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Análisis de nervios estromales en pacientes con queratocono
Comparison of stromal corneal nerves between normal and keratoconus patients using confocal microscopy
M. Ramírez Fernández
Autor para correspondencia
, E. Hernández Quintela, R. Naranjo Tackman
Servicio de Córnea y Cirugía Refractiva, Asociación Para Evitar la Ceguera en México (APEC), Hospital Luis Sánchez Bulnes, Universidad Nacional Autónoma de México, México D.F., México
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No obstante&#44; los nervios del estroma de la c&#243;rnea&#44; al ser mucho menos abundantes&#44; es m&#225;s complicado capturarlos en im&#225;genes por microscopia confocal&#44; por lo que su estudio ha sido m&#225;s limitado<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;7&#44;8</span></a>&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Aunque no sean tan abundantes los nervios del estroma de la c&#243;rnea como los del plexo nervioso subepitelial&#44; a la exploraci&#243;n oftalmol&#243;gica habitual mediante l&#225;mpara de hendidura los nervios del estroma de la c&#243;rnea&#44; por su tama&#241;o&#44; son los &#250;nicos que se pueden ver y estos se han descrito desde hace a&#241;os como m&#225;s aparentes y gruesos en pacientes con queratocono que en pacientes normales o sin esta dolencia<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#44; incluso se ha sugerido que los nervios del estroma de la c&#243;rnea tienen una relaci&#243;n con la progresi&#243;n del queratocono<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46; El prop&#243;sito del presente estudio es capturar y as&#237; poder comparar el mayor n&#250;mero de nervios del estroma de la c&#243;rnea entre sujetos normales y pacientes con queratocono mediante microscopia confocal&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0070">Sujetos&#44; material y m&#233;todos</span><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Contando con el consentimiento firmado de todas las personas que participaron&#44; se dividi&#243; el estudio en 2 grupos&#58; el grupo A&#44; grupo control&#44; en el cual se estudiaron 140 ojos de 70 sujetos normales y sin ning&#250;n tipo de enfermedad ocular o sist&#233;mica&#59; y el grupo B&#44; en el que se estudiaron 122 ojos de 87 pacientes con diagn&#243;stico de queratocono por topograf&#237;a &#40;Bausch &#38; Lomb Surgical&#44; Orbtek Inc&#46;&#44; Salt Lake City&#44; Utah&#44; EE&#46;&#160;UU&#46;&#41; en los estadios <span class="elsevierStyleSmallCaps">ii</span> y <span class="elsevierStyleSmallCaps">iii</span> de la clasificaci&#243;n de Amsler-Krumeich&#44; la cual se ha utilizado en m&#250;ltiples estudios de queratocono<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11&#8211;14</span></a>&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Microscopia confocal&#58; En el &#225;rea de Imagenolog&#237;a corneal del servicio de C&#243;rnea y Cirug&#237;a Refractiva del hospital de la Asociaci&#243;n Para Evitar la Ceguera en M&#233;xico&#44; previa anestesia t&#243;pica de la c&#243;rnea con clorhidrato de tetraca&#237;na 5&#44;0<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg por ml &#40;Ponti Ofteno&#44; Laboratorios Sophia&#44; S&#46;A&#46; Guadalajara&#44; M&#233;xico&#41;&#44; se les realiz&#243; a todos los sujetos del estudio en ambos grupos&#44; un rastreo central del espesor total de la c&#243;rnea mediante el uso del microcopio confocal Confoscan 4 &#40;Fortune Technologies&#44; Vigonza&#44; Italia&#41;&#46; En cada examen de microscopia confocal se obtuvo una secuencia de im&#225;genes digitalizadas en formato JPEG&#44; que constaba de 2 rastreos consecutivos de la profundidad total del espesor de la c&#243;rnea central&#44; siendo un rastreo equivalente a la obtenci&#243;n de im&#225;genes de endotelio a epitelio y nuevamente a endotelio&#44; es decir&#44; de lo posterior a lo anterior y de nuevo a lo posterior&#44; para permitir el desplazamiento en el eje Z del espesor de la c&#243;rnea central&#46; Se utiliz&#243; el dispositivo Z-Ring Scan &#40;Confoscan&#44; Fortune Technologies&#44; Italia&#41; el cual mantiene contacto con la superficie de la c&#243;rnea para as&#237; poder obtener mediciones de espesor confiables sin tener movimiento anteroposterior del globo ocular&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se obtuvieron en promedio 350 im&#225;genes de cada rastreo&#44; las im&#225;genes son de 340<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>255&#160;&#956; en los ejes <span class="elsevierStyleSmallCaps">X</span>&#44; Y&#44; estas son capturadas autom&#225;ticamente en el disco duro de un ordenador para su posterior an&#225;lisis mediante el uso del programa Navis v&#46; 3&#46;5&#46;0&#46; &#40;NIDEK&#44; Multi-Instrument Diagnostic System&#44; Jap&#243;n&#41;&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se revisaron individualmente cada una de las im&#225;genes de todos los rastreos obtenidos mediante la microscopia