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Debido a la complejidad de la respuesta inmunitaria que desencadena y también a la disponibilidad de diferentes reactivos que pueden ser utilizados en los análisis serológicos, C. pneumoniae presenta una heterogeneidad en la determinación de los títulos de inmunoglobulinas y en la interpretación serológica de los aspectos epidemiológicos relacionados con la capacidad de infección, el diagnóstico de infección o reinfección, o de la implicación en la patogenia inflamatoria de algunas enfermedades muy prevalentes.</p><p class="elsevierStylePara">Para los estudios epidemiológicos se asume que la presencia de anticuerpos (inmunoglobulina [Ig] G o Ig totales 1:16) indicaría una infección pasada. En los estudios realizados en población general, en todo el mundo, se ha descrito sistemáticamente una seroprevalencia superior al 50%, la cual aumenta con la edad y difiere en cuanto al sexo. La consideración de otra inmunoglobulina, como la IgA, presenta más dificultades a la hora de interpretar la capacidad de infectar con C. pneumoniae y de entender los patrones de infección, sobre todo debido a la importante variabilidad descrita en las series que la han analizado.</p><p class="elsevierStylePara">En España solamente se ha comunicado la seroprevalencia en población general infantil y de adultos jóvenes<span class="elsevierStyleSup">1</span>, pero no se ha investigado en el resto de la población adulta.</p><p class="elsevierStylePara">Nuestro objetivo es conocer indirectamente la difusión de C. pneumoniae en nuestro medio mediante la descripción e interpretación de los perfiles de seroprevalencia que presenta en la población adulta.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Material y método</span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Población</span></p><p class="elsevierStylePara">Se analizó 462 muestras de sangre extraídas a individuos de la población general mayor de 15 años del Área de Salud Oeste de Valladolid que participaron en un estudio epidemiológico de factores de riesgo cardiovascular, realizado entre 1997 y 2000. El estudio se ejecutó en dos fases y la metodología se resume brevemente.</p><p class="elsevierStylePara">En la primera fase, se realizó un muestreo aleatorio simple y una encuesta por correo al 20% de la población general entre 15 y 82 años (33.022 sujetos). En una segunda fase del estudio (año 2000), se realizó un nuevo muestreo aleatorio y poliestratificado (por edad, sexo, nivel de educación, índice de masa corporal y prevalencia de factores de riesgo cardiovascular hallados en la fase 1), y en el cálculo de la n muestral se aseguró la representación de los estratos más pequeños. Posteriormente, se procedió a entrevistar a los individuos seleccionados y a realizar las extracciones de sangre, y se obtuvo muestras sanguíneas en todos los estratos. Mediante la revisión de la historia clínica se comprobó una frecuencia de enfermedades y factores de riesgo cardiovascular similar en los individuos no respondedores respecto a los respondedores del segundo muestreo, salvo para la diabetes mellitus. Por tanto, los individuos participantes eran representativos de la población general.</p><p class="elsevierStylePara">El estudio obtuvo la aprobación del Comité de Ética del hospital. Todos los participantes dieron su conformidad para participar en el estudio y firmaron el consentimiento informado.