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TRABAJO ORIGINAL
Efecto de agentes de blanqueamiento dental sobre la concentración de fosfato en el esmalte dental por medio de espectroscopia Raman
Effect of tooth-bleaching agents on phosphate concentration in dental enamel by means of Raman spectroscopy
Tatiana Vargas-Koudriavtseva,1,
Autor para correspondencia
tatiana.vargas.k@gmail.com

Dirección para correspondencia.
, Randall Durán-Sedób, Paola Sáenz-Bonillab, Vivian Bonilla-Morac, Milena Guevara-Bertschd, Rodrigo Antonio Jiménez-Corralese, Oscar Andrey Herrera-Sanchof
a Máster en Prostodoncia, Máster en Salud Pública. Docente e Investigadora de la Facultad de Odontología
b Estudiante de grado de la Carrera de Odontología
c Laboratorista Química, Laboratorio Nacional de Materiales y Modelos Estructurales
d Estudiante de Maestría en Física. Docente e Investigadora del Instituto Tecnológico de Costa Rica
e Especialista en Prostodoncia, Docente e Investigador del Postgrado de Prostodoncia
f Doctor en Ciencias Naturales, Docente e Investigador Escuela de Física. Instituto Tecnológico de Costa Rica
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Este m&#233;todo es ideal para analizar el tejido superficial inorg&#225;nico &#40;por ejemplo&#44; la concentraci&#243;n de mol&#233;culas de fosfato y carbonato&#41; ya que es posible obtener informaci&#243;n de los minerales presentes por medio de la observaci&#243;n de sus energ&#237;as caracter&#237;sticas de sus modos vibracionales&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a> Como es bien conocido&#44; es posible excitar mol&#233;culas &#40;e&#46; g&#46; usando radiaci&#243;n electromagn&#233;tica de un l&#225;ser&#41;&#44; las cuales absorben y emiten parte de esta energ&#237;a&#44; la cual es f&#225;cilmente medible con fotodetectores comerciales&#46; Una descripci&#243;n simple para entender la espectroscopia Raman se puede hacer al observar los distintos tipos de dispersi&#243;n que ocurren cuando la radiaci&#243;n electromagn&#233;tica interact&#250;a con las mol&#233;culas&#46; Una opci&#243;n es que la energ&#237;a que transporta la radiaci&#243;n electromagn&#233;tica&#44; o la energ&#237;a del fot&#243;n&#44; sea igual antes y despu&#233;s de la colisi&#243;n con la mol&#233;cula&#44; este caso se conoce como dispersi&#243;n el&#225;stica o Rayleigh&#46; El caso cuando se observa una variaci&#243;n entre la energ&#237;a inicial y final del fot&#243;n despu&#233;s de la interacci&#243;n con la mol&#233;cula es llamado dispersi&#243;n inel&#225;stica o Raman&#46; A nivel at&#243;mico&#44; la probabilidad de que suceda la dispersi&#243;n Raman es mucho menor que la dispersi&#243;n de tipo Rayleigh&#44; aproximadamente 10<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> veces menor&#46; Este valor es equivalente a la diferencia que hay si se compara la altura promedio de un ser humano con respecto al radio del sol&#46; La dispersi&#243;n Raman o emisi&#243;n de radiaci&#243;n energ&#233;tica de estas mol&#233;culas&#44; se lleva a cabo en la regi&#243;n del espectro electromagn&#233;tico conocido como espectro infrarrojo cercano&#46; As&#237; mismo&#44; las mol&#233;culas superficiales presentes en estructuras dentales pueden ser caracterizadas a partir de su espectro de emisi&#243;n en la regi&#243;n del infrarrojo cercano&#44; conocido como espectros vibracionales&#46; La espectroscopia Raman presenta ventajas tales como&#58; 1&#41; preparaci&#243;n sencilla de la muestra&#59; 2&#41; an&#225;lisis simple de banda y espectral&#44; 3&#41; respuesta lineal a concentraciones minerales y qu&#237;micas&#44; 4&#41; an&#225;lisis de muestras sin ning&#250;n da&#241;o&#44; 5&#41; alta sensibilidad a cambios peque&#241;os de estructura y 6&#41; es posible escoger qu&#233; tanta cantidad de la muestra se est&#225; analizando&#46; Adem&#225;s&#44; al ser un m&#233;todo no des-tructivo &#40;pues el esp&#233;cimen no se debe modifi car cada vez que va a ser analizado&#41;&#44; las muestras pueden ser analizadas antes y despu&#233;s de un tratamiento&#44; con lo cual cada esp&#233;cimen puede funcionar como su propio control&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0040"><span class="elsevierStyleSup">8&#44;9</span></a></p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Debido a las caracter&#237;sticas mencionadas anterior-mente&#44; la espectroscopia Raman es entonces una t&#233;cnica id&#243;nea para investigar el efecto de los blanqueamientos dentales a base de per&#243;xido de hidr&#243;geno&#46; El blanqueamiento dental&#44; tanto casero como de oficina&#44; se promueve como un tratamiento conservador y de pocos efectos secundarios&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> No obstante&#44; pocas investigaciones han analizado los cambios en el esmalte a nivel molecular y los que lo han hecho presentan resultados muy antag&#243;nicos&#46; Algunos de los investigadores indican que la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato disminuye luego de la aplicaci&#243;n