El metapneumovirus humano (MPVh) fue identificado por primera vez en 2001 a partir de aspirados nasofaríngeos de niños y adultos con infección aguda del tracto respiratorio. El objetivo de este estudio prospective es conocer las características clínicas y epidemiológicas de los pacientes pediátricos con infección respiratoria aguda y aislamiento exclusivo del MPVh (diciembre 2005-enero 2007).
Material y métodosLas muestras fueron sometidas a ladetección antigénica rápida frente al virus respiratorio sincitial (VRS) y los virus gripales A y B. Las muestras fueron sembradas en shell-viales de diferentes líneas celulares para el aislamiento de virus respiratorios. Para el MPVh se utilizó la línea LLC-MK2. Sólo las muestras negativas en las técnicas antigénicas fueron estudiadas para la presencia del MPVh.
ResultadosEn este estudio se han aislado 32 MPVh de pacientes distintos, que representan el 1,7% de todas las muestras estudiadas para este virus (sólo las negativas al VRS: 1.791) y el 1,5% de todas las muestras analizadas. La mayoría de casos se presentaron entre los meses de diciembre y marzo de ambos años estudiados. Los 32 casos correspondían a 17 niñas (53,2%) y 15 niños (46,8%). La edad media de los pacientes fue de 12,5 meses (intervalo: 1 mes y 4 años). La mayoría de los pacientes presentaron fiebre (90,6%), tos (87,5%), rinorrea y bronquiolitis (46,8%). Sólo 3 pacientes (9,4%) precisaron de ingreso hospitalario.
ConclusionesLas infecciones respiratorias causadas por el MPVh se han convertido en una enfermedad emergente en la población pediátrica. Las manifestaciones clínicas no permiten realizar un diagnóstico diferencial con el VRS, de modo que sólo el estudio virológico permitirá establecer el diagnóstico etiológico definitivo.
Human Metapneumovirus (hMPV) was first identified in 2001 in respiratory samples from children and adults with acute respiratory tract infection. The aim of this prospective study was to determine the clinical and epidemiological characteristics of pediatric patients with an acute respiratory tract infection and exclusive isolation of hMPV in respiratory samples (December 2005-January 2007).
Material and methodsAll respiratory tract samples were submitted to rapid antigen detection against respiratory syncytial virus (RSV) and influenza A and B viruses. To isolate respiratory viruses, samples were inoculated in various cell lines using the shell vial culture assay. To isolate hMPV, the LLC-MK2 cell line was used. Only antigen-negative samples were studied for the presence of hMPV.
ResultsOver the study period, 32 hMPV were isolated from different patients, accounting for 1.7% of all samples studied for this virus (only RSV-negative samples, 1,791) and 1.5% of all samples studied. Peak incidence was found between December and March of the two years studied. Of the 32 patients in whom hMPV was detected, 17 (53.2%) were female and 15 (46.8%) male. Mean age was 12.5 months (range, 1 month-4 years). The most frequent clinical symptoms were fever (90.6%), cough (87.5%), rhinorrhea and bronchiolitis (46.8%). Three patients (9.4%) were hospitalized.
ConclusionsRespiratory infection caused by hMPV isconsidered an emergent disease in pediatric patients. The clinical manifestations are very similar to those of RSV infection; hence, only virological study can establish the definite etiological diagnosis.
El metapneumovirus humano (MPVh) fue identificado por primera vez en Holanda en el año 2001 a partir de aspirados nasofaríngeos de niños y adultos con una infección aguda del tracto respiratorio1. Los estudios realizados posteriormente han demostrado que este virus es el responsable de una parte significativa de las infecciones víricas respiratorias de la comunidad que afectan a la población infantil en todo el mundo1-10. Las coinfecciones entre el MPVh y el virus respiratorio sincitial (VRS) son bastante frecuentes y parecen agravar el pronóstico y la morbilidad de las bronquiolitis infantiles5,7,11,12.