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Muestras</span></p><p class="elsevierStylePara">Se centrifugaron las muestras de sangre recogidas y posteriormente se separó el suero en alícuotas y se congelaron a ­85 ºC. Una vez descongeladas, se realizó la determinación de anticuerpos IgG e IgA frente a C. pneumoniae mediante inmunofluorescencia indirecta, usando los correspondientes kits distribuidos por la casa comercial Immunogenetics y elaborados por el laboratorio Vircell SL, siguiendo el procedimiento de ensayo recomendado. La técnica consistió en realizar diluciones seriadas de los sueros de estudio con una solución tamponada con fosfato (PBS). Se depositó 5 µl de cada dilución en los correspondientes pocillos del portaobjetos que contenían los antígenos de CP (cepa 2023, ATCC VR-1356). A continuación se incubaba en cámara húmeda durante 30 min a 37 ºC. Se lavaba el portaobjetos con PBS y se añadían 5 µl de antiinmunoglobulina humana marcada con fluoresceína. Se procedía a incubar y lavar otra vez en las mismas condiciones descritas con anterioridad y se montaba el cubreobjetos tras añadir una gota de glicerina en cada pocillo de reacción. Para la determinación de la IgA se requirió la realización de un paso previo al procedimiento descrito, se añadió un sorbente de IgG al suero de estudio y se seguía con el mismo procedimiento. Las lecturas de las determinaciones fueron realizadas en un microscopio de fluorescencia a ƒ1.000 por dos observadores independientes que desconocían la procedencia de la muestra. Las muestras que mostraron fluorescencia brillante y homogénea fueron consideradas positivas.</p><p class="elsevierStylePara">Si la primera dilución era positiva (1:16), se continuaba con la serie de diluciones del suero (1:32, 1:64, 1:128, 1:256, 1:512, etc.) hasta que se conseguía la negativización. En el análisis preliminar de los resultados se comprobó en las primeras 50 muestras que todas las determinaciones que presentaban IgG negativas, es decir, sin positividad a la primera dilución seriada (1:16), también presentaban una IgA negativa, por lo que con el fin de evitar malgastar muestra y reactivo, solamente se continuó realizando las diluciones posteriores de la IgA si la IgG era positiva en la primera dilución (1:16).</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Análisis estadístico</span></p><p class="elsevierStylePara">Los resultados obtenidos fueron ponderados según el tamaño de cada estrato, que osciló entre 0,4108 y 1,9161, y las estimaciones de las seroprevalencias de IgG e IgA se expresaron en porcentaje con su intervalo de confianza (IC) del 95% correspondiente.</p><p class="elsevierStylePara">Se utilizó la prueba estadística de la *<span class="elsevierStyleSup">2</span> para la comparación de categorías entre las variables cualitativas que conformaban los estratos de edad y sexo. Se aceptó un valor de p < 0,05 como estadísticamente significativo.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Resultados</span></p><p class="elsevierStylePara">La seroprevalencia global estimada para la población estudiada fue del 74,1% (IC del 95%, 69,7-78,6) para un título de IgG 1:16, sin hallarse diferencias estadísticas en cuanto al sexo (72% en mujeres frente a un 76% en varones; p > 0,05) o la edad (< 35 años: 73%; 36-65 años: 73%; 66 años: 80%; p > 0,05). A la dilución de 1:64 la seroprevalencia fue del 32,2% (IC del 95%, 27,6-36,8), sin diferencias en el sexo (31% en mujeres frente a un 37% en varones; p > 0,05) o edad (¾ 35 años: 32%; 36-65 años: 30%; 66 años: 39%; p > 0,05). Por el contrario, la seroprevalencia global de IgA fue del 21,5% (IC del 95%, 17,7-25,4) para un título 1:16, con diferencias estadísticas en cuanto al sexo (18% en mujeres frente a un 31% en varones; *<span class="elsevierStyleSup">2</span> = 9,99, p < 0,05) o la edad (¾ 35 años: 13%; 36-65 años: 26%; 66 años: 29%; *<span class="elsevierStyleSup">2</span> = 8,08, p < 0,05). La seroprevalencia fue del 5,2% (IC del 95%, 3,3-7,2) para una IgA 1:32.</p><p class="elsevierStylePara">La figuras 1 y 2 muestran por separado, más detalladamente, las seroprevalencias alcanzadas para las diluciones 1:16 y 1:64 de IgG, y 1:16 y 1:32 de IgA, en función de la edad y el sexo. Para la IgG se observó un discreto aumento de la seroprevalencia con la edad, más lineal para los varones que para las mujeres, mientras que para la IgA el aumento fue mayor en los varones a partir de los 36 años de edad respecto al aumento hallado para las mujeres (p < 0,05).