Carta científica
Anisakiosis colónica, un caso infrecuente caracterizado molecularmente mediante PCR-RFLP
Colonic anisakiasis, an infrequent case molecularly characterised by PCR-RFLP
Belén González-Bertolína,
, Nerea Hernanz-Ruizb, Ramón Pérez-Tanoirac, María Jesús Perteguer-Prietoa
Autor para correspondencia
a Laboratorio de Helmintos, Centro Nacional de Microbiología, Instituto de Salud Carlos III, Majadahonda, Madrid, España
b Servicio de Aparato Digestivo, Hospital Universitario Príncipe de Asturias, Alcalá de Henares, Madrid, España
c Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Príncipe de Asturias, Alcalá de Henares, Madrid, España
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(A) Experimental timeline; (B) Protein profile of <span class="elsevierStyleItalic">L. rubellus</span>; M, marker; lane 1–3, replication 1–3; (C, D) MRSA colonization and the level of sIgA in the nasal mucosa after treatment with mupirocin or 40-kDa protein of <span class="elsevierStyleItalic">L. rubellus</span>, respectively. NC, negative control; PC, positive control; M, mupirocin; ns, not significant. 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Los principales agentes etiológicos pertenecen al complejo <span class="elsevierStyleItalic">Anisakis simplex</span> sensu lato (s.l.), compuesto por 3 especies gemelas: <span class="elsevierStyleItalic">Anisakis simplex</span> sensu stricto (s.s.), <span class="elsevierStyleItalic">Anisakis pegreffii y Anisakis berlandi.</span> Existen diferentes formas clínicas: anisakiosis gástrica, gastroalérgica, intestinal y ectópica. En la forma intestinal, el íleon terminal suele ser el segmento más afectado<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>, y, por el contrario, el colon y el yeyuno, los menos implicados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>.</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este estudio, presentamos un caso de anisakiosis colónica en un varón de 69<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>años, español, con antecedente de pólipos en colon y polipectomía endoscópica de lesión adenomatosa de 30<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm 2<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>años antes, al que se le realiza colonoscopia de control. El paciente no refiere clínica digestiva, ni de otro tipo.</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la colonoscopia se observa, además de 3 pólipos sésiles que se extirpan, un gusano blanquecino transparente de 6-8<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm que penetra la mucosa en el colon descendente (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>A), y que se envía al laboratorio para su identificación molecular.</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Inicialmente, se realiza una identificación morfológica de la larva extraída al microscopio siguiendo las claves de Petter y Maillard (1988)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0075"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>. La larva, parcialmente destruida, de color blanquecino y de 19<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mm, es identificada morfológicamente como compatible con <span class="elsevierStyleItalic">A. simplex</span> s.l. Posteriormente, la extracción automatizada del ADN genómico se llevó a cabo empleando el kit comercial QIAamp® DNA FFPE (QIAGEN, Hilden, Alemania) con un paso previo de incubación con proteinasa K y buffer ATL a 56<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>°C durante toda la noche.</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para la caracterización molecular, los productos de PCR correspondientes a la región ITS1-5.8S-ITS2 del ADN ribosómico son amplificados y posteriormente digeridos con las enzimas de restricción HhaI y HinfI (New England Biolabs, Massachusetts, EE.<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>UU.) según el protocolo descrito por D’Amelio et al. 2000<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>. Los resultados de la PCR (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>B) determinan que el ADN amplificado de la larva presenta un peso molecular (960<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>pb) compatible con el esperado para el complejo <span class="elsevierStyleItalic">A. simplex</span> s.l. El líquido de transporte de la larva también muestra una amplificación a 960<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>pb, aunque con menor intensidad (amplificación de ADN libre).</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el análisis de los polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP) del ADN amplificado, la larva presenta los perfiles característicos descritos para la especie <span class="elsevierStyleItalic">A. simplex</span> s.s.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0080"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>C). La secuenciación confirmó la identificación del genotipo <span class="elsevierStyleItalic">A. simplex</span> s.s. y la secuencia se ha anotado en el GenBank (NA: MT516319). Esta presenta elevada homología con otros aislados del mismo genotipo (99,9% NA: MN871437.1, NA: KY973681.1).</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La anisakiosis es una patología poco habitual en las regiones más distales del tubo digestivo, siendo infrecuente su presencia en el colon, aunque sí se han llegado a reportar casos en el segmento ascendente<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">6,7</span></a>. Hasta la fecha, Joo et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> han sido los únicos que han descrito casos en el segmento descendente, y ninguno ha sido reportado en España.