Rendimiento de 2 técnicas de PCR en tiempo real para la detección de Bordetella pertussis y Bordetella parapertussis | Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica

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La infección por B. bronchiseptica es infrecuente, clínicamente distinta y afecta a pacientes debilitados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0060">2</a>. Las dianas más empleadas para el diagnóstico de Bordetella spp. mediante PCR han sido las secuencias IS481 e IS1001. La IS481 está presente en B. pertussis, B. holmesii y también puede estarlo en B. bronchiseptica. La IS1001 se encuentra en B. parapertussis y ocasionalmente en B. bronchiseptica<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0065">3-5</a>. Una estrategia para distinguir especies puede basarse en el uso de cebadores concretos para la zona del gen promotor de la toxina pertussis (ptxA-pr), que es específica de B. pertussis<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0065">3,5,6</a>. Otra alternativa es el gen de una porina de B. pertussis (BPTD_0837)<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070">4</a>. El gen BP283 también ha sido empleado para identificar B. pertussis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085">7</a>. En la actualidad existen numerosos kits para el diagnóstico molecular de tosferina. No obstante, su interpretación puede resultar compleja debido a esa posibilidad de detectar mismas secuencias en diferentes especies. El objetivo de este estudio fue evaluar el rendimiento de dos métodos de PCR en tiempo real, RealCycler® BORD-T, Progenie Molecular y DiaSorin Molecular Simplexa™ Bordetella Direct, para el diagnóstico de tosferina.Se estudiaron 50 muestras de exudado/lavado nasofaríngeo obtenidas de pacientes con sospecha clínica de tosferina entre julio de 2018 y enero de 2020, y como grupo control 44 muestras de exudado nasofaríngeo recibidas en febrero de 2022 para diagnóstico de SARS-CoV-2 mediante RT-PCR. Las muestras se conservaron congeladas a −80°C hasta su estudio. Todas las muestras procedían de estudios de vigilancia epidemiológica y se procesaron simultáneamente con los ensayos RealCycler® BORD-T previa extracción de ácidos nucleicos y Simplexa™ Bordetella Direct directamente a partir de muestra sin extracción previa. La interpretación de resultados de las 2 técnicas se realizó siguiendo las recomendaciones de los fabricantes.Para las 50 muestras sospechosas de tosferina, los resultados con RealCycler® BORD-T fueron: 28 (56%) B. pertussis, 12 (24%) Bordetella spp., 6 (12%) B. parapertussis o B. bronchiseptica, 3 (6%) coinfección por diferentes Bordetella spp. y uno (2%) negativo. Con Simplexa™ Bordetella Direct 39 (78%) B. pertussis, 6 (12%) B. parapertussis, 2 (4%) coinfección por diferentes Bordetella spp. 2 (4%) negativas y una (2%) inválida por inhibición de la amplificación (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>). En 47 muestras bajo sospecha de tosferina (94%) ambos métodos coincidieron en la identificación a nivel de género o coinfección por Bordetella spp. En 27 (54%) de estos casos las dos técnicas identificaron la especie como B. pertussis. En 11 (22%) casos que Simplexa™ Bordetella Direct clasificó el resultado como B. pertussis RealCycler® BORD-T lo catalogó como Bordetella spp. En los 6 (12%) casos identificados como B. parapertussis mediante Simplexa™ Bordetella Direct el resultado de RealCycler® BORD-T fue B. parapertussis o B. bronchiseptica. Las 44 muestras tomadas para la detección de SARS-CoV-2 fueron negativas para Bordetella spp. por ambas técnicas.<elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia>El kit RealCycler® BORD-T detecta tanto IS481 como la región BP283. Esta combinación aúna una alta sensibilidad y una elevada especificidad para el diagnóstico de tosferina. Este kit también incluye la IS1001 para detectar B. parapertussis.Simplexa™ Bordetella incluye IS481 para detección de B. pertussis e IS1001 para B. parapertussis<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090">8</a> y, aunque la combinación de positividad y negatividad para cada una de estas dianas no excluye definitivamente a otras como B. holmesii o B. bronchiseptica, a efectos prácticos, en muestras con sospecha clínica de tosferina el resultado se podría considerar como «probable infección por» B. pertussis o B. parapertussis según el caso<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065">3</a>. Este kit ha mostrado muy buena sensibilidad y especificidad<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095">9</a> y excelentes valores globales de porcentaje de acuerdo de resultados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100">10</a>.En este estudio