Efectos del amoníaco en el transporte de membrana del epitelio intestinal humano: implicaciones fisiopatológicas

Introducción. Nos propusimos estudiar los efectos del amoníaco sobre el transporte vectorial electrogénico de cloro en el epitelio intestinal humano.
Material y métodos. Estudiamos la línea celular T84 análoga a las células de las criptas intestinales del colon mediante métodos de electrofisiología. Se midió la resistencia transepitelial (RT) y la corriente de cortocircuito (Isc) en monocapas de epitelio intestinal en presencia y ausencia de NH4Cl y de diferentes agonistas del transporte vectorial transcelular de cloro.
Resultados. El NH4Cl (10 mmol/l) produjo la inhibición de la secreción de cloro estimulada tanto por un agonista del AMPc (forskolina) como por un inhibidor de las tirosincinasas, la genisteína, sin afectar a la función de barrera. Por contra, la secreción estimulada por el carbacol, un análogo de la acetilcolina que estimula la secreción de cloro por medio de la vía del calcio, no se vio alterada por el NH4Cl a la misma concentración. A concentraciones superiores (30 mmol/l) sí se produjo inhibición tanto de la respuesta al carbacol como a la ionomicina, otro agonista del calcio no dependiente del receptor.
Conclusiones. El efecto inhibitorio de la secreción de cloro parece deberse al bloqueo de un canal de potasio presente en la membrana basolateral de la célula y que es preciso para establecer un balance eléctrico durante la secreción estimulada por el AMPc y por la genisteína. Por contra, y dado que el calcio activa un canal de potasio diferente, de mayor conductancia, la inhibición no se produce con los agonistas del calcio, salvo a altas concentraciones. Esto tiene implicaciones en la patogenia de, entre otras, la encefalopatía hepática, la alteración de la secreción de insulina en pacientes cirróticos o la gastritis inducida por Helicobacter pylori

Introduction. We proposed to study the effects of ammonia on electrogenic vectorial chloride transport in human intestinal epithelium.
Material and methods. We studied T84, a cell line that is analogous to colonic crypt cells, using electrophysiological methods to measure transepithelial resistance (TR) and short-circuit current (Isc) in intestinal epithelial monolayers in the presence and absence of NH4Cl and different agonists of transcellular vectorial chloride transport.
Results. NH4Cl (10 mmol/l) inhibited chloride secretion elicited both by the cAMP agonist, forskolin, and by the tyrosine kinase inhibitor, genistein, without affecting the barrier function. In contrast, secretion elicited by carbachol, an acetylcholine analogue that stimulates chloride secretion through the calcium signaling pathway, was unaltered by NH4Cl at the same concentration. Higher concentrations (30 mmol/l) resulted in inhibition of the responses to both carbachol and ionomycin, another receptor-independent calcium agonist.
Conclusions.. Inhibition of chloride secretion appears to be mediated by the blocking of a potassium channel present in the cell basolateral membrane, and it is necessary for the establishment of an electrical balance during the secretion elicited by cAMP and genistein. In contrast, since calcium activates a different potassium channel, having a greater conductance, there is no inhibition with calcium agonists except at high concentrations. This has implications in the pathogenesis of hepatic encephalopathy, changes in insulin secretion in cirrhotic patients and Helicobacter pylori-induced gastritis, among other disorders.