Estudio clínico e inmunólogico del xenorrechazo en el xenotrasplante ortotópico de hígado de cerdo a babuino

Resumen

Introducción

La experiencia de xenotrasplante hepático (Xtoh) de cerdo a primate no humano es muy limitada. Nuestros objetivos han sido: a) comprobar si el hígado de un cerdo transgénico h-DAF evita el rechazo hiperagudo; b) estudiar las funciones metabólicas del hígado porcino tras el Xtoh; y c) analizar el perfil clínico, bioquímico e inmunológico del rechazo vascular agudo retardado.

Animales y métodos

Se realizaron 6 Xtoh de cerdo a babuino, 4 de cerdos no modificados y dos de cerdos transgénicos para h-DAF. Se llevaron a cabo determinaciones hematológicas, de coagulación, de xenoanticuerpos y del complemento. En el babuino que sobrevivió 8 días, se estudiaron durante los mismos las poblaciones linfocitarias y la actividad lítica de los linfocitos.

Resultados

Los valores de xIgG e IgM descendieron drásticamente a los 3 min de la reperfusión, sobre todo del CH50, C3 y C4. En los hígados no modificados genéticamente apareció una coagulación intravascular diseminada por rechazo hiperagudo, con una supervivencia inferior a 12 h. Con los hígados h-DAF, la coagulación se normalizó, con una supervivencia de 8 y 4 días, falleciendo ambos por insuficiencia respiratoria, sin rechazo hiperagudo. El babuino que sobrevivió 8 días presentó a las 36 h un rechazo vascular agudo retardado, detectándose una estimulación de las HLA clase I sobre los linfocitos CD3+ y CD19+, que respondió al tratamiento.

Conclusiones

El hígado transgénico h-DAAF previene el rechazo hiperagudo y mantiene la coagulación en rangos normales en el babuino. El rechazo vascular agudo provoca el cese en la producción de bilis y un patrón mixto de citólisis y colostasis. Los valores de expresión de HLA clase I en los linfocitos podrían ser útiles para diagnosticarlo.

Introduction

Experience in liver xenotransplantation from pig-to-nonhuman primate is limited. Our aims were (i) to determine whether h-DAF transgenic pig liver prevents hyperacute rejection; (ii) to study the metabolic function of pig liver after liver xenotransplantation and (iii) to analyze the clinical, biochemical and immunological profile of acute delayed vascular rejection.

Animals and methods

Six liver xenotransplantations were performed, four from unmodified pigs and two from pigs transgenic for h-DAF. Hematological, coagulation, xenoantibodies and complement determinations were performed. In one baboon that survived 8 days, lymphocyte populations and the lytic activity of lymphocytes were studied in the same period.

Results

xIgG and IgM levels decreased drastically 3 minutes after reperfusion, especially those of CH50, C3 and C4. In genetically unmodified livers, disseminated intravascular coagulation developed due to hyperacute rejection, and survival was lower than 12 hours. In h-DAF livers, coagulation returned to normal and survival was 8 and 4 days; both baboons died from respiratory failure, without hyperacute rejection. The baboon who survived for 8 days, presented acute delayed vascular rejection at 36 hours and HLA class I stimulation of CD3+ and CD19+ lymphocytes was detected, which responded to treatment.

Conclusions

Transgenic hDAF liver prevents hyperacute rejection and maintains coagulation within normal limits in baboons. Acute vascular rejection provokes cessation of bile production and mixed symptoms of cytolysis and cholestasis. Levels of HLA class I expression in lymphocytes may be useful for diagnosing this.