</p><p class="elsevierStylePara"><img src="2v126n20-13089108tab01.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig. 1. Seroprevalencias de inmunoglobulina (Ig) G (diluciones de 1:16 y 1:64) y de IgA (diluciones 1:16 y 1:32) frente a Chlamydophila pneumoniae por estratos de edad en las mujeres.</p><p class="elsevierStylePara"><img src="2v126n20-13089108tab02.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">Fig. 2. Seroprevalencias de inmunoglobulina (Ig) G (diluciones de 1:16 y 1:64) y de IgA (diluciones 1:16 y 1:32) por estratos de edad en los varones.*p < 0,05 para las diferencias de seroprevalencias de la dilución 1:16 IgA con la edad. </p><br></br><br></br><p class="elsevierStylePara">Solamente el 3,6% (IC del 95%, 1,9-5,3) y el 0,7% (IC del 95%, 0,03-1,4) de los sujetos presentaron unos títulos de IgG 1:256 o 1:512, respectivamente.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Discusión</span></p><p class="elsevierStylePara">En el presente estudio confirmamos que C. pneumoniae muestra en la población general española adulta una alta seroprevalencia de infección pasada: 74,1% para una IgG 1:16, con un incremento lineal a partir de los 36 años, y ligeramente superior en los varones. Esta elevada seroprevalencia, por encima del 50%, corrobora la hallada previamente para la población española entre 6 y 20 años<span class="elsevierStyleSup">1</span>, y coincide también con la descrita en diferentes estudios epidemiológicos realizados en población general mayor de 20 años<span class="elsevierStyleSup">2-8</span>.</p><p class="elsevierStylePara">La seroprevalencia hallada para la dilución de IgG 1:64 también fue elevada (32,2%). Este nivel de titulación es interpretado por algunos autores como «infección persistente» si se acompaña, además, de una IgA positiva, aunque este criterio no es totalmente aceptado y se debe, en parte, a la dificultad que hay en interpretar la corta duración de los anticuerpos específicos<span class="elsevierStyleSup">5</span> y también a la dificultad de establecer una sensibilidad y una especificidad adecuadas en un contexto de diagnóstico epidemiológico. En este sentido, aproximadamente una cuarta parte de nuestra población presentó positividad a ambas inmunoglobulinas, lo que supone una estimación muy superior a la descrita, por ejemplo, en la población israelí<span class="elsevierStyleSup">6</span>.</p><p class="elsevierStylePara">Pocos estudios han evaluado la seroprevalencia de IgA, y presentan resultados discordantes entre sí<span class="elsevierStyleSup">2,3</span>. La seroprevalencia hallada en nuestro estudio fue del 21,5% para una IgA 1:16 y del 5,2% para una IgA 1:32, y es superior en el sexo masculino y para los sujetos de más edad. Esta seroprevalencia es similar a las descritas por Paltiel et al<span class="elsevierStyleSup">3</span> en Jerusalén y Leowattana et al<span class="elsevierStyleSup">9</span> en Tailandia, pero difiere de la hallada en Finlandia por Tuuminen et al<span class="elsevierStyleSup">2</span>, superior al 70%. Esta variabilidad, dependiente de la zona geográfica que se estudie, podría indicar diferencias en el grado de reinfección.</p><p class="elsevierStylePara">La interpretación de los perfiles serológicos de nuestro estudio nos induce a pensar que tanto la contribución de una única determinación de IgA o en combinación con la IgG no sería relevante en cuanto al establecimiento del diagnóstico de contacto sucesivo, de reinfección o de «infección persistente», sobre todo si la seroprevalencia de IgG en la zona geográfica estudiada es muy elevada, como ya se ha indicado previamente<span class="elsevierStyleSup">2</span>.