covid
Buscar en
Revista Clínica de Periodoncia, Implantología y Rehabilitación Oral
Toda la web
Inicio Revista Clínica de Periodoncia, Implantología y Rehabilitación Oral Genotipificación de los genes rgpA y kgp que codifican para las gingipaínas de...
Información de la revista
Vol. 5. Núm. 3.
Páginas 135-138 (diciembre 2012)
Compartir
Compartir
Descargar PDF
Más opciones de artículo
Vol. 5. Núm. 3.
Páginas 135-138 (diciembre 2012)
Open Access
Genotipificación de los genes rgpA y kgp que codifican para las gingipaínas de Porphyromonas gingivalis
Genotyping of rgpA and kgp genes encoding Pophyromonas gingivalis gingipains
Visitas
1801
L. Abusleme1,
Autor para correspondencia
loreabusleme@uchile.cl

Correspondencia autor.
, V. Blanc2, R. Léon2, J. Gamonal3, N. Silva1
1 Laboratorio de Microbiología Oral. Departamento de Patología. Facultad de Odontología, Universidad de Chile. Santiago, Chile
2 Laboratorio de Microbiología. Dentaid S.L. Barcelona, España
3 Laboratorio de Biología Periodontal Departamento de Odontología Conservadora. Facultad de Odontología, Universidad de Chile. Santiago, Chile
Este artículo ha recibido

Under a Creative Commons license
Información del artículo
Resumen

Porphyromonas gingivalis es un microorganismo fuertemente asociado con la etiología de la periodontitis. Esta bacteria posee varios factores de virulencia, dentro de los que destacan las gingipaínas, debido a sus múltiples acciones relacionadas con la destrucción de la matriz extracelular del tejido conectivo periodontal, la modulación del sistema inmune del hospedero y la estimulación de la expresión de citoquinas pro-inflamatorias. Estas proteinasas tienen afinidades específicas siendo Arg-gingipaínas (RgpA y RgpB, codificadas por los genes rgpA y rgpB, respectivamente) y Lys-gingipaínas (Kgp, codificada por el gen kgp). Se ha descrito que existen polimorfismos en los genes que codifican para esta proteinasas. El objetivo del presente estudio fue describir la frecuencia de los genotipos identificados para los genes rgpA y kgp en aislados clínicos de P. gingivalis, obtenidos desde pacientes con periodontitis. Para ello se utilizó amplificación por PCR de los genes rgpA y kgp, seguido de análisis de restricción. De un total de 47 aislados provenientes de 4 individuos con periodontitis crónica y 2 con periodontitis agresiva, se genotipificaron 38 aislados para el gen rgpA, exhibiendo la totalidad de éstos el patrón electroforético A (100%). Para el gen kgp se genotipificaron 43 aislados, presentando 28 de ellos (65.2%) el perfil electroforético kgp-I y 15 aislados (34.8%) el perfil kgp-II. En los aislados provenientes de un individuo fue posible apreciar ambos genotipos descritos para el gen kgp. Los resultados indican un predominio del patrón electroforético A (rgpA) y que el genotipo kgp-I fue el más frecuentemente encontrado de los genotipos kgp.

Palabras clave:
Porphyromonas gingivalis
gingipaínas
genotipos
kgp
rgpA
Abstract

Porphyromonas gingivalis is a microorganism strongly associated with the etiology of periodontitis. This periodontal bacterium possesses an array of virulence factors, among which gingipains have a key importance, being involved with extracellular matrix destruction of periodontal tissues, modulation of host immune response and stimulation in the production of pro-inflammatory cytokines by different types of cells. These proteinases have specific affinities, being Arg-gingipains (RgpA and RgpB, encoded by rgpA and rgpB genes, respectively) and Lys-gingipains (Kgp, encoded by the kgp gene). It has been described that there are polymorphisms in the genes encoding for gingipains. Therefore, the aim of the present study was to describe the frequency of rgpA and kgp genotypes in clinical isolates of P. gingivalis obtained from periodontitis patients. For determining the rgpA and kgp genotypes, we used PCR amplification and restriction analysis. From 47 isolates obtained from 4 individuals with chronic periodontitis and 2 subjects with aggressive periodontitis, 38 were typified for rgpA gene and all exhibited the electrophoretic pattern A (100%). For kgp gene, we characterized 43 isolates, 28 of them (65.2%) with the kgp-I electrophoretic profile and 15 isolates (34.8%) with the kgp-II profile. In the isolates belonging to one individual, we found both genotypes of kgp gene. The results indicate a clear predominance of the electrophoretic pattern A (for rgpA gene) and kgp-I genotype was the most frequently found of the kgp genotypes.

