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Sistema «Point of Care» de medición de la resorción ósea en orina y comparación con otros métodos
System «Point of Care» of mensuration of the bony resorption in urine and comparison with other methods
M. Gasso de Camposa, J. Cómez Ariasb, M V. Camacho Reinaa, M J. Cabeza Arroyoa, J. Lara Arenasa, J. García Garcíaa
a Servicios de Análisis clínicos. Hospital Universitario Médico-Quirúrgico de Jaén 
b Servicios de Ginecología. Hospital Universitario Médico-Quirúrgico de Jaén
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y actualmente constituye un grave problema de salud p&#250;blica&#44; cuya importancia aumenta conforme la poblaci&#243;n envejece&#46; Consiste en el deterioro en la microestructura del tejido &#243;seo a consecuencia de un desequilibrio entre los procesos de formaci&#243;n y de degradaci&#243;n del hueso&#44; que se suceden de forma continuada a lo largo de la vida&#46; As&#237; pues&#44; cuando la tasa de degradaci&#243;n de hueso es mayor que la tasa de formaci&#243;n&#44; la porosidad del tejido &#243;seo aumenta&#44; increment&#225;ndose considerablemente el riesgo de fractura&#46; Estos procesos de recambio se llevan a cabo por medio de los osteoblastos encargados de la formaci&#243;n &#243;sea y los osteoclastos encargados de la resorci&#243;n&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los osteoclastos act&#250;an sobre el col&#225;geno&#44; verti&#233;ndose al torrente sangu&#237;neo componentes del hueso que posteriormente se excretan a trav&#233;s de la orina&#46; Estos componentes nos van a servir como marcadores e indirectamente su medici&#243;n nos indicar&#225; el grado de resorci&#243;n &#243;sea&#46; El CrossLaps &#40;CTx&#41; es una secuencia de 8 amino&#225;cidos situada en el extremo C del col&#225;geno de tipo I&#44; que se isomeriza durante el proceso de formaci&#243;n del tejido &#243;seo&#46; Al fragmentarse las mol&#233;culas de col&#225;geno&#44; la presencia de esta secuencia de amino&#225;cidos en orina indica p&#233;rdida de masa &#243;sea&#46; Por tanto&#44; el &#237;ndice de resorci&#243;n &#243;sea es proporcional al nivel de CTx en orina<span class="elsevierStyleSup">3&#44;4</span>&#46; Diversos estudios han demostrado que las mediciones regulares de estos marcadores &#243;seos pueden emplearse para monitorizar tratamientos contra la resorci&#243;n &#243;sea en pacientes que sufren de osteoporosis<span class="elsevierStyleSup">5&#44;6</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En Espa&#241;a hay dos millones de mujeres afectadas por esta enfermedad&#46; Como consecuencia&#44; se calcula que una de cada ocho personas mayores de 50 a&#241;os sufrir&#225; una fractura en la columna&#44; mientras que una de cada tres mujeres mayores de 80 a&#241;os sufrir&#225; una fractura de cadera&#46; La osteoporosis no presenta s&#237;ntomas cl&#237;nicos y no suele diagnosticarse hasta que el paciente sufre una fractura&#46; La morbilidad y mortalidad asociadas son elevadas&#46; Sin embargo&#44; la osteoporosis puede prevenirse y predecirse&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La posibilidad de un test r&#225;pido para la monitorizaci&#243;n de la respuesta al tratamiento&#44; y de f&#225;cil uso en la propia consulta&#44; podr&#237;a presentar importantes ventajas para el paciente y el m&#233;dico&#44; con respecto a las mediciones realizadas en el laboratorio&#46; Osteosal<span class="elsevierStyleSup">TM</span> es un test r&#225;pido de inmunoensayo de qu&#237;mica seca&#44; para la determinaci&#243;n cuantitativa de una secuencia espec&#237;fica del col&#225;geno tipo I&#44; CrossLaps &#40;CTx&#41; en orina humana&#44; que permite al m&#233;dico proporcionar resultados inmediatos al paciente mediante el denominado m&#233;todo <span class="elsevierStyleItalic">&#171;point of care&#187;</span> &#40;POC&#41;&#44; con