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Caracterización molecular de aislados clínicos de Pseudomonas aeruginosa productores de la metalobetalactamasa VIM-2 en Cantabria, España
Molecular characterization of Pseudomonas aeruginosa isolates in Cantabria, Spain, producing VIM-2 metallo-β-lactamase
M.C.. María-Cruz Rodríguez
Autor para correspondencia
cruzrodriguez@humv.es

Autor para correspondencia.
, B.. Belén Ruiz del Castillo, Cristina Rodríguez-Mirones, M.. María Romo, Idoia Monteagudo, Luis Martínez-Martínez
Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Marqués de Valdecilla, Santander, España
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pertenecientes a la clase B de Ambler&#44; capaces de hidrolizar estos compuestos adem&#225;s de las penicilinas y cefalosporinas&#44; pero no el aztreonam&#46; Estas enzimas requieren zinc para su actividad catal&#237;tica y su actividad es inhibida por agentes quelantes como el &#225;cido etilendiaminotetraac&#233;tico &#40;EDTA&#44; <span class="elsevierStyleItalic">ethylenediaminetetraacetic acid</span>&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Seg&#250;n el estudio multic&#233;ntrico llevado a cabo en hospitales espa&#241;oles por Guti&#233;rrez et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib2"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#44; la frecuencia de aislados cl&#237;nicos de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> resistentes a imipenem &#40;IMP&#41; o a MPM es del 18&#44;9&#37; y la presencia de MBL en estos aislados se da con una frecuencia del 0&#44;4&#37;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las MBL descritas hasta la fecha en <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomonas</span> spp&#46; se agrupan en 4 grupos moleculares&#58; IMP&#44; VIM&#44; GIM y SPM<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib3"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46; Un quinto grupo corresponde a SIM<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib4"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>&#44; que se ha descrito &#250;nicamente en <span class="elsevierStyleItalic">Acinetobacter baumannii</span>&#46; Los genes causantes de la producci&#243;n de MBL se encuentran formando parte de un integr&#243;n<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib5"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#44; que puede estar localizado en un pl&#225;smido movilizable o insertado en el cromosoma&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">El objetivo de este estudio ha sido la caracterizaci&#243;n fenot&#237;pica y genot&#237;pica de 9 aislados cl&#237;nicos de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> que codifican la MBL VIM-2&#44; detectados en el Servicio de Microbiolog&#237;a del Hospital Universitario Marqu&#233;s de Valdecilla durante los a&#241;os 2004 a 2006 &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl1">tabla 1</a>&#41;&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl1"></elsevierMultimedia></span><span class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">M&#233;todos</span><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los aislados de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> &#40;uno por paciente&#41; se han obtenido de muestras cl&#237;nicas enviadas al Servicio de Microbiolog&#237;a del Hospital Universitario Marqu&#233;s de Valdecilla entre enero de 2004 y diciembre de 2006&#46; Como posibles productores de MBL se seleccionaron los aislados con una concentraci&#243;n inhibitoria m&#237;nima &#40;CIM&#41; de IMP o de MPM superior o igual a 8<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;l &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl1">tabla 1</a>&#41;&#46; La identificaci&#243;n y los estudios preliminares de sensibilidad a los antimicrobianos se determinaron con el sistema MicroScan Walkaway &#40;Dade Behring&#44; Sacramento&#44; California&#44; EE&#46; UU&#46;&#41; y con tiras de Etest &#40;AB Biodisk&#44; Solna&#44; Suecia&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las CIM de IMP y de MPM se confirmaron mediante microdiluci&#243;n de referencia de acuerdo con las normas del Clinical and Laboratory Standards Institute<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib6"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>&#46; Tambi&#233;n se ha empleado la microdiluci&#243;n para la detecci&#243;n fenot&#237;pica de MBL&#58; se consider&#243; indicativa de la presencia de MBL una relaci&#243;n superior o igual a 8 del cociente entre la CIM de IMP o de MPM solos y el mismo agente combinado con 0&#44;4<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mM de EDTA &#40;Sigma&#44; Madrid&#44; Espa&#241;a&#41; y 0&#44;04<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mM 1&#44;10-fenantrolina &#40;Sigma&#44; Madrid&#44; Espa&#241;a&#41;&#46; La obtenci&#243;n del &#225;cido desoxirribonucleico &#40;ADN&#41; y las reacciones para llevar a cabo la detecci&#243;n simult&#225;nea de los genes <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">IMP</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">GIM</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">SPM</span> y <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">SIM</span> mediante Multiplex PCR &#40;<span class="elsevierStyleItalic">polymerase chain reaction</span> &#39;reacci&#243;n