del blanqueamiento&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11&#8211;13</span></a> otros estudios sugieren que la concentraci&#243;n molecular permanece inalterada&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;14&#8211;17</span></a> Sin embargo&#44; como se mencion&#243; antes&#44; la literatura sobre el tema es escasa y las investigaciones presentan irregularidades en el m&#233;todo espectrosc&#243;pico aplicado tales como el uso del silicio como patr&#243;n de referencia&#44;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">18</span></a> el cual se encuentra lejano en el &#225;mbito de energ&#237;a de trabajo en comparaci&#243;n con la mol&#233;cula observada&#46; Adem&#225;s&#44; hay estudios que estiman la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato en la pieza dental como la altura m&#225;xima de la curva observada en el espectro &#40;intensidad del pico&#41; en la espectroscopia Raman&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;12</span></a> siendo la forma correcta de estimar una concentraci&#243;n de las mol&#233;culas presentes como el &#225;rea debajo de la curva medida con el espectr&#243;metro&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Constantemente se anuncian nuevos productos comerciales en el mercado&#44; con una promesa de disminuir la sensibilidad dental&#44; acelerar el proceso de blanqueamiento con diferentes concentraciones y menores tiempos de aplicaci&#243;n&#46; Por otro lado&#44; si se considera la decoloraci&#243;n dental&#44; existe una creciente demanda de los tratamientos para mejorar el color de los mismos&#46; La Academia Americana de Odontolog&#237;a Cosm&#233;tica &#40;<span class="elsevierStyleItalic">American Academy of Cosmetic Dentistry</span>&#41; ha reportado que los procedimientos de blanqueamiento dental han incrementado en un poco m&#225;s del 300&#37; entre el 2002 y el 2007 y que los n&#250;meros siguen creciendo alrededor de un 25&#37; anual&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">19</span></a> Por lo anterior&#44; el blanqueamiento es un procedimiento com&#250;n muy solicitado por los pacientes&#46; Es as&#237; que el an&#225;lisis molecular del esmalte dental luego de estos tratamientos es un terreno f&#233;rtil para la investigaci&#243;n en la odontolog&#237;a&#46; El objetivo de nuestra investigaci&#243;n es analizar los cambios en la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> luego del proceso de blanqueamiento con tres agentes blanqueadores de diferente concentraci&#243;n&#44; de una misma casa comercial&#44; por medio de la espectroscopia Raman&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0030">MATERIAL Y M&#201;TODOS</span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0035">Selecci&#243;n y preparaci&#243;n de la muestra</span><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se utilizaron 30 piezas dentales extra&#237;das&#44; libres de pigmentaciones y caries&#46; De ser necesario se elimin&#243; todo el c&#225;lculo presente por medio de un tratamiento de las piezas con el ba&#241;o ultras&#243;nico&#46; Todos los espec&#237;menes fueron sometidos a una profilaxis con piedra p&#243;mez para eliminar impurezas&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los dientes fueron divididos aleatoriamente en tres grupos de 10 piezas cada uno&#46; El &#225;rea de trabajo en cada esp&#233;cimen fue la porci&#243;n m&#225;s convexa en el tercio medio vestibular&#46; Esta &#225;rea se marc&#243; con dos l&#237;neas con el fin de aplicar el gel blanqueador siempre en la misma parte y para facilitar la ubicaci&#243;n del &#225;rea con el l&#225;ser utilizado en el espectr&#243;metro Raman al momento de las mediciones &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">Figura 1</a>&#41;&#46; Una vez seleccionadas y marcadas las piezas dentales se almacenaron en agua destilada a una temperatura de aproximadamente 32<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0040">Proceso de blanqueamiento</span><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El blanqueamiento se realiz&#243; utilizando el gel blanqueador de la marca Day White<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> a tres diferentes concentraciones&#46; En el <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">cuadro I</a> se muestran los materiales utilizados y sus diferentes caracter&#237;sticas para los grupos experimentales investigados&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las muestras se blanquearon dos veces al d&#237;a siguiendo las instrucciones del fabricante&#44; siendo cada aplicaci&#243;n de 30 minutos&#46; La primera aplicaci&#243;n se realiz&#243; a las 07&#58;00 horas y la segunda aplicaci&#243;n a las 16&#58;00 horas&#46; Se continu&#243; con este procedimiento durante 28 d&#237;as consecutivos&#46; Rutinariamente&#44; antes de cada aplicaci&#243;n del gel&#44; se retiraron manualmente los excesos de las jeringas blanqueadoras&#44; con el fin de eliminar el producto qu&#237;mico