</p><p class="elsevierStylePara">Solamente el 3,6% de las muestras analizadas presentaron una IgG 1:256 y sólo un 0,7% mostró una IgG 1:512, seroprevalencias que consideramos ligeramente inferiores al intervalo de las descritas en otros estudios<span class="elsevierStyleSup">1,5-7</span>, y que se han determinado principalmente en sujetos entre 6 y 20 años<span class="elsevierStyleSup">1,5,6</span>. Se ha indicado una mayor capacidad de infección de C. pneumoniae en edades tempranas, pero sin poderse diferenciar con claridad del grado de influencia que otros factores pueden desempeñar, también, en la variabilidad de las seroprevalencias<span class="elsevierStyleSup">3,10</span>. Nuestros datos permiten inferir, de una manera indirecta (figs. 1 y 2), la asociación lineal positiva entre títulos elevados y edad, debida a la mayor exposición que tiene un individuo de presentar infecciones reiteradas por C. pneumoniae en el transcurso del tiempo. Miyashita et al<span class="elsevierStyleSup">7</span>, en la descripción anual de seroprevalencias de IgG realizadas durante una década en Japón, ha confirmado esta circunstancia de manera directa y precisa. Su estudio permitió constatar una alta variabilidad de las seroprevalencias con picos epidémicos periódicos en la endemia de C. pneumoniae<span class="elsevierStyleSup">7</span>.</p><p class="elsevierStylePara">Debido a la variabilidad de las seroprevalencias descritas en los diferentes estudios, halladas para las inmunoglubulinas, resulta difícil determinar si el patrón serológico presente en un grupo de población concreto representa una infección «persistente» o una reinfección. Creemos que su diferenciación desde el punto de vista epidemiológico de la infección pasada no es posible hacerla sólo mediante el uso de los patrones serológicos.</p><p class="elsevierStylePara">El presente estudio tiene las limitaciones propias de los estudios de diseño transversal, pero sus resultados son representativos y de amplia validez externa, por lo que consideramos que este estudio retrata la infección pasada y «persistente» por C. pneumoniae en nuestro medio.</p><p class="elsevierStylePara">En definitiva, a pesar de que C. pneumoniae presenta una interacción compleja con el sistema inmunitario con respues-ta humoral heterogénea, este patógeno intracelular mantiene una alta seroprevalencia de infección en la población.</p>" "pdfFichero" => "2v126n20a13089108pdf001.pdf" "tienePdf" => true "PalabrasClave" => array:2 [ "es" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Palabras clave" "identificador" => "xpalclavsec223190" "palabras" => array:3 [ 0 => "Chlamydophila pneumoniae" 1 => "Seroprevalencia" 2 => "Inmunofluorescencia" ] ] ] "en" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Keywords" "identificador" => "xpalclavsec223191" "palabras" => array:3 [ 0 => "Chlamydophila pneumoniae" 1 => "Seroprevalence" 2 => "Immunofluorescence antibody assay" ] ] ] ] "tieneResumen" => true "resumen" => array:2 [ "es" => array:1 [ "resumen" => "Fundamento y objetivo: <span class="elsevierStyleItalic">Chlamydophila pneumoniae</span> es un germen patógeno intracelular implicado en la patogenia inflamatoria de algunas enfermedades crónicas con alta prevalencia. Su capacidad de difusión es elevada porque los patrones serológicos de infección descritos para la población general están ampliamente distribuidos en todo el mundo; sin embargo, se desconoce la seroprevalencia en la población adulta de España. Nuestro objetivo fue determinar la seroprevalencia de inmunoglobulinas (IgG) e IgA específicas frente a <span class="elsevierStyleItalic">C. pneumoniae</span> en la población general adulta mediante su determinación por inmunofluorescencia indirecta. Material y método: Se analizó 462 muestras de suero procedentes de individuos mayores de 15 años de la población general de Valladolid. Resultados: La seroprevalencia de IgG 1:16 fue del 74,1% (intervalo de confianza [IC] del 95%, 69,7-78,6) y para una IgG 1:64 del 32,2% (IC del 95%, 27,6-36,8), mientras que para la IgA fue del 21,5% (IC del 95%, 17,7-25,4) a una dilución 1:16 y del 