confocal de las c&#243;rneas&#44; buscando en cu&#225;les se hab&#237;an capturado nervios en el estroma&#46; De los nervios obtenidos&#44; solo se evaluaron y midieron los que estuvieran en foco y con bordes bien definidos&#46; Se analiz&#243; la morfolog&#237;a de los nervios del estroma encontrados&#44; as&#237; como el espesor de estos&#44; el cual se midi&#243; utilizando el programa de an&#225;lisis de im&#225;genes microsc&#243;picas Navis v&#46; 3&#46;5&#46;0&#46; &#40;NIDEK&#44; Multi-Instrument Diagnostic System&#44; Jap&#243;n&#41;&#46; El espesor de los nervios se obtuvo del promedio de la porci&#243;n m&#225;s gruesa y la m&#225;s angosta de cada nervio analizado &#40;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#fig0005">figs&#46; 1 y 2</a>&#41;&#46; No se midieron los nervios que presentaron bifurcaciones &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 3</a>&#41;&#46; Solo se analizaron los nervios del estroma de la c&#243;rnea&#46; No se midieron los nervios del plexo nervioso subepitelial&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0075">Resultados</span><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Todos los rastreos de microscopia confocal fueron completos y de todo el espesor central de la c&#243;rnea&#44; debido a que fueron visibles el epitelio&#44; el plexo nervioso subepitelial y el endotelio&#44; as&#237; como el estroma de la c&#243;rnea&#44; con n&#250;cleos de queratocitos a partir de la primera imagen por debajo del plexo nervioso subepitelial&#44; hasta la imagen por encima del endotelio de la c&#243;rnea&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se obtuvieron para su estudio&#44; de todas las im&#225;genes de los rastreos de microscopia confocal&#44; un total de 243 nervios del estroma&#44; en foco y con bordes bien definidos&#44; de los cuales 127 fueron del grupo A&#44; sujetos sin patolog&#237;a&#44; y 116 del grupo B&#44; pacientes con queratocono&#46; Todos los nervios del estroma de la c&#243;rnea se observaron en las im&#225;genes de microscopia confocal como estructuras lineales&#44; bien definidas y de alta reflexi&#243;n&#44; rodeados por queratocitos del estroma de la c&#243;rnea&#44; estos &#250;ltimos de moderada reflexi&#243;n &#40;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#fig0005">figs&#46; 1 y 2</a>&#41;&#46; La disposici&#243;n de los nervios del estroma de la c&#243;rnea fue con una tendencia oblicua en el 100&#37; de todas las im&#225;genes evaluadas&#44; presentando tambi&#233;n&#44; en todos los casos&#44; una morfolog&#237;a con porciones gruesas y angostas &#40;<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#fig0005">figs&#46; 1 y 2</a>&#41;&#46;</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El promedio del espesor de los nervios del estroma en el grupo A&#44; pacientes sin enfermedad &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#44; fue de 5&#44;7<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;7 con un rango de 3&#44;3 a 10&#44;4&#160;&#956;&#44; el promedio del espesor de los nervios del estroma en el grupo B&#44; pacientes con queratocono &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>&#41;&#44; fue de 7&#44;2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;9 con un rango de 3&#44;5 a 12&#44;0&#160;&#956;&#46; La diferencia en el espesor de los nervios del estroma de la c&#243;rnea entre el grupo A y el grupo B fue estad&#237;sticamente significativa &#40;p<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#60;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>0&#44;05&#44; prueba T no pareada&#41; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">fig&#46; 4</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0080">Discusi&#243;n</span><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En condiciones normales&#44; por microscopia confocal se pueden valorar en la c&#243;rnea diferentes estructuras como el epitelio superficial&#44; las c&#233;lulas basales epiteliales&#44; el plexo nervioso subepitelial&#44; los n&#250;cleos de los queratocitos del estroma&#44; as&#237; como las c&#233;lulas endoteliales<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;7</span></a>&#46; Los nervios del estroma no son la excepci&#243;n&#46; En el presente estudio los observamos como estructuras lineales de alta reflexi&#243;n&#44; con porciones gruesas y delgadas&#44; como ya se ha descrito en la literatura<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">15&#44;16</span></a>&#44; rodeadas de n&#250;cleos de queratocitos que se consideran de reflexi&#243;n moderada<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">1&#44;17</span></a>&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La mayor&#237;a de los estudios de nervios corneales realizados mediante microscopia confocal lo han sido principalmente enfocados al plexo nervioso subepitelial debido a que se encuentra en toda la c&#243;rnea por debajo del epitelio de esta y eso hace que sea muy f&#225;cil la obtenci&#243;n