Interferencia en electroforesis capilar debida a contraste yodado

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La electroforesis de proteínas está indicada siempre que se sospeche una de estas alteraciones conocidas como gammapatías monoclonales (GM)<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0025">1,2</a>, las cuales presentan una secreción de proteínas de características homogéneas conocidas como inmunoglobulinas (excepto en el denominado mieloma no secretor).El mieloma múltiple (MM) y la macroglobulinemia de Waldenström (MW) son los dos trastornos típicos asociados a la proliferación de células plasmáticas o a procesos linfoproliferativos.La presencia de un clon de linfocitos o células plasmáticas con capacidad de producir una inmunoglobulina o un fragmento de la misma se relaciona también con la existencia de una gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI) cuyo origen, en la mayoría de los casos, es desconocido.En el caso de que aparezca una banda estrecha o un pico monoclonal o se sospeche la presencia de un mieloma múltiple, macroglobulinemia, amiloidosis primaria o enfermedades relacionadas, debe realizarse la inmunofijación, puesto que es crítica para la diferenciación entre un aumento monoclonal o policlonal de las inmunoglobulinas.Indicaciones adicionales de la inmunofijación son la detección de una pequeña cantidad de proteína M en presencia de inmunoglobulinas normales o aumentadas, pacientes con mieloma múltiple o macroglobulinemia en los que el tratamiento haya producido la desaparición de la proteína M en la electroforesis de rutina y el reconocimiento y distinción de gammapatías biclonales o triclonales. Además, se debe estudiar la posibilidad de una IgD o IgE monoclonal en todos los pacientes con presencia de una cadena ligera monoclonal en el suero pero sin reactividad frente a antisueros anti-G, anti-A o anti-M.La CZE presenta la ventaja de que cuantifica todas las proteínas directamente a través de los enlaces peptídicos mediante detección ultravioleta; proporciona una elevada precisión y un tiempo de respuesta rápido<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035">3,4</a>.Como inconveniente, la CZE puede producir interferencias por sustancias exógenas no proteicas que también absorben a 200 o 214nm. El principal grupo de sustancias que pueden producir este tipo de interferencia son los agentes yodados radioopacos. Estos pueden producir un pico anormal en la región de la prealbúmina, en la fracción α-2-globulina o en la fracción β-globulina.El conocimiento de estas sustancias interferentes es imprescindible para evitar la interpretación errónea de los resultados obtenidos por CZE.Descripción de casosEl presente estudio se basa en la aparición, en la sección de proteínas del Servicio de Análisis Clínicos del Hospital General Mancha-Centro, de dos casos independientes con presencia aparente de un pico monoclonal cuando se analizaron los sueros mediante electroforesis capilar (EC) y que posteriormente se demostró que no existían realmente cuando se realizó la inmunofijación (IF), confirmándose como interferencias.En la revisión rutinaria que se realiza de todos los proteinogramas diariamente, se observó, en primer lugar, la presencia de un posible pico monoclonal en la región β de uno de los sueros sometidos a EC. Siguiendo el protocolo diagnóstico establecido en el laboratorio se realizó una IF de la muestra siendo negativa la existencia de algún componente monoclonal. Revisada la historia clínica del paciente se pudo comprobar que se trataba de un paciente de 58 años valorado en consultas previas de Neumología que es enviado a Urgencias e ingresado posteriormente. Refiere aumento progresivo de su disnea habitual por enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) desde hace dos semanas junto con tos de predominio nocturno y expectoración mucosa. El tratamiento administrado de forma ambulatoria no produce mejoría. Tras realizarle una exploración física sin hallazgos patológicos de importancia se le solicita una radiografía y una tomografía axial computarizada (TAC) de tórax con contraste. El mismo día que se realiza la TAC se solicita una analítica de rutina al laboratorio para la realización de una electroforesis de proteínas en suero. Concretamente el contraste yodado utilizado para la realización de la TAC es el Optiray 320 Ultraject® compuesto por Ioversol.Un segundo caso se encontró posteriormente en otra muestra que igualmente mostró un aparente pico monoclonal mediante EC en la misma región que el anterior. La posterior comprobación por IF fue negativa. La paciente de 53 años se valoró en la consulta de Otorrinolaringología (ORL) por sensación de cuerpo extraño faríngeo. Presentaba un cuadro con tos permanente y hemoptisis ocasional. Había sido intervenida de nódulos en las cuerdas vocales en 2 ocasiones y estaba en tratamiento con Sintrom® por un accidente cerebrovascular (ACV) anterior. Se remitió a consulta de Neumología solicitándose una radiografía y TAC torácicos ante la sospecha de una bronquiectasia perihiliar derecha. El mismo día que se realizó el estudio con contraste intravenoso se hizo la extracción de sangre periférica para analítica de rutina con determinación de proteinograma. Se pudo comprobar que el contraste yodado utilizado era el mismo descrito anteriormente.Material y métodosLas técnicas utilizadas para el análisis de las muestras fueron CZE mediante el sistema Capillarys de Sebia, IF e inmunosustración con el equipo Hydrasys