inactivo&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El gel blanqueador se aplic&#243; en la superficie previamente marcada y se dej&#243; actuar en ella por 30 minutos&#46; Luego&#44; las muestras se lavaron con abundante agua destilada y se almacenaron en agua destilada a 32 oC en tres cajas debidamente rotuladas&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0045">Obtenci&#243;n de la espectroscopia Raman</span><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para la medici&#243;n de los espectros Raman&#44; se utiliz&#243; un espectr&#243;metro comercial tipo Raman con focal &#40;marca&#58; WiTec&#44; modelo&#58; Alpha 300 R&#41; equipado con un l&#225;ser cuya longitud de onda es de 785<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>nm&#46; La potencia utilizada para la obtenci&#243;n de espectros fue de aproximadamente 100 mW&#46; El di&#225;metro del l&#225;ser utilizado fue de aproximadamente 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;m&#46; Estos valores fueron verificados peri&#243;dicamente para corregir las variaciones debidas a las fluctuaciones de la fuente l&#225;ser y de la fibra &#243;ptica para no irradiar el esp&#233;cimen con mayor intensidad&#44; i&#46; e&#46;&#44; potencia por unidad de &#225;rea&#46; Antes de realizar la medici&#243;n con el espectr&#243;metro se secaron los espec&#237;menes para evitar la fluorescencia que las mol&#233;culas de agua pudieran generar al interactuar con la radiaci&#243;n del l&#225;ser&#46; Luego cada pieza se coloc&#243; en un portamuestras y se ados&#243; al mismo por medio de pasta moldeable de arcilla pl&#225;stica &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">Figura 2</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A cada muestra se le realizaron mediciones con el espectr&#243;metro Raman antes de la aplicaci&#243;n del gel blanqueador&#46; Esta medici&#243;n se denomin&#243; medida control para que cada muestra sea por s&#237; misma su propia referencia&#46; Luego&#44; las mediciones con el espectr&#243;metro se llevaron a cabo en la segunda y cuarta semana de blanqueamiento continuo&#46; El espectro Raman del esp&#233;cimen fue adquirido mediante la irradiaci&#243;n con l&#225;ser de la superficie coronal del diente previamente marcada&#46; T&#237;picamente en el espectro se observa un pico cercano a 0<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>cm<span class="elsevierStyleSup">-1</span>&#44; el cual corresponde a la energ&#237;a dispersada de forma el&#225;stica&#44; i&#46; e&#46; Rayleigh&#46; Adem&#225;s&#44; otro pico que es intenso en el espectro obtenido es el correspondiente a la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span>&#46; Adem&#225;s&#44; se observan otros picos con menor intensidad caracter&#237;sticos de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">2</span>&#44; &#957;<span class="elsevierStyleInf">3</span> y &#957;<span class="elsevierStyleInf">4</span>&#44; en conjunto con el carbonato&#46; En esta investigaci&#243;n se analiz&#243; &#250;nicamente el pico proveniente de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span>&#44; para as&#237; determinar su concentraci&#243;n a lo largo de las cuatro semanas de blanqueamiento continuo&#46; Para cada espectro que se obtuvo de un esp&#233;cimen se llevaron a cabo 100 mediciones &#40;un total de 100 acumulaciones&#41; en el mismo punto con un tiempo de integraci&#243;n de 0&#46;5 s cada acumulaci&#243;n&#46; Lo anterior con el fin de aumentar la se&#241;al Raman obtenida de la mol&#233;cula de fosfato y disminuir el ruido derivado de fluctuaciones del l&#225;ser y el detector&#46; Tambi&#233;n&#44; despu&#233;s de obtener el espectro Raman de cada pieza&#44; se llev&#243; a cabo otra medici&#243;n con la misma cantidad de acumulaciones y tiempo de integraci&#243;n pero sin radiaci&#243;n l&#225;ser&#46; Esto con el fin de substraer matem&#225;ticamente estos dos espectros y obtener la se&#241;al producida &#250;nicamente de la interacci&#243;n del l&#225;ser con la mol&#233;cula a investigar&#46;</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Cada espectro obtenido de una muestra fue importado al software PeakFit<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;Systat Software Inc&#46;&#41;&#44; el cual permite graficar el espectro Raman de cada muestra y adem&#225;s permite obtener&#44; con mucha precisi&#243;n&#44; los valores de energ&#237;a &#40;eje &#171;x&#187;&#41; e intensidad &#40;eje &#171;y&#187;&#41; para cada pico espectral por medio de ajustes &#40;l&#237;nea base&#44; tipo de picos&#58; gaussianos o lorentzianos&#44; suavizado&#44; eliminaci&#243;n de puntos solos&#44; etc&#46;&#41; a los espectros&#46; Los datos obtenidos con el software PeakFit<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;energ&#237;a&#44; intensidad&#44; &#225;rea bajo la curva&#41; para cada muestra fueron almacenados semanalmente al igual que el gr&#225;fico del espectro Raman correspondiente a cada muestra&#46; Cabe recalcar que para cada pico se calcul&#243;&#44; adem&#225;s&#44; el &#225;rea bajo la curva&#44; lo cual refleja de una manera objetiva la intensidad de la se&#241;al de la mol&#233;cula analizada&#46;</p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0050">An&#225;lisis estad&#237;stico</span><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Previo a la realizaci&#243;n del an&#225;lisis estad&#237;stico se aplic&#243; una normalizaci&#243;n con el pico tipo Rayleigh obtenido de los valores medidos del espectro Raman para cada mol&#233;cula de cada esp&#233;cimen&#46; Esto se hizo con el fin de neutralizar la posible variabilidad del equipo de medici&#243;n a lo largo del tiempo y posibles fl uctuaciones de potencia de la fuente l&#225;ser&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Con ayuda del programa SPSS<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> v19 &#40;IBM Software&#41; se llev&#243; a cabo la estad&#237;stica descriptiva para la muestra&#44; as&#237; como un an&#225;lisis de varianza para mediciones repetitivas&#46; Este an&#225;lisis de varianza se realiz&#243; para detectar cualquier tipo de diferencia estad&#237;sticamente significativa entre los grupos experimentales &#40;grupo 1&#44; grupo 2 y grupo 3&#41; y entre las diferentes semanas del blanqueamiento aplicado seg&#250;n cada grupo experimental&#46; Previo a los an&#225;lisis de varianza se realiz&#243; el test Mauchly de esfericidad con el fin de corroborar si los datos recolectados a trav&#233;s del an&#225;lisis con el software PeakFit<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> de los espectros Raman cumpl&#237;an con las condiciones necesarias para poder llevar a cabo el an&#225;lisis estad&#237;stico ANOVA&#46;</p></span></span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0055">RESULTADOS</span><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">figura 3</a> nos muestra el comportamiento de la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> previo &#40;semana control&#41; y a lo largo de las semanas de blanqueamiento &#40;semana 2 y semana 4&#41;&#46; Para una mejor visualizaci&#243;n de los resultados&#44; los datos fueron normalizados con respecto a su concentraci&#243;n inicial de la semana control&#46; Cada punto del gr&#225;fi co corresponde al promedio de los diez espec&#237;menes de cada grupo experimental&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se puede observar a partir del gr&#225;fico anterior que tanto el segundo como el tercer grupo experimental presentan una disminuci&#243;n de la mol&#233;cula estudiada a lo largo de todas las semanas de tratamiento&#46; Cabe destacar que el tercer grupo experimental tiene el descenso m&#225;s pronunciado entre la segunda semana de tratamiento y que esta disminuci&#243;n se estabiliza para la semana cuatro del tratamiento&#46; En comparaci&#243;n con el grupo 3&#44; el grupo 2 tiene un descenso en la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato con una pendiente menos pronunciada&#46; A diferencia de lo anterior&#44; el grupo 1 es el &#250;nico que presenta un aumento de la mol&#233;cula de fosfato a la mitad del tiempo de tratamiento investigado&#46; N&#243;tese a su vez que los grupos 1 y 2 llegan a una p&#233;rdida de la mol&#233;cula de fosfato similar a la semana cuatro del tratamiento&#46; Entonces&#44; a partir del gr&#225;fico anterior&#44; se puede inferir que los grupos experimentales 1 y 2 pierden aproximadamente 20&#37; de la mol&#233;cula de fosfato y el grupo 3 pierde aproximadamente 50&#37;&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0010">cuadro II</a> presenta el an&#225;lisis de varianza general para los valores de concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0010"></elsevierMultimedia><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la fila &#171;prepost&#187; del cuadro II se analiza si hay una diferencia estad&#237;sticamente significativa &#40;a un nivel de significancia del 95&#37;&#41; en la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> antes y durante el blanqueamiento&#46; El nivel de significancia nos indica que s&#237; hay una diferencia significativa entre las tres semanas de medici&#243;n&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la fila &#171;prepost grupo&#187; se analiza si hay una interacci&#243;n entre el grupo experimental y la semana de tratamiento&#44; es decir&#44; si la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> cambia de forma diferente depende de si pertenece al grupo experimental 1&#44; 2 o 3&#46; El resultado indica que s&#237; hay una interacci&#243;n&#44; es decir&#44; que seg&#250;n el grupo experimental al que se pertenezca&#44; as&#237; va a disminuir la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula&#46;</p><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se procedi&#243; a realizar una prueba <span class="elsevierStyleItalic">post hoc</span> de Bonferroni &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0015">Cuadro III</a>&#41; seg&#250;n cada grupo experimental para observar entre cu&#225;les semanas de