Objetivo: Los radioaptámeros son conjugados heterotriméricos formados por un aptámero, un linker de deoxirribonucleótidos y un quelante al que se puede unir un radiometal diagnóstico o terapéutico. Este tipo de molécula serviría como nuevo sistema de monitorización in vivo de la diseminación tumoral y como terapia antimetastásica biológica y/o radiometabólica combinada. El objetivo del presente trabajo es desarrollar el radiomarcaje del aptámero E07-pNT-NODAGA con galio-67 y analizar la estabilidad del complejo radiomarcado.

Material y métodos: El aptámero anti-EGFR (E07) se produjo por transcripción in vitro y se unió mediante hibridación por complementaridad a un complejo (pNT-NODAGA) formado por una extensión de deoxirribonucleótidos unido al quelante NODAGA y sintetizado a partir de pNCS-benzil-NODAGA. El [⁶⁷Ga]GaCl₃ se obtuvo mediante acidificación con HCl de citrato de galio-67 y purificación fraccionada (12 × 30 μl) con cartuchos C18. Las fracciones con mayor actividad se llevaron a pH = 3,4 o 5 con HEPES y se incubaron (40 ^oC, 30’) con 32,5 pmoles del E07-nt-NODAGA. Mediante radio-TLC se analizó la cinética de marcaje (1, 3, 5, 10, 20 y 30 min) y su estabilidad a 1 y 5 días. Igualmente se marcó pNT-NODAGA (2 nmoles) y E07 (2 nmoles).

Resultado: El rendimiento de conversión a [⁶⁷Ga]GaCl₃ fue > 80%. El E07-pNT-NODAGA presentó una cinética de reacción más favorable y mayor pureza radioquímica (≥ 95%) que pNT-NODAGA (≈ 50%) o E07 (70%); estos últimos se purificaron mediante filtración tangencial para eliminar el ⁶⁷Ga³⁺. A pH = 5 el rendimiento fue superior en todos los casos. Todos los complejos se mostraron estables durante 5 días con una liberación del galio-67 < 3%.

Conclusiones: El marcaje de la quimera E07-pNT-NODAGA con galio-67 es factible y ocurre con alto rendimiento. Los resultados de los controles parecen indicar que la estructura 3D del aptámero puede ser responsable de la unión de una parte importante del galio.