Inmunoexpresión del factor de crecimiento transformante β3 (TGF-β3) y del receptor III del factor de crecimiento transformante β (TGF β-RIII) en pacientes pediátricos con paladar hendido completo o incompleto no sindromático

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class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050">10</a>Por otra parte, el receptor tipo III, también llamado β-glucano, se distribuye en células mesenquimales y epiteliales, se puede unir a todas las isoformas del TGF-β,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055">11</a> el cual puede ser anclado a la membrana o secretado en forma soluble,<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0060">12–14</a> la pérdida del TGFβ-RIII impide la elongación del proceso palatino y su elevación, lo que ocasiona la hendidura,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075">15</a> esto se da en parte por una reducción de la expresión de los genes TGF-β y el receptor tipo I de BMP, provocando una supresión del señalamiento hacia el TGFβ-RIII, que afecta el equilibro de dicha señalización para la formación apropiada del tejido.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080">16</a>En algunos estudios realizados para evaluar la palatogénesis por medio de inmunohistoquímica, en muestras murinas in vivo e in vitro, se determinó que la expresión de TGF-β3, y TGFβ-RIII,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085">17</a> en el paladar ocurre cuando las crestas tenían una orientación vertical, esta inmunoexpresión fue localizada en células epiteliales.La distribución epitelial se conservó durante la elevación de las crestas palatinas, y destrucción del epitelio medial. Posterior a la fusión palatina, se observó una baja expresión de TGF-β3,<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085">17–22</a> por lo que algunos estudios previos mostraron inhibición de la señalización para la activación del TGF-β3 en muestras murinas tomadas del paladar hendido.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115">23</a>,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120">24</a> No obstante, ratones deficientes en la expresión de TGF-β3 mostraron defectos en la fusión palatina, por lo que la expresión del TGF-β3 se limitó estrictamente al epitelio de la línea palatina media en prefusión.<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0125">25–29</a>En cuanto al receptor, en un estudio experimental de ratón, se demostró que la expresión del TGFβ-RIII durante la palatogénesis ocurre a través del epitelio, y se localiza específicamente en el epitelio del borde medio durante la fusión de las crestas palatinas.<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0150">30–32</a> Además, debido a la falta de la expresión de éste, conlleva a una alteración en la proliferación e inducción de apoptosis celular, así como a una afección endotelial, reducción de células mesenquimatosas, el cual afecta el desarrollo de osteoblastos.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0165">33</a>El objetivo del presente estudio, fue el de determinar la inmunoexpresión del TGF-β3 y del TGFβ-RIII en una muestra de tejido de la hendidura de pacientes infantiles con paladar hendido completo o incompleto no sindrómico, tratados con palatoplastia.Previo a la toma de la muestra, se firmó el consentimiento informado y aprobación de la toma de muestra por el Comité Ético de Investigación del Hospital General «Dr. Manuel Gea González» y de los padres o tutores de cada paciente.MATERIAL Y MÉTODOSSelección de la muestraLa muestra consistió en 18 pacientes que presentaron paladar hendido completo, y dos pacientes con paladar hendido incompleto; ambos no sindrómicos, de los cuales, ocho fueron del sexo femenino y 12 masculino, de cinco a 28 meses de edad, todos ellos programados para palatoplastia por primera vez.Durante el estudio se procedió a recolectar una muestra de tejido sobrante del procedimiento quirúrgico, mismo que fue otorgado por el cirujano plástico a cargo, quien proporcionó el tejido sin implicar un riesgo adicional para la salud de los pacientes.El tejido fue tomado de la mucosa del paladar de la hendidura de 0.3 a 0.5 cm, el cual fue fijado con formol en una solución buffer de fosfato al 10% (MEYER), las muestras fueron guardadas a 4 oC, durante ocho horas, posteriormente se colocaron en una solución de PBS.Preparación de la inmunohistoquímica para TGF-β3 y TGFβ-RIIISe realizaron cortes de cada muestra, de 3μ cada uno, con su respectivo control. El anticuerpo del TGF-β3 fue probado previamente en muestras de intestino delgado (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">Figura 1</a>), mientras que el anticuerpo del TGFβ-RIII se probó previamente en muestras de la línea celular HepG2 (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">Figura 2</a>), y páncreas de humano.<elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia>Las muestras de tejido, se dejaron secar y desparafinar a 60 oC durante toda la noche. La inmunohistoquímica se corrió en un aparato VENTANA BenchMark Ultra.Para el anticuerpo monoclonal primario TGFβ-RIII (ab78421, abcam), se utilizó el sistema de detección UltraView (Referencia 760-500, lote E06611, caducidad 20-09-2016). Se seleccionó la opción de desparafinado a 72 oC, se realizó un acondicionamiento celular (CC1) por 20 minutos, el anticuerpo primario se incubó 20 minutos a 36 oC.Para el anticuerpo policlonal TGF-β3 (sc-82, Santa Cruz Biotechnology, Inc.), se utilizó el sistema de detección OptiView (Referencia 760-700, lote F08259, caducidad 28-10-2017). Se seleccionó la opción de desparafinado a 72 oC, con el acondicionamiento celular (CC1) por 16 minutos, el anticuerpo se incubó por 12 minutos a 36 oC.Evaluación de la expresión del TGF-β3 y TGFβ-RIII por medio de inmunohistoquímicaSe realizó la observación de los tejidos en un microscopio binocular (Axio Lab. A1). Las imágenes se tomaron con una cámara ZEISS Axiocam ERc 5s.La observación y evaluación estuvo a cargo de un patólogo experto, quien valoró la presencia o ausencia de expresión de TGF-β3 y del TGFβ-RIII en las muestras, mediante la impresión global de las células que resultaron teñidas en diferentes zonas del tejido de la