un aparato peque&#241;o que abre expectativas importantes en el uso de los marcadores bioqu&#237;micos de remodelado &#243;seo&#46;</p><p class="elsevierStylePara">OBJETIVO</p><p class="elsevierStylePara">Comparar los resultados de los marcadores de resorci&#243;n &#40;CTx&#41; en orina determinados por el sistema Osteosal-Instaquant&#44; que permite la medici&#243;n semicuantitativa de CTx en orina de una forma r&#225;pida y en 5 minutos&#44; normalizados con el valor de creatinina&#44; con otros marcadores de resorci&#243;n &#243;sea en orina cuantitativos&#44; como NTx&#44; D-piridinolina&#44; calcio&#47;creatinina&#44; en pacientes con terapia hormonal sustitutiva &#40;THS&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">MATERIAL Y M&#201;TODO</p><p class="elsevierStylePara">Se seleccionaron aleatoriamente 45 mujeres posmenop&#225;usicas &#40;edades entre 48-52 a&#241;os&#41; a las cuales se recogi&#243; la segunda micci&#243;n de orina&#44; y se determin&#243; hidroxiprolina&#47;creatinina&#44; NTx&#47;creatinina&#44; D-piridinolina&#47;creatinina&#44; calcio&#47;creatinina&#44; y test Osteosal-Instaquant &#40;CTx&#41;&#46; El valor de la creatinina en los ensayos realizados con el test Osteosal-Instaquant se determin&#243; con las tiras Microalbustix<span class="elsevierStyleSup">TM</span> &#40;Bayer Corporation&#41;&#46; El resto de los tests se normalizaron mediante la determinaci&#243;n de creatinina en el autoanalizador CK4<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#40;Beckman&#41;&#44; por el m&#233;todo de Jaff&#233; cuantitativo modificado&#46;</p><p class="elsevierStylePara">SISTEMA OSTEOSAL-INSTAQUANT</p><p class="elsevierStylePara">Es un ensayo inmunocromatogr&#225;fico que se lleva a cabo en una tira dispuesta dentro de un estuche de pl&#225;stico&#46; Dispone de una ventana de resultados en la que aparecen dos l&#237;neas marcadas por las letras C &#40;Control&#41; y T &#40;Test&#41;&#46; La l&#237;nea de control debe aparecer siempre&#44; e indica que el ensayo funciona correctamente&#46; La l&#237;nea T indica el lugar en donde se analizan los CrossLaps &#40;CTx&#41;&#46; El test Osteosal<span class="elsevierStyleSup">TM</span> es competitivo&#46; Se han inmovilizado anticuerpos monoclonales con gran afinidad por los CTx&#44; sobre part&#237;culas de l&#225;tex azul que se encuentran en un compartimento de fibra de vidrio&#46; Por medio del peine recolector se introduce la muestra de orina en el Osteosal<span class="elsevierStyleSup">TM</span>&#44; de manera que &#233;sta contacta con el l&#225;tex recubierto de anticuerpos&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Las mol&#233;culas de CTx presentes en la orina se unir&#225;n a los anticuerpos&#46; La orina y el l&#225;tex emigran a trav&#233;s de la membrana hacia las zonas de Test y Control&#46; La intensidad de la l&#237;nea aparecida es inversamente proporcional a la concentraci&#243;n de CTx&#46; La l&#237;nea de Test que aparece es analizada por el fot&#243;metro Instaquant en s&#243;lo 5 minutos&#44; &#233;ste funciona emitiendo un haz de luz mediante unos LEDS&#44; siendo absorbido por el l&#225;tex del Osteosal<span class="elsevierStyleSup">TM</span>&#46; La cantidad de luz absorbida es&#44; tras la correcci&#243;n del blanco&#44; inversamente pro porcional a la concentraci&#243;n de CTx en orina&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El test Osteosal<span class="elsevierStyleSup">TM</span> necesita normalizar la creatinina&#44; para ello se emplean las tiras Microalbustix<span class="elsevierStyleSup">TM</span> &#40;Bayer Corporation&#41;&#46; Despu&#233;s se introducen los valores de creatinina en el Instaquant<span class="elsevierStyleSup">TM</span> mientras se realiza la medici&#243;n&#46; El software del instrumento normaliza el valor de la concentraci&#243;n de la creatinina para la