el número de muestras estudiadas es reducido. Además, no se contó con un «gold standard» para valorar la sensibilidad de las técnicas, no se dispuso de cepas control ni se confirmaron los casos discordantes con una tercera técnica alternativa. Sin embargo, ambas técnicas aportaron una buena coincidencia de resultados para la detección de Bordetella spp. Cada una de ellas muestra algún tipo de ventaja: RealCycler® BORD-T resultaría teóricamente muy específico para B. pertussis mientras que Simplexa™ Bordetella Direct no requiere extracción de ácidos nucleicos, convirtiéndolo en una alternativa sencilla y rápida.Conflicto de interesesEn este estudio los reactivos de DiaSorin Molecular Simplexa™ Bordetella Direct fueron cedidos por DiaSorin Iberia S.A. Las autoras V.B. y E.M. son empleadas de DiaSorin Iberia S.A.Este estudio ha sido parcialmente enviado y aceptado como comunicación al XXVI Congreso Nacional de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica." 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"tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:2 [ "tabla" => array:1 [ 0 => """ <table border="0" frame="\n \t\t\t\t\tvoid\n \t\t\t\t" class=""><thead title="thead"><tr title="table-row"><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " colspan="4" align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">RealCycler® BORD-T</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " colspan="3" align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Simplexa™ Bordetella Direct</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " colspan="2" align="center" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Total</th></tr><tr title="table-row"><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS481 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS1001 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">BP283 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS481 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS1001 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">N \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-head\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">% \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. pertussis \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. pertussis \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">a</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">a</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">27 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">54 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Bordetella spp. \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. pertussis \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">a</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005">a</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">11 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">22 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. parapertussis o B. bronchiseptica \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. parapertussis \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010">b</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010">b</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">6 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">12 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " rowspan="2" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Coinfección por diferentes Bordetella spp.</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " rowspan="2" align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. pertussis y B. parapertussis</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010">b</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010">b</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">4 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010">b</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010">b</a> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t"> \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Coinfección por diferentes Bordetella spp. \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">B. pertussis \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Bordetella spp. \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Positivo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="left" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">Negativo \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">1 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t " align="char" valign="\n \t\t\t\t\ttop\n \t\t\t\t">2 \t\t\t\t\t\t\n \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n \t\t\t\t\ttable-entry\n \t\t\t\t ; 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Estadísticas