de Sebia para identificar la presencia de un pico en el proteinograma como consecuencia de alguna interferencia.La EC se utiliza en la separación de proteínas y péptidos como método alternativo a la electroforesis convencional. El mecanismo de separación está basado en las relaciones carga/masa de los analitos. Entre las ventajas que ofrece destaca la utilización de volúmenes de muestra extraordinariamente pequeños (< 10 nanoL) y una elevada resolución y rapidez.El potencial aplicado hace que los diferentes componentes iónicos de la mezcla migren cada uno según su propia movilidad y se separen en zonas que puedan estar completamente resueltas o parcialmente solapadas.Si se detecta un pico monoclonal en el proteinograma sérico, el estudio se debe completar mediante la realización de una IF o inmunosustracción para definir el tipo de proteína monoclonal.La IF es un método inmunológico para identificar proteínas anormales. Con las ventajas de su rapidez y facilidad de interpretación, está sustituyendo gradualmente a la inmunoelectroforesis.En una placa de gel se efectúa un recorrido electroforético para separar las proteínas que se tratan con los antisueros específicos de inmunoglobulinas anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-kappa y anti-lambda.De esta forma se permite que la inmunoglobulina que reacciona con su correspondiente antisuero se fije en la agarosa. Las otras proteínas que no reaccionan se eliminan. La tinción del gel con un colorante permite identificar la proteína anormal.La inmunosustracción consiste en la incubación de la muestra con antisueros monoespecíficos correspondientes a las distintas clases de inmunoglobulinas, antes de su análisis electroforético. Como resultado, se obtienen las gráficas de los proteinogramas en los que se identifican las diferentes inmunoglobulinas por la reducción o ausencia de los picos originales correspondientes, cuando son comparados con el proteinograma de referencia de la muestra no tratada.Procesamiento de las muestrasEn este estudio se analizaron de manera rutinaria, inicialmente, las muestras de dos pacientes. Las extracciones se realizaron por punción venosa de vía periférica en tubo de extracción de sangre al vacío de 10ml con gel y activador de coagulación de Biogen. Las muestras se centrifugaron posteriormente a 3500 r.p.m. durante 7 minutos para obtener los sueros a estudio, los cuales fueron sometidos a EC el mismo día de su extracción y conservados en nevera a 4°C en tubos tapados e identificados con sus correspondientes etiquetas de códigos de barras.Tras detectar visualmente en los proteinogramas la presencia de un pico que pudiera estar causado por algún tipo de interferencia, se trataron los sueros con phosphate buffered saline (PBS) al 10% overnight y centrifugación posterior para evitar la posible presencia de fibrinógeno que produce la aparición de un pico en la zona β-γ del proteinograma.Posteriormente se comprobó que a ambos se les había suministrado por vía intravenosa, el mismo día de la extracción, un contraste yodado para la realización de una TAC torácica. El contraste yodado utilizado era Optiray 320 Ultraject® en solución inyectable administrada por vía intraarterial o intravenosa, cuyo principio activo es Ioversol. Cada mililitro de Optiray 320 Ultraject® contiene 678mg de Ioversol equivalente a 320mg de yodo.ResultadosLos resultados obtenidos de las muestras extraídas de los dos pacientes son los siguientes:Paciente 1El varón de 58 años presenta una sospecha de componente monoclonal en la fracción β-2 al realizar la CZE del suero (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig. 1</a>).<elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia>Posteriormente, siguiendo el protocolo establecido, se realiza una inmunofijación del suero del paciente (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig. 2</a>) que revela la no existencia de una banda correspondiente a proteína monoclonal en la zona donde aparecía el pico.<elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia>El suero es tratado con PBS al 10% overnight para evitar la posible interferencia por la presencia de fibrinógeno pero la electroforesis posterior da el mismo resultado.Consultado el caso con los clínicos se demuestra que la muestra de sangre analizada ha sido extraída el mismo día y con posterioridad a la realización de una TAC de tórax con contraste al paciente, lo cual hace sospechar que la aparición del pico puede ser el resultado de una interferencia por el agente yodado utilizado.Para confirmar que la interferencia hallada en la CZE es el resultado del Ioversol se solicita una nueva extracción al paciente, realizándose esta 13 días después de la inicial.Efectivamente, al realizar el proteinograma a esta segunda muestra (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig. 3</a>) se puede observar la desaparición del pico en la fracción β-2, obteniéndose un proteinograma totalmente normal.<elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia>Paciente 2La mujer de 53 años igualmente presentó en la muestra inicial un pico en la región β-2 al realizar la electroforesis (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">fig. 4</a>).<elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia>También se trató el suero con PBS (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">fig. 5</a>) no apreciándose ningún cambio respecto al proteinograma inicial.<elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia>A continuación se realizó una IF (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig. 6</a>) en la cual no aparece banda monoclonal asociada al pico encontrado en la CZE.<elsevierMultimedia ident="fig0030"></elsevierMultimedia>Para corroborar esta ausencia de banda se sometió a inmunosustracción la muestra de la paciente (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0035">fig. 7</a>) y se comprobó que no se suprimía el pico al tratarla con los antisueros. 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Una vez obtenida la muestra, se sometió a una electroforesis rutinaria (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0040">fig. 8</a>) obteniéndose como resultado un proteinograma sin ningún pico sospechoso de proteína monoclonal.<elsevierMultimedia ident="fig0040"></elsevierMultimedia>DiscusiónExisten diversos estudios que demuestran la aparición de interferencias tras la administración de contrastes yodados en muestras sometidas a electroforesis.Hasta ahora, la mayoría de los artículos han descrito casos en los que la interferencia se localizaba en la fracción α-2. In vitro, Arranz-Peña et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0005">5</a> han comparado las interferencias por 13 agentes de contraste yodado diferentes y encontraron que la mayoría de ellos producía un pico en la fracción α-2 aunque alguno lo hacía en la β. En cuanto al tiempo necesario que se debería dejar entre la administración del contraste y la extracción de la muestra para CZE, estos mismos autores concluyen que debería ser entre 2 y 6 días.En otro estudio realizado por Bossuyt et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0010">6</a> se comprobó la interferencia causada por tres contrastes yodados en la fracción α-2 del proteinograma. Coincide también en el tiempo necesario para la eliminación del contraste, entre 2 y 6 días, ya que transcurrido ese periodo no se observa ningún pico al extraer de nuevo las muestras para CZE.Sin embargo, existen algunos estudios in vivo que demuestran la progresiva disminución del pico interferente del proteinograma hasta su casi total desaparición a las 8 horas tras la administración del agente yodado<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0015">7,8</a>. Concretamente se ha descrito que tras estar 8 horas la concentración del mismo disminuye hasta aproximadamente un 5% de la cantidad administrada.Como conclusión del presente estudio, se puede confirmar que la administración del contraste yodado Optiray 320 Ultraject® cuyo principio activo es el Ioversol, produce una interferencia en la fracción β del proteinograma realizado por CZE, en las muestras de los pacientes a los que se les ha administrado el contraste inmediatamente antes de la extracción.Para tratar de evitar este tipo de interferencias, se debería especificar en las instrucciones de uso de este tipo de agentes que no se debe realizar extracción de sangre para electroforesis de proteínas por CZE inmediatamente después de su administración.La aparición de pseudoparaproteinemia también se puede aplicar a otras exploraciones con contraste distintas de la TAC como la angiocardiografía. En un trabajo publicado por Vermeersch et al.<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045">9</a> se demostró la aparición, en la fracción β, de un posible pico monoclonal tras la administración del contraste iomeprol previo a una angiocardiografía. Posteriormente la inmunofijación confirmó la interferencia producida por el contraste al no encontrarse dicho pico.Asimismo, se han encontrado antibióticos que pueden interferir en los resultados de la CZE. El Sulfametoxazol migra en la zona más anódica y puede producir un pico en la zona de la prealbúmina<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib1045">10</a>, por lo que no daría lugar a error ya que en esta zona no se observan proteínas monoclonales. Sin embargo otros, como la Ampicilina-Sulbactam<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055">11</a>, producen un pico en α-2 semejante a los que aparecen con contrastes yodados.Un aspecto a tener en cuenta sería el retraso que la velocidad de eliminación de los contrastes experimentaría en el caso de pacientes con una función renal alterada. En estos casos la interferencia persistiría durante un período de tiempo más prolongado en función del grado de deterioro renal, ya que el contraste permanecería más tiempo en circulación antes de su eliminación.Conflicto de interesesLos autores declaran no tener ningún conflicto de intereses." 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Sin embargo, se han descrito interferencias por sustancias exógenas no proteicas que absorben a la misma longitud de onda y provocan la aparición de falsos positivos.Se describen dos pacientes a los que se les realiza una extracción de sangre para una analítica programada que incluye la determinación del proteinograma. En ambos casos, justo antes de la extracción, se realizó una tomografía axial computarizada (TAC) de tórax con contraste yodado. En el proteinograma se observa un pico monoclonal en la fracción beta. La inmunofijación e inmunosustracción de ambos sueros no confirma la presencia del pico, por lo que se sospecha la existencia de una interferencia por el contraste yodado. 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Original

Iodinated contrast interference in capillary electrophoresis

José Ramón García-Escribano Rodríguez de Tembleque

Autor para correspondencia

jrgarciaes@yahoo.es

Autor para correspondencia.