medici&#243;n hubo una diferencia estad&#237;sticamente significativa&#46; En esta tabla se puede observar que en el grupo 1 no hay una variaci&#243;n significativa de la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> de fosfato a lo largo de las cuatro semanas de tratamiento&#46; En el grupo 2 se observa una diferencia entre la semana control y la &#250;ltima semana de tratamiento&#44; no as&#237; con la segunda semana de tratamiento&#46; El grupo experimental 3 refleja una diferencia significativa entre la semana control respecto a la segunda y cuarta semana de tratamiento&#44; pero no entre la segunda semana y la cuarta&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0015"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0060">DISCUSI&#211;N</span><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El principal componente mineral del esmalte es la hidroxiapatita&#44; cuya f&#243;rmula b&#225;sica es Ca<span class="elsevierStyleInf">10</span>&#40;PO4&#41;<span class="elsevierStyleInf">6</span>&#40;OH&#41;<span class="elsevierStyleInf">2</span> algunos otros iones como fluoruro usualmente est&#225;n incorporados en el cristal&#46; La disoluci&#243;n del esmalte en &#225;cido ocurre como resultado de la interacci&#243;n de los iones de hidr&#243;geno y la hidroxiapatita como se muestra a continuaci&#243;n en la ecuaci&#243;n balanceada&#58;<elsevierMultimedia ident="eq0005"></elsevierMultimedia></p><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Por lo anterior&#44; la cuantificaci&#243;n de la concentraci&#243;n del grupo fosfato en la hidroxiapatita por medio de espectroscopia Raman es un buen indicador del grado de mineralizaci&#243;n del esmalte dental&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11&#44;13</span></a></p><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Estudios previos han utilizado la intensidad del pico m&#225;ximo dada en unidades arbitrarias y el valor del ancho a la mitad del pico m&#225;ximo para la comparaci&#243;n de las mediciones&#46; Sin embargo&#44; en el presente estudio se utiliz&#243; el &#225;rea total bajo la curva para realizar los an&#225;lisis cuantitativos del fosfato dental ya que seg&#250;n Gilchrist<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">20</span></a>&#233;ste es el m&#233;todo de comparaci&#243;n m&#225;s exacto porque excluye el fondo del espectro producido por la luz incidente y la oscuridad proveniente del detector CCD y&#44; por lo tanto&#44; se mide s&#243;lo la se&#241;al producida por la excitaci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato &#957;1 que es directamente proporcional a la concentraci&#243;n del grupo total de fosfato dentro de la mol&#233;cula de hidroxiapatita y por lo tanto puede ser utilizada para analizar los cambios en la concentraci&#243;n de este mineral cuando el esmalte dental es sometido a agentes blanqueadores en diferentes concentraciones&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a></p><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados de nuestro estudio demostraron que en el grupo de dientes blanqueados con per&#243;xido de hidr&#243;geno al 9&#46;5&#37; &#40;grupo experimental 1&#41; no hubo diferencia estad&#237;sticamente significativa entre la banda de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> evaluada previo a la aplicaci&#243;n del gel de blanqueamiento&#44; y la banda de fosfato &#957;1 obtenida despu&#233;s de cuatro semanas de tratamiento&#46; Sin embargo&#44; parece importante resaltar que aunque estad&#237;sticamente no es significativo&#44; la concentraci&#243;n del grupo fosfato tuvo una variaci&#243;n en las primeras dos semanas de blanqueamiento en las cuales se not&#243; un leve aumento &#40;aproximadamente 20&#37;&#41; en la medici&#243;n de la mol&#233;cula en estudio&#46; Este aumento se puede atribuir a la composici&#243;n qu&#237;mica del gel blanqueador Day White<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> ACP&#40;<span class="elsevierStyleItalic">amorphous calcium phosphate</span>&#44; fosfato de calcio amorfo&#41;&#44; ya que algunas investigaciones<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">21</span></a> han demostrado que el uso de ACP tiene el potencial para rellenar defectos superficiales del esmalte dental con iones minerales similares a los que est&#225;n presentes en esta estructura del diente&#44; tales como calcio y fosfato&#46; Es posible que despu&#233;s de las semanas iniciales de blanqueamiento el fosfato brindado por el ACP no sea suficiente para restablecer la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula perdida&#44; evidenci&#225;ndose en una disminuci&#243;n en la banda de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> para el grupo experimental 1&#46; Para los grupos experimentales 2 y 3&#44; en los cuales la p&#233;rdida de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> fue estad&#237;sticamente significativa&#44; este aumento inicial de fosfato no se obtuvo&#44; probablemente porque desde el inicio del blanqueamiento