La procalcitonina (PCT) es un péptido de 116 aminoácidos, uno de los precursores de la calcitonina1, proteína codificada por el gen CALC1 (11p15.4) cuya función fisiológica permanece incierta. Las infecciones bacterianas inducen un incremento ubicuo en la expresión del gen CALC-I y la subsiguiente liberación de precursores de calcitonina en los diferentes tejidos del organismo2.

Los procesos febriles constituyen uno de los motivos de consulta más frecuentes en las urgencias pediátricas, siendo las infecciones bacterianas una de las principales causas. Su diagnóstico es un reto a superar pues representan una importante causa de morbimortalidad3,4.

El diagnóstico de las infecciones bacterianas es a veces complicado, debido a la similitud en la presentación clínica de procesos infecciosos originados por diferentes agentes causales (bacterias o virus), e incluso por otros estados inflamatorios de diferente etiología.

El diagnóstico preciso de las mismas se realiza mediante pruebas específicas bacteriológicas o inmunológicas que originan un retraso en el conocimiento de sus resultados. Así, es de especial interés el uso de biomarcadores séricos cuya rápida determinación evidencie, precozmente, la existencia del proceso infeccioso. Entre estos, es la PCT la que aparece en el suero de los pacientes con anterioridad a otros marcadores inflamatorios agudos tradicionalmente utilizados como el aumento en el número de leucocitos periféricos y/o la proteína C reactiva5.

El principal estímulo para la liberación de PCT durante un proceso infeccioso es la endotoxina bacteriana responsable, produciendo un incremento en las concentraciones séricas de PCT a las 3-4h del mismo, alcanzando concentraciones máximas a las 6-8h y permaneciendo elevada al menos durante 24-30h6. La proteína C reactiva, por el contrario, requiere de 12 a 24 h para elevarse y de 20 a 72 h para llegar a una meseta, manteniéndose elevada durante 3 a 7 días7.

La PCT es un excelente biomarcador de infecciones bacterianas en niños, mostrando buena correlación con la severidad de la enfermedad, pudiendo utilizarse asimismo como marcador pronóstico8–10, decreciendo inmediatamente tras la administración específica de antibióticos11.

Es bien conocida la dificultad que aparece en la mayoría de los casos, de obtener un volumen adecuado de muestra en recién nacidos y niños pequeños, y la preocupación de realizar una extracción excesiva de sangre, pudiendo así provocar una anemia inducida por flebotomía. Este hecho está facilitando que se busquen y adopten otras alternativas para solucionar estos posibles problemas.

Las muestras de sangre seca recogida sobre papel (DBS) de pacientes con una posible infección constituyen un método accesible de toma, almacenaje y envío de muestras al laboratorio de referencia. La experiencia del cribado en neonatos empleando DBS, ha mostrado ser eficaz y sencilla12. Las muestras DBS también han sido empleadas en el diagnóstico de diversas enfermedades genéticas, metabólicas e infecciosas12,13.

El uso de este tipo de muestras presenta la misma precisión y reproducibilidad que las muestras líquidas, siendo muchos los metabolitos cuantificables en las mismas y, entre ellos, la PCT.

La determinación de PCT en DBS presenta muchas ventajas en relación con las muestras de sangre líquida14, empleándose volúmenes de sangre significativamente menores recogidos mediante una pequeña punción en el talón o en el dedo, evitando el uso de jeringuillas y reduciendo el gasto de infraestructuras, de material de laboratorio y permitiendo, asimismo, el envío a los laboratorios mediante el correo ordinario.

Estudiar la posible aplicación de las muestras DBS en el diagnóstico y monitorización de infecciones bacterianas mediante la determinación del biomarcador PCT, comparándolo con el método tradicional de electroquimioluminiscencia (ECLIA) en plasma utilizado en nuestro laboratorio.

En este estudio se analizaron un total de 135 muestras de sangre, a las que se les determinaron los niveles de PCT en plasma y en sangre seca en papel, utilizando la metodología establecida en nuestro laboratorio (ECLIA).

Las muestras estudiadas fueron agrupadas en 4 grupos en función del nivel de PCT presentado. Grupo1: <0,740ng/mL (n=15), grupo 2: 0,740-1,99ng/mL (n=38), grupo 3: 2-10ng/mL (n=51) y grupo 4:>10ng/mL (n=31), comprendidos en el rango de edad de 0 a 14 años.

Aunque nuestra n total es de 135 muestras, pudimos observar que muestras con niveles de PCT inferiores a 0,650ng/mL no pueden ser cuantificadas mediante la metodología en DBS ya que, en las 15 estudiadas, los valores estaban por debajo del límite de detección de la técnica tradicional cuyo valor es de 0,020ng/mL. En la tabla 2 se muestran los valores obtenidos por ambos métodos para la totalidad de las muestras.