de im&#225;genes de dicho plexo<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;4&#44;18</span></a>&#46; Por ello&#44; se han realizado estudios del plexo nervioso subepitelial tanto en condiciones normales<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;19</span></a> &#40;o con los cambios que este plexo nervioso sufre secundarios a procesos quir&#250;rgicos como trasplante de c&#243;rnea<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0010"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a> o cirug&#237;a refractiva<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0020"><span class="elsevierStyleSup">4&#44;20&#44;21</span></a>&#41; como con enfermedades como en el caso del ojo seco<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">16</span></a>&#46; Tambi&#233;n se han realizado estudios del plexo nervioso subepitelial en pacientes con queratocono&#44; incluso relacion&#225;ndolos con la sensibilidad corneal<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0025"><span class="elsevierStyleSup">5&#44;6</span></a>&#46; Por otra parte&#44; es m&#225;s dif&#237;cil encontrar nervios del estroma de la c&#243;rnea&#44; puesto que no se trata de un plexo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">22</span></a> y ya que las im&#225;genes por microscopia confocal son de 340<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#215;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>255&#160;&#956; en los ejes <span class="elsevierStyleSmallCaps">X</span>&#44; Y &#40;Confoscan 4&#44; Fortune Technologies&#44; Vigonza&#44; Italia&#41; tiene que coincidir el trayecto de un nervio del estroma de la c&#243;rnea con la muy peque&#241;a imagen que se est&#225; capturando en el rastreo&#46; El presente estudio se enfoc&#243; en los nervios del estroma de la c&#243;rnea&#46;</p><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El queratocono es una enfermedad en la cual la c&#243;rnea sufre una ectasia habitualmente progresiva&#44; que puede aparecer desde la ni&#241;ez o en edades m&#225;s tard&#237;as y que conlleva en ocasiones la necesidad de realizar un trasplante de c&#243;rnea para corregir el problema<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0115"><span class="elsevierStyleSup">23</span></a>&#46; El diagn&#243;stico temprano del queratocono en la actualidad ha tomado suma importancia debido al auge de la cirug&#237;a refractiva&#44; ya que es una de las principales contraindicaciones para esta<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0120"><span class="elsevierStyleSup">24</span></a>&#46; El desarrollo y evoluci&#243;n de los equipos de topograf&#237;a corneal han permitido el diagn&#243;stico del queratocono en etapas cada vez m&#225;s tempranas<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0125"><span class="elsevierStyleSup">25&#8211;30</span></a>&#46; No obstante&#44; desde hace a&#241;os se ha indicado que existen datos sutiles tales como la observaci&#243;n de los nervios del estroma de la c&#243;rnea&#44; m&#225;s evidentes en pacientes con queratocono a la exploraci&#243;n oftalmol&#243;gica mediante l&#225;mpara de hendidura&#44; que pudieran probar un queratocono incipiente<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> y as&#237; apoyar al diagn&#243;stico en casos solo sospechosos mediante topograf&#237;a corneal&#46; Inclusive se ha especulado el papel que pudieran tener los nervios de la c&#243;rnea en la progresi&#243;n del queratocono<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0050"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46; Incluso&#44; Al-Alqaba et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0155"><span class="elsevierStyleSup">31</span></a> reportaron una serie de casos por enfermedad de 14 botones corneales de pacientes con queratocono&#44; compar&#225;ndolos con 6 botones corneales de pacientes sin esta dolencia&#44; en lo que se apreciaron los nervios del estroma de la c&#243;rnea con un espesor mayor&#46; El presente estudio se hizo para comparar los espesores de los nervios del estroma de la c&#243;rnea por microscopia confocal <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> y en un grupo mayor&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se han realizado estudios por microscopia confocal en pacientes con queratocono en el estroma de la c&#243;rnea&#44; principalmente enfocados a los cambios en la densidad y la reflexi&#243;n de los queratocitos del estroma&#44; debido a su f&#225;cil captura por microscopia confocal&#44; ya que los queratocitos se encuentran en todo el espesor de este<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0160"><span class="elsevierStyleSup">32&#44;33</span></a>&#46; El prop&#243;sito del presente estudio fue comparar mediante microscopia confocal las caracter&#237;sticas morfol&#243;gicas as&#237; como el espesor de los nervios del estroma de la c&#243;rnea entre sujetos normales y pacientes con diagn&#243;stico de queratocono&#46; Encontramos que morfol&#243;gicamente