hendidura evaluado.Análisis estadísticoLa información se analizó en el paquete estadístico SPSS, v 20.0. Se utilizó estadística descriptiva. Para las variables cualitativas, se emplearon porcentajes, y para las variables cuantitativas se emplearon medidas de tendencia central y dispersión.Se utilizó χ2 para las variables nominales, para comparar, expresión de TGF-β3 y TGFβ-RIII, con paladar hendido completo e incompleto.El nivel de significancia fue establecido cuando p < 0.05.RESULTADOSEn este estudio la muestra de pacientes del sexo masculino, correspondió al 60% (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">Figura 3</a>), con una media de 13.00 ± 5.93 meses de edad (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">Cuadro I</a>), mientras que en los pacientes del sexo femenino correspondió al 40% (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">Figura 3</a>), con una media de 14.25 ± 5.44 meses de edad (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">Cuadro I</a>), de los cuales resultaron el 90% de casos con paladar hendido completo y 10% con paladar hendido incompleto (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">Figura 4</a>).<elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia>Los pacientes provenían del Estado de México (40%), Ciudad de México (40%), Guerrero (10%), Guanajuato (5%) y Oaxaca (5%) (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">Figura 5</a>).<elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia>La medida de la hendidura palatina fue de 8 a 16 mm (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">Figura 6</a>), la media para pacientes masculinos fue de 11.66 ± 1.96 mm y en pacientes femeninos de 11.37 ± 3.20 mm (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0010">Cuadro II</a>).<elsevierMultimedia ident="fig0030"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia>Se observó mayor tamaño de la hendidura palatina en muestras de paladar hendido completo (11.83 ± 2.40), que en paladar hendido incompleto (9.00 ± 1.41).Al comparar la frecuencia con la que se expresó TGF-β3 y TGFβ-RIII, se encontró lo siguiente:Se observó mayor expresión positiva de TGF-β3, en la membrana y citoplasma de células epiteliales, que en la membrana y citoplasma de fibroblastos en muestras de paladar hendido completo e incompleto (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015">Cuadro III</a>y<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0035">Figuras 7</a>y<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0040">8</a>).<elsevierMultimedia ident="tbl0015"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0035"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0040"></elsevierMultimedia>En cuanto al TGFβ-RIII, se observó mayor expresión positiva en membrana y citoplasma de fibroblastos, que en membrana y citoplasma de células epiteliales, de paladar hendido completo. En muestras de paladar hendido incompleto, se observa tinción negativa de TGFβ-RIII (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015">Cuadro III</a>y<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0045">Figura 9</a>).<elsevierMultimedia ident="fig0045"></elsevierMultimedia>Al realizar la prueba de χ2, se observa p = 0.008* en casos de paladar hendido completo e incompleto, con expresión en TGF-β3, lo cual podría indicar una diferencia entre las poblaciones de estudio en cuanto al tipo de paladar hendido, por lo que sería importante aumentar el número de muestras de paladar hendido incompleto en estudios posteriores (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015">Cuadro III</a>).DISCUSIÓNEste estudio determinó la inmunoexpresión del TGF-β3 y del TGFβ-RIII en una muestra de tejido de la hendidura completa e incompleta de pacientes masculinos y femeninos que fueron sometidos a palatoplastia en el Hospital General «Dr. Manuel Gea González». Dicha expresión fue evaluada por inmunohistoquímica en la membrana y citoplasma de células epiteliales y fibroblastos del tejido de la hendidura palatina en pacientes dentro de los primeros tres años de edad, de tal forma que este estudio representa uno de los primeros realizados en humanos, posterior al periodo embrionario. Al comparar la edad entre ambos sexos no se encontraron diferencias significativas, debido al protocolo de selección para realizar la cirugía de paladar hendido, llevado a cabo por el Departamento de Cirugía Plástica y Reconstructiva.Por otro lado, las muestras evaluadas fueron en mayor cantidad en los pacientes con hendidura completa en comparación con hendidura incompleta, además, no hubo diferencia significativa entre el ancho de la hendidura completa con el sexo femenino y masculino, lo cual se debió a que los pacientes recibieron tratamiento de ortopedia prequirúrgica previo a la palatoplastia.Durante la evaluación de las muestras con TGF-β3 en paladar hendido completo, se observó expresión positiva en todas las células del epitelio, lo cual concuerda con los datos observados en muestras murinas.<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085">17–22</a>Se detectó además del epitelio escamoso correspondiente a paladar, epitelio de tipo respiratorio, debido a la anatomía patológica resultante de la falta de fusión de las crestas palatinas, la cual permite la unión entre cavidad oral y nasal.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170">34</a>Se observa que el epitelio escamoso y respiratorio fue positivo en la mayoría de los casos con paladar hendido completo, lo cual concuerda con lo reportado anteriormente en humanos, que indica que se ha detectado expresión moderada de TGF-β3 en células del epitelio respiratorio.