muestra&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se determinaron adem&#225;s los siguientes marcadores de remodelado &#243;seo en la segunda micci&#243;n de la ma&#241;ana&#58; dexosipiridinolina &#40;DPD&#41; se determin&#243; en un autoanalizador Inmunolite<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;Dipesa&#41; mediante enzimoinmunoan&#225;lisis por quimioluminiscencia&#44; NTx<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;<span class="elsevierStyleItalic">Cross-linked</span> N-telop&#233;ptidos tipo I&#41; se determin&#243; por enzimoinmunoan&#225;lisis &#40;EIA&#41;&#44; hidroxiprolina con dieta previa exenta de col&#225;geno mediante el Kit Hypronosticon&#174; &#40;Organ&#243;n&#41;&#44; calcio y f&#243;sforo se determinaron en autoanalizador Synchr&#243;n CK4<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;Beckman&#41;&#46; Todos los valores obtenidos se normalizaron referidos a la creatinina&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El sistema utilizado para el an&#225;lisis de datos fue el SPSS 10 para Windows&#46;</p><p class="elsevierStylePara">RESULTADOS</p><p class="elsevierStylePara">Los resultados estad&#237;sticos descriptivos de los marcadores de resorci&#243;n &#243;sea quedan reflejados en la tabla 1&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="70v12n02-13046870tab01.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">La creatinina determinada por las tiras reactivas Bayer Corporation<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span>&#44; necesarias para la normalizaci&#243;n de los resultados del sistema Osteosal&#44; mostraron una correlaci&#243;n importante y significativa &#40;r &#61; 0&#44;848&#41; &#40;p &#61; 000&#41;&#44; con la determinada por el m&#233;todo de Jaff&#233; cuantitativo&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Existe una correlaci&#243;n significativa &#40;p &#61; 0&#44;008&#41;&#44; aunque con asociaci&#243;n d&#233;bil &#40;r &#61; 0&#44;392&#41;&#44; entre el sistema Osteosal-Instaquant&#47;creatinina y la determinaci&#243;n de NTx&#47;creatinina &#40;tabla 2&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="70v12n02-13046870tab02.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">Existe una correlaci&#243;n significativa &#40;p &#61; 0&#44;002&#41;&#44; aunque con asociaci&#243;n d&#233;bil &#40;r &#61; 0&#44;455&#41;&#44; entre el sistema Osteosal-Instaquant&#47;creatinina y la determinaci&#243;n de DPD&#47;creatinina &#40;dexosipiridinolina&#47;creatinina&#41; &#40;tabla 2&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Existe una correlaci&#243;n significativa &#40;p &#61; 0&#44;0015&#41; con asociaci&#243;n &#40;r &#61; 0&#44;463&#41; entre el sistema Osteosal-Instaquant&#47;creatinina y la determinaci&#243;n de hidroxiprolina&#47;creatinina &#40;hidroxiprolina&#47;creatinina&#41; &#40;tabla 2&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Gran asociaci&#243;n entre los DPD&#47;creatinina y los NTx&#47;creatinina &#40;r &#61; 0&#44;953 y p &#61; 000&#41;&#46; Tambi&#233;n existe una gran asociaci&#243;n entre la hidroxiprolina&#47;creatinina y los NTx&#47;creatinina &#40;r &#61; 0&#44;992 y p &#61; 000&#41;&#46; Gran asociaci&#243;n entre DPD&#47;creatinina e hidroxiprolina&#47;creatinina &#40;r &#61; 0&#44;940 p &#61; 000&#41;&#46; No existe asociacion entre el NTx&#47;C y el calcio&#47;C &#40;tabla 3&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="70v12n02-13046870tab03.