Comparación de tres técnicas ELISA para evaluar la seroprevalencia de IgG frente a Bordetella pertussis en niños vacunados con tres dosis de DTPe

Fundamentos

Aunque existen varios ELISA para determinar la IgG frente a Bordetella pertussis, no se dispone de demasiados datos que permitan comparar la seroprevalencia detectada por diferentes técnicas. El objetivo de este estudio fue evaluar y comparar mediante tres técnicas ELISA la seroprevalencia en niños frente a B. pertussis.

Pacientes y método

Se estudió a 172 niños de 6 a 10 años vacunados con tres dosis de DTPe. La detección de IgG frente a un combinado antigénico de B. pertussis se realizó mediante dos técnicas cuantitativas (Labsystems y Serion). La presencia de IgG frente a hemaglutinina filamentosa (HAF) y toxina Pertussis (TP) se detectó por un método semicuantitativo (Pertusscan).

Resultados

El 42,4% de las muestras resultó positivo mediante Labsystems y el 32% dudoso. Serion aportó un 52,9% de resultados positivos y un 20,9% de dudosos. Pertusscan detectó IgG-HAF en el 81,4% de las muestras e IgG-TP en el 75%. El grado de “inmunidad” basado en la recomendación de este método fue del 21,5%. La concordancia entre Labsystems y Serion fue del 45,9% (índice kappa □ 0,157; p < 0,01). En las muestras IgG-TP o IgG-HAF positivas el número de resultados positivos por Serion respecto a Labsystems resultó superior y el de dudosos inferior (p < 0,05).

Conclusiones

Ambas técnicas cuantitativas revelaron una elevada tasa de resultados dudosos y una concordancia muy débil. La alta tasa de resultados dudosos mediante Labsystems y su peor concordancia con las otras técnicas desaconsejan su empleo en estudios de inmunogenicidad. Los otros procedimientos presentan una interpretación problemática en términos de seroprevalencia.

Background

Although there are several ELISA procedures to determine IgG against Bordetella pertussis, there are scarce data that allow to compare the seroprevalence detected using different kits. The objective of this study was to evaluate and to compare by three ELISA techniques the seroprevalence against B. pertussis in children.

Patients and method

172 children 6-10 years old, vaccinated with three dose of DTPwc were studied. IgG against Bordetella pertussis was determined by two quantitative techniques (Labsystems and Serion). The qualitative detection of IgG against FHA and PT was performed by a semiquantitative method (Pertusscan).

Results

The Labsystems ELISA classified a 42.4% of the samples as positive and a 32% as borderline. The Serion method showed 52.9% of positive and 20.9% of borderline results. IgG-FHA was detected in 81.4% and IgG-PT in 75% of the samples by Pertusscan. The level of “immunity” recommended by this method was of 21.5%. The agreement between Labsystems and Serion was 45.9% (kappa index □ 0.157; p < 0.01). In the IgG-TP or IgG-FHA positive samples, the proportion of positive results obtained by Serion was superior to those obtained by Labsystems while the number of borderline results were inferior (p < 0.05).

Conclusions

Both quantitative techniques showed a high rate of not conclusive results and a very weak concordance. The large number of doubtful results obtained by Labsystems and its worse concordance with the other techniques dissuades its employment in inmunogenicity studies. The results obtained by the other two techniques present a problematic interpretation in terms of seroprevalence.