El análisis mutacional del gen KRAS realizado en tejido FFEP proveniente de pacientes con adenocarcinoma colorectal en estadio metastásico permite seleccionar candidatos a recibir terapia anti-EGFR.
ObjetivoEstablecer el estado mutacional del gen KRAS en pacientes con adenocarcinoma colorectal avanzado o metastásico que asistieron a consulta en el Instituto Nacional de Cancerología E.S.E, durante el periodo 2010-2011.
Materiales y métodosLos pacientes autorizaron, mediante consentimiento informado, al grupo de patología oncológica del INC a realizar la prueba usando los kits: TheraScreen®/Kras/(IVD/CE), que detecta 7 mutaciones en los codones 12 y 13 (DxS Diagnostics/ Innovation)y Cobas®/Kras que detecta 19 mutaciones en los codones 12, 13 y 61 (Roche)/(IVD/CE). Se seleccionó un FFEP por paciente, según indicaciones del fabricante, registrando además otras características. Se realizaron 116 pruebas (62-TheraScreen® y 54-Cobas®). Para TheraScreen®, el ADN se extrajo de ~8 cortes histológicos de 10μm usando QIAamp®/DNA-FFPE Tissue kit/(Quiagen) y se evaluó mediante ensayo control del kit (muestras con CTs diferentes a 24–28 se reprocesaron). Se usó el equipo LightCycler®z480/ II y LightCycler®/Adapt-Software/(Roche). Para Cobas® el ADN se extrajo de 1 corte de 5μm usando COBAS®/DNA Sample Preparation kit/(Roche), requiriéndose 2ng/μl cuantificados espectrofotométricamente con Nanodrop®-UV-Vis/ND-2000c. Se usó el equipo COBAS®/z480 con COBAS®/4800-SR2-V.2-Software/(Roche). El EM: estado mutacional, se registró como MD: mutaciones detectadas, MND: mutaciones no detectadas y RI: resultado inválido.
ResultadosSe atendieron 105 (90,5%) pacientes INC y 11 (9,5%) no-INC, para un total de 116, de estos 51% eran mujeres y 49% hombres, con una edad promedio de 58 años. Las características del FFEP no afectaron la prueba independientemente del kit. En los pacientes INC el EM fue: RI 1%, MD 53% y MND 46%. En los pacientes no-INC el EM fue: MD 37% y MND 63%. De los FFEPs seleccionados el 36% correspondían a biopsias y su EM (sin tener en cuenta el kit) fue: MD 21 casos y MND 21 casos, el 64% de casos restantes, eran resecciones quirúrgicas y su EM fue: RI 1 caso, MD 40 casos y MND 33 casos. El análisis por tecnología mostró que: el EM de los 62 casos TheraScreen® fue: MND 43,5% y MD 56,4%, el EM para los 54 casos Cobas® fue: RI 2%, MND 50% y MD 48%. El EM de los 116 casos, sin correlacionar el kit, fue: RI 1%, MD 54% y MND 46%.
ConclusionesLa prevalencia de mutaciones en KRAS detectada en el INC es mayor a lo reportado para Europa pero concuerda con lo reportado para América Latina en 2011.