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0175">35</a>La comparación de la expresión entre casos de paladar hendido completo e incompleto, no resultó adecuada desde el punto de vista estadístico, sin embargo, al observar la expresión de TGF-β3 en el citoplasma de epitelio de paladar hendido completo e incompleto, se observó una tendencia hacia la mayor expresión positiva de TGF-β3 en el epitelio de paladar hendido completo.En cambio, al evaluar la expresión de TGFβ-RIII en células epiteliales de paladar hendido completo e incompleto, se observó una tendencia hacia una menor expresión positiva en epitelio, al compararla con la expresión de TGF-β3, lo cual difiere de algunos estudios previos,<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0150">30–32</a> en los que mostraron que la expresión del TGFβ-RIII durante la palatogénesis ocurrió en el epitelio.Esta diferencia entre nuestros datos y lo reportado en la bibliografía, podría proponer que exista una falla de señalización en la inhibición o disminución de la expresión del TGFβ-RIII en las células epiteliales.Sin embargo, la expresión de TGF-β3 y TGFβ-RIII en fibroblastos, no tuvo diferencias.Por otro lado, este estudio no coincide con los realizados en muestras murinas, ya que a pesar de ser ambas especies mamíferos,<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0180">36</a> en humanos se observa en la mayoría de las ocasiones inmunoexpresión positiva, mientras que en muestras murinas se ha detectado ausencia de inmunoexpresión tanto de TGF-β3 como de TGFβ-RIII,<a 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reportado para la colocación de injertos en fisuras palatinas de pacientes con LPH, ya que al utilizar plasma rico en plaquetas, al momento de formar el coágulo, pueden desprender factores de crecimiento como el derivado de plaquetas, factor de crecimiento endotelial vascular, factor de crecimiento transformador tipo β, factor de crecimiento epidérmico, factor de crecimiento fibroblástico, entre otros, por lo que permitiría inducir la expresión del TGFβ-RIII a nivel epitelial<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0190">38–40</a> y así consolidar el injerto óseo, por lo que ésta es una razón más para continuar incrementando las investigaciones sobre este tema.CONCLUSIONESDespués de realizar la inmunohistoquímica del TGF-β3 y TGFβ-RIII, se concluyó que la ausencia de expresión del TGFβ-RIII en epitelio de paladar hendido completo e incompleto, podría tener relación con la falta de fusión de las crestas palatinas.Sería de gran interés continuar analizando más a fondo su expresión en 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La falta de expresión de TGF-β3 y del TGF-βRIII provoca defectos en la fusión palatina. ObjetivoObservar la inmunoexpresión del TGF-β3 y del TGF-βRIII en pacientes pediátricos con paladar hendido (PH), completo o incompleto no sindrómico. Material y métodosEl diseño de estudio fue observacional, descriptivo, prospectivo y transversal. La muestra consistió de 20 pacientes con PH completo e incompleto, de cinco a 28 meses de edad. Se tomaron muestras del mucoperiostio de la hendidura palatina durante la palatoplastia. Para realizar la inmunohistoquímica, las muestras se procesaron en un aparato VENTANA BenchMark Ultra, con el anticuerpo TGF-β3 y TGFβ-RIII. Se valoró su expresión, mediante impresión global celular. ResultadosLa inmunoexpresión del TGF-β3 fue mayor en las células epiteliales que en los fibroblastos de pacientes con PH completo e incompleto; sin embargo, la inmunoexpresión del TGFβ-RIII fue mayor en los fibroblastos que en células epiteliales de pacientes con paladar hendido completo. ConclusionesSe concluyó que la falta de expresión del TGFβ-RIII en epitelio, podría tener relación con la falta de fusión de las crestas palatinas. Sería de gran interés realizar un análisis más profundo de la expresión de TGF-β3 y TGFβ-RIII, en distintas poblaciones celulares." 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Samples were taken from 20 complete and incomplete CP patients from five to 28 months of age. Samples of mucoperiostium were removed from the cleft in the palate during palatoplasty. In order to perform immunohistochemistry, samples were processed with VENTANA Benchmark Ultra equipment, using TGF-β3 and TGFβ-RIII antibody. Immunoexpression was evaluated by means of global cell impression. ResultsTGF-β3 immunoexpression was greater in epithelial cells than in fibroblasts of patients with complete and incomplete CP; however, TGFβ-RIII immunoexpression was greater within the fibroblasts than in epithelial cells of patients with complete cleft palate. ConclusionsIt was concluded that the lack of TGFβ-RIII expression in the epithelium may be related to the lack of fusion of the palatal shelves. It would be of great interest to perform a more in-depth analysis of the expressions of TGF-β3 and TGFβ-RIII within different cell populations." 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entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Masculino \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">11.66 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">11.00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">11.00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">1.96 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Femenino \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">11.37 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">11.00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">8.00 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">3.20 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab1653492.png" ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Medida de la hendidura palatina por sexo" ] ] 11 => array:8 [ "identificador" => "tbl0015" "etiqueta" => "Cuadro III" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "detalles" => array:1 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "at3" "detalle" => "Cuadro II" "rol" => "short" ] ] "tabla" => array:1 [ "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:2 [ "tabla" => array:1 [ 0 => """ <table border="0" frame="\n \t\t\t\t\tvoid\n \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head " rowspan="2" align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Anticuerpo</th><th class="td" title="table-head " rowspan="2" align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Localizacion</th><th class="td" title="table-head " colspan="3" align="center" valign="bottom" scope="col">Inmunoexpresión paladar hendido completo</th><th class="td" title="table-head " colspan="3" align="center" valign="bottom" scope="col">Inmunoexpresión paladar hendido incompleto</th><th class="td" title="table-head " rowspan="2" align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">p</th></tr><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Positiva(%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Negativa(%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">NV(%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Positiva(%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Negativa(%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">NV(%) \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " rowspan="2" align="left" valign="bottom">TGF-β3</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="bottom">Epitelio \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">88.9 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">11.1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="center" valign="bottom">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="bottom">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="bottom">0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">0.008* \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Fibroblastos \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">72.2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">16.7 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">11.1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="center" valign="bottom">0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">0.119 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " rowspan="2" align="left" valign="top">TGFβ-RIII</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">Epitelio \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">44.4 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">33.3 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">22.2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="center" valign="bottom">0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="top">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="top">0.452 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="bottom">Fibroblastos \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">72.2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">16.7 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">11.1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="center" valign="bottom">0 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="bottom">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="left" valign="bottom">50 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry " align="right" valign="bottom">0.119 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr></tbody></table> """ ] "imagenFichero" => array:1 [ 0 => "xTab1653493.png" ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "*χ2. 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TRABAJO ORIGINAL

Immunoexpression of Transforming growth factor-β3 (TGF-β3) and receptor III of β Transforming Growth Factor (TGF β-RIII) in pediatric patients with complete or incomplete non-syndromic cleft palate

Carolina López González1,

Autor para correspondencia

caroleta21@hotmail.com

Autor para correspondencia.

, Héctor Aquiles Maldonado Martínez2, Salvador García López3, María del Carmen Rosas Ramírez4, Fernando López Casillas5, Araceli Pérez González6, Dulce Haydeé Gutiérrez Valdez7

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piel&#44; dientes&#44; gl&#225;ndulas&#44; entre otros &#243;rganos&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6&#8211;9</span></a> por lo que la falla de se&#241;alamiento tanto del TGF-&#946; como de la prote&#237;na morfogen&#233;tica de hueso &#40;BPM&#41; conlleva a una variedad de deformidades craneofaciales incluyendo el paladar hendido&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a></p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por otra parte&#44; el receptor tipo III&#44; tambi&#233;n llamado &#946;-glucano&#44; se distribuye en c&#233;lulas mesenquimales y epiteliales&#44; se puede unir a todas las isoformas del TGF-&#946;&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a> el cual puede ser anclado a la membrana o secretado en forma soluble&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12&#8211;14</span></a> la p&#233;rdida del TGF&#946;-RIII impide la elongaci&#243;n del proceso palatino y su elevaci&#243;n&#44; lo que ocasiona la hendidura&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">15</span></a> esto se da en parte por una reducci&#243;n de la expresi&#243;n de los genes TGF-&#946; y el receptor tipo I de BMP&#44; provocando una supresi&#243;n del se&#241;alamiento hacia el TGF&#946;-RIII&#44; que afecta el equilibro de dicha se&#241;alizaci&#243;n para la formaci&#243;n apropiada del tejido&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">16</span></a></p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En algunos estudios realizados para evaluar la palatog&#233;nesis por medio de inmunohistoqu&#237;mica&#44; en muestras murinas <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> e <span class="elsevierStyleItalic">in vitro</span>&#44; se determin&#243; que la expresi&#243;n de TGF-&#946;3&#44; y TGF&#946;-RIII&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a> en el paladar ocurre cuando las crestas ten&#237;an una orientaci&#243;n vertical&#44; esta inmunoexpresi&#243;n fue localizada en c&#233;lulas epiteliales&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La distribuci&#243;n epitelial se conserv&#243; durante la elevaci&#243;n de las crestas palatinas&#44; y destrucci&#243;n del epitelio medial&#46; Posterior a la fusi&#243;n palatina&#44; se observ&#243; una baja expresi&#243;n de TGF-&#946;3&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17&#8211;22</span></a> por lo que algunos estudios previos mostraron inhibici&#243;n de la se&#241;alizaci&#243;n para la activaci&#243;n del TGF-&#946;3 en muestras murinas tomadas del paladar hendido&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">23</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">24</span></a> No obstante&#44; ratones deficientes en la expresi&#243;n de TGF-&#946;3 mostraron defectos en la fusi&#243;n palatina&#44; por lo que la expresi&#243;n del TGF-&#946;3 se limit&#243; estrictamente al epitelio de la l&#237;nea palatina media en