras y registros de auditor&#237;a en operaciones cr&#237;ticas&#46; Incluye herramientas de control de calidad que le permiten detectar inconsistencias que pueden ser el resultado de restos mezclados&#44; cambios de muestra o contaminaci&#243;n y reducen en gran medida la posibilidad de una identificaci&#243;n falsa&#46;</p><p id="p0180" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por &#250;ltimo&#44; otra aplicaci&#243;n de gran versatilidad es <span class="elsevierStyleItalic">Bonaparte</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0205"><span class="elsevierStyleSup">41</span></a> &#40;de la compa&#241;&#237;a holandesa <span class="elsevierStyleItalic">SMART Research BV</span>&#41;&#46; <span class="elsevierStyleItalic">Bonaparte</span> ha sido validado en el &#225;mbito forense en distintos escenarios internacionales &#40;NFI&#44; <span class="elsevierStyleItalic">Netherlands Forensic Institute</span>&#59; ACIC&#44; <span class="elsevierStyleItalic">Australian Criminal Intelligence Commission</span>&#41; y ha sido adquirido recientemente por INTERPOL dentro del programa internacional <span class="elsevierStyleItalic">I-Familia</span>&#44; para la identificaci&#243;n de personas desaparecidas en todo el mundo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bb0210"><span class="elsevierStyleSup">42</span></a>&#46; Este <span class="elsevierStyleItalic">software</span> permite la creaci&#243;n de pedigr&#237;s complejos y emplea un algoritmo matem&#225;tico abierto basado en un modelo de inferencia bayesiana para el c&#225;lculo de LR &#40;<span class="elsevierStyleItalic">Likelihood Ratio</span>&#44; cociente de verosimilitud&#41; adaptable a cualquier tipo de relaci&#243;n familiar investigada&#46; Adem&#225;s&#44; es escalable a miles de marcadores SNP&#44; de gran utilidad en el an&#225;lisis de muestras degradadas&#44; y que&#44; como se coment&#243; anteriormente&#44; usados en un n&#250;mero elevado permiten establecer&#44; con un alto grado de fiabilidad&#44; relaciones de parentesco con familiares lejanos&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleBold">Muestra a recoger</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Sangre &#40;en tarjeta o hisopo&#41; e hisopos bucales</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Si est&#225; disponible&#44; sangre</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Tejido muscular de color rojo intenso &#40;&#8765;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#8239;g&#41;</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Huesos largos y compactos &#40;cortes de 4&#8211;6&#8239;cm en ventana&#44; sin separar la di&#225;fisis&#41;</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Dientes sanos sin empastes &#40;preferiblemente molares&#41;</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cuerpos severamente quemados&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cualquiera de las muestras anteriores</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleBold">Muestras de referencia de familiares &#40;por orden de preferencia&#41;</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Ambos progenitores</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Hijos y c&#243;nyuge</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Hijos</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Un progenitor y un hermano</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t">Hermanos &#40;2 o m&#225;s&#41;</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Gemelo id&#233;ntico conocido</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleVsp" style="height:0.5px"></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleBold">Muestras</span><span class="elsevierStyleItalic"><span class="elsevierStyleBold">ante mortem</span></span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleBold">Calidad del ADN</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleBold">Habitualmente disponibles</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleBold">Podr&#237;an estar disponibles</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#211;ptima&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Cepillos de dientes&#59; maquinillas de afeitar el&#233;ctricas y manuales&#59; cepillos y peines de pelo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Muestras de donaciones y&#47;o biobancos &#40;sangre&#44; m&#233;dula &#243;sea&#44; esperma&#44; cord&#243;n umbilical&#41;&#59; otras muestras cl&#237;nicas &#40;sangre o suero&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Peines&#59; barras de labios&#59; desodorantes en barra&#59; ropa interior usada&#59; fundas de almohada&#59; tazas y&#47;o vasos usados&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Bloques de parafina&#59; frotis cervicales&#59; recortes de u&#241;as&#59; colillas de cigarro&#59; protector bucal o f&#233;rula dental&#59; cascos&#44; gorras o sombreros&#59; tapones para los o&#237;dos&#44; auriculares&#59; gafas&#59; bol&#237;grafos o l&#225;pices con marcas de dientes&#59; sobres o postales&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Joyas&#59; relojes de pulsera&#59; ropas&#59; toallas&#59; zapatos&#59; bandas para el pelo u orejeras&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo

ISSN: 03774732
Idioma original: Español

DOI:10.1016/j.reml.2023.04.005

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2024 Abril	8	5	13
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2024 Febrero	8	6	14
2024 Enero	8	2	10
2023 Diciembre	10	0	10
2023 Noviembre	11	1	12
2023 Octubre	21	0	21
2023 Septiembre	11	4	15
2023 Agosto	18	9	27
2023 Julio	14	1	15
2023 Junio	13	0	13
2023 Mayo	8	5	13

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