en cadena de la polimerasa&#39;&#41; se han realizado usando los oligonucle&#243;tidos y las condiciones previamente descritas<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib3"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Se han utilizado como controles en todas las reacciones de amplificaci&#243;n las cepas portadoras de los diferentes tipos de MBL&#58; <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM&#8722;2</span>&#41;&#44; <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> 07-406 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM&#8722;7</span>&#41;&#44; <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> 86-6348 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">IMP&#8722;2</span>&#41;&#44; <span class="elsevierStyleItalic">A&#46; baumannii</span> 48-695 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">IMP&#8722;1</span>&#41;&#44; <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> 86-16734 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">IMP&#8722;13</span>&#41; y <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> 73-5671 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">GIM&#8722;1</span>&#41;&#44; cedidas por el Dr&#46; Toleman &#40;Universidad de Cardiff&#44; Reino Unido&#41;&#59; <span class="elsevierStyleItalic">A&#46; baumannii</span> T104 YMC 03&#47;9&#47;T104 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">SIM&#8722;1</span>&#41;&#44; enviada por el Dr&#46; Rossolini &#40;Universidad de Siena&#44; Italia&#41; y <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> P1088 &#40;<span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">SMP&#8722;1</span>&#41;&#44; donada por el Dr&#46; Mendes &#40;Universidad Federal de S&#227;o Paulo&#44; Brasil&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Las reacciones de amplificaci&#243;n y secuenciaci&#243;n de los integrones que codifican el <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM</span> se realizaron con los oligonucle&#243;tidos 5&#8242;CS y 3&#8242;CS &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl2">tabla 2</a>&#41; que hibridan con regiones conservadas de los extremos del integr&#243;n&#46; Tambi&#233;n se ha dise&#241;ado otro grupo de oligonucle&#243;tidos &#40;no mostrados&#41; para secuenciar la regi&#243;n interna del integr&#243;n&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl2"></elsevierMultimedia><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La actividad hidrol&#237;tica de los carbapen&#233;micos se determin&#243; mediante ensayos espectrofotom&#233;tricos de acuerdo con lo descrito anteriormente<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib5"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>&#46; De forma breve&#44; las reacciones se llevaron a cabo en tamp&#243;n de 50<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mM hepes &#40;Sigma&#44; Madrid&#44; Espa&#241;a&#41;&#44; pH 7&#44;0 suplementado con 5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;M de sulfato de cinc &#40;Sigma&#44; Madrid&#44; Espa&#241;a&#41; a 25<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#176;C en un volumen de 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>ml&#46; La hidr&#243;lisis del IMP se midi&#243; a 297<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>nm usando una concentraci&#243;n inicial de 150<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mM&#46; En todas las reacciones se emplearon como controles positivo y negativo <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> COL-1 productora de VIM-2<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib7"><span class="elsevierStyleSup">7</span></a> y <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> ATCC 27853&#44; respectivamente&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">El gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span> que codifica una porina de membrana externa se amplific&#243; y se secuenci&#243; con los oligonucle&#243;tidos oprD&#46;F y oprD&#46;R &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl2">tabla 2</a>&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La expresi&#243;n de los genes <span class="elsevierStyleItalic">mexB</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span> y <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span> se cuantific&#243; mediante RT-PCR &#40;<span class="elsevierStyleItalic">real time polymerase chain reaction</span> &#39;reacci&#243;n en cadena de la polimerasa en tiempo real&#39;&#41;&#46; Se parti&#243; del &#225;cido ribonucleico &#40;ARN&#41; total obtenido con el equipo RNeasy &#40;Qiagen&#44; Barcelona&#44; Espa&#241;a&#41;&#59; para eliminar el posible ADN contaminante se trataron las muestras con desoxirribonucleasa de acuerdo con las instrucciones del fabricante&#46; La concentraci&#243;n y la calidad de las muestras se determinaron con el sistema Experion Automated Electrophoresis System &#40;Bio-Rad&#44; California&#44; EE&#46; UU&#46;&#41;&#46; Un &#956;g de ARN total de cada muestra se transcribi&#243; con el equipo i-script<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> Select cDNA Synthesis &#40;Bio-Rad&#44; California&#44; EE&#46; UU&#46;&#41;&#59; a continuaci&#243;n&#44; los ADN complementarios de los genes <span class="elsevierStyleItalic">mexB</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span> y <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span> se cuantificaron usando el sistema ABI 7000 Real Time PCR &#40;Applied Biosystems&#44; California&#44; EE&#46; UU&#46;&#41;&#46; Para la reacci&#243;n de amplificaci&#243;n se us&#243; el equipo iTaq<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> SYBR Green with Rox &#40;Bio-Rad&#44; California&#44; EE&#46; UU&#46;&#41;&#46; Los oligonucle&#243;tidos empleados para la amplificaci&#243;n de estos genes aparecen indicados en la <a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl2">tabla 2</a>&#46; Para corregir los posibles errores en la cuantificaci&#243;n debidos a diferencias en la cantidad inicial de ARN total empleado y as&#237; comparar los resultados de las diferentes muestras se eligi&#243; como control interno de la reacci&#243;n el gen ribos&#243;mico <span class="elsevierStyleItalic">rpsL</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib8"><span class="elsevierStyleSup">8</span></a>&#46; Los resultados se presentan como la relaci&#243;n de la expresi&#243;n entre los genes estudiados &#40;<span class="elsevierStyleItalic">mexB</span>&#44; <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span> o <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span>&#41; y el gen de referencia &#40;<span class="elsevierStyleItalic">rpsL</span>&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib9"><span class="elsevierStyleSup">9</span></a>&#46; La expresi&#243;n relativa de cada gen en cada uno de los aislados se compara con respecto a la expresi&#243;n del mismo gen en la cepa control <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> ATCC 27853&#46; Se considera que los genes <span class="elsevierStyleItalic">mexB</span> y <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span> se encuentran sobreexpresados en un aislado cl&#237;nico con respecto a la cepa parental cuando hay un incremento en la expresi&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">mexB</span> superior o igual a 2 &#243;rdenes de magnitud y de <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span> superior o igual a 10 &#243;rdenes de magnitud&#46; Estos valores se encuentran dentro del rango de otros estudios<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib1"><span class="elsevierStyleSup">1</span></a>&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> JFL30 y la <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> JFL05<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib10"><span class="elsevierStyleSup">10</span></a> son cepas de referencia que sobreexpresan los genes que codifican las bombas de expulsi&#243;n MexAB-OprM y MexEF-OprN&#44; respectivamente y se han empleado como controles positivos&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La relaci&#243;n clonal de los aislados productores de MBL se analiz&#243; mediante detecci&#243;n de regiones extrag&#233;nicas palindr&#243;micas repetidas con PCR &#40;Rep-PCR&#41;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib11"><span class="elsevierStyleSup">11</span></a> con los oligonucle&#243;tidos REP-1 y REP-2&#46; Los aislados se han considerado no relacionados gen&#233;ticamente cuando se han detectado 2 o m&#225;s bandas de diferencia entre &#233;stos&#46;</p></span><span class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Resultados y discusi&#243;n</span><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Durante los 2 a&#241;os de estudio&#44; se aislaron en el laboratorio 163 aislados cl&#237;nicos no sensibles a IMP o a MPM &#40;CIM para IMP o para MPM superior o igual a 8<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mg&#47;l&#41;&#46; En 9 de los aislados con CIM de IMP de 32 a 128<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#47;ml y de MPM de 16 a 64<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#47;ml&#44; &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl1">tabla 1</a>&#41; se ha detectado la presencia de una MBL mediante el m&#233;todo fenot&#237;pico de microdiluci&#243;n en caldo&#46; Este resultado se ha corroborado mediante Multiplex PCR&#44; obteni&#233;ndose en los 9 aislados un amplic&#243;n de 380<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>pb&#46; La secuenciaci&#243;n de este fragmento ha hecho posible la identificaci&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM&#8722;2</span> en todos los amplificados&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los aislados fueron tambi&#233;n resistentes a cefepima y a ceftacidima&#44; y todos &#233;stos menos uno &#40;HUMV-2470&#41; son sensibles a aztreonam&#46; Salvo este &#250;ltimo&#44; los aislados presentan&#44; pues&#44; el patr&#243;n caracter&#237;stico de producci&#243;n de MBL&#46; Como en otros casos fueron tambi&#233;n resistentes a los aminogluc&#243;sidos evaluados &#40;gentamicina&#44; tobramicina y amikacina&#41; y mostraron un alto grado de resistencia a ciprofloxacina &#40;CIM &#62; 32<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#47;ml&#41;&#46; Todos fueron sensibles a colistina &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl1">tabla 1</a>&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La amplificaci&#243;n mediante PCR del gen de la integrasa <span class="elsevierStyleItalic">intI1</span> con los oligonucle&#243;tidos int n1 e int2 &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl2">tabla 