prefusi&#243;n&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">25&#8211;29</span></a></p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En cuanto al receptor&#44; en un estudio experimental de rat&#243;n&#44; se demostr&#243; que la expresi&#243;n del TGF&#946;-RIII durante la palatog&#233;nesis ocurre a trav&#233;s del epitelio&#44; y se localiza espec&#237;ficamente en el epitelio del borde medio durante la fusi&#243;n de las crestas palatinas&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">30&#8211;32</span></a> Adem&#225;s&#44; debido a la falta de la expresi&#243;n de &#233;ste&#44; conlleva a una alteraci&#243;n en la proliferaci&#243;n e inducci&#243;n de apoptosis celular&#44; as&#237; como a una afecci&#243;n endotelial&#44; reducci&#243;n de c&#233;lulas mesenquimatosas&#44; el cual afecta el desarrollo de osteoblastos&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0165"><span class="elsevierStyleSup">33</span></a></p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El objetivo del presente estudio&#44; fue el de determinar la inmunoexpresi&#243;n del TGF-&#946;3 y del TGF&#946;-RIII en una muestra de tejido de la hendidura de pacientes infantiles con paladar hendido completo o incompleto no sindr&#243;mico&#44; tratados con palatoplastia&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Previo a la toma de la muestra&#44; se firm&#243; el consentimiento informado y aprobaci&#243;n de la toma de muestra por el Comit&#233; &#201;tico de Investigaci&#243;n del Hospital General <span class="elsevierStyleBold">&#171;</span>Dr&#46; Manuel Gea Gonz&#225;lez<span class="elsevierStyleBold">&#187;</span> y de los padres o tutores de cada paciente&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0080">MATERIAL Y M&#201;TODOS</span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0085">Selecci&#243;n de la muestra</span><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La muestra consisti&#243; en 18 pacientes que presentaron paladar hendido completo&#44; y dos pacientes con paladar hendido incompleto&#59; ambos no sindr&#243;micos&#44; de los cuales&#44; ocho fueron del sexo femenino y 12 masculino&#44; de cinco a 28 meses de edad&#44; todos ellos programados para palatoplastia por primera vez&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Durante el estudio se procedi&#243; a recolectar una muestra de tejido sobrante del procedimiento quir&#250;rgico&#44; mismo que fue otorgado por el cirujano pl&#225;stico a cargo&#44; quien proporcion&#243; el tejido sin implicar un riesgo adicional para la salud de los pacientes&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El tejido fue tomado de la mucosa del paladar de la hendidura de 0&#46;3 a 0&#46;5 cm&#44; el cual fue fijado con formol en una soluci&#243;n buffer de fosfato al 10&#37; &#40;MEYER&#41;&#44; las muestras fueron guardadas a 4 <span class="elsevierStyleSup">o</span>C&#44; durante ocho horas&#44; posteriormente se colocaron en una soluci&#243;n de PBS&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0090">Preparaci&#243;n de la inmunohistoqu&#237;mica para TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII</span><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se realizaron cortes de cada muestra&#44; de 3&#956; cada uno&#44; con su respectivo control&#46; El anticuerpo del TGF-&#946;3 fue probado previamente en muestras de intestino delgado <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 1</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#44; mientras que el anticuerpo del TGF&#946;-RIII se prob&#243; previamente en muestras de la l&#237;nea celular HepG2 <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 2</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#44; y p&#225;ncreas de humano&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las muestras de tejido&#44; se dejaron secar y desparafinar a 60 <span class="elsevierStyleSup">o</span>C durante toda la noche&#46; La inmunohistoqu&#237;mica se corri&#243; en un aparato VENTANA BenchMark Ultra&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para el anticuerpo monoclonal primario TGF&#946;-RIII &#40;ab78421&#44; abcam&#41;&#44; se utiliz&#243; el sistema de detecci&#243;n UltraView &#40;Referencia 760-500&#44; lote E06611&#44; caducidad 20-09-2016&#41;&#46; Se seleccion&#243; la opci&#243;n de desparafinado a 72 <span class="elsevierStyleSup">o</span>C&#44; se realiz&#243; un acondicionamiento celular &#40;CC1&#41; por 20 minutos&#44; el anticuerpo primario se incub&#243; 20 minutos a 36 <span class="elsevierStyleSup">o</span>C&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para el anticuerpo policlonal TGF-&#946;3 &#40;sc-82&#44; Santa Cruz Biotechnology&#44; Inc&#46;&#41;&#44; se utiliz&#243; el sistema de detecci&#243;n OptiView &#40;Referencia 760-700&#44; lote F08259&#44; caducidad 28-10-2017&#41;&#46; Se seleccion&#243; la opci&#243;n de desparafinado a 72 <span class="elsevierStyleSup">o</span>C&#44; con el acondicionamiento celular &#40;CC1&#41; por 16 minutos&#44; el anticuerpo se incub&#243; por 12 minutos a 36 <span class="elsevierStyleSup">o</span>C&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0095">Evaluaci&#243;n de la expresi&#243;n del TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII por medio de inmunohistoqu&#237;mica</span><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se realiz&#243; la observaci&#243;n de los tejidos en un microscopio binocular &#40;Axio Lab&#46; A1&#41;&#46; Las im&#225;genes se tomaron con una c&#225;mara ZEISS Axiocam ERc 5s&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La observaci&#243;n y evaluaci&#243;n estuvo a cargo de un pat&#243;logo experto&#44; quien valor&#243; la presencia o ausencia de expresi&#243;n de TGF-&#946;3 y del TGF&#946;-RIII en las muestras&#44; mediante la impresi&#243;n global de las c&#233;lulas que resultaron te&#241;idas en diferentes zonas del tejido de la hendidura evaluado&#46;</p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0100">An&#225;lisis estad&#237;stico</span><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La informaci&#243;n se analiz&#243; en el paquete estad&#237;stico SPSS&#44; v 20&#46;0&#46; Se utiliz&#243; estad&#237;stica descriptiva&#46; Para