Objetivo: Tras su inyección intravenosa, la ¹⁸F-fluorometilcolina es oxidada en presencia de colina-oxidasa a su principal metabolito plasmático (¹⁸F-betaína). En estudios de cuantificación PET de la captación tumoral por modelización cinética, es necesario conocer la fracción de radiactividad total en plasma correspondiente a ¹⁸F-colina no metabolizada. Se pretende desarrollar un método cromatográfico en capa fina (TLC) para cuantificar las fracciones relativas de ¹⁸F-colina y ¹⁸F-betaína en medio plasmático.

Material y métodos: Inicialmente, optimizamos un sistema TLC para separar colina y betaína (disolución estándar fría), usando vapor de yodo como método de visualización. Ensayamos Silica-Gel-60 (SG60) y alúmina como fases estacionarias, y cuatro sistemas de fases móviles: (1) MeOH/0,5%NaCl/NH₃, (2) MeOH/Acetona/HCl, (3) MeOH/NH₃ y (4) MeOH/H₂O. Determinamos los valores de Rf (factor de retención) de colina y betaína, tras lo cual seleccionamos SG60-MeOH/NH₃.A continuación, lo aplicamos a muestras de ¹⁸F-colina/¹⁸F-betaína. Obtuvimos ¹⁸F-betaína tras oxidación de ¹⁸F-colina con KMnO₄, y transcurridos diferentes tiempos de incubación, lo analizamos por radio-TLC. Simulando condiciones in-vivo, se repitió el procedimiento con muestras oxidadas en una matriz de plasma humano desproteinizado (acetonitrilo), aplicando sucesivas diluciones hasta alcanzar la concentración aproximada de radiactividad que obtendríamos si fueran muestras de un paciente sometido a diagnóstico con ¹⁸F-colina. La lectura por TLC de las muestras plasmáticas más diluidas se efectuó mediante contador gamma.

Resultado: Los Rf de los estándares fríos fueron Rf = 0,03 (colina) y Rf = 0,77 (betaína). Los radiocromatogramas para ¹⁸F-colina/¹⁸F-betaína en medios estándar y plasmático mostraron dos picos bien definidos, Rf = 0,02-0,05 y Rf = 0,82-0,89, congruentes con el análisis previo de los patrones fríos. La proporción de radioactividad de ¹⁸F-colina en los radiocromatogramas a tiempos de oxidación de 5, 20, 40 y 60 minutos fue 57%, 46%, 32% y 25% respectivamente, mientras que el segundo pico aumentaba proporcionalmente.

Conclusiones: Optimizamos un método de TLC para su implementación en una Unidad de Radiofarmacia hospitalaria, que permite separar ¹⁸F-colina de ¹⁸F-betaína en muestras plasmáticas y cuantificar sus fracciones relativas.