El diagnóstico virológico frente al MPVh puede hacerse por cultivo celular, detección antigénica directa, amplificación genómica (retrotranscripción inversa-reacción en cadena de la polimerasa [RT-PCR]) o estudio serológico1,2,13-18. El MPVh crece lentamente en las líneas celulares utilizadas habitualmente para el aislamiento de otros virus respiratorios1,14,16. Aunque Boivin et al8 han demostrado que este virus crece bien en la línea LLC-MK2, utilizada sistemáticamente para el aislamiento del virus parainfluenza, el método diagnóstico considerado de referencia es la amplificación genómica13,14.
Debido al caractér emergente de este nuevo virus, se presenta un estudio prospectivo sobre las características clínicas y epidemiológicas de los pacientes pediátricos con infección respiratoria aguda y aislamiento exclusivo del MPVh en el tracto respiratorio.
Material y métodosSe ha realizado un estudio prospectivo sobre las características clínicas y epidemiológicas de los pacientes pediátricos (< 15 años) con infección respiratoria y aislamiento del MPVh entre los meses de diciembre de 2005 y enero de 2007.
A todos los pacientes con sospecha de infección respiratoria aguda se les tomó una muestra que fue remitida lo antes posible en un medio de transporte para virus. Las diferentes muestras respiratorias (aspirados nasofaríngeos y frotis faríngeos) fueron sometidas inicialmente a la detección antigénica rápida frente al VRS (Directigen RSV, Becton & Dickinson, EE.UU.) y los virus gripales A y B (Directigen FluA + B, Becton & Dickinson, EE.UU.). Las muestras fueron sembradas en shell-viales (200 µl/vial) de las líneas celulares Hep-2 (VRS y adenovirus), MDCK (virus gripales A y B), LLC-MK2 (virus parainfluenza y MPVh) y MRC-5 (CMV y enterovirus) (Vircell, Granada). Sólo las muestras negativas en la técnica antigénica frente al VRS fueron estudiadas para la presencia del MPVh. A los viales destinados al aislamiento del MPVh se les añadió al medio de mantenimiento tripsina (2 µg/ml) antes de su incubación. Todos los viales fueron incubados a 36 °C durante 3 días, a excepción de los destinados al aislamiento del MPVh, que lo fueron durante 5 días. Tras este proceso, los diferentes viales fueron fijados y teñidos mediante anticuerpos monoclonales específicos para cada uno de los virus (Monofluokit, BioRad, Irlanda). La presencia del MPVh se detectó mediante el empleo del anticuerpo monoclonal anti-MPVh (clon MAB8510; Chemicon, EE.UU.). En todos los casos la tinción se realizó mediante la técnica de inmunofluorescencia indirecta siguiendo las instrucciones del fabricante. Se consideraron positivas aquellas monocapas con presencia de fluorescencia específica y compatible con cada uno de los diferentes virus estudiados.
Se han analizado las características clínicas y epidemiológicas de los pacientes con aislamiento exclusivo del MPVh en muestras respiratorias, a través del estudio de sus historias clínicas.
ResultadosA lo largo del período de estudio se han analizado 2.029 muestras respiratorias, de las cuales 1.685 (83%) fueron aspirados nasofaríngeos y 344 (17%), frotis faríngeos. De todas ellas, 484 (23,8%) fueron consideradas positivas. Los virus aislados en estas muestras fueron: VRS, 318 (65,7%); adenovirus, 50 (10,3%); virus gripales A y B, 46 (9,5%); MPVh, 32 (6,6%); virus parainfluenza, 3,26 (5,3%), y otros virus, 12 (2,2%) (enterovirus y citomegalovirus). Los 32 MPVh aislados correspondían a pacientes distintos, que representaban el 1,7% de todas las muestras estudiadas para este virus (sólo las negativas al VRS: 1.791), el 1,5% del total de muestras analizadas y el 6,6% de todas las muestras positivas (32/484). Los MPVh sólo se aislaron en los aspirados nasofaríngeos. Durante el estudio no se ha detectado ninguna coinfección del MPVh con otro virus respiratorio.
Los porcentajes de positividad para el MPVh, sobre el total de cultivos positivos, obtenidos en este estudio han oscilado entre el 2,3 y el 10% (fig. 1). En relación con el aislamiento del VRS, los casos positivos frente al MPVh han mostrado un patrón epidemiológico muy parecido a este virus, aunque un poco posterior al pico máximo del VRS (fig. 2). Desde el punto de vista epidemiológico la mayoría de casos se presentaron entre los meses de diciembre y febrero de ambos años estudiados (v. fig. 2).