a una mayor concentraci&#243;n de per&#243;xido de hidr&#243;geno fue mayor la cantidad de fosfato perdida que la brindada por el ACP de los geles blanqueadores&#46;</p><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La p&#233;rdida de concentraci&#243;n de la mol&#233;cula fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> en el grupo experimental 2&#44; en el cual se utiliz&#243; per&#243;xido de hidr&#243;geno al 14&#37;&#44; fue estad&#237;sticamente significativa y se puede decir que mostr&#243; un patr&#243;n de disminuci&#243;n uniforme o constante a lo largo de las cuatro semanas de blanqueamiento&#59; sin embargo&#44; el grupo experimental 3&#44; sometido a per&#243;xido de carbamida al 38&#37;&#44; el cual seg&#250;n el fabricante es equivalente a 14&#37; de per&#243;xido de hidrogeno&#44; mostr&#243; de la misma manera una disminuci&#243;n significativa &#40;aproximadamente 50&#37;&#41; del fosfato al fi nal del tratamiento&#46;</p><p id="par0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Es importante notar que la disminuci&#243;n en el grupo experimental 3 en las primeras dos semanas fue m&#225;s dr&#225;stica que la obtenida para este mismo tiempo en el grupo experimental 2&#44; esto podr&#237;a justificarse con lo mencionado en otra investigaci&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">22</span></a> donde se indica que aunque el resultado final es equivalente&#44; los espec&#237;menes sometidos a per&#243;xido de carbamida presentan un efecto m&#225;s acelerado en comparaci&#243;n a los tratados con per&#243;xido de hidr&#243;geno&#46; Lo anterior fue observado&#44; tambi&#233;n por otras investigaciones&#44;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0030"><span class="elsevierStyleSup">6&#44;23&#44;24</span></a> en donde se menciona que en el mecanismo de blanqueamiento dental del per&#243;xido de carbamida se divide el compuesto en dos componentes&#58; urea y per&#243;xido de hidr&#243;geno&#46; La urea tiene la habilidad de desnaturalizar las prote&#237;nas presentes en la porci&#243;n org&#225;nica de la estructura dental con el potencial de penetrar y afectar no solamente el esmalte dental superficial sino que tambi&#233;n la porci&#243;n prism&#225;tica&#46; Por lo tanto&#44; la penetraci&#243;n de la urea podr&#237;a contribuir a una permeabilidad incrementada en el esmalte y en consecuencia cambios microestructurales m&#225;s acelerados &#40;como el observado en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015"><span class="elsevierStyleItalic">figura 3</span></a> para el grupo experimental 3&#46; Adem&#225;s de la urea&#44; se ha reportado que el ox&#237;geno liberado del per&#243;xido de carbamida tambi&#233;n es capaz de incrementar la porosidad del esmalte dental&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">24</span></a> En los estudios anteriores no se concluye que el efecto del per&#243;xido de carbamida sea mejor que el causado por el per&#243;xido de hidr&#243;geno&#44; por el contrario indican que el efecto final es comparable entre los dos compuestos&#44; pero si se indica un cambio m&#225;s acelerado en las primeras semanas de uso del per&#243;xido de carbamida&#46; Esto fue igualmente comprobado en esta investigaci&#243;n y adem&#225;s se obtuvo una disminuci&#243;n total mayor para el grupo experimental 3 de aproximadamente 1&#46;5 veces m&#225;s que el grupo experimental 2&#46;</p><p id="par0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Luego de discutir el comportamiento de la concentraci&#243;n de la mol&#233;cula de fosfato &#957;<span class="elsevierStyleInf">1</span> &#40;o del compuesto total de fosfato&#41; a lo largo de las semanas de blanqueamiento&#44; cabe resaltar la significancia cl&#237;nica de la p&#233;rdida de &#233;ste&#46; El fosfato ejerce una acci&#243;n cariost&#225;tica&#44; es decir&#44; reduce la solubilidad del esmalte y act&#250;a como un b&#250;fer en la neutralizaci&#243;n de los valores de pH de la saliva&#44; la placa bacteriana y los alimentos&#46; Tambi&#233;n&#44; interfi ere con los procesos enzim&#225;ticos en la superfi cie del esmalte para aumentar la resistencia del hu&#233;sped&#44; disminuir la adhesi&#243;n bacteriana e interferir en la s&#237;ntesis de formaci&#243;n de polisac&#225;ridos extracelulares&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a> La disminuci&#243;n estructural de la microdureza del diente puede ser atribuida a la degradaci&#243;n de la superficie como resultado del proceso oxidativo de los radicales libres&#46; La microdureza est&#225; directamente relacionada con el contenido de minerales del esmalte por tanto una p&#233;rdida del grupo de fosfato puede alterar esta propiedad en el esmalte&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">16</span></a></p><p id="par0145" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Una de las limitaciones del presente estudio fue no haber almacenado los espec&#237;menes en saliva artificial a 37 oC a lo largo de la investigaci&#243;n&#46; La saliva artificial