Variabilidad de la Respuesta de las Células Dendríticas Estimuladas in vitro con Porphyromonas gingivalis y Aggregatibacter actinomycetemcomitans

Resumen

Las células dendríticas son células presentadoras de antígeno capaces de inducir la activación y maduración de linfocitos T CD4+ vírgenes hacia un fenotipo efector especifico Th1 o Th2, dependiendo del tipo de antigeno presentado, las senales co-estimuladoras que expresan y el ambiente de citoquinas en el cual se produce la interaccion celula-celula. El objetivo del presente trabajo es analizar la respuesta de las celulas dendriticas estimuladas in vitro con distintas concentraciones de las bacterias periodontopatógenas Pg y Aa. En celulas dendriticas derivadas de monocitos de sangre periferica estimuladas con 10¹ a 10⁹ bacterias/mL de Pg y Aa se evaluo la expresion del marcador de maduracion CD80 mediante citometria de flujo y de las citoquinas IL1β, IL2, IL5, IL6, IL10, IL12, IL13, IFNγ, TNFα y TNFβ mediante RT-PCR cuantitativa. Aa y Pg indujeron maduracion de las celulas dendriticas, detectandose significativamente mayor expresion de CD80 con la estimulacion de Aa, e indujeron predominantemente la expresion de citoquinas propias de una respuesta Th1. Dependiendo de la carga bacteriana, fueron detectados distintos umbrales de induccion de expresion de citoquinas. Aa indujo la sintesis de IL1β, IL12, IFNγ, TNFα y TNFβ a menor carga bacteriana que Pg. Tomados en conjunto, estos datos nos permiten especular un mayor potencial antigenico y proyectar una mayor capacidad patogenica durante la infeccion periodontal de Aa en comparación a Pg.

Abstract

Dendritic cells are potent antigen-presenting cells able to prime naive T cells and polarize them towards a Th1 or Th2 response, depending on the type of the antigen presented to the TCR, the type of costimulatory signals, and the cytokine pattern in the environment. The aim of this work was to analyze the response of dendritic cells to in vitro stimulation with Pg and Aa. In monocyte-derived dendritic cells stimulated with 10¹ to 10⁹ bacteria/mL of Pg or Aa were evaluated both the expression of the maturation marker CD80 by flow cytometry and the expression of the cytokines IL1β, IL2, IL5, IL6, IL10, IL12, IL13, IFNγ, TNFα and TNFβ by quantitative RT-PCR. Both Pg and Aa led to dendritic cell maturation, detecting higher CD80 expression upon Aa-stimulation, and induced a Th1 pattern of cytokine expression. Aa-stimulated dendritic cells expressed IL1β, IL12, IFNγ, TNFα and TNFβ mRNAs with lower bacterial charge than with Pg. Furthermore, our data indicated the existence of distinct thresholds for the induction of the different cytokines analyzed. Taken together, these data allow us to speculate a higher antigenic potential and higher pathogenic capacity of Aa than Pg during periodontal infections.