2</a>&#41; permiti&#243; obtener un fragmento de un tama&#241;o mayor al esperado en los 9 aislados objeto de estudio&#46; La secuenciaci&#243;n del fragmento ha hecho posible identificar la presencia de una secuencia de inserci&#243;n de 1&#44;1 kb &#40;<span class="elsevierStyleItalic">IS-like element</span>&#41; que interrumpe el gen de la integrasa &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig1">fig&#46; 1</a>&#41;&#46; Esto se ha descrito recientemente en cepas de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> portadoras de MBL aisladas en Espa&#241;a por Guti&#233;rrez et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib2"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig1"></elsevierMultimedia><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">El an&#225;lisis clonal que se realiz&#243; mediante Rep-PCR englob&#243; en un &#250;nico grupo a los 9 aislados de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span>&#46; Se han seleccionado 2 de &#233;stos &#40;HUMV-2121 y HUMV-2633&#41; como representantes para estudios posteriores&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Para la secuenciaci&#243;n completa del integr&#243;n en los aislados HUMV-2121 y HUMV-2633 se ha amplificado en primer lugar la regi&#243;n que contiene los casetes de resistencia con oligonucle&#243;tidos &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl2">tabla 2</a>&#41; que hibridan con las regiones conservadas de los extremos 5&#8242;CS y 3&#8242;CS del integr&#243;n &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig1">fig&#46; 1</a>&#41;&#46; El amplic&#243;n obtenido tiene un tama&#241;o de 3&#46;552<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>pb&#59; el gen <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM&#8722;2</span> se encuentra precedido por otro gen que codifica la acetiltransferasa <span class="elsevierStyleItalic">aac &#40;6&#8242;&#41; 32</span> recientemente descrita<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib2"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#44; que confiere resistencia a gentamicina&#44; tobramicina y amikacina&#46; Este resultado explica la resistencia a aminogluc&#243;sidos que se ha se&#241;alado previamente&#46; En el extremo 3&#8242;CS&#44; el integr&#243;n contiene un gen que codifica una transposasa&#46; Todos los datos indican que se trata del mismo integr&#243;n descrito por primera vez por Guti&#233;rrez et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib2"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>&#46; Los ensayos de conjugaci&#243;n llevados a cabo utilizando como donadores los aislados cl&#237;nicos HUMV-2121 y HUMV-2633 y como recipiente la cepa <span class="elsevierStyleItalic">Escherichia coli</span> DH5&#945; no han permitido en ning&#250;n caso obtener transconjugantes resistentes a IMP&#46; El pl&#225;smido obtenido a partir de las cepas HUMV-2121 y HUMV-2633 se introdujo mediante transformaci&#243;n qu&#237;mica en <span class="elsevierStyleItalic">E&#46; coli</span> DH5&#945; y se observ&#243; que la CIM de IMP en <span class="elsevierStyleItalic">E&#46; coli</span> DH5&#945; pasa de 0&#44;19<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#47;ml a 1<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>&#956;g&#47;ml en la misma cepa con el pl&#225;smido&#46; Este resultado indica la localizaci&#243;n plasm&#225;tica del gen <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM&#8722;2</span> y&#44; por tanto&#44; del integr&#243;n que lo contiene&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La actividad de hidr&#243;lisis del IMP observada en extractos crudos de los aislados HUMV-2121 y HUMV-2633 fue de 235 &#177; 44<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>pmol&#47;min&#47;&#956;g y de 162 &#177; 18<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>pmol&#47;min&#47;&#956;g&#44; respectivamente&#59; esta capacidad de hidr&#243;lisis es totalmente inhibida tras incubar las muestras con 5<span class="elsevierStyleHsp" style=""></span>mM de EDTA &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl3">tabla 3</a>&#41;&#46; Estos resultados indican que VIM-2 se expresa en las cepas estudiadas&#46;</p><elsevierMultimedia ident="tbl3"></elsevierMultimedia><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La porina OprD es el canal de entrada de los carbapen&#233;micos de uso cl&#237;nico en <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span>&#46; Las mutaciones del gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span> son bastante frecuentes y se relacionan de forma directa con la resistencia a carbapen&#233;micos en esta especie<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib12"><span class="elsevierStyleSup">12</span></a>&#46; Aunque algunas cepas de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> que producen MBL poseen tambi&#233;n mutaciones de <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span>&#44; no se ha observado esta asociaci&#243;n en estas cepas &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig2">fig&#46; 2</a>&#41;&#46; En los 2 aislados estudiados&#44; HUMV-2121 y HUMV-2633&#44; la secuencia y la expresi&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span> no presenta diferencias con respecto a la cepa de referencia <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> ATCC 27853&#46; Adem&#225;s&#44; el