las variables cualitativas&#44; se emplearon porcentajes&#44; y para las variables cuantitativas se emplearon medidas de tendencia central y dispersi&#243;n&#46;</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se utiliz&#243; &#967;<span class="elsevierStyleSup">2</span> para las variables nominales&#44; para comparar&#44; expresi&#243;n de TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII&#44; con paladar hendido completo e incompleto&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El nivel de significancia fue establecido cuando p &#60; 0&#46;05&#46;</p></span></span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0105">RESULTADOS</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este estudio la muestra de pacientes del sexo masculino&#44; correspondi&#243; al 60&#37; <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 3</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#44; con una media de 13&#46;00 &#177; 5&#46;93 meses de edad <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005"><span class="elsevierStyleItalic">Cuadro I</span></a>&#41;&#44; mientras que en los pacientes del sexo femenino correspondi&#243; al 40&#37; <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 3</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#44; con una media de 14&#46;25 &#177; 5&#46;44 meses de edad <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005"><span class="elsevierStyleItalic">Cuadro I</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#44; de los cuales resultaron el 90&#37; de casos con paladar hendido completo y 10&#37; con paladar hendido incompleto <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 4</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los pacientes proven&#237;an del Estado de M&#233;xico &#40;40&#37;&#41;&#44; Ciudad de M&#233;xico &#40;40&#37;&#41;&#44; Guerrero &#40;10&#37;&#41;&#44; Guanajuato &#40;5&#37;&#41; y Oaxaca &#40;5&#37;&#41; <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 5</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La medida de la hendidura palatina fue de 8 a 16 mm <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 6</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#44; la media para pacientes masculinos fue de 11&#46;66 &#177; 1&#46;96 mm y en pacientes femeninos de 11&#46;37 &#177; 3&#46;20 mm <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0010"><span class="elsevierStyleItalic">Cuadro II</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0030"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se observ&#243; mayor tama&#241;o de la hendidura palatina en muestras de paladar hendido completo &#40;11&#46;83 &#177; 2&#46;40&#41;&#44; que en paladar hendido incompleto &#40;9&#46;00 &#177; 1&#46;41&#41;&#46;</p><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Al comparar la frecuencia con la que se expres&#243; TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII&#44; se encontr&#243; lo siguiente&#58;</p><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se observ&#243; mayor expresi&#243;n positiva de TGF-&#946;3&#44; en la membrana y citoplasma de c&#233;lulas epiteliales&#44; que en la membrana y citoplasma de fibroblastos en muestras de paladar hendido completo e incompleto <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015"><span class="elsevierStyleItalic">Cuadro III</span></a><span class="elsevierStyleItalic">y</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0035"><span class="elsevierStyleItalic">Figuras 7</span></a><span class="elsevierStyleItalic">y</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0040"><span class="elsevierStyleItalic">8</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0015"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0035"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0040"></elsevierMultimedia><p id="par0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En cuanto al TGF&#946;-RIII&#44; se observ&#243; mayor expresi&#243;n positiva en membrana y citoplasma de fibroblastos&#44; que en membrana y citoplasma de c&#233;lulas epiteliales&#44; de paladar hendido completo&#46; En muestras de paladar hendido incompleto&#44; se observa tinci&#243;n negativa de TGF&#946;-RIII <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015"><span class="elsevierStyleItalic">Cuadro III</span></a><span class="elsevierStyleItalic">y</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0045"><span class="elsevierStyleItalic">Figura 9</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0045"></elsevierMultimedia><p id="par0135" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Al realizar la prueba de &#967;<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#44; se observa p &#61; 0&#46;008&#42; en casos de paladar hendido completo e incompleto&#44; con expresi&#243;n en TGF-&#946;3&#44; lo cual podr&#237;a indicar una diferencia entre las poblaciones de estudio en cuanto al tipo de paladar hendido&#44; por lo que ser&#237;a importante aumentar el n&#250;mero de muestras de paladar hendido incompleto en estudios posteriores <span class="elsevierStyleItalic">&#40;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015"><span class="elsevierStyleItalic">Cuadro III</span></a><span class="elsevierStyleItalic">&#41;</span>&#46;</p></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0110">DISCUSI&#211;N</span><p id="par0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este estudio determin&#243; la inmunoexpresi&#243;n del TGF-&#946;3 y del TGF&#946;-RIII en una muestra de tejido de la hendidura completa e incompleta de pacientes masculinos y femeninos que fueron sometidos a palatoplastia en el Hospital General &#171;Dr&#46; Manuel Gea Gonz&#225;lez&#187;&#46; Dicha expresi&#243;n fue evaluada por inmunohistoqu&#237;mica en la membrana y citoplasma de c&#233;lulas epiteliales y fibroblastos del tejido de la hendidura palatina en pacientes dentro de los primeros tres a&#241;os de edad&#44; de tal forma que este estudio representa uno de los primeros realizados en humanos&#44; posterior al periodo embrionario&#46; Al comparar la edad entre ambos sexos no se encontraron diferencias significativas&#44; debido al protocolo de selecci&#243;n para realizar