Justificación: Estudios previos han demostrado que la exposición in vitro a concentraciones inhibitorias de daptomicina (DAP) en G. adiacens y A. defectiva genera rápidamente el desarrollo de resistencia de alto nivel a la daptomicina (RAND) con CMI>256μg/ml. Estudios realizados en S. mitis han mostrado que las combinaciones de DAP con β-lactamicos son sinérgicas y bactericidas y previenen el desarrollo de resistencia a daptomicina (Zapata B. et al. 2018). En este contexto, estas combinaciones de β-lactamicos con DAP podrían ser útiles para prevenir in vitro el RAND en ABI y GRA.
Objetivos: Estudiar la actividad in vitro por curvas de letalidad de la daptomicina (DAP) en combinación con ampicilina (AMP), gentamicina (GEN), ceftriaxona (CTR) o ceftarolina (CTL) en cepas de Abiotrophiadefectiva y Granulicatella adiances que generan RAND y evaluar si previenen el desarrollo de resistencia a la DAP.
Materiales y métodos: Tres cepas que presentan RAND fueron seleccionadas en este estudio (A. defectiva-288, G. adiacens-295 y G. adiacens-761), aisladas de pacientes con endocarditis infecciosa en el Hospital Clínic de Barcelona. Se realizaron curvas de letalidad para evaluar la actividad de DAP+AMP, DAP+GEN, DAP+CTR y DAP+CTL en estas cepas. La concentración de antibiótico utilizada para los estudios fue de 1×CMI. Adicionalmente, se evaluó DAP a 10μg/ml dependiendo de los resultados obtenidos en las combinaciones de DAP+AMP y DAP+GEN.
Resultados: Los valores de concentración mínima inhibitoria (CMI) en las cepas estudiadas ABI-288, GRA-295 y GRA-761 fueron los siguientes: AMP 16μg/ml, 0,25μg/ml y 0,5μg/ml; GEN 0,12μg/ml, 0,5μg/ml y 1μg/ml; CTR 0,25μg/ml, 8μg/ml y 1μg/ml, CTL 0,25μg/ml, 0,5μg/ml y 0,5μg/ml y DAP 1μg/ml, 1μg/ml y 2μg/ml respectivamente. Los estudios de sinergia (descritos en la tabla) mostraron que: la combinación DAP+CTR fue sinérgica y bactericida en las cepas ABI-288 y GRA-295, la cepa GRA-761 solo mostró actividad sinérgica. En ningún caso se detectaron aislados RAND. La combinación DAP+CTL para la cepa ABI-288 mostró actividad sinérgica y bactericida. Frente a GRA-295 y GRA-761 presentó actividad sinérgica y no se recuperaron aislados RAND. La combinación DAP+GEN en la cepa ABI-288 fue sinérgica y bactericida a diferencia de las cepas GRA-295 y GRA-761 donde la combinación fue indiferente y se recuperaron aislados RAND. La combinación de DAP+AMP en la cepa ABI-288 tiene actividad sinérgica y bactericida, sin embargo, en GRA-295 y GRA-761 presentó sinergia sin actividad bactericida y se identificaron aislados RAND. Al evaluar DAP a concentración de 10μg/ml en combinación con GEN, se observó en la cepa ABI-288 actividad indiferente y bactericida debido a la actividad de DAP. Por este motivo ya no se estudió la combinación de DAP+AMP para esta cepa. En las cepa GRA-295 y GRA-761 la actividad de DAP+AMP fue sinérgica y bactericida sin recuperados RAND. Por último, la combinación DAP10+GEN para la cepa GRA-761 fue sinérgica y bactericida y para la cepa GRA-295 fue indiferente y se recuperaron aislados RAND.
| Combinación | A. defectiva-288 | G. adjacens-295 | G. adjacens-761 |
|---|---|---|---|
| DAP+CTR | Sinérgica+Bactericida | Sinérgica+Bactericida | Sinérgica |
| DAP+CTL | Sinérgica+Bactericida | Sinérgica+Bactericida | Sinérgica |
| DAP+GEN | Sinérgica+Bactericida | Indiferente* | Indiferente* |
| DAP10+GEN | Indiferente+Bactericida | Indiferente* | Sinérgica+Bactericida |
| DAP+AMP | Sinérgica+Bactericida | Sinérgica* | Sinérgica* |
| DAP10+AMP | No evaluado | Sinérgica+Bactericida | Sinérgica+Bactericida |
CONCLUSIÓN: Los estudios in vitro de sinergia mostraron que frente a cepas de A.defectiva y G. adiances que generan RAND, las combinaciones de DAP+CTL y DAP+CTR son las más efectivas siendo sinérgicas para las tres cepas, bactericidas en 2/3 cepas y previnieron el desarrollo de RAND en todos los casos.