, Ana Velasco Romero, Herminio López-Escribano, Maria del Monte Jarabo Bueno

Servicio de Análisis Clínicos, Hospital General Mancha-Centro, Alcázar de San Juan, Ciudad Real, España

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y la macroglobulinemia de Waldenstr&#246;m &#40;MW&#41; son los dos trastornos t&#237;picos asociados a la proliferaci&#243;n de c&#233;lulas plasm&#225;ticas o a procesos linfoproliferativos&#46;</p><p id="par0015" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La presencia de un clon de linfocitos o c&#233;lulas plasm&#225;ticas con capacidad de producir una inmunoglobulina o un fragmento de la misma se relaciona tambi&#233;n con la existencia de una gammapat&#237;a monoclonal de significado incierto &#40;GMSI&#41; cuyo origen&#44; en la mayor&#237;a de los casos&#44; es desconocido&#46;</p><p id="par0020" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En el caso de que aparezca una banda estrecha o un pico monoclonal o se sospeche la presencia de un mieloma m&#250;ltiple&#44; macroglobulinemia&#44; amiloidosis primaria o enfermedades relacionadas&#44; debe realizarse la inmunofijaci&#243;n&#44; puesto que es cr&#237;tica para la diferenciaci&#243;n entre un aumento monoclonal o policlonal de las inmunoglobulinas&#46;</p><p id="par0025" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Indicaciones adicionales de la inmunofijaci&#243;n son la detecci&#243;n de una peque&#241;a cantidad de prote&#237;na M en presencia de inmunoglobulinas normales o aumentadas&#44; pacientes con mieloma m&#250;ltiple o macroglobulinemia en los que el tratamiento haya producido la desaparici&#243;n de la prote&#237;na M en la electroforesis de rutina y el reconocimiento y distinci&#243;n de gammapat&#237;as biclonales o triclonales&#46; Adem&#225;s&#44; se debe estudiar la posibilidad de una IgD o IgE monoclonal en todos los pacientes con presencia de una cadena ligera monoclonal en el suero pero sin reactividad frente a antisueros anti-G&#44; anti-A o anti-M&#46;</p><p id="par0030" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La CZE presenta la ventaja de que cuantifica todas las prote&#237;nas directamente a trav&#233;s de los enlaces pept&#237;dicos mediante detecci&#243;n ultravioleta&#59; proporciona una elevada precisi&#243;n y un tiempo de respuesta r&#225;pido<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0035"><span class="elsevierStyleSup">3&#44;4</span></a>&#46;</p><p id="par0035" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Como inconveniente&#44; la CZE puede producir interferencias por sustancias ex&#243;genas no proteicas que tambi&#233;n absorben a 200 o 214<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>nm&#46; El principal grupo de sustancias que pueden producir este tipo de interferencia son los agentes yodados radioopacos&#46; Estos pueden producir un pico anormal en la regi&#243;n de la prealb&#250;mina&#44; en la fracci&#243;n &#945;-2-globulina o en la fracci&#243;n &#946;-globulina&#46;</p><p id="par0040" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El conocimiento de estas sustancias interferentes es imprescindible para evitar la interpretaci&#243;n err&#243;nea de los resultados obtenidos por CZE&#46;</p></span><span id="sec0010" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0030">Descripci&#243;n de casos</span><p id="par0045" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El presente estudio se basa en la aparici&#243;n&#44; en la secci&#243;n de prote&#237;nas del Servicio de An&#225;lisis Cl&#237;nicos del Hospital General Mancha-Centro&#44; de dos casos independientes con presencia aparente de un pico monoclonal cuando se analizaron los sueros mediante electroforesis capilar &#40;EC&#41; y que posteriormente se demostr&#243; que no exist&#237;an realmente cuando se realiz&#243; la inmunofijaci&#243;n &#40;IF&#41;&#44; confirm&#225;ndose como interferencias&#46;</p><p id="par0050" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En la revisi&#243;n rutinaria que se realiza de todos los proteinogramas diariamente&#44; se observ&#243;&#44; en primer lugar&#44; la presencia de un posible pico monoclonal en la regi&#243;n &#946; de uno de los sueros sometidos a EC&#46; Siguiendo el protocolo diagn&#243;stico establecido en el laboratorio se realiz&#243; una IF de la muestra siendo negativa la existencia de alg&#250;n componente monoclonal&#46; Revisada la historia cl&#237;nica del paciente se pudo comprobar que se trataba de un paciente de 58 a&#241;os valorado en consultas previas de Neumolog&#237;a que es enviado a Urgencias e ingresado posteriormente&#46; Refiere