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara"> DISCUSI&#211;N</p><p class="elsevierStylePara">La relaci&#243;n de los marcadores de recambio &#243;seo con fractura &#243;sea es incierta&#46; A partir de estudios retrospectivos resulta dif&#237;cil determinar si unos valores elevados de &#233;stos se relacionan con una alta tasa de recambio &#243;seo causante de la fractura&#44; o bien se deben a cambios agudos en el recambio &#243;seo asociados a la fractura<span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Para poder predecir el riesgo de fractura a partir de los valores de los marcadores&#44; se debe relacionar los valores basales de &#233;stos y evaluar el riesgo de fractura en estudios prospectivos<span class="elsevierStyleSup">9&#44;10</span>&#44; y este valor predictivo se debe analizar por separado frente a las fracturas de cadera&#44; vertebrales y otras localizaciones&#44; debido a la heterogeneidad en su patogenia&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se ha descrito que las mujeres menop&#225;usicas catalogadas como perdedoras r&#225;pidas de hueso&#44; poseen un riesgo dos veces mayor de sufrir una fractura vertebral o perif&#233;rica que aqu&#233;llas consideradas como normales o perdedoras lentas<span class="elsevierStyleSup">11&#44;12</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En los &#250;ltimos a&#241;os&#44; se ha suscitado en numerosas ocasiones la controversia de densitometr&#237;a &#243;sea o marcadores bioqu&#237;micos&#46; Los defensores de la densitometr&#237;a llegaron a afirmar que los marcadores bioqu&#237;micos de remodelado &#243;seo ten&#237;an una utilidad muy limitada con relaci&#243;n a la densitometr&#237;a&#46; Sin embargo&#44; &#233;sta es una cuesti&#243;n bastante discutible&#44; y la prueba es el desarrollo que ha experimentado en fechas recientes el campo de los marcadores bioqu&#237;micos del remodelado &#243;seo&#46; En este sentido se ha planteado si los valores de los marcadores bioqu&#237;micos se pueden considerar junto con la determinaci&#243;n de la densidad mineral &#243;sea &#40;DMO&#41; para conseguir una mayor precisi&#243;n en la predicci&#243;n del riesgo de fractura&#44; y se ha observado que las mujeres que poseen una baja masa &#243;sea y un elevado recambio &#243;seo tienen un riesgo mayor de fractura que aqu&#233;llas con un &#250;nico factor de riesgo<span class="elsevierStyleSup">13</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Mientras que la relaci&#243;n entre los marcadores de formaci&#243;n &#243;sea y el riesgo de fractura no est&#225; clara&#44; los valores de los marcadores de resorci&#243;n &#40;tabla 4&#41; s&#237; se relacionan con el riesgo de fractura &#243;sea<span class="elsevierStyleSup">14&#44;15</span>&#46; Garnero et al<span class="elsevierStyleSup">16</span> en un estudio prospectivo observaron que en las mujeres que sufrieron una fractura&#44; durante dos a&#241;os de seguimiento&#44; los valores de CTx libre fueron m&#225;s altos que los controles sin fracturas&#46; Adem&#225;s&#44; se demostr&#243; que la DMO y CTx poseen un valor de predicci&#243;n muy parecido&#44; siendo el mejor indicador de fractura un valor elevado de CTx en personas con historia de fractura&#44; seguido por una baja DMO y un valor alto de CTx&#46; De esta forma&#44; un valor elevado de CTx &#40;por encima de 2 DE&#41; predijo mejor la fractura que una baja DMO &#40;menor o igual a 2&#44;9 DE&#41;<span class="elsevierStyleSup">17</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img src="70v12n02-13046870tab04.gif"></img></p><p class="elsevierStylePara">Parece que la tasa de resorci&#243;n &#243;sea predice la fractura de manera independiente de la masa &#243;sea&#44; por lo que estos datos sugieren que una mayor resorci&#243;n &#243;sea puede conducir a un aumento en la fragilidad del esqueleto por dos mecanismos distintos&#58; mediados por una reducci&#243;n en la masa &#243;sea y por un deterioro de la microarquitectura del tejido &#243;seo debidos a una mayor actividad osteocl&#225;stica<span class="elsevierStyleSup">18</span>&#46; Estos datos permiten concluir que una combinaci&#243;n de DMO y de marcadores de resorci&#243;n aumentar&#225; la especificidad para la predicci&#243;n de la fractura&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El principal uso de