Key words:
Porphyromonas gingivalis
gingipains
genotypes
kgp
rgpA
El Texto completo está disponible en PDF
Referencias bibliográficas
[1.]
Consensus report.
Periodontal diseases: Pathogenesis and microbial factors.
Ann Periodontol, 1 (1996), pp. 926-932
[2.]
S.S. Socransky, A.D. Haffajee, M.A. Cugini, C. Smith, R.L. Kent Jr..
Microbial complexes in subgingival plaque.
J Clin Periodontol, 25 (1998), pp. 134-144
[3.]
A.L. Griffen, M.R. Becker, S.R. Lyons, M.L. Moeschberger, E.J. Leys.
Prevalence of Porphyromonas gingivalis and periodontal health status.
J Clin Microbiol, 36 (1998), pp. 3239-3242
[4.]
N. Silva, N. Dutzan, M. Hernandez, et al.
Characterization of progressive periodontal lesions in chronic periodontitis patients: Levels of chemokines, cytokines, matrix metalloproteinase-13, periodontal pathogens and inflammatory cells.
J Clin Periodontol, 35 (2008), pp. 206-214
[5.]
R.J. Lamont, H.F. Jenkinson.
Life below the gum line: Pathogenic mechanisms of Porphyromonas gingivalis.
Microbiol Mol Biol Rev, 62 (1998), pp. 1244-1263
[6.]
R. Pike, W. McGraw, J. Potempa, J. Travis.
Lysine-and arginine-specific proteinases from Porphyromonas gingivalis. Isolation, characterization, and evidence for the existence of complexes with hemagglutinins.
J Biol Chem, 269 (1994), pp. 406-411
[7.]
M.A. Curtis, J. Aduse-Opoku, M. Rangarajan.
Cysteine proteases of Porphyromonas gingivalis.
Critical reviews in oral biology and medicine: An official publication of the American Association of Oral Biologists, 12 (2001), pp. 192-216
[8.]
J. Potempa, A. Banbula, J. Travis.
Role of bacterial proteinases in matrix destruction and modulation of host responses.
Periodontol 2000, 24 (2000), pp. 153-192
[9.]
T. Kantyka, T. Latendorf, O. Wiedow, et al.
Elafin is specifically inactivated by RgpB from Porphyromonas gingivalis by distinct proteolytic cleavage.
Biological Chemistry, 390 (2009), pp. 1313-1320
[10.]
J.P. Lewis.
Metal uptake in host-pathogen interactions: Role of iron in Porphyromonas gingivalis interactions with host organisms.
Periodontol 2000, 52 (2010), pp. 94-116
[11.]
T. Chen, K. Nakayama, L. Belliveau, M.J. Duncan.
Porphyromonas gingivalis gingipains and adhesion to epithelial cells.
Infect Immun, 69 (2001), pp. 3048-3056
[12.]
M. Kontani, H. Ono, H. Shibata, et al.
Cysteine protease of Porphyromonas gingivalis 381 enhances binding of fimbriae to cultured human fibroblasts and matrix proteins.
Infect Immun, 64 (1996), pp. 756-762
[13.]
J.A. Kinane, M.R. Benakanakere, J. Zhao, K.B. Hosur, D.F. Kinane.
Porphyromonas gingivalis influences actin degradation within epithelial cells during invasion and apoptosis.
Cell Microbiol, 14 (2012), pp. 1085-1096
[14.]
M.D. Carlisle, R.N. Srikantha, K.A. Brogden.
Degradation of human alpha-and betadefensins by culture supernatants of Porphyromonas gingivalis strain 381.
Journal of Innate Immunity, 1 (2009), pp. 118-122
[15.]
H.A. Schenkein, H.M. Fletcher, M. Bodnar, F.L. Macrina.
Increased opsonization of a prtH-defective mutant of Porphyromonas gingivalis W83 is caused by reduced degradation of complement-derived opsonins.
J Immunol, 154 (1995), pp. 5331-5337
[16.]
Y. Kitamura, S. Matono, Y. Aida, T. Hirofuji, K. Maeda.