</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las manifestaciones clínicas de la anisakiosis intestinal son bastante diversas, desde una afección asintomática, pasando por dolor abdominal difuso con náuseas, vómitos…, hasta un abdomen agudo por perforación intestinal, obstrucción, invaginación, etc.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>. También se ha postulado la asociación entre la colonización por <span class="elsevierStyleItalic">Anisakis</span> spp. y cáncer, debido al posible efecto tumorigénico resultante de la inflamación local persistente, así como al inducido por ciertas secreciones del parásito<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>.</p><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El caso presentado es un paciente asintomático, en el que el hallazgo de anisakiosis fue incidental, sin embargo, se desconoce el pronóstico si se hubiera dejado a su libre evolución. La localización de la larva a nivel del colon descendente dota a nuestro caso de una mayor singularidad. Una de las razones que explicarían por qué es más frecuente encontrar las larvas en el colon ascendente es que, en esta región, el peristaltismo intestinal está enlentecido, y de esta forma la larva encuentra las condiciones idóneas para su penetración y no se ve obligada a migrar hacia regiones más distales del colon<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>.</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La técnicas moleculares son de gran utilidad en el diagnóstico de las anisakiosis intestinales, siendo aplicables incluso cuando la larva se encuentra en mal estado de conservación, lo cual es habitual debido a la manipulación durante el proceso de extracción, o como resultado de la respuesta inmunitaria del paciente al intentar eliminarla. Estas técnicas también proporcionan el genotipado, con una caracterización inequívoca a nivel de especie, a diferencia del estudio morfológico, en el que no solamente hay que tener en cuenta la integridad de la larva, sino también la imposibilidad de distinguir especies gemelas. Además, cabe resaltar su alta sensibilidad, que permite la amplificación e identificación, incluso con el ADN presente en el líquido de transporte de la muestra, como se ha demostrado.</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A pesar del elevado número de casos de anisakiosis diagnosticadas en España, el estudio realizado por Roca-Geronès et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0105"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> es el único publicado en el que se realiza la identificación molecular de las larvas, y la especie identificada es la misma que en el caso presentado. El conocimiento a nivel de especie añade el beneficio de aportar información acerca del potencial invasivo y patogénico de cada una de ellas. En este caso, se confirma la capacidad de <span class="elsevierStyleItalic">A. simplex</span> s.s. de sobrevivir al jugo gástrico y su potencial de penetración a nivel de colon, previamente reportado por otros autores<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0110"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>.</p><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0005">Financiación</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Estudio financiado por los proyecto PI17CIII/00019 - Acción Estratégica de Salud Intramural (ISCIII-AESI) y RD16/0027/0000 - Red de Investigación Cooperativa en Enfermedades Tropicales (RICET). Belén González-Bertolín disfruta de un contrato de ayudante de investigación, PEJ-2017-AI/BMD- 6632,- POEJ-CAM.</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0010">Conflicto de intereses</span><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no presentar ningún tipo de conflicto de intereses para la realización de este trabajo.</p></span></span>" "textoCompletoSecciones" => array:1 [ "secciones" => array:3 [ 0 => array:2 [ "identificador" => "sec0005" "titulo" => "Financiación" ] 1 => array:2 [ "identificador" => "sec0010" "titulo" => "Conflicto de intereses" ] 2 => array:1 [ "titulo" => "Bibliografía" ] ] ] "pdfFichero" => "main.pdf" "tienePdf" => true "multimedia" => array:1 [ 0 => array:7 [ "identificador" => "fig0005" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "gr1.jpeg" "Alto" => 1292 "Ancho" => 2482 "Tamanyo" => 199194 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "<p id="spar0005" class="elsevierStyleSimplePara elsevierViewall">Imagen del parásito en colon, productos de amplificación de PCR y patrón de RFLP. 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| año/Mes | Html | Total | |
|---|---|---|---|
| 2024 Octubre | 17 | 4 | 21 |
| 2024 Septiembre | 32 | 6 | 38 |
| 2024 Agosto | 28 | 9 | 37 |
| 2024 Julio | 23 | 11 | 34 |
| 2024 Junio | 29 | 8 | 37 |
| 2024 Mayo | 17 | 11 | 28 |
| 2024 Abril | 24 | 21 | 45 |
| 2024 Marzo | 43 | 32 | 75 |
| 2024 Febrero | 31 | 19 | 50 |
| 2024 Enero | 28 | 26 | 54 |
| 2023 Diciembre | 39 | 37 | 76 |
| 2023 Noviembre | 34 | 21 | 55 |
| 2023 Octubre | 31 | 55 | 86 |
| 2023 Septiembre | 25 | 7 | 32 |
| 2023 Agosto | 35 | 9 | 44 |
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| 2023 Junio | 33 | 8 | 41 |
| 2023 Mayo | 43 | 4 | 47 |
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| 2023 Marzo | 36 | 5 | 41 |
| 2023 Febrero | 16 | 4 | 20 |
| 2023 Enero | 19 | 9 | 28 |
| 2022 Diciembre | 29 | 23 | 52 |
| 2022 Noviembre | 31 | 27 | 58 |
| 2022 Octubre | 27 | 17 | 44 |
| 2022 Septiembre | 15 | 24 | 39 |
| 2022 Agosto | 14 | 21 | 35 |
| 2022 Julio | 14 | 4 | 18 |
| 2022 Junio | 27 | 11 | 38 |
| 2022 Mayo | 28 | 14 | 42 |
| 2022 Abril | 42 | 24 | 66 |
| 2022 Marzo | 18 | 8 | 26 |
| 2022 Febrero | 12 | 6 | 18 |
| 2022 Enero | 17 | 4 | 21 |
| 2021 Diciembre | 17 | 7 | 24 |
| 2021 Octubre | 14 | 4 | 18 |
| 2021 Septiembre | 2 | 0 | 2 |
| 2021 Agosto | 5 | 2 | 7 |
| 2021 Julio | 6 | 4 | 10 |
| 2021 Junio | 53 | 15 | 68 |
| 2020 Noviembre | 0 | 2 | 2 |
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