Los 32 casos correspondían a 17 niñas (53,2%) y 15 niños (46,8%). La edad media de los pacientes fue de 12,5 meses (intervalo: 1 mes y 4 años). El el 56,2% de los pacientes tenían una edad inferior a los 6 meses, el 65,6% eran menores de 12 meses y el 35,2% eran mayores de 2 años; se observaba, además, una distribución bimodal entre los diferentes grupos de edad (fig. 3). El 90,6% de los pacientes fueron atendidos en urgencias y sólo 3 pacientes (9,4%) precisaron de ingreso hospitalario. En la tabla 1 se exponen las principales características clínicas de los pacientes con infección por el MPVh.
Principales características clínicas de los pacientes con infección por el metapneumovirus humano
| Fiebre > 38 °C | 29 (90,6)* |
| Tos | 28 (87,5) |
| Rinorrea | 15 (46,8) |
| Bronquiolitis | 15 (46,8) |
| Faringitis | 9 (28,1) |
| Síndrome febril respiratorio | 9 (28,1) |
| Sibilancias | 5(15,6) |
| Neumonía | 3 (9,3) |
| Asma | 3 (9,3) |
| Distrés respiratorio | 2 (6,2) |
| Vómitos | 2 (6,2) |
| Diarrea | 2 (6,2) |
| Otitis media aguda | 1 (3,1) |
Desde su detección se han comunicado muchos estudios sobre la incidencia de las infecciones respiratorias agudas causadas por el MPVh en la población pediátrica mundial1-10. Los porcentajes de detección muestran un intervalo muy amplio, que va desde el 1,5% hasta el 25% dependiendo de la zona geográfica, la edad del paciente y la patología del mismo1,4-11. Nuestro porcentaje total de aislamiento ha sido del 1,7%, bastante más bajo que los comunicados en nuestro país. Así, Vicente et al19 han comunicado una positividad del 4,1% en los que fueron negativos a otros virus respiratorios, y en el estudio inicial de García et al20, en un 9% de los pacientes. Este virus fue el detectado en el 18% de todas las muestras positivas; en un estudio posterior, García et al21 detectaron un porcentaje del 10,8% en lactantes hospitalizados, mientras que Ordás et al22 comunicaron una positividad del 16,2%.
La mayoría de los estudios realizados para la detección del MPVh han utilizado la técnica de RT-PCR, considerada más sensible que el cultivo celular14,15. En el estudio comparativo entre el cultivo shell-vial y la RT-PCR, Schirm et al14 observan como el cultivo presenta una sensibilidad del 61,3%, con un porcentaje de positividad por cultivo del 7,6 frente al 11,5% de la RT-PCR. La no utilización de las técnicas moleculares podría explicar el bajo número de casos detectados en nuestro estudio.
La mayoría de infecciones respiratorias por MPVh se producen en los meses fríos11. Maggi et al5 han observado que el 91% de los casos se detectan entre enero y mayo, con variaciones porcentuales en diferentes años a lo largo del estudio. En el estudio de Williams et al23, el 78% de los casos se presentaron entre diciembre y abril, y en Japón la mayoría de casos se han detectado entre marzo y junio24. En nuestro estudio la mayoría de casos se presentaron entre los meses de diciembre y enero de ambos años estudiados, mientras que en el estudio de García et al20 el 100% de los pacientes se detectaron entre marzo y abril, con un pico máximo en marzo20,21.
Las infecciones respiratorias por MPVh parecen afectar al mismo segmento etario que el VRS11. En nuestro estudio la edad media de los pacientes fue de 12,5 meses; aunque el 56,2% de los pacientes tenían una edad inferior a los 6 meses y el 65,6%, una edad inferior a los 12 meses. Se observaba, de este modo, una distribución bimodal entre los diferentes grupos de edad. La edad media observada en nuestro estudio es un poco superior a la descrita por otros autores españoles; así, García et al21 observaron una edad media de 6,7 meses y, además, el 80% presentaban menos de 12 meses, y Ordás et al22 detectaron una edad media de 6,4 meses. Sin embargo, estudios realizados en otros países, como el de Williams et al23, se observa que la edad media fue de 11,6 meses y de 17,6 meses en Israel25.