estudio de las prote&#237;nas de membrana externa de ambos aislados &#40;separadas mediante electroforesis en geles de poliacrilamida con SDS&#41; permiti&#243; comprobar la presencia de una prote&#237;na de 46 kD&#44; compatible con la expresi&#243;n de OprD &#40;datos no mostrados&#41;&#44; y los valores de expresi&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span> medidos por RT-PCR en los aislados HUMV-2121 y HUMV-2633 no muestran diferencias estad&#237;sticamente significativas con respecto a los de la cepa de referencia &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl4">tabla 4</a>&#41;&#46; Todos estos datos indican que OprD no est&#225; implicada en la resistencia a carbapen&#233;micos en los aislados cl&#237;nicos de este estudio&#46;</p><elsevierMultimedia ident="fig2"></elsevierMultimedia><elsevierMultimedia ident="tbl4"></elsevierMultimedia><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">La expresi&#243;n de la bomba de expulsi&#243;n MexAB-OprM se relaciona con la expulsi&#243;n del MPM y su sobreexpresi&#243;n en cepas cl&#237;nicas se traduce en un aumento de la CIM de este antimicrobiano<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib13"><span class="elsevierStyleSup">13</span></a>&#46; Por otra parte&#44; la sobreexpresi&#243;n de MexEF-OprN suele asociarse a la represi&#243;n de la expresi&#243;n de <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span>&#44; siendo este &#250;ltimo hecho &#40;y no la actividad de la bomba propiamente dicha&#41; la causa de un aumento de la CIM de IMP<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib14"><span class="elsevierStyleSup">14</span></a>&#46; En los 2 aislados&#44; HUMV-2121 y HUMV-2633&#44; los valores de expresi&#243;n de ARN mensajero de <span class="elsevierStyleItalic">mexB</span> y <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span> determinados mediante RT-PCR no se observaron diferencias significativas con respecto a <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> ATCC 27853 &#40;<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#tbl4">tabla 4</a>&#41;&#46; En conjunto&#44; la presencia de la MBL VIM-2 en estas cepas es suficiente para justificar su resistencia a carbapen&#233;micos&#46; Ninguno de los otros mecanismos de resistencia estudiados contribuye al fenotipo de resistencia a estos antimicrobianos&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Aunque la prevalencia de clones epid&#233;micos multirresistentes de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> productores de MBL es todav&#237;a baja en el hospital&#44; se sigue llevando a cabo una vigilancia continua que permita su detecci&#243;n&#44; con el objetivo de prevenir su diseminaci&#243;n&#46; Hay que tener en cuenta&#44; adem&#225;s&#44; que la existencia de integrones que contienen casetes de resistencia puede contribuir a agravar el problema en otras especies&#46; Durante el per&#237;odo de estudio&#44; adem&#225;s de los 9 aislados de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> que se describen aqu&#237;&#44; tambi&#233;n se han podido identificar otros 3 aislados cl&#237;nicos de <span class="elsevierStyleItalic">Pseudomonas putida</span> procedentes de hemocultivos que contienen un integr&#243;n de clase 1 con los genes <span class="elsevierStyleItalic">bla</span><span class="elsevierStyleInf">VIM&#8722;2</span> y <span class="elsevierStyleItalic">aacA4</span> &#40;manuscrito en preparaci&#243;n&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Los aislados cl&#237;nicos de <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> y <span class="elsevierStyleItalic">P&#46; putida</span> productores de VIM-2 suponen un grave problema terap&#233;utico que es necesario controlar&#44; tanto para reducir su expansi&#243;n a nuevos pacientes como para prevenir la diseminaci&#243;n de la resistencia a otros microorganismos capaces de causar infecciones nosocomiales&#46;</p></span></span>"
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Datos cl&#237;nicos</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cepa&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Edad&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Sexo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">IMP&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">MPM &#43; EDTA&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">CAZ&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">GTM&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">TOB&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">AMK&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">CIP&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">PTZ&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">CO&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">Pseudomonas aeruginosa</span> ATCC 27853&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;094&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">4&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> COL1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;25&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2121&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">AT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">UCI&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">29&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&#60;0&#44;25&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2460&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">AT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">M