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Se ha descrito que esta enfermedad está asociada con altos grados de morbilidad y mortalidad. Se han implicado factores biológicos en la etiopatogenia del trastorno bipolar, entre los cuales se encuentran alteraciones moleculares, neuroquímicas, inmunohematológicas y genéticas, entre otras<span class="elsevierStyleSup">6-12</span>.Los estudios sobre los cambios genéticos están dirigidos a la escala molecular de las alteraciones, y han identificado la ubicación de genes de susceptibilidad a la enfermedad, algunos de los cuales son compartidos con la esquizofrenia<span class="elsevierStyleSup">11,12</span>. En la enfermedad bipolar (EBP) existe poca evidencia sobre estudios citogenéticos convencionales, a diferencia de lo que ocurre en otras enfermedades mentales. Recientemente, Yoshitsung et al<span class="elsevierStyleSup">13</span> describieron la presencia de un punto de ruptura en el cromosoma Y de un paciente con esquizofrenia. Los sitios frágiles son definidos como <span class="elsevierStyleItalic">loci</span> específicos que forman espacios vacíos, constricciones y rupturas en los cromosomas, que se observan en una metafase extendida<span class="elsevierStyleSup">14-16</span> y pueden ser comunes y constitutivos. Se han descrito 84 sitios frágiles comunes, de los cuales algunos ya han sido estudiados en detalle a escala molecular y se han relacionado con ciertos tipos de cáncer, como el renal, de colon, de esófago, de estómago, de mama y de pulmón<span class="elsevierStyleSup">17-20</span>. Los estudios de replicación han demostrado que, bajo las condiciones de inducción de sitios frágiles comunes, la replicación es específicamente retardada a lo largo de esas regiones, y, por tanto, las secuencias adyacentes replican a diferentes tiempos durante la fase S. Estos resultados indican que los sitios frágiles tienen características intrínsecas que afectan a la elongación de la replicación. Aunque se ha sugerido que la replicación tardía en ciertas regiones cromosómicas contribuye a la formación de fragilidades, las bases moleculares que originan la expresión de sitios frágiles es desconocida<span class="elsevierStyleSup">14</span>.El objetivo del presente estudio ha sido evaluar la estructura cromosómica a través de estudios convencionales en los pacientes con enfermedad bipolar. <span class="elsevierStyleBold">MATERIALES Y MÉTODOS</span> El cariotipo constitucional se ha estudiado en 40 pacientes con enfermedad bipolar en sus diferentes estadios de presentación, incluyendo manías disfóricas y depresiones agitadas, todas en mujeres, con edades comprendidas entre los 20 y los 67 años de edad (promedio, 42,65 años) y que recibían terapia. Como controles se escogió a 40 personas adultas, aparentemente sanas, de las mismas edades, sin enfermedad psiquiátrica.Las pacientes con EBP se evaluaron en el Hospital Psiquiátrico de Maracaibo, Zulia, en el occidente de Venezuela. Los representantes de cada una de estas pacientes autorizaron por escrito su inclusión en el presente estudio. En cada una de las pacientes se extrajeron 5 ml de sangre venosa de vena antecubital, con una jeringa heparinizada, conservada a temperatura ambiente y trasladada de inmediato al Laboratorio de Citogenética del Instituto Hematológico de Occidente-Banco de Sangre del Estado Zulia, Venezuela, para su procesamiento.Se efectuaron cariotipos de metafases celulares, obtenidos por cultivos de 72 h sincronizados con metotrexato, según las técnicas estándares establecidas<span class="elsevierStyleSup">21</span>. El bandeo cromosómico se realizó según la técnica de tripsina-Giemsa (GTG). Se analizaron, al menos, 20 metafases y por cada metafase anormal se evaluaron 3 metafases adicionales. Las anormalidades cromosómicas se identificaron y clasificaron de acuerdo con el International System for Human Cytogenetic Nomenclature (ISCN 1995)<span class="elsevierStyleSup">22</span>.La evaluación estadística utilizada para comparar las variables estudiadas en los grupos investigados fue el test exacto de Fisher (p < 0,05). <span class="elsevierStyleBold">RESULTADOS</span> En la tabla 1 se exponen los resultados citogenéticos de los pacientes con EBP. No se observaron alteraciones citogenéticas mayores en los pacientes ni en los controles, salvo en la paciente 1, en la que en una metafase se observó hiperdiploidía con ganancia de los cromoso mas 8 y 9. Una inesperada alta expresión de sitios frágiles se observó en 26 pacientes (65%), mientras que esto sólo se identificó en 4 de los controles (10%) (p < 0,001), como se muestra en la tabla 2. <p class="elsevierStylePara"><img src="46v12n03-13076389tab01.