Objetivo: El bevacizumab es un anticuerpo monoclonal utilizado para el tratamiento de patologías oncológicas y de hipervascularización ocular. Su inclusión como parte de un nanosistema permitiría mejorar la biodisponibilidad del fármaco y facilitar su aplicación. El objetivo es comparar la biodistribución in vivo mediante SPECT/CT de bevacizumab radiomarcado y nanopartículas de albúmina pegiladas (HSA-PEG) con bevacizumab encapsulado, marcando bien la cubierta de albúmina de la nanopartícula o el bevacizumab.

Material y métodos: El bevacizumab se obtuvo tras purificación con columnas PD10 de Avastin^®. Se prepararon: 1. Nanopartículas de HSA-PEG con bevacizumab que se marcaron directamente con 99mTc-pertecnetato/SnCl2. La pureza radioquímica (%PR) se evaluó mediante TLC (Whatman 3MM, suero). 2. 99mTc[(H2O)3(CO)3] (a partir de kit comercial, PSI) utilizado para preparar 99mTc(CO)3-Bevacizumab, que se purificó posteriormente utilizando concentradores Amicon^®. Se evaluó la estabilidad del marcaje incubando a 37ªc en plasma (1:10) e histidina 10mM hasta 24h determinando la %PR mediante radio-TLC (Alugram RP-18, MeOH/citrato sódico (50:50)). 3. El anticuerpo marcado se encapsuló en nanopartículas de albúmina preparadas por desolvatación y posteriormente recubiertas con PEG [1], midiendo %PR por radio-TLC (ITLC-SG, suero), tamaño de partícula y polidispersión. Tras la administración i.v. (n = 13 ratas) de las tres formulaciones radiomarcadas se evaluó su biodistribución (1, 4, 10, 24h) mediante SPECT/CT. Las imágenes se exportaron y analizaron con PMOD.

Resultado: Los%PR de 99mTc-NP-Beva, 99mTc(CO)3-Bevacizumab purificado, y NP-99mTc-Beva fueron > 95%. La liberación de 99mTc del 99mTc(CO)3-Bevacizumab fue < 3% a las 24h en ambos medios. Las NP-99mTc-Beva mostraron un tamaño medio de 250 ± 20 nm y un PDI < 0,3. Los estudios de biodistribución in vivo revelaron una cinética diferente de las tres formulaciones.

Conclusiones: El marcaje de bevacizumab con 99mTc[(CO)3(H2O)3] fue estable permitiendo construir NP de HSA con el anticuerpo radiomarcado. Los estudios in vivo aportaron información relevante sobre el destino del fármaco (bevacizumab) y el vehículo (nanopartícula) tras su administración i.v.