la cirug&#237;a de paladar hendido&#44; llevado a cabo por el Departamento de Cirug&#237;a Pl&#225;stica y Reconstructiva&#46;</p><p id="par0145" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por otro lado&#44; las muestras evaluadas fueron en mayor cantidad en los pacientes con hendidura completa en comparaci&#243;n con hendidura incompleta&#44; adem&#225;s&#44; no hubo diferencia significativa entre el ancho de la hendidura completa con el sexo femenino y masculino&#44; lo cual se debi&#243; a que los pacientes recibieron tratamiento de ortopedia prequir&#250;rgica previo a la palatoplastia&#46;</p><p id="par0150" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Durante la evaluaci&#243;n de las muestras con TGF-&#946;3 en paladar hendido completo&#44; se observ&#243; expresi&#243;n positiva en todas las c&#233;lulas del epitelio&#44; lo cual concuerda con los datos observados en muestras murinas&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17&#8211;22</span></a></p><p id="par0155" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se detect&#243; adem&#225;s del epitelio escamoso correspondiente a paladar&#44; epitelio de tipo respiratorio&#44; debido a la anatom&#237;a patol&#243;gica resultante de la falta de fusi&#243;n de las crestas palatinas&#44; la cual permite la uni&#243;n entre cavidad oral y nasal&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0170"><span class="elsevierStyleSup">34</span></a></p><p id="par0160" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se observa que el epitelio escamoso y respiratorio fue positivo en la mayor&#237;a de los casos con paladar hendido completo&#44; lo cual concuerda con lo reportado anteriormente en humanos&#44; que indica que se ha detectado expresi&#243;n moderada de TGF-&#946;3 en c&#233;lulas del epitelio respiratorio&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0175"><span class="elsevierStyleSup">35</span></a></p><p id="par0165" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La comparaci&#243;n de la expresi&#243;n entre casos de paladar hendido completo e incompleto&#44; no result&#243; adecuada desde el punto de vista estad&#237;stico&#44; sin embargo&#44; al observar la expresi&#243;n de TGF-&#946;3 en el citoplasma de epitelio de paladar hendido completo e incompleto&#44; se observ&#243; una tendencia hacia la mayor expresi&#243;n positiva de TGF-&#946;3 en el epitelio de paladar hendido completo&#46;</p><p id="par0170" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En cambio&#44; al evaluar la expresi&#243;n de TGF&#946;-RIII en c&#233;lulas epiteliales de paladar hendido completo e incompleto&#44; se observ&#243; una tendencia hacia una menor expresi&#243;n positiva en epitelio&#44; al compararla con la expresi&#243;n de TGF-&#946;3&#44; lo cual difiere de algunos estudios previos&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0150"><span class="elsevierStyleSup">30&#8211;32</span></a> en los que mostraron que la expresi&#243;n del TGF&#946;-RIII durante la palatog&#233;nesis ocurri&#243; en el epitelio&#46;</p><p id="par0175" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Esta diferencia entre nuestros datos y lo reportado en la bibliograf&#237;a&#44; podr&#237;a proponer que exista una falla de se&#241;alizaci&#243;n en la inhibici&#243;n o disminuci&#243;n de la expresi&#243;n del TGF&#946;-RIII en las c&#233;lulas epiteliales&#46;</p><p id="par0180" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Sin embargo&#44; la expresi&#243;n de TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII en fibroblastos&#44; no tuvo diferencias&#46;</p><p id="par0185" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por otro lado&#44; este estudio no coincide con los realizados en muestras murinas&#44; ya que a pesar de ser ambas especies mam&#237;feros&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0180"><span class="elsevierStyleSup">36</span></a> en humanos se observa en la mayor&#237;a de las ocasiones inmunoexpresi&#243;n positiva&#44; mientras que en muestras murinas se ha detectado ausencia de inmunoexpresi&#243;n tanto de TGF-&#946;3 como de TGF&#946;-RIII&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">16</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">23</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">24</span></a><span class="elsevierStyleSup">&#44;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0185"><span class="elsevierStyleSup">37</span></a> lo anterior podr&#237;a deberse a la diferencia entre la fisiopatolog&#237;a en humano y en rat&#243;n&#46;</p><p id="par0190" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Adem&#225;s de lo anterior&#44; la presencia de la expresi&#243;n de TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII podr&#237;a estar relacionada con la edad del paciente&#44; por lo que la edad de estudio de los pacientes&#44; representar&#237;a otra variaci&#243;n en cuanto a los resultados encontrados en ratones&#44; ser&#225; necesario evaluar la expresi&#243;n de TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII&#44; en muestras control de pacientes sanos&#44; de 0 a 3 a&#241;os de edad&#46;</p><p id="par0195" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En estudios posteriores&#44; ser&#237;a interesante explorar las diferencias entre estos tipos de paladar hendido y las c&#233;lulas que expresan TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII&#44; por lo que ser&#237;a necesario incrementar el n&#250;mero de muestras de paladar hendido incompleto&#46;</p><p id="par0200" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados del presente estudio&#44; se relacionan con lo previamente reportado para la colocaci&#243;n de injertos en fisuras palatinas de pacientes con LPH&#44; ya que al utilizar plasma rico en plaquetas&#44; al momento de formar el co&#225;gulo&#44; pueden desprender factores de crecimiento como el derivado de plaquetas&#44; factor de crecimiento endotelial vascular&#44; factor de crecimiento transformador tipo &#946;&#44; factor de crecimiento epid&#233;rmico&#44; factor de crecimiento fibrobl&#225;stico&#44; entre otros&#44; por lo que permitir&#237;a inducir la expresi&#243;n del TGF&#946;-RIII a nivel