5,2% (IC del 95%, 3,3-7,2) a un título 1:32. Encontramos títulos más altos en los varones y a medida que aumentaba la edad, especialmente para la IgA (p < 0,05). Sólo el 3,6% (IC del 95%, 1,9-5,3) y el 0,7% (IC del 95%, 0,03-1,4) de los sujetos presentaron títulos de IgG 1:256 o 1:512, respectivamente. Conclusiones: <span class="elsevierStyleItalic">C. pneumoniae</span> mantiene una alta seroprevalencia de infección en la población adulta española." ] "en" => array:1 [ "resumen" => "Background and objective: <span class="elsevierStyleItalic">Chlamydophila pneumoniae</span> is an intracelular pathogen involved in the inflammatory pathogenesis of some chronic diseases with high prevalence. Infectivity is supposed to be high because the serologic patterns published are widely spread out all over the world. However, the prevalence in the Spanish adult population is unknown. Our goal was to assess the seroprevalence of specific IgG and IgA against <span class="elsevierStyleItalic">C. pneumoniae</span> in the general adult population performing an indirect immunofluorescence assay. Material and method: 462 serum samples were analysed from subjects over 15 years of age in the general population in Valladolid. Results: IgG 1:16 seroprevalence was 74.1% (95% confidence interval [CI], 69.7-78.6) and IgG 1:64 was 32.2% (95% CI, 27.6-36.8), whereas IgA 1:16 was 21.5% (95% CI, 17.7-25.4) and IgA 1:32 was 5.2% (95% CI, 3.3-7.2). Higher titles were found in men and with increasing age, specially for IgA (p < 0.05). Only 3.6% (95% CI, 1.9-5.3) and 0.7% (95% CI, 0.03-1.4) of subjects showed titles IgG 1:256 or 1:512, respectively. Almost one fourth showed a title 1:16 for both immunoglobulins. Conclusions: <span class="elsevierStyleItalic">Chlamydophila pneumoniae</span> maintains a high seroprevalence of infection in the Spanish adult population." ] ] "multimedia" => array:4 [ 0 => array:8 [ "identificador" => "tbl1" "etiqueta" => "Fig. 1" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "copyright" => "Elsevier España" "tabla" => array:1 [ "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:1 [ "tablaImagen" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagenFichero" => "2v126n20-13089108tab01.gif" "imagenAlto" => 440 "imagenAncho" => 565 "imagenTamanyo" => 27241 ] ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Seroprevalencias de inmunoglobulina (Ig) G (diluciones de 1:16 y 1:64) y de IgA (diluciones 1:16 y 1:32) frente a Chlamydophila pneumoniae por estratos de edad en las mujeres." ] ] 1 => array:8 [ "identificador" => "tbl2" "etiqueta" => "Fig. 2" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "copyright" => "Elsevier España" "tabla" => array:1 [ "tablatextoimagen" => array:1 [ 0 => array:1 [ "tablaImagen" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagenFichero" => "2v126n20-13089108tab02.gif" "imagenAlto" => 439 "imagenAncho" => 567 "imagenTamanyo" => 27893 ] ] ] ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Seroprevalencias de inmunoglobulina (Ig) G (diluciones de 1:16 y 1:64) y de IgA (diluciones 1:16 y 1:32) por estratos de edad en los varones.*p < 0,05 para las diferencias de seroprevalencias de la dilución 1:16 IgA con la edad." ] ] 2 => array:5 [ "identificador" => "tbl3" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "copyright" => "Elsevier España" ] 3 => array:5 [ "identificador" => "tbl4" "tipo" => "MULTIMEDIATABLA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "copyright" => "Elsevier España" ] ] "bibliografia" => array:2 [ "titulo" => "Bibliografía" "seccion" => array:1 [ 0 => array:1 [ "bibliografiaReferencia" => array:10 [ 0 => array:3 [ "identificador" => "bib1" "etiqueta" => "1" "referencia" => array:1 [ 0 => array:2 [ "contribucion" => array:1 [ 0 => array:3 [ "titulo" => "High prevalence of Chlamydia pneumoniae infection in children and young adults in Spain." 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