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara"><img src="46v12n03-13076389tab02.gif"></img></p> En la tabla 3 se describe la ubicación cromosómica de las fragilidades observadas. La disposición de los puntos de ruptura encontrados identifica un patrón de distribución concentrado principalmente en las bandas 1(p32), 1(p33), 1(p34), 3(p14), 3(q21), 3(q25), 4(q23), 14(q22), y 19(p13).En la figura 1 se señalan, en un idiotipo, los puntos de ruptura encontrados; se aprecia que los 54 puntos de ruptura expresados están distribuidos sobre 17 de los 22 pares de autosomas, y no se observa ninguno en el par de cromosomas sexuales. <p class="elsevierStylePara"><img src="46v12n03-13076389tab03.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Fig. 1.</span><span class="elsevierStyleItalic">Puntos de ruptura encontrados en los pacientes con enfermedad bipolar estudiados.</span></p><p class="elsevierStylePara"><img src="46v12n03-13076389tab04.gif"></img></p><span class="elsevierStyleBold">DISCUSIÓN</span> Hay pocos reportes de estudios de citogenética convencional en pacientes con EBP, no así de estudios moleculares donde se señala la ubicación de genes de susceptibilidad a la EBP en los cromosomas 1(q32), 4(p16), 4(p35), 12(q23-24), 13(q32), 14(q35), 16(p13), 18(q21-22), 18(q23), 21(q22-23), X(q25-26) (12). Algunas investigaciones revelan regiones solapadas de susceptibilidad entre la enfermedad bipolar y la esquizofrenia, como por ejemplo 1(q31-32), 7(q31), 13(q32), 18(p11.2), 18(q12.1-q12.3), 22(q11-13)<span class="elsevierStyleSup">23-29</span>.En este estudio no se han observado alteraciones cromosómicas numéricas, a excepción de un paciente en quien en una metafase se evidenció cariotipo hiperdiploide con ganancia de 2 cromosomas del grupo C. No se observaron alteraciones estructurales, como translocaciones, deleciones o inversiones, entre otras, pero llama la atención la expresión de sitios frágiles distribuidos en 17 de los 23 pares de cromosomas, algo no descrito en otras enfermedades en tal proporción. Por otra parte, la mayoría de los sitios frágiles comunes descritos en la población general no coinciden con lo observado en este estudio. La implicación técnica, en este caso, se obvió por el uso de medio de cultivo suplementado con ácido fólico, tal como lo describieron Green et al, en 1988<span class="elsevierStyleSup">29</span>.Las causas de la fragilidad cromosómica no son bien conocidas, pero sus consecuencias pueden ser significativas. Una rotura cromosómica es vulnerable a perderse o rearreglarse, y puede conducir a enfermedades genéticas o cáncer. El origen de los sitios frágiles parece estar en la expansión de una secuencia repetitiva de ADN. Este mismo mecanismo se ha descrito en un tipo de mutación que se ha relacionado con, al menos, 14 enfermedades heredables que incluyen enfermedad de Huntington, síndrome fra (X) (la enfermedad de retardo mental heredable más común) y un tipo de distrofia muscular<span class="elsevierStyleSup">30</span>. Después de los primeros reportes de sitios frágiles comunes no se estableció originalmente relación con enfermedades; posteriormente, las investigaciones cambiaron este concepto. Así, la región 3(p14.2), conocida como s.f. heredable común, se ha relacionado específicamente con carcinoma renal multifocal, bilateral y familiar, y de igual manera con el carcinoma de colon, de esófago, de estómago, de mama y de pulmón. Sin embargo, la relación entre el cáncer y el gen involucrado sigue siendo