Puesto que la muestra analizada no seguía una distribución normal (test de Kolmogorov-Smirnov, p<0,001), y con el fin de explicar la variabilidad obtenida entre ambos métodos, se analizaron el coeficiente de correlación de Spearman, el método de regresión Passing-Bablock y el análisis de Bland-Altman para evaluar la concordancia entre ambos métodos.

Los resultados del coeficiente de correlación de Spearman y el análisis de Passing-Bablock se expresan en la tabla 3.

Finalmente, y para comprobar si existían diferencias entre las medias de ambas poblaciones se aplicó el test U de Mann-Whitney mostrándonos (p=0,200) la no existencia de diferencias entre las mismas.

En la figura 1 se representa el análisis de Bland-Altman de la totalidad de las muestras así como distribuidas por grupos.

Figura 1.

Análisis de Bland-Altman de la totalidad de muestras y distribuidas por grupos (2,3 y 4).

(0,32MB).

El diagnóstico de los procesos infecciosos febriles presenta un especial interés ya que, hasta en un 30% de las ocasiones, pueden suponer una infección bacteriana masiva de la que deriven graves consecuencias18.

Entre los diferentes biomarcadores utilizados, la PCT es el parámetro más utilizado actualmente en las urgencias hospitalarias. La PCT es un compuesto estable en las muestras obtenidas19 y, su fácil determinación, su moderado coste, y la rapidez en la obtención de los resultados, hacen que constituya una valiosa herramienta adicional para el diagnóstico y manejo de las infecciones bacterianas en pediatría20,21.

Diferentes estudios señalan la gran sensibilidad y especificidad que presenta, mostrando mayor coste-efectividad que otros parámetros analíticos en diferentes procesos infecciosos22,23. Aún no es considerado como el parámetro «gold standard» para este tipo de eventos debido a que su valor predictivo negativo no es siempre del 100%, pudiendo conducir, en algunas ocasiones, a interpretaciones erróneas.

Diferentes metaanálisis realizados para la evaluación de procesos febriles en poblaciones pediátricas24,25 concluyen que los niveles de PCT plasmáticos deben utilizarse en combinación con criterios de predicción clínica para aumentar la eficacia de los datos obtenidos. En nuestro estudio, puede observarse la utilidad del empleo de este biomarcador corroborado por el diagnóstico definitivo posterior. La excelente correlación existente entre los niveles de PCT analizados en ambos tipos de muestras (plasma/sangre seca en papel) en el mismo paciente, la concordancia entre las mediciones (según el análisis de Bland-Altman realizado) así como la falta de significación estadística entre sus resultados, es clara expresión de la utilidad de la muestra DBS. No obstante el estudio presenta una limitación cuando estamos ante valores bajos de PCT. Como se muestra anteriormente en los resultados, en 15 de nuestras muestras no se pudieron determinar los valores de PCT, siendo el valor mínimo medido en DBS de 0,650ng/mL. Por ello, a pesar de la buena correlación que existe entre métodos, se deben manejar los resultados con cautela en estos casos para tomar decisiones clínicas siendo recomendable, en caso de valores iniciales bajos, el repetir la determinación pasadas 4-5 h, por si nos encontrásemos ante el inicio precoz de un proceso séptico grave26.

El hecho de poder determinar este marcador mediante DBS tiene un especial interés para la población pediátrica donde, con frecuencia, la extracción de sangre venosa presenta dificultades. La obtención de la muestra por punción en el talón o yema del dedo evita este problema contribuyendo al diagnóstico rápido de este tipo de procesos infecciosos, permitiéndonos instaurar el tratamiento específico que disminuirá las complicaciones que estas pueden originar.

La obtención de valores de PCT en los niveles de la normalidad permitirá una mejor optimización de los recursos hospitalarios evitando ingresos, así como el uso inadecuado de antibióticos en procesos inflamatorios no infecciosos, donde no solo son ineficaces sino que contribuyen al desarrollo de resistencias, aumentan los costes, y añade los riesgos de toxicidad y reacciones alérgicas derivadas de su uso.

Podemos concluir de nuestro estudio la existencia de una buena correlación entre métodos, y las ventajas que aporta el uso de las muestras DBS. No obstante podría mejorarse la sensibilidad del método ya que no podría excluirse la presencia de infección en aquellas muestras con resultados bajos (inferiores a 0,650ng/mL), siendo recomendable realizar determinaciones seriadas en estos casos.

Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.