no presentan diferencia entre los 2 grupos&#58; en ambos se observaron los nervios del estroma de la c&#243;rnea como estructuras lineales&#44; bien definidas y de reflexi&#243;n alta&#44; rodeados por queratocitos en las im&#225;genes de microscopia confocal del estroma de la c&#243;rnea&#59; la disposici&#243;n de estos fue de tendencia oblicua en el 100&#37; de todas las im&#225;genes evaluadas&#44; presentando diferentes grados de tortuosidad con porciones gruesas y angostas en ambos grupos&#46; En cuanto al espesor de los nervios del estroma de la c&#243;rnea&#44; s&#237; se encontr&#243; una diferencia estad&#237;sticamente significativa&#44; siendo m&#225;s gruesos en los pacientes con diagn&#243;stico de queratocono&#44; sustentando as&#237; la idea cl&#225;sica de que los nervios del estroma de la c&#243;rnea son m&#225;s evidentes a la exploraci&#243;n oftalmol&#243;gica mediante l&#225;mpara de hendidura en pacientes con queratocono<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El espesor de los nervios del estroma de la c&#243;rnea se ha estudiado en otras enfermedades en la cuales se sabe que se encuentran anormalmente engrosados&#44; como el estudio de Mocan et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a>&#44; en el cual encontraron en pacientes diab&#233;ticos un promedio de espesor de nervios del estroma de la c&#243;rnea de 8&#44;99<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;32&#160;&#956;&#46; En ese estudio&#44; el n&#250;mero de ojos evaluados fue de 35 en el grupo de pacientes con diabetes y de 24 en el grupo control de sujetos sanos&#59; en el presente estudio se evaluaron 122 en el grupo de pacientes con queratocono y 140 en el grupo control de sujetos sin enfermedad&#44; aun as&#237;&#44; este &#250;ltimo presenta un espesor de nervios del estroma de la c&#243;rnea de 5&#44;7<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>1&#44;7&#160;&#956; semejante al grupo control reportado por Mocan et al&#46; de 5&#44;69<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#177;<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>2&#44;32&#160;&#956;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">17</span></a>&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el presente estudio no se midieron los nervios de estroma que presentaban bifurcaciones para no sobrestimar el espesor de estos ni alterar el promedio real del espesor de los nervios medidos&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Solo se incluyeron pacientes con diagn&#243;stico de queratocono en los estadios <span class="elsevierStyleSmallCaps">ii</span> y <span class="elsevierStyleSmallCaps">iii</span> de la clasificaci&#243;n de Amsler-Krumeich&#44; debido a que los pacientes en estadio <span class="elsevierStyleSmallCaps">iv</span> presentan ya cicatrizaciones las cuales limitan la toma y la adquisici&#243;n de im&#225;genes de calidad del estroma de la c&#243;rnea por microscopia confocal&#46; As&#237; mismo&#44; los pacientes en estadio <span class="elsevierStyleSmallCaps">i</span> pudiera ser dudoso el diagn&#243;stico de queratocono y sesgar el estudio al medir los nervios en pacientes que no fueran queratoconos&#44; puesto que se necesitaba la certeza de medir los nervios del estroma de la c&#243;rnea en pacientes que se tuviera la seguridad del diagn&#243;stico de queratocono&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Gracias a la microscopia confocal es posible evaluar los nervios del estroma de la c&#243;rnea que&#44; aunque son m&#225;s dif&#237;ciles de capturar en im&#225;genes de microscopia confocal que el plexo nervioso subepitelial&#44; con un n&#250;mero de pacientes alto&#44; se puede obtener una cantidad suficiente de estos para su an&#225;lisis y medici&#243;n&#46;</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Con el presente estudio&#44; se puede demostrar que efectivamente los pacientes con queratocono tienen los nervios del estroma de la c&#243;rnea m&#225;s gruesos que los sujetos normales y se apoya la noci&#243;n previamente mencionada de que&#44; a la exploraci&#243;n oftalmol&#243;gica con l&#225;mpara de hendidura&#44; los nervios del estroma de la c&#243;rnea son m&#225;s evidentes en pacientes con queratocono que en sujetos sin esta enfermedad<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; Esto &#250;ltimo puede brindar un dato adicional en la sospecha cl&#237;nica del queratocono&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0085">Financiaci&#243;n</span><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">APEC&#44; <span class="elsevierStyleSmallCaps">I</span>&#46;A&#46;P&#46;&#44; M&#233;xico D&#46;F&#44; M&#233;xico&#46;</p></span><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0090">Conflicto de intereses</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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Información del artículo
ISSN: 03656691
Idioma original: Español
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