incierta<span class="elsevierStyleSup">17,18</span>. En este estudio se describe una concentración de s.f. en los cromosomas 1, 2, y 3, diferentes de los s.f. heredables comunes descritos en la bibliografía. Se ha encontrado que las pacientes investigadas expresan 10 s.f. que coinciden con los descritos como s.f. heredables comunes<span class="elsevierStyleSup">14-16</span>. Se requieren futuros estudios para establecer el papel que desempeñan estos s.f. en el desarrollo de la EBP y en otras enfermedades.Utilizando métodos para análisis de ligamiento en pacientes con EBP se ha identificado ligamiento en un <span class="elsevierStyleItalic">loci</span> del cromosoma 18<span class="elsevierStyleSup">31</span>. En esta investigación se observó una diferente frecuencia de presentación de sitios frágiles entre los pacientes y los individuos sanos. La amplia distribución de sitios frágiles a lo largo del genoma, con una distribución preferencial en algunos puntos, sugiere que los pacientes con EBP presentan inestabilidad cromosómica; queda por dilucidar si está relacionada con la enfermedad en sí o con el tratamiento recibido a lo largo de los años. Se plantea, entonces, realizar estudios cromosómicos en los pacientes en el momento del diagnóstico de la enfermedad y en sus familiares.Lubs en 1969<span class="elsevierStyleSup">32</span>, en su descripción original del síndrome fra (X), indica que éste se observa en los 4 varones afectados, con una frecuencia del 12 al 33% de las células examinadas, inferior a las mujeres portadoras en quienes se evidencia en menos del 3% de las metafases analizadas. A pesar de que en nuestro estudio el 67,5% de las pacientes presentó fragilidad cromosómica, ésta no se encontró en los cromosomas sexuales.En mujeres de mayor edad portadoras obligadas del cromosoma fra (X), se ha descrito discrepancia en los resultados entre madres e hijas, lo que ha llevado a varios investigadores a afirmar que hay un aparente efecto de envejecimiento en la expresión del fra (X) en las mujeres. Sutherland<span class="elsevierStyleSup">14-16</span> concluyó, a este respecto, que la frecuencia de la expresión del marcador en portadoras, declina rápidamente en mujeres por encima de los 25 años de edad y no es frecuentemente observado en mujeres mayores de 30 años. Nuestras pacientes tienen un promedio de 42,6 años de edad y presentan una frecuencia de expresión de s.f. del 72,5%, por lo que el factor etario no parece influir en la expresión de s.f. en mujeres con EBP.Los sitios frágiles observados no parecen relacionarse con el tratamiento recibido, ya que los mismos medicamentos se administraron en los pacientes que revelaron sitios frágiles y en aquellos con cariotipo normal. A pesar de la extensa investigación realizada, hay poca evidencia que apoye o refute el papel de los sitios frágiles, incluso en el cáncer<span class="elsevierStyleSup">33</span>. Esto mismo es aplicable al estudio cromosómico y a la presencia de sitios frágiles en pacientes con EBP, donde los mayores esfuerzos en las investigaciones se han hecho a escala molecular, con estudios de ligamiento, en los que se ha tratado de establecer la ubicación de los genes de susceptibilidad<span class="elsevierStyleSup">23-29</span>. Nuestros resultados sugieren que la expresión de sitios frágiles es independiente de los genes de susceptibilidad descritos hasta ahora, debido a que las bandas donde se ubican estos genes no estuvieron mayormente involucradas en estos cambios de la estructura cromosómica.Llama la atención la proximidad entre la banda 1p36.1, donde se ubica el <span class="elsevierStyleItalic">locus</span> para el gen del Rh y las bandas 1(p32), 1(p33) y 1(p34), donde se concentran puntos de rotura; cabe recordar que publicaciones anteriores nuestras demuestran que los pacientes con EBP son todos Rh (+)<span class="elsevierStyleSup">34,35</span>. En resumen, los presentes resultados evidencian una frecuencia inesperadamente alta de fragilidad cromosómica en pacientes con EBP, sin que se tenga, hasta ahora, una explicación lógica para tal alteración, sus consecuencias futuras y su posible relación con el pronóstico y el tratamiento. Nuevos estudios deben conducirse a fin de dilucidar estas cuestiones. 