Carta científica

Rendimiento de 2 técnicas de PCR en tiempo real para la detección de Bordetella pertussis y Bordetella parapertussis

Performance of 2 automated real time PCR methods for the detection of Bordetella pertussis and Bordetella parapertussis

Marta Pérez-Abeledoa, Verónica Barrioluengob, Elena Maesob, Juan Carlos Sanza,c,

Autor para correspondencia

juan.sanz@salud.madrid.org

Autor para correspondencia.

a Unidad de Microbiología Clínica, Laboratorio Regional de Salud Pública de la Comunidad de Madrid, Dirección General de Salud Pública de la Comunidad de Madrid, Madrid, España

b DiaSorin Iberia S.A., Madrid, España

c CIBER de Epidemiología y Salud Pública (CIBERESP), Madrid, España

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La IS<span class="elsevierStyleItalic">481</span> est&#225; presente en <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; holmesii</span> y tambi&#233;n puede estarlo en <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; bronchiseptica</span>&#46; La IS<span class="elsevierStyleItalic">1001</span> se encuentra en <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span> y ocasionalmente en <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; bronchiseptica</span><a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">3-5</span></a>&#46; Una estrategia para distinguir especies puede basarse en el uso de cebadores concretos para la zona del gen promotor de la toxina pertussis <span class="elsevierStyleItalic">&#40;ptxA-pr&#41;&#44;</span> que es espec&#237;fica de <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span><a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;5&#44;6</span></a>&#46; Otra alternativa es el gen de una porina de&#160;<span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&#160;<span class="elsevierStyleItalic">&#40;BPTD&#95;0837&#41;</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0070"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>&#46; El gen <span class="elsevierStyleItalic">BP283</span> tambi&#233;n ha sido empleado para identificar <span class="elsevierStyleItalic">B</span>&#46; <span class="elsevierStyleItalic">pertussis</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0085"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a>&#46; En la actualidad existen numerosos kits para el diagn&#243;stico molecular de tosferina&#46; No obstante&#44; su interpretaci&#243;n puede resultar compleja debido a esa posibilidad de detectar mismas secuencias en diferentes especies&#46; El objetivo de este estudio fue evaluar el rendimiento de dos m&#233;todos de PCR en tiempo real&#44; RealCycler&#174; BORD-T&#44; Progenie Molecular y DiaSorin Molecular Simplexa&#8482; Bordetella Direct&#44; para el diagn&#243;stico de tosferina&#46;</p><p id="par0010" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se estudiaron 50 muestras de exudado&#47;lavado nasofar&#237;ngeo obtenidas de pacientes con sospecha cl&#237;nica de tosferina entre julio de 2018 y enero de 2020&#44; y como grupo control 44 muestras de exudado nasofar&#237;ngeo recibidas en febrero de 2022 para diagn&#243;stico de SARS-CoV-2 mediante RT-PCR&#46; Las muestras se conservaron congeladas a &#8722;80&#176;C hasta su estudio&#46; Todas las muestras proced&#237;an de estudios de vigilancia epidemiol&#243;gica y se procesaron simult&#225;neamente con los ensayos RealCycler&#174; BORD-T previa extracci&#243;n de &#225;cidos nucleicos y Simplexa&#8482; Bordetella Direct directamente a partir de muestra sin extracci&#243;n previa&#46; La interpretaci&#243;n de resultados de las 2 t&#233;cnicas se realiz&#243; siguiendo las recomendaciones de los fabricantes&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para las 50 muestras sospechosas de tosferina&#44; los resultados con RealCycler&#174; BORD-T fueron&#58; 28 &#40;56&#37;&#41; <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&#44; 12 &#40;24&#37;&#41; <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46;&#44; 6 &#40;12&#37;&#41; <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span> o <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; bronchiseptica</span>&#44; 3 &#40;6&#37;&#41; coinfecci&#243;n por diferentes <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46; y uno &#40;2&#37;&#41; negativo&#46; Con Simplexa&#8482; Bordetella Direct 39 &#40;78&#37;&#41; <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&#44; 6 &#40;12&#37;&#41; <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span>&#44; 2 &#40;4&#37;&#41; coinfecci&#243;n por diferentes <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46; 2 &#40;4&#37;&#41; negativas y una &#40;2&#37;&#41; inv&#225;lida por inhibici&#243;n de la amplificaci&#243;n &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl0005">tabla 1</a>&#41;&#46; En 47 muestras bajo sospecha de tosferina &#40;94&#37;&#41; ambos m&#233;todos coincidieron en la identificaci&#243;n a nivel de g&#233;nero o coinfecci&#243;n por <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46; En 27 &#40;54&#37;&#41; de estos casos las dos t&#233;cnicas identificaron la especie como <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&#46; En 11 &#40;22&#37;&#41; casos que Simplexa&#8482; Bordetella Direct clasific&#243; el resultado como <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span> RealCycler&#174; BORD-T lo catalog&#243; como <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46; En los 6 &#40;12&#37;&#41; casos identificados como <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span> mediante Simplexa&#8482; Bordetella Direct el resultado de RealCycler&#174; BORD-T fue <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span> o <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; bronchiseptica</span>&#46; Las 44 muestras tomadas para la detecci&#243;n de SARS-CoV-2 fueron negativas para <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46; por ambas t&#233;cnicas&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl0005"></elsevierMultimedia><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El kit RealCycler&#174; BORD-T detecta tanto IS<span class="elsevierStyleItalic">481</span> como la regi&#243;n BP<span class="elsevierStyleItalic">283</span>&#46; Esta combinaci&#243;n a&#250;na una alta sensibilidad y una elevada especificidad para el diagn&#243;stico de tosferina&#46; Este kit tambi&#233;n incluye la <span class="elsevierStyleItalic">IS1001</span> para detectar <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span>&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Simplexa&#8482; Bordetella incluye IS<span class="elsevierStyleItalic">481</span> para detecci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span> e