No hemos encontrado diferencias entre los sexos de los pacientes infectados por el MPVh; así, el 53,2% eran niños y el 46,8%, niñas. Estos datos contrastan con los comunicados por García et al20, en los cuales el 72% de los infectados eran niños; los de Williams et al23, en los que la relación niño:niña era de 1,8:1; los de Regev et al26, con una relación 2:1, y los de Peiris et al7, con una relación 3:1. Sin embargo, en otros estudios no se ha podido demostrar tanta diferencia entre la incidencia por sexo8,11.
Las manifestaciones clínicas de las infecciones respiratorias por el MPVh son prácticamente indistiguibles de las observadas en los infectados por el VRS5,7,11,12. En nuestro estudio, la mayoría de los pacientes presentaban fiebre elevada y tos, acompañados de otras manifestaciones respiratorias. La asociación de estos dos síntomas ha sido descrita entre el 90 y el 100% de los casos comunicados11,19-22. La rinorrea, que traduce una afectación de las vías respiratorias altas, la hemos observado en casi la mitad de los pacientes, tal como han comunicado Bach et al27, pero en porcentaje inferior a los observados en otras series6,8,26. Como diagnósticos clínicos, la bronquiolitis fue la entidad más frecuente observada (46,8%). Sin embargo, el porcentaje de positividad en esta patología varía ampliamente en la bibliografía médica, oscilando entre el 1 y el 59%, lo cual se debe básicamente a los grupos de edad estudiados en cada área geográfica11.
Otra patología asociada frecuentemente con las infecciones por el MPVh es el asma, las crisis asmáticas y/o las sibilancias8,11. En nuestro estudio, cerca del 25% de los pacientes presentaban este tipo de sintomatología, porcentaje algo inferior al 45-55% comunicado por García et al21, aunque en este estudio la mayoría de los pacientes estaban hospitalizados. Las sibilancias se han comunicado en el 80-90% en varios estudios5-8. La asociación entre el MPVh y el asma o las crisis asmáticas parece una evidencia clínica, aunque todavía no existe una certeza científica asociativa; no obstante, en un estudio se ha observado que los niños infectados por el MPVh presentan títulos más elevados de interleucina-8 en sus secreciones respiratorias28.
La implicación del MPVh en las neumonías del lactante es todavía un dato controvertido; así, su detección en esta entidad es muy variable y depende del área geográfica, la edad del paciente y la patología de base del mismo5,10,24. En nuestro estudio sólo se pudo implicar al MPVh en 3 casos de neumonía (9,3%), cuando algunos estudios, basados la mayoría en datos radiológicos de infiltrados pulmonares, elevan el porcentaje al 25-30%23-25. Aunque, dada la dificultad para establecer el diagnóstico definitivo de neumonía en los niños de corta edad, deban tomarse estos valores con cierta prudencia.
Algunos estudios parecen indicar que la gravedad de las infecciones por el MPVh es inferior a las causadas por el VRS4-8. En nuestro estudio sólo 3 pacientes (9,3%) precisaron de ingreso hospitalario debido a su corta edad y al distrés respiratorio; por lo tanto, en la mayoría de pacientes la infección por el MPVh fue considerada leve o moderada y sin criterios de ingreso. Con los datos disponibles no podemos establecer la verdadera magnitud epidemiológica de las infecciones comunitarias por el MPVh. Peiris et al7 han calculado una tasa de admisiones hospitalarias por infecciones causadas por este virus de 441,6/100.000 niños menores de 6 años.
En algunos estudios se ha intentado buscar algunas características clínicas o epidemiológicas diferenciales con las infecciones respiratorias causadas por el VRS; así, sólo se han podido observar diferencias significativas en que los pacientes con MPVh presentan una edad media más elevada que afecta a mayores de 6 meses, presentan una tasa de sibilancias recurrentes más elevada y presentan una proteína C reactiva menos elevada21,22,27. En términos generales, las infecciones por MPVh son menos graves y precisan de menos ingresos hospitalarios, aunque depende de los grupos etarios y las zonas geográficas consideradas.