INT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">82&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">16&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2470&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">EDTA&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">M INT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">84&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">16&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2633&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">EDTA&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">M INT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">29&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&#60;0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">16&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2678&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">O&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">M INT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">70&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
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                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">16&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2760&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">EH&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">NCG&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">M&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&#60;0&#44;25&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">256&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">16&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-3031&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">EH&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">T&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">74&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">32&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">16&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;75&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-3476&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">EH&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">M INT&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">29&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">V&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">128&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">64&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Oligonucle&#243;tido&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Secuencia&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Tm &#40;&#176;C&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Amplic&#243;n &#40;pb&#41;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Uso&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5&#8242;-GTGATCGAGCAGCAGATGAA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">310&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Cuantificaci&#243;n de la expresi&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">mexB</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">mexB&#46;R&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-AGAGTGGGTCCTGGATGTTG-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">59&#44;9&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">mexF&#46;F&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-TCAACGTGAAGGACGAACTG-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">63&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">228&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Cuantificaci&#243;n de la expresi&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">mexF</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">mexF&#46;R&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-TGATCGACAACTGGAAGCTG-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">63&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">RT-oprD&#46;F&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-CTGGGCTTCGATTTCAACAT-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">61&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">179&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " rowspan="4" align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Cuantificaci&#243;n de la expresi&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">RT-oprD&#46;R&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-GCCGAAGCCGATATAATCAA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">60&#44;2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">rpsL&#46;F&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-GCAAGCGCATGGTCGACAAGA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">69&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">201&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">rpsL&#46;R&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5 &#8242;-CGCTGTGCTCTTGCAGGTTGTGA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">70&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">oprD&#46;F&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-GGCAGAGATAATTTCAAAACCAA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">59&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">1&#46;384&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Amplificaci&#243;n y