La proteína relacionada con el receptor (LRP) de lipoproteínas de baja densidad (LDL) une e internalize LDL agregadas (LDLag) en células musculares lisas (CML) de la pared arterial. El objetivo es analizar la contribución de los proteoglucanos (PG) en la incorporación de LDLag en CML, en fibroblastos de embrión de ratón wild type (línea celular MEF) y en fibroblastos de embrión de ratón deficientes en LRP (línea cellular PEA13).
Métodos y resultadosSe aislaron los PG del medio, de la fracción celular y de la matriz extracelular (ECM) por marcaje con [35S]-Na2SO4 y se caracterizaron mediante digestión selectiva con heparinasa I y III (4 U/ml cada una) y condroitinasa ABC (2 U/ml). Para analizar la contribución de los PG y LRP en la internalización de LDLag, células con y sin expresión de LRP, tratadas o no con polisacaridasas se incubaron con LDLag (25, 50 y 100 Lg/ml) durante 18 h. En CML humanas, LDLag no induce el acúmulo de ésteres de cholesterol (EC) en las células tratadas con oligonucleótidos antisentido para LRP, y la eliminación de heparin sulfato en los PG provoca una reducción de la acumulación de EC. En fibroblastos de ratón, la línea cellular PEA13 comparada con la línea MEF presenta una menor pero todavía considerable acumulación de EC, y la eliminación de heparán sulfato inhibe completamente la acumulación de EC.
ConclusionesEn la línea mef, los PG de tipo heparin sulfato pueden actuar como receptores que unen e internalizan LDLag en ausencia de LRP, en CML humanas, aunque los PG de tipo heparán sulfato facilitan la union de LDLag a las células. La lrp es esencial para la internalización de ldlag.