los marcadores de recambio &#243;seo es el de identificar a pacientes con p&#233;rdida &#243;sea acelerada&#44; ya que la relaci&#243;n entre posibilidad real de fractura determinada mediante baja DMO y alto recambio &#243;seo est&#225; clara&#59; incluso para densitometr&#237;as normales&#44; unos valores altos de marcadores son predictivos de una p&#233;rdida de masa &#243;sea anual elevada&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En patolog&#237;as como la osteoporosis posmenop&#225;usica&#44; los marcadores de remodelado &#243;seo son tremendamente &#250;tiles&#46; En primer lugar&#44; asociados a la densitometr&#237;a para decidir&#44; seg&#250;n el estado del remodelado y de la masa &#243;sea&#44; si es conveniente o no realizar un tratamiento a un determinado paciente&#46; En segundo lugar&#44; los marcadores son ideales para el seguimiento del tratamiento&#46; El &#233;xito o el fracaso de un determinado tratamiento &#40;hormonal sustitutivo&#44; bifosfonatos&#44; calcitonina&#46;&#46;&#46;&#41; podr&#225; ser valorado dos o tres meses despu&#233;s de haber comenzado&#44; antes de que sea posible detectar variaciones apreciables en la DMO&#44; para lo que tiene que transcurrir al menos el plazo de un a&#241;o<span class="elsevierStyleSup">19</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Por el contrario&#44; varios estudios han demostrado que los marcadores &#243;seos se reducen considerablemente a los 3 meses &#40;formaci&#243;n &#243;sea&#41; y a los 6 meses &#40;formaci&#243;n &#243;sea&#41; tras instaurar la terapia&#46; Este retraso en el descenso de los marcadores de formaci&#243;n refleja el acoplamiento fisiol&#243;gico de la formaci&#243;n a la resorci&#243;n&#44; alcanz&#225;ndose una meseta a los 6-12 meses<span class="elsevierStyleSup">20</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El NTx y CTx en orina parecen presentar un mayor grado de supresi&#243;n que las piridolinas y otros marcadores cl&#225;sicos de resorci&#243;n con la terapia antirresortiva&#46; Al comparar varios marcadores con la DMO se encontr&#243; que las mujeres que no respond&#237;an al tratamiento&#44; seg&#250;n la DMO&#44; pose&#237;an unos valores s&#233;ricos de osteocalcina y fosfatasa alcalina &#243;sea y un CTx urinario mucho mayores que las que respond&#237;an&#44; y que el CTx fue el marcador m&#225;s predictivo y sensible<span class="elsevierStyleSup">21</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En resumen&#44; una determinaci&#243;n previa de los marcadores antes de instaurar una terapia antirresortiva y su determinaci&#243;n cada 3-6 meses&#44; ayudar&#237;a a identificar a las pacientes que&#44; <span class="elsevierStyleItalic">a priori</span>&#44; se beneficiar&#225;n m&#225;s del tratamiento&#46; El uso de estos marcadores en mujeres que est&#225;n llevando una terapia antirresortiva son de gran utilidad&#44; ya que revelan si la mujer responde o no al tratamiento y ayudan a identificar a aquellas pacientes con mayor riesgo de p&#233;rdida &#243;sea<span class="elsevierStyleSup">22</span>&#46; La posibilidad de disponer de m&#233;todos r&#225;pidos&#44; fiables y de f&#225;cil uso ambulatorio para los CTx en orina ser&#237;a una gran ayuda en el control del tratamiento de mujeres posmenop&#225;usicas sometidas a THS&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> CONCLUSIONES</p><p class="elsevierStylePara">El test Osteosal<span class="elsevierStyleSup">TM</span> mide CTx en orina del paciente mediante el denominado m&#233;todo POC&#59; es f&#225;cil de usar y&#44; a la vista de las conclusiones obtenidas&#44; podr&#237;a tener utilidad en la monitorizaci&#243;n ambulatoria de los tratamientos antirresortivos&#46;</p>"
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Información del artículo
ISSN: 11328460
Idioma original: Español
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