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Materiales y métodos: Se estudió a 40 pacientes mujeres, con diagnóstico de enfermedad bipolar, con un promedio de edad de 42,65 años (20-67 años). Se utilizó como control a 40 individuos adultos con las mismas edades, sin enfermedad psiquiátrica. Se evaluó la estructura cromosómica mediante estudios convencionales. Resultados: No se observaron alteraciones citogenéticas en las pacientes con enfermedad bipolar, salvo una, en la que en una metafase se evidenció hiperdiploidía con ganancia de los cromosomas 8 y 9. En 26/40 pacientes (65%) y en 4/40 controles (10%) se observó una alta expresión de sitios frágiles (p < 0,05). La ubicación cromosómica de estas fragilidades identifican un patrón de distribución concentrado principalmente en las bandas 1(p32), 1(q21), 1(q22), 2(p12), 2(q31), 3(p14), 3(q21), 3(q25), 7(p14), 14 (q22) y 19(p13). Se apreció que los 54 puntos de ruptura expresados están distribuidos en 17 de los 22 pares de autosomas, y no se observa ninguno en el par de cromosomas sexuales. Conclusiones: Los resultados muestran una frecuencia inesperadamente alta de fragilidad cromosómica en pacientes con enfermedad bipolar, sin que se tenga hasta ahora una explicación lógica para tal alteración, sus consecuencias futuras y su posible relación con el pronóstico y el tratamiento. Se deben llevar a cabo nuevos estudios a fin de dilucidar estos interrogantes." ] "en" => array:1 [ "resumen" => "Introduction: The studies on genetic changes are aimed at the molecular level of alterations and have identified the location of the disease susceptible genes, some of wich are shared with schizophrenia. In the bipolar disease, there is little evidence from conventional cytogenetic studies in comparison with other mental pathologies. The purpose of this research was to evaluate the chromosome structure through conventional studies. Materials and methods: This research is prospective and descriptive. 40 female patients with an average age of 42.65 years and 40 adult controls without psychiatric disease were examined. Results: No cytogenetic alterations were observed in the bipolar disorder (BPD) patients, except for one patient in whom one mataphase evidenced hyperdiploidy with a gain of chromosomes 8 and 9. An unexpected high fragile site expression was noted in 26/40 patients (65%) and 4 /40 controls (10%). The chromosomal location of the fragilities observed identifies a distribution pattern concentrated mainly in bands 1(p32), 1(q21), 1(q22), 2(p12), 2(q31), 3(p14), 3(q21), 3(q25), 7(p14), 14 (q22) y 19(p13). It was observed that the 54 breakage points expressed are distributed on 17 of the 22 autosome pairs, with none observed on the sex chromosome pair. Conclusions: The presents results evidence an unexpected high frecuence of chromosomal fragility in BPD patients, without a logic explanation thus far such alteration, its future consecuences and possible relationship with prognosisi and treatment. 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Evaluación cromosómica en pacientes con enfermedad bipolar
Chromosomal evaluation in patients with bipolar disorder
J. Weir Medinaa, Z. Zuleta-Neumanbb, M. Macías-Duertoa, M. Arteaga-Vizcaínoc, M. Sánchezd, M. Zabalad, O. Ferrere, A. Hassanieha
a Instituto Hematológico de Occidente-Banco de Sangre del Estado Zulia. Maracaibo. Venezuela.
b Cátedra de Biofísica-Universidad del Zulia. Maracaibo. Venezuela.
c Instituto de Investigaciones Clínicas. Universidad del Zulia. Maracaibo. Venezuela.
d Posgrado de Psiquiatría. Universidad del Zulia. Maracaibo. Venezuela.
e Instituto de Investigaciones Biológicas. Universidad del Zulia. Maracaibo. Venezuela.
Artículo
Este artículo está disponible en español
Evaluación cromosómica en pacientes con enfermedad bipolar
J Weir Medina, Z Zuleta-Neumanb, M Macías-Duerto, M Arteaga-Vizcaíno, M Sánchez, M Zabala, O Ferrer, A Hassanieh
Psiquiatr Biol . 2005;12:89-94