IS<span class="elsevierStyleItalic">1001</span> para <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0090"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a> y&#44; aunque la combinaci&#243;n de positividad y negatividad para cada una de estas dianas no excluye definitivamente a otras como <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; holmesii</span> o <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; bronchiseptica</span>&#44; a efectos pr&#225;cticos&#44; en muestras con sospecha cl&#237;nica de tosferina el resultado se podr&#237;a considerar como &#171;probable infecci&#243;n por&#187; <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span> o <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span> seg&#250;n el caso<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0065"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46; Este kit ha mostrado muy buena sensibilidad y especificidad<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0095"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> y excelentes valores globales de porcentaje de acuerdo de resultados<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0100"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este estudio el n&#250;mero de muestras estudiadas es reducido&#46; Adem&#225;s&#44; no se cont&#243; con un &#171;gold standard&#187; para valorar la sensibilidad de las t&#233;cnicas&#44; no se dispuso de cepas control ni se confirmaron los casos discordantes con una tercera t&#233;cnica alternativa&#46; Sin embargo&#44; ambas t&#233;cnicas aportaron una buena coincidencia de resultados para la detecci&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46; Cada una de ellas muestra alg&#250;n tipo de ventaja&#58; RealCycler&#174; BORD-T resultar&#237;a te&#243;ricamente muy espec&#237;fico para <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span> mientras que Simplexa&#8482; Bordetella Direct no requiere extracci&#243;n de &#225;cidos nucleicos&#44; convirti&#233;ndolo en una alternativa sencilla y r&#225;pida&#46;</p><span id="sec0005" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0005">Conflicto de intereses</span><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este estudio los reactivos de DiaSorin Molecular Simplexa&#8482; Bordetella Direct fueron cedidos por DiaSorin Iberia S&#46;A&#46; Las autoras V&#46;B&#46; y E&#46;M&#46; son empleadas de DiaSorin Iberia S&#46;A&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este estudio ha sido parcialmente enviado y aceptado como comunicaci&#243;n al XXVI Congreso Nacional de la Sociedad Espa&#241;ola de Enfermedades Infecciosas y Microbiolog&#237;a Cl&#237;nica&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">RealCycler&#174; BORD-T</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Simplexa&#8482; Bordetella Direct</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">Total</th></tr><tr title="table-row"><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS<span class="elsevierStyleItalic">481</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS<span class="elsevierStyleItalic">1001</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">BP<span class="elsevierStyleItalic">283</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS<span class="elsevierStyleItalic">481</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">IS<span class="elsevierStyleItalic">1001</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">N&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th><th class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" scope="col" style="border-bottom: 2px solid black">&#37;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t\t\t</th></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005"><span class="elsevierStyleSup">a</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">Negativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005"><span class="elsevierStyleSup">a</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">27&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">54&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005"><span class="elsevierStyleSup">a</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0005"><span class="elsevierStyleSup">a</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">11&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">22&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span> o <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; bronchiseptica</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010"><span class="elsevierStyleSup">b</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010"><span class="elsevierStyleSup">b</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">6&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">12&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Coinfecci&#243;n por diferentes <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46;</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span> y <span class="elsevierStyleItalic">B&#46; parapertussis</span></td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010"><span class="elsevierStyleSup">b</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010"><span class="elsevierStyleSup">b</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010"><span class="elsevierStyleSup">b</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tblfn0010"><span class="elsevierStyleSup">b</span></a>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td-with-role" title="\n
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                  \t\t\t\t ; entry_with_role_rowhead " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Coinfecci&#243;n por diferentes <span class="elsevierStyleItalic">Bordetella</span> spp&#46;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">B&#46; pertussis</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Positivo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="left" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Negativo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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Información del artículo

ISSN: 0213005X
Idioma original: Español

DOI:10.1016/j.eimc.2023.05.004

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año/Mes	Html	Pdf	Total

2024 Noviembre	14	0	14
2024 Octubre	57	8	65
2024 Septiembre	173	13	186
2024 Agosto	50	5	55
2024 Julio	76	2	78
2024 Junio	78	7	85
2024 Mayo	53	10	63
2024 Abril	54	8	62
2024 Marzo	67	6	73
2024 Febrero	137	4	141
2024 Enero	245	7	252
2023 Diciembre	207	30	237
2023 Noviembre	6	2	8
2023 Octubre	3	0	3
2023 Septiembre	1	0	1
2023 Agosto	1	0	1
2023 Julio	29	6	35

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