Análisis de microsatélites de la región 3p13-p25 en el carcinoma de células renales en humanos

Resumen

Introducción y objetivos

En el desarrollo del carcinoma de células renales no papilar (Carcinoma Renal Convencional-CRC) sehan implicado deleciones terminales e intersticiales de diversas regiones del 3p. Se ha realizado un análisis de microsatélites en la región3p13-p25 para estudiar el papel del brazo corto del cromosoma 3 en la patogénesis del Carcinoma de Células Renales (CCR).

Material y métodos

Se obtuvieron muestras de las piezas de nefrectomía de 57 pacientes afectos de tumor renal. Los controlesnormales de DNA constitucional lo constituyeron las muestras de riñón sano y sangre periférica de cada paciente. La valoración de la pérdidade heterocigosidad (LOH) se determinó mediante 8 marcadores localizados en 3p13-p25. Las alteraciones genéticas se han correlacionadocon la histología, grado nuclear, estadio patológico e infiltración celular estromal.

Resultados

Un total de 41 casos (71,9%) correspondieron a carcinomas renales de células claras o convencionales (CRC), 7 (12,3%)carcinomas cromófobos, 5 (8,8%) carcinomas papilares, y 4 (7%) oncocitomas. El 73,2% de los CRC mostró LOH, pero ninguno de los restantestipos histológicos. Deleciones terminales se detectaron en 53,3% de los CRC con LOH, y el resto mostraron deleciones intersticialesmúltiples (46,6%). La región 3p14.2 presenta una región común de pérdida. Debido a la contaminación con ADN normal, cuandola infiltración celular estromal aumenta, se detectan menor número de LOH. No se ha encontrado asociación de LOH 3p con el grado nuclear, ni con el estadio patológico.

Conclusiones

1. El análisis de microsatélites de LOH en 3p puede ser utilizado para el diagnóstico diferencial de los tumores renales.2. La evidencia de múltiples deleciones intersticiales en un gran número de CRC sugiere que más de un gen debe estar implicado enla génesis de esta neoplasia, y que ya debe estar presente en estadios tempranos de la oncogénesis. 3. La región común de pérdida 3p14.2sugiere la presencia de secuencias inestables de ADN que juegan un papel importante en la patogénesis del CRC. 4. LOH en 3p en lamayoría de los CRC, independientemente del grado y estadio, demuestra que estas alteraciones moleculares no marcan un comportamiento más agresivo del tumor.

Abstract

Introduction & objectives

Interstitial and terminal deletions of different regions of the chromosome 3 have been associated withthe development of human nonpapillary renal cell carcinomas. We performed a microsatellite analysis at the region 3p13-p25 to studythe role of the short arm of chromosome 3 in the pathogenesis of Renal Cell Carcinomas.

Material & methods

Renal tumor specimens and normal kidney tissue from 57 patients were obtained after radical nephrectomyand immediately snap-frozen. Blood samples were also obtained from each patient, immediately proccesssed and used as normal DNA.To detect allelic loss, we used 8 microsatellite markers covering the region 3p13-p25. Genetic alterations have been correlated with histology, nuclear grade, pathological stage and stromal cell infiltration.

Results

A total of 41 cases (71.9%) were clear cell renal cell carcinomas (CCRCC), 7 (12.3%) were chromophobe renal cell carcinomas,5 (8.8%) were papillary renal cell carcinomas, and 4 (7%) oncocytic tumors. Microsatellite analysis showed loss of heterozigosity(LOH) in 73.2% of the CCRCCs, and in none of the remaining histologic types. Terminal deletions were detected in 53.3% of the nonpapillaryRCCs with LOH, and the remaining nonpapillary RCCs showed multiple interstitial deletions (46.6%). A common region of deletionin 3p14.2 has been observed. Due to contamination with normal DNA, when stromal cell infiltration increases, less losses of heterozigosityare detected. We did not find a correlation between LOH at 3p and the nuclear grade, nor between LOH at 3p and the pathologicalstage.

Conclusions

1. Microsatellite analysis of LOH at 3p can be used for the differential diagnosis of renal tumors. 2. The evidence ofmultiple interstitial deletions in a great number of nonpapillary RCCs suggests that more than one gene should be involved in the developmentof nonpapillary RCC, and already present in early stages of oncogenesis. 3. The common region of deletion 3p14.2 suggests thepresence of unstable sequences of DNA that play an important role in the pathogenesis of nonpapillary RCC. 4. LOH at 3p in most nonpapillaryRCCs irrespective of the grade and stage, proves that these molecular alterations do not mark a more aggressive behaviour of the tumor.