Los pacientes con EC activa presentan un daño oxidativo en CMS que depende de una sobreproducción de H2O2.
ObjetivosI) Analizar la actividad de la enzima antioxidante CAT en pacientes con EC activa e inactiva, con objeto de clarificar el origen del daño oxidativo. II) Estudiar la correlación entre la actividad y la concentración de la enzima CAT.
MétodosSujetos control (n=20) y pacientes con EC al debut (n=20) y los experimentos se repitieron al alcanzar remisión clínica. La actividad se midió con Harvey- Bradshaw (HB). Se aislaron las CMS mediante sedimentación sobre columna de Ficoll-Histopaque. La actividad CAT se midió en los lisados celulares usando el kit de Bioxitech CAT 520, por espectrofotometría. El análisis estadístico se realizó con el test Mann-Whitney. La expresión de la CAT fue estudiada en pacientes con EC activa, inactiva y sujetos controles sanos por western blot (WB) usando el anticuerpo anti-CAT.
ResultadosHB: EC activa 8,72±2,22, inactiva 1±1,2 (8,7±3 meses en remisión). La actividad CAT en las CMS de pacientes con EC activa e inactiva fue inferior que en sujetos sanos; 17,22±9,44 (p=0,0016 vs control) en EC activa and 10,38±4,47 (p=0,0003 vs control) en EC inactiva y 33,51±15,9U/mg en controles. WB: EC activa e inactiva los niveles de CAT eran inferiores respecto a los controles sanos.
ConclusionesLa inhibición mantenida de la CAT y la correlación entre su actividad y niveles de proteína abren nuevas posibilidades exploratorias etiopatogénicas y terapéuticas en la EC.