contiene fosfato&#44; el cual tendr&#237;a el efecto potencial de revertir el efecto causado por los agentes blanqueadores y actuar como agente alcalinizante&#46; Sin embargo&#44; la composici&#243;n de la saliva artificial rara vez es conocida en su totalidad y esto podr&#237;a introducir una variable adicional a la investigaci&#243;n&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a> Por otro lado&#44; como es bien conocido&#44; el medio oral provee condiciones para la remineralizaci&#243;n del esmalte&#46; Cuando el agente blanqueador causa desmineralizaci&#243;n en el mismo&#44; se inducen cambios i&#243;nicos que incrementan la captaci&#243;n de minerales&#46; Por lo tanto se reemplaza as&#237; la p&#233;rdida que se dio por el agente blanqueador&#46;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">25&#44;26</span></a> No obstante&#44; en el presente estudio&#44; la variable saliva fue eliminada para concentrarse en el efecto puro de los geles de blanqueamiento sobre la concentraci&#243;n del grupo fosfato del esmalte dental en funci&#243;n del tiempo y porcentaje de concentraci&#243;n del per&#243;xido de hidr&#243;geno&#46;</p><p id="par0150" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Otra de las limitaciones de este estudio es el hecho de haber utilizado piezas dentales extra&#237;das de diferentes individuos&#44; esto implica que la concentraci&#243;n de fosfato inicial difiera entre los espec&#237;menes y por ende la p&#233;rdida de concentraci&#243;n de &#233;ste a lo largo del tratamiento con el gel blanqueador&#46; Adem&#225;s&#44; el hecho de ser diferentes tipos de piezas dentales dificult&#243; las mediciones&#44; pues las piezas muy bulbosas se volv&#237;an dif&#237;ciles de colocar en el espectr&#243;metro Raman&#44; y la presencia de fluorescencia&#44; cuando se realizaron las mediciones&#44; oblig&#243; a mover las muestras para obtener mejores resultados&#44; no garantizando as&#237; que todas las mediciones fueran realizadas exactamente en el mismo sitio&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0065">CONCLUSIONES</span><p id="par0155" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Dentro de las limitaciones del presente estudio se puede concluir que los espec&#237;menes tratados con per&#243;xido de hidr&#243;geno al 9&#46;5&#37; presentan una m&#237;nima p&#233;rdida de fosfato dental&#44; no significativa estad&#237;sticamente&#44; cuando se compara con los espec&#237;menes tratados con per&#243;xido de hidr&#243;geno al 14&#37; y per&#243;xido de carbamida al 38&#37;&#46;</p><p id="par0160" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El blanqueamiento dental con per&#243;xido de hidr&#243;geno al 14&#37; produjo una p&#233;rdida de fosfato dental continua a lo largo de las cuatro semanas de tratamiento y represent&#243; una p&#233;rdida mineral de aproximadamente 22&#37;&#46;</p><p id="par0165" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los espec&#237;menes blanqueados con per&#243;xido de carbamida al 38&#37; presentaron la mayor p&#233;rdida de fosfato del esmalte dental&#44; equivalente a una disminuci&#243;n de aproximadamente el 45&#37; la cual ocurri&#243; principalmente en las primeras dos semanas del estudio&#44; dado que en las semanas 3 y 4 la concentraci&#243;n se mantuvo constante&#46;</p></span><span id="sec0050" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0070">Agradecimientos</span><p id="par0170" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este proyecto es financiado por el Fondo Especial de Est&#237;mulo a la Investigaci&#243;n de la Universidad de Costa Rica&#46;</p><p id="par0175" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores agradecen la colaboraci&#243;n de todo el personal del Laboratorio de Infraestructura Vial del Laboratorio Nacional de Materiales y Modelos Estructurales &#40;LANAMME&#41;&#44; V&#237;ctor Rodr&#237;guez del Laboratorio Mec&#225;nico de Precisi&#243;n de la Escuela de F&#237;sica&#44; Universidad de Costa Rica&#44; as&#237; como a las estudiantes Calendy Soto&#44; Sof&#237;a Obando y Amaya V&#225;squez de la Facultad de Odontolog&#237;a&#44; Universidad de Costa Rica&#46;</p><p id="par0180" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Universidad de Costa Rica&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Producto&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Composici&#243;n&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Lote n&#250;mero&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Day White<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Per&#243;xido de hidr&#243;geno 9&#46;5&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Day White<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Per&#243;xido de hidr&#243;geno 14&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">14043020&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Day White<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Per&#243;xido de carbamida 38&#37; &#40;correspondiente a 13&#46;3&#37; de per&#243;xido