aumento progresivo de su disnea habitual por enfermedad pulmonar obstructiva cr&#243;nica &#40;EPOC&#41; desde hace dos semanas junto con tos de predominio nocturno y expectoraci&#243;n mucosa&#46; El tratamiento administrado de forma ambulatoria no produce mejor&#237;a&#46; Tras realizarle una exploraci&#243;n f&#237;sica sin hallazgos patol&#243;gicos de importancia se le solicita una radiograf&#237;a y una tomograf&#237;a axial computarizada &#40;TAC&#41; de t&#243;rax con contraste&#46; El mismo d&#237;a que se realiza la TAC se solicita una anal&#237;tica de rutina al laboratorio para la realizaci&#243;n de una electroforesis de prote&#237;nas en suero&#46; Concretamente el contraste yodado utilizado para la realizaci&#243;n de la TAC es el Optiray 320 Ultraject<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> compuesto por Ioversol&#46;</p><p id="par0055" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Un segundo caso se encontr&#243; posteriormente en otra muestra que igualmente mostr&#243; un aparente pico monoclonal mediante EC en la misma regi&#243;n que el anterior&#46; La posterior comprobaci&#243;n por IF fue negativa&#46; La paciente de 53 a&#241;os se valor&#243; en la consulta de Otorrinolaringolog&#237;a &#40;ORL&#41; por sensaci&#243;n de cuerpo extra&#241;o far&#237;ngeo&#46; Presentaba un cuadro con tos permanente y hemoptisis ocasional&#46; Hab&#237;a sido intervenida de n&#243;dulos en las cuerdas vocales en 2 ocasiones y estaba en tratamiento con Sintrom<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> por un accidente cerebrovascular &#40;ACV&#41; anterior&#46; Se remiti&#243; a consulta de Neumolog&#237;a solicit&#225;ndose una radiograf&#237;a y TAC tor&#225;cicos ante la sospecha de una bronquiectasia perihiliar derecha&#46; El mismo d&#237;a que se realiz&#243; el estudio con contraste intravenoso se hizo la extracci&#243;n de sangre perif&#233;rica para anal&#237;tica de rutina con determinaci&#243;n de proteinograma&#46; Se pudo comprobar que el contraste yodado utilizado era el mismo descrito anteriormente&#46;</p></span><span id="sec0015" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0035">Material y m&#233;todos</span><p id="par0060" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las t&#233;cnicas utilizadas para el an&#225;lisis de las muestras fueron CZE mediante el sistema Capillarys de Sebia&#44; IF e inmunosustraci&#243;n con el equipo Hydrasys de Sebia para identificar la presencia de un pico en el proteinograma como consecuencia de alguna interferencia&#46;</p><p id="par0065" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La EC se utiliza en la separaci&#243;n de prote&#237;nas y p&#233;ptidos como m&#233;todo alternativo a la electroforesis convencional&#46; El mecanismo de separaci&#243;n est&#225; basado en las relaciones carga&#47;masa de los analitos&#46; Entre las ventajas que ofrece destaca la utilizaci&#243;n de vol&#250;menes de muestra extraordinariamente peque&#241;os &#40;&#60; 10 nanoL&#41; y una elevada resoluci&#243;n y rapidez&#46;</p><p id="par0070" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El potencial aplicado hace que los diferentes componentes i&#243;nicos de la mezcla migren cada uno seg&#250;n su propia movilidad y se separen en zonas que puedan estar completamente resueltas o parcialmente solapadas&#46;</p><p id="par0075" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Si se detecta un pico monoclonal en el proteinograma s&#233;rico&#44; el estudio se debe completar mediante la realizaci&#243;n de una IF o inmunosustracci&#243;n para definir el tipo de prote&#237;na monoclonal&#46;</p><p id="par0080" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La IF es un m&#233;todo inmunol&#243;gico para identificar prote&#237;nas anormales&#46; Con las ventajas de su rapidez y facilidad de interpretaci&#243;n&#44; est&#225; sustituyendo gradualmente a la inmunoelectroforesis&#46;</p><p id="par0085" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En una placa de gel se efect&#250;a un recorrido electrofor&#233;tico para separar las prote&#237;nas que se tratan con los antisueros espec&#237;ficos de inmunoglobulinas anti-IgG&#44; anti-IgA&#44; anti-IgM&#44; anti-kappa y anti-lambda&#46;</p><p id="par0090" class="elsevierStylePara elsevierViewall">De esta forma se permite que la inmunoglobulina que reacciona con su correspondiente antisuero se fije en la agarosa&#46; Las otras prote&#237;nas que no reaccionan se eliminan&#46; La tinci&#243;n del gel con un colorante permite identificar la prote&#237;na anormal&#46;</p><p id="par0095" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La <span class="elsevierStyleItalic">inmunosustracci&#243;n</span> consiste en la incubaci&#243;n de la muestra con antisueros monoespec&#237;ficos correspondientes a las distintas clases de inmunoglobulinas&#44; antes de su an&#225;lisis electrofor&#233;tico&#46; Como resultado&#44; se obtienen las gr&#225;ficas de los proteinogramas en los que se identifican las diferentes inmunoglobulinas por la reducci&#243;n o ausencia de los picos originales correspondientes&#44; cuando son comparados con el proteinograma de referencia de la muestra no tratada&#46;</p></span><span id="sec0020" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0040">Procesamiento de las muestras</span><p id="par0100" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En este estudio se analizaron de manera rutinaria&#44; inicialmente&#44; las muestras de dos pacientes&#46; Las extracciones se realizaron por punci&#243;n venosa de v&#237;a perif&#233;rica en tubo de extracci&#243;n de sangre al vac&#237;o de 10<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>ml con gel y activador de coagulaci&#243;n de Biogen&#46; Las muestras se centrifugaron posteriormente a 3500 r&#46;p&#46;m&#46; durante 7 minutos para obtener los sueros a estudio&#44; los cuales fueron sometidos a EC el mismo d&#237;a de su extracci&#243;n y conservados en nevera a 4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C en tubos tapados e identificados con sus correspondientes etiquetas de c&#243;digos de barras&#46;</p><p id="par0105" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tras detectar visualmente en los proteinogramas la presencia de un pico que pudiera estar causado por alg&#250;n tipo de interferencia&#44; se trataron los sueros con phosphate buffered saline &#40;PBS&#41; al 10&#37; overnight y centrifugaci&#243;n posterior para evitar la posible presencia de fibrin&#243;geno que produce la aparici&#243;n de un pico en la zona &#946;-&#947; del proteinograma&#46;</p><p id="par0110" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Posteriormente se comprob&#243; que a ambos se les hab&#237;a suministrado por v&#237;a intravenosa&#44; el mismo d&#237;a de la extracci&#243;n&#44; un contraste yodado para la realizaci&#243;n de una TAC tor&#225;cica&#46; El contraste yodado utilizado era Optiray 320 Ultraject<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> en soluci&#243;n inyectable administrada por v&#237;a intraarterial o intravenosa&#44; cuyo principio activo es Ioversol&#46; Cada mililitro de Optiray 320 Ultraject<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> contiene 678<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg de Ioversol equivalente a 320<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg de yodo&#46;</p></span><span id="sec0025" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0045">Resultados</span><p id="par0115" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los resultados obtenidos de las muestras extra&#237;das de los dos pacientes son los siguientes&#58;</p><span id="sec0030" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0050">Paciente 1</span><p id="par0120" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El var&#243;n de 58 a&#241;os presenta una sospecha de componente monoclonal en la fracci&#243;n &#946;-2 al realizar la CZE del suero &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0005">fig&#46; 1</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0005"></elsevierMultimedia><p id="par0125" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Posteriormente&#44; siguiendo el protocolo establecido&#44; se realiza una inmunofijaci&#243;n del suero del paciente &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0010">fig&#46; 2</a>&#41; que revela la no existencia de una banda correspondiente a prote&#237;na monoclonal en la zona donde aparec&#237;a el pico&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0010"></elsevierMultimedia><p id="par0130" class="elsevierStylePara elsevierViewall">El suero es tratado con PBS al 10&#37; overnight para evitar la posible interferencia por la presencia de fibrin&#243;geno pero la electroforesis posterior da el mismo resultado&#46;</p><p id="par0135" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Consultado el caso con los cl&#237;nicos se demuestra que la muestra de sangre analizada ha sido extra&#237;da el mismo d&#237;a y con posterioridad a la realizaci&#243;n de una TAC de t&#243;rax con contraste al paciente&#44; lo cual hace sospechar que la aparici&#243;n del pico puede ser el resultado de una interferencia por el agente yodado