Gingipains in the culture supernatant of Porphyromonas gingivalis cleave CD4 and CD8 on human T cells.
J Periodontal Res, 37 (2002), pp. 464-468
[17.]
A. Lourbakos, J. Potempa, J. Travis, et al.
Arginine-specific protease from Porphyromonas gingivalis activates protease-activated receptors on human oral epithelial cells and induces interleukin-6 secretion.
Infect Immun, 69 (2001), pp. 5121-5130
[18.]
M. Oido-Mori, R. Rezzonico, P.L. Wang, et al.
Porphyromonas gingivalis gingipain-R enhances interleukin-8 but decreases gamma interferon-inducible protein 10 production by human gingival fibroblasts in response to T-cell contact.
Infect Immun, 69 (2001), pp. 4493-4501
[19.]
R.P. Allaker, J. Aduse-Opoku, J.E. Batten, M.A. Curtis.
Natural variation within the principal arginine-specific protease gene, prpR1, of Porphyromonas gingivalis.
Oral Microbiol Immunol, 12 (1997), pp. 298-302
[20.]
T. Beikler, U. Peters, B. Ehmke, T.F. Flemmig.
Sequence analysis of kgp in Porphyromonas gingivalis isolates from periodontitis patients.
Oral Microbiol Immunol, 18 (2003), pp. 393-397
[21.]
T. Yoshino, M.L. Laine, A.J. van Winkelhoff, G. Dahlen.
Genotype variation and capsular serotypes of Porphyromonas gingivalis from chronic periodontitis and periodontal abscesses.
FEMS Microbiology Letters, 270 (2007), pp. 75-81
[22.]
L. Abusleme, P. Pozo, N. Silva.
Genotipificación de Porphyromonas gingivalis en pacientes con periodontitis.
Rev Clin Periodoncia Implantol Rehabil Oral, 2 (2009), pp. 54-58
[23.]
T. Beikler, U. Peters, K. Prior, B. Ehmke, T.F. Flemmig.
Sequence variations in rgpA and rgpB of Porphyromonas gingivalis in periodontitis.
J Periodontal Res, 40 (2005), pp. 193-198
[24.]
M.A. Nadkarni, K.A. Nguyen, C.C. Chapple, A.A. DeCarlo, N.A. Jacques, N. Hunter.
Distribution of Porphyromonas gingivalis biotypes defined by alleles of the kgp (Lysgingipain) gene.
J Clin Microbiol, 42 (2004), pp. 3873-3876
[25.]
Y. Shi, D.B. Ratnayake, K. Okamoto, N. Abe, K. Yamamoto, K. Nakayama.
Genetic analyses of proteolysis, hemoglobin binding, and hemagglutination of Porphyromonas gingivalis. Construction of mutants with a combination of rgpA, rgpB, kgp, and hagA.
J Biol Chem, 274 (1999), pp. 17955-17960
[26.]
G.D. Tribble, G.J. Lamont, A. Progulske-Fox, R.J. Lamont.
Conjugal transfer of chromosomal DNA contributes to genetic variation in the oral pathogen Porphyromonas gingivalis.
J Bacteriol, 189 (2007), pp. 6382-6388
[27.]
O.J. Park, K.M. Min, S.J. Choe, B.K. Choi, K.K. Kim.
Use of insertion sequence element IS1126 in a genotyping and transmission study of Porphyromonas gingivalis.
J Clin Microbiol, 42 (2004), pp. 535-541
[28.]
B.G. Loos, D. Mayrand, R.J. Genco, D.P. Dickinson.
Genetic heterogeneity of Porphyromonas (Bacteroides) gingivalis by genomic DNA fingerprinting.
J Dent Res, 69 (1990), pp. 1488-1493
[29.]
A.J. van Winkelhoff, M.C. Rijnsburger, U. van der Velden.
Clonal stability of Porphyromonas gingivalis in untreated periodontitis.
J Clin Periodontol, 35 (2008), pp. 674-679
Copyright © 2012. Sociedad de Periodoncia de Chile, Sociedad de Implantología Oral de Chile y Sociedad de Prótesis y Rehabilitación Oral de Chile
Opciones de artículo