de hidr&#243;geno&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">14150024&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Suma de cuadrados tipo III&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Sig&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">repost&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">376662&#44;310&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">&#46;000&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">Prepost grupo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">316096&#44;941&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">&#46;009&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col">&#40;I&#41; Prepost&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col">&#40;J&#41; Prepost&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col">Diferencia de medias &#40;I-J&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col">Sig&#46;<span class="elsevierStyleSup">aa</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " colspan="2" align="left" valign="top" scope="col">95&#37; Intervalo de confianza</th></tr><tr title="table-row"><th class="td" title="table-head  " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">L&#237;mite inferior&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th><th class="td" title="table-head  " align="left" valign="top" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">L&#237;mite superior&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-57&#44;782&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">1&#44;000&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-335&#44;367&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">219&#44;804&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">69&#44;067&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">0&#44;959&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-123&#44;314&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">261&#44;448&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Semana 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">126&#44;848&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">0&#44;266&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-68&#44;023&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">321&#44;720&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">76&#44;286&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">0&#44;265&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-40&#44;855&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">193&#44;427&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">117&#44;563&#42;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">0&#44;047&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">1&#44;489&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">233&#44;637&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Semana 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">41&#44;277&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">1&#44;000&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-86&#44;691&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">169&#44;244&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="table-entry ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="top">3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Control&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">288&#44;324&#42;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">0&#44;005&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">98&#44;003&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">478&#44;646&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">281&#44;252&#42;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">0&#44;019&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">48&#44;639&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">513&#44;866&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="table-entry  " align="" valign="top">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Semana 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">Sem&#46; 4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-7&#44;072&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">1&#44;000&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">-210&#44;809&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="table-entry  " align="left" valign="top">196&#44;665&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></tbody></table>
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Información del artículo
ISSN: 1870199X
Idioma original: Español
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2017 Mayo 49 7 56
2017 Abril 31 5 36
2017 Marzo 44 62 106
2017 Febrero 41 7 48
2017 Enero 42 4 46
2016 Diciembre 43 5 48
2016 Noviembre 68 3 71
2016 Octubre 77 9 86
2016 Septiembre 90 6 96
2016 Agosto 54 8 62
2016 Julio 35 4 39
2016 Junio 35 16 51
2016 Mayo 32 18 50
2016 Abril 22 9 31
2016 Marzo 37 15 52
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2016 Enero 18 14 32
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