utilizado&#46;</p><p id="par0140" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para confirmar que la interferencia hallada en la CZE es el resultado del Ioversol se solicita una nueva extracci&#243;n al paciente&#44; realiz&#225;ndose esta 13 d&#237;as despu&#233;s de la inicial&#46;</p><p id="par0145" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Efectivamente&#44; al realizar el proteinograma a esta segunda muestra &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0015">fig&#46; 3</a>&#41; se puede observar la desaparici&#243;n del pico en la fracci&#243;n &#946;-2&#44; obteni&#233;ndose un proteinograma totalmente normal&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0015"></elsevierMultimedia></span><span id="sec0035" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0055">Paciente 2</span><p id="par0150" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La mujer de 53 a&#241;os igualmente present&#243; en la muestra inicial un pico en la regi&#243;n &#946;-2 al realizar la electroforesis &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0020">fig&#46; 4</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0020"></elsevierMultimedia><p id="par0155" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Tambi&#233;n se trat&#243; el suero con PBS &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0025">fig&#46; 5</a>&#41; no apreci&#225;ndose ning&#250;n cambio respecto al proteinograma inicial&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0025"></elsevierMultimedia><p id="par0160" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A continuaci&#243;n se realiz&#243; una IF &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0030">fig&#46; 6</a>&#41; en la cual no aparece banda monoclonal asociada al pico encontrado en la CZE&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0030"></elsevierMultimedia><p id="par0165" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para corroborar esta ausencia de banda se someti&#243; a inmunosustracci&#243;n la muestra de la paciente &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0035">fig&#46; 7</a>&#41; y se comprob&#243; que no se suprim&#237;a el pico al tratarla con los antisueros&#46; La muestra del primer paciente no pudo someterse a esta t&#233;cnica por no disponer de ella en ese momento&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0035"></elsevierMultimedia><p id="par0170" class="elsevierStylePara elsevierViewall">A esta paciente tambi&#233;n se le hab&#237;a suministrado Ioversol para la realizaci&#243;n de una TAC tor&#225;cica minutos antes de la extracci&#243;n de la muestra para la CZE&#46;</p><p id="par0175" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Finalmente se solicit&#243; una segunda extracci&#243;n para comprobar la desaparici&#243;n del pico en esta muestra&#44; realiz&#225;ndose la misma casi al mes de la primera&#44; debido a que la paciente no se present&#243; a las citas previas por problemas laborales&#46; Una vez obtenida la muestra&#44; se someti&#243; a una electroforesis rutinaria &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig0040">fig&#46; 8</a>&#41; obteni&#233;ndose como resultado un proteinograma sin ning&#250;n pico sospechoso de prote&#237;na monoclonal&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig0040"></elsevierMultimedia></span></span><span id="sec0040" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0060">Discusi&#243;n</span><p id="par0180" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Existen diversos estudios que demuestran la aparici&#243;n de interferencias tras la administraci&#243;n de contrastes yodados en muestras sometidas a electroforesis&#46;</p><p id="par0185" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Hasta ahora&#44; la mayor&#237;a de los art&#237;culos han descrito casos en los que la interferencia se localizaba en la fracci&#243;n &#945;-2&#46; <span class="elsevierStyleItalic">In vitro</span>&#44; Arranz-Pe&#241;a et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0005"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a> han comparado las interferencias por 13 agentes de contraste yodado diferentes y encontraron que la mayor&#237;a de ellos produc&#237;a un pico en la fracci&#243;n &#945;-2 aunque alguno lo hac&#237;a en la &#946;&#46; En cuanto al tiempo necesario que se deber&#237;a dejar entre la administraci&#243;n del contraste y la extracci&#243;n de la muestra para CZE&#44; estos mismos autores concluyen que deber&#237;a ser entre 2 y 6 d&#237;as&#46;</p><p id="par0190" class="elsevierStylePara elsevierViewall">En otro estudio realizado por Bossuyt