epitelial<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0190"><span class="elsevierStyleSup">38&#8211;40</span></a> y as&#237; consolidar el injerto &#243;seo&#44; por lo que &#233;sta es una raz&#243;n m&#225;s para continuar incrementando las investigaciones sobre este tema&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0115">CONCLUSIONES</span><p id="par0205" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Despu&#233;s de realizar la inmunohistoqu&#237;mica del TGF-&#946;3 y TGF&#946;-RIII&#44; se concluy&#243; que la ausencia de expresi&#243;n del TGF&#946;-RIII en epitelio de paladar hendido completo e incompleto&#44; podr&#237;a tener relaci&#243;n con la falta de fusi&#243;n de las crestas palatinas&#46;</p><p id="par0210" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Ser&#237;a de gran inter&#233;s continuar analizando m&#225;s a fondo su expresi&#243;n en m&#225;s y distintas poblaciones celulares&#44; adem&#225;s de fibroblastos y c&#233;lulas epiteliales&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Media&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Mediana&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Moda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Desviaci&#243;n est&#225;ndar&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Masculino&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">13&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">12&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">12&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">5&#46;93&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Femenino&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">14&#46;25&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">5&#46;44&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></tbody></table>
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Media&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Mediana&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Moda&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Desviaci&#243;n est&#225;ndar&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Masculino&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;66&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">1&#46;96&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Femenino&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;37&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">11&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">8&#46;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">3&#46;20&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head  " rowspan="2" align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Anticuerpo</th><th class="td" title="table-head  " rowspan="2" align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Localizacion</th><th class="td" title="table-head  " colspan="3" align="center" valign="bottom" scope="col">Inmunoexpresi&#243;n paladar hendido completo</th><th class="td" title="table-head  " colspan="3" align="center" valign="bottom" scope="col">Inmunoexpresi&#243;n paladar hendido incompleto</th><th class="td" title="table-head  " rowspan="2" align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">p</th></tr><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head  " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Positiva&#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Negativa&#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">NV&#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Positiva&#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Negativa&#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="center" valign="bottom" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">NV&#40;&#37;&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " rowspan="2" align="left" valign="bottom">TGF-&#946;3</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="bottom">Epitelio&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">88&#46;9&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">11&#46;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="center" valign="bottom">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="bottom">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="bottom">0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">0&#46;008<span class="elsevierStyleSup">&#42;</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Fibroblastos&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">72&#46;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">16&#46;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">11&#46;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="center" valign="bottom">0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">0&#46;119&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " rowspan="2" align="left" valign="top">TGF&#946;-RIII</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Epitelio&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">44&#46;4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">33&#46;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">22&#46;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="center" valign="bottom">0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="top">0&#46;452&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="bottom">Fibroblastos&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">72&#46;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">16&#46;7&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="right" valign="bottom">11&#46;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="center" valign="bottom">0&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="bottom">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo

ISSN: 23959215
Idioma original: Español

DOI:10.1016/j.rmo.2018.01.003

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2024 Noviembre	3	0	3
2024 Octubre	60	12	72
2024 Septiembre	37	8	45
2024 Agosto	53	4	57
2024 Julio	34	5	39
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2018 Diciembre	9	5	14
2018 Noviembre	14	12	26
2018 Octubre	20	13	33
2018 Septiembre	30	5	35
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2018 Mayo	32	0	32
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