secuenciaci&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">oprD&#46;R&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-GTTGCCTGTCGGTCGATTAC-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">60&#44;53&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">oprD2&#46;F&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-entry\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-ACTTCACCGAGGGCAAGG-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">61&#44;22&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Secuenciaci&#243;n del gen <span class="elsevierStyleItalic">oprD</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">oprD2&#46;R&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-CAGAGTTGGCGAGGAAAATC-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">59&#44;81&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">int n1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-GCGAAGTCGAGGCATTTCTGTC-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">65&#44;57&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">767&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " rowspan="2" align="" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Amplificaci&#243;n y secuenciaci&#243;n gen <span class="elsevierStyleItalic">int</span></td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">int 2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5&#8242;-ATGCGTGTAAATCATCGTCGTAGAGA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">65&#44;02&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5&#8242;CS&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5&#8242;-GGCATCCAAGCAGCAAG-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">50&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">Amplificaci&#243;n del integr&#243;n</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">3&#8242;CS&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5&#8242;-AAGCAGACTTGACCTGA-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">49&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">REP-1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">5 &#8242;-IIIGCGCCGICATCAGGC-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">Rep-PCR</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">REP-2&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">5 &#8242;-ACGTCTTATCAGGCCTAC-3&#8242;&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Actividad espec&#237;fica &#40;pmol&#47;min&#47;&#956;g de la prote&#237;na&#41;</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cepa&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
                  \t\t\t\t\ttable-head\n
                  \t\t\t\t  " align="" valign="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Extracto crudo&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Extracto crudo &#43; EDTA&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></thead><tbody title="tbody"><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">Pseudomonas aeruginosa</span> ATCC 27853&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">57 &#177; 8&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;1 &#177; 0&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> COL-1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">372 &#177; 34&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;2 &#177; 0&#44;1&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2121&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">235 &#177; 44&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2 &#177; 0&#44;5&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span> HUMV-2163&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t  " align="char" valign="\n
                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">162 &#177; 18&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t\ttop\n
                  \t\t\t\t">2 &#177; 0&#44;3&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td></tr></tbody></table>
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                  \t\t\t\t">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Expresi&#243;n relativa de mARN&#47;rpsl</td></tr><tr title="table-row"><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">Cepa&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black">&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleItalic">mexB</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t" style="border-bottom: 2px solid black"><span class="elsevierStyleItalic">mexF</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">ATCC 27853&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;8 &#177; 0&#44;01&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">0&#44;99 &#177; 0&#44;01&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">1&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">PAO1-L&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
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                  \t\t\t\t">1&#44;00&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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                  \t\t\t\t"><span class="elsevierStyleItalic">P&#46; aeruginosa</span>&nbsp;\t\t\t\t\t\t\n
                  \t\t\t\t</td><td class="td" title="\n
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Información del artículo
ISSN: 0213005X
Idioma original: Español
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