et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0010"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a> se comprob&#243; la interferencia causada por tres contrastes yodados en la fracci&#243;n &#945;-2 del proteinograma&#46; Coincide tambi&#233;n en el tiempo necesario para la eliminaci&#243;n del contraste&#44; entre 2 y 6 d&#237;as&#44; ya que transcurrido ese periodo no se observa ning&#250;n pico al extraer de nuevo las muestras para CZE&#46;</p><p id="par0195" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Sin embargo&#44; existen algunos estudios <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> que demuestran la progresiva disminuci&#243;n del pico interferente del proteinograma hasta su casi total desaparici&#243;n a las 8 horas tras la administraci&#243;n del agente yodado<a class="elsevierStyleCrossRefs" href="#bib0015"><span class="elsevierStyleSup">7&#44;8</span></a>&#46; Concretamente se ha descrito que tras estar 8 horas la concentraci&#243;n del mismo disminuye hasta aproximadamente un 5&#37; de la cantidad administrada&#46;</p><p id="par0200" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Como conclusi&#243;n del presente estudio&#44; se puede confirmar que la administraci&#243;n del contraste yodado Optiray 320 Ultraject<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> cuyo principio activo es el Ioversol&#44; produce una interferencia en la fracci&#243;n &#946; del proteinograma realizado por CZE&#44; en las muestras de los pacientes a los que se les ha administrado el contraste inmediatamente antes de la extracci&#243;n&#46;</p><p id="par0205" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para tratar de evitar este tipo de interferencias&#44; se deber&#237;a especificar en las instrucciones de uso de este tipo de agentes que no se debe realizar extracci&#243;n de sangre para electroforesis de prote&#237;nas por CZE inmediatamente despu&#233;s de su administraci&#243;n&#46;</p><p id="par0210" class="elsevierStylePara elsevierViewall">La aparici&#243;n de pseudoparaproteinemia tambi&#233;n se puede aplicar a otras exploraciones con contraste distintas de la TAC como la angiocardiograf&#237;a&#46; En un trabajo publicado por Vermeersch et al&#46;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0045"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a> se demostr&#243; la aparici&#243;n&#44; en la fracci&#243;n &#946;&#44; de un posible pico monoclonal tras la administraci&#243;n del contraste iomeprol previo a una angiocardiograf&#237;a&#46; Posteriormente la inmunofijaci&#243;n confirm&#243; la interferencia producida por el contraste al no encontrarse dicho pico&#46;</p><p id="par0215" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Asimismo&#44; se han encontrado antibi&#243;ticos que pueden interferir en los resultados de la CZE&#46; El Sulfametoxazol migra en la zona m&#225;s an&#243;dica y puede producir un pico en la zona de la prealb&#250;mina<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib1045"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a>&#44; por lo que no dar&#237;a lugar a error ya que en esta zona no se observan prote&#237;nas monoclonales&#46; Sin embargo otros&#44; como la Ampicilina-Sulbactam<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib0055"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a>&#44; producen un pico en &#945;-2 semejante a los que aparecen con contrastes yodados&#46;</p><p id="par0220" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Un aspecto a tener en cuenta ser&#237;a el retraso que la velocidad de eliminaci&#243;n de los contrastes experimentar&#237;a en el caso de pacientes con una funci&#243;n renal alterada&#46; En estos casos la interferencia persistir&#237;a durante un per&#237;odo de tiempo m&#225;s prolongado en funci&#243;n del grado de deterioro renal&#44; ya que el contraste permanecer&#237;a m&#225;s tiempo en circulaci&#243;n antes de su eliminaci&#243;n&#46;</p></span><span id="sec0045" class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle" id="sect0065">Conflicto de intereses</span><p id="par0225" class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los autores declaran no tener ning&#250;n conflicto de intereses&#46;</p></span></span>"
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Información del artículo

ISSN: 18884008
Idioma original: Español

DOI:10.1016/j.labcli.2014.03.001

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2021 Noviembre	90	25	115
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2021 Junio	51	19	70
2021 Mayo	65	7	72
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