Carta científica
Caracterización de cepas de Escherichia coli O157:H7 aisladas de pacientes en Cáceres, Extremadura (2006–2007)
Characterization of Escherichia coli O157:H7 strains isolated from patients in Cáceres, Extremadura (Spain) (2006–2007)
Remigio Martínez
, Sergio Sánchez, J.. Joaquín Rey, Juan Manuel Alonso
Autor para correspondencia
Unidad de Patología Infecciosa y Epidemiología, Departamento de Sanidad Animal, Facultad de Veterinaria, Universidad de Extremadura, Cáceres, España
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Las cepas de ECVT O157:H7 pueden provocar desde una diarrea no sanguinolenta hasta una colitis hemorrágica (CH), con el síndrome urémico hemolítico (SUH) o la púrpura trombocitopénica trombótica como complicaciones más habituales, principalmente en niños, ancianos y pacientes inmunodeficientes<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib2"><span class="elsevierStyleSup">2</span></a>. Su patogenicidad se debe a la producción de una citotoxina conocida como verotoxina o toxina Shiga, de la que existen 2 variantes principales: Stx1 y Stx2. Desde su reconocimiento como patógeno en 1982, el serotipo O157:H7 se ha identificado como causante de innumerables brotes y casos esporádicos de CH y SUH, ampliamente descritos en países anglosajones y Japón. En España, las infecciones por ECVT son relativamente frecuentes, y se han descrito hasta la fecha 7 brotes de CH causados por cepas de ECVT O157:H7, según los datos del Laboratorio de Referencia de <span class="elsevierStyleItalic">E. coli</span> en Lugo<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib3"><span class="elsevierStyleSup">3</span></a>.</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Entre los meses de junio de 2006 y diciembre de 2007, en colaboración con el Servicio de Microbiología del Hospital San Pedro de Alcántara de Cáceres, se analizaron para la detección de ECVT O157:H7 1.675 coprocultivos de pacientes internos y externos de todas las edades, aquejados de diarrea y otras alteraciones gastrointestinales. Para ello se llevó a cabo un enriquecimiento previo de las muestras en agua de peptona tamponada suplementada con antibióticos, seguido de separación inmunomagnética con Dynabeads<span class="elsevierStyleSup">®</span> anti-<span class="elsevierStyleItalic">E. coli</span> O157 (Dynal, Noruega) y siembra del inmunoconcentrado resultante en el medio agar MacConkey sorbitol con telurito y cefixima, de acuerdo con el protocolo para la detección de ECVT en muestras fecales descrito por Rey et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib4"><span class="elsevierStyleSup">4</span></a>. A continuación se identificaron los genes que codifican las verotoxinas (<span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">1</span></span> y <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span>) y la intimina tipo γ1 (variante <span class="elsevierStyleItalic">eae-</span>γ1, específica de O157:H7) mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a partir de la zona de crecimiento confluente. En los casos positivos se seleccionaron 10 colonias sorbitol-negativas y se sembraron en agar MacConkey lactosa y agar coliformes Chromocult (Merck, Alemania), y se seleccionaron tras la incubación únicamente las colonias lactosa-positivas y beta-glucuronidasa-negativas (colonias de color rosa-rojo en el medio agar coliformes Chromocult). Estas colonias se confirmaron bioquímicamente como <span class="elsevierStyleItalic">E. coli</span> empleando el sistema API 20E (bioMérieux, Francia) y se analizaron individualmente mediante PCR con cebadores específicos para los genes que codifican el antígeno somático O157 <span class="elsevierStyleItalic">(O157 rfbE)</span> y el antígeno flagelar H7 <span class="elsevierStyleItalic">(fliCh7)</span>, la intimina (gen <span class="elsevierStyleItalic">eae</span> general y su variante <span class="elsevierStyleItalic">eae-</span>γ1), las verotoxinas y la enterohemolisina <span class="elsevierStyleItalic">(ehxA)</span><a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib5"><span class="elsevierStyleSup">5</span></a>.</p><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">En total se detectaron y se aislaron cepas de ECVT O157:H7 en 8 coprocultivos (0,5%) pertenecientes a 4 pacientes aquejados de procesos gastroentéricos de diversa consideración, concretamente en los meses de noviembre y diciembre de 2007. Todas las cepas mostraron un fenotipo típico (sorbitol-negativas y beta-glucuronidasa-negativas), en todas ellas se identificaron los genes <span class="elsevierStyleItalic">eae</span> (su variante <span class="elsevierStyleItalic">eae-</span>γ1) y <span class="elsevierStyleItalic">ehxA</span>, y se confirmaron los genes <span class="elsevierStyleItalic">O157 rfbE</span> y <span class="elsevierStyleItalic">fliCh7</span>. En 5 cepas se identificaron los genes <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">1</span></span> y <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span>, mientras que en las 3 cepas restantes únicamente se detectó el gen <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span> (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig1">fig. 1</a>). En cuanto al patrón de sensibilidad a los antibióticos, las 5 cepas de ECVT O157:H7 <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">1</span> stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span> fueron resistentes a estreptomicina y a sulfamidas, mientras que las 3 cepas de ECVT O157:H7 <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span> fueron sensibles a los 26 antibióticos ensayados. Paralelamente, se obtuvieron los perfiles de electroforesis en campo pulsado (PFGE) de todos los aislados, de acuerdo con el protocolo descrito por Sánchez et al<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#bib6"><span class="elsevierStyleSup">6</span></a>. Las 5 cepas de ECVT O157:H7 <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">1</span> stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span>, aisladas en el mes de noviembre a partir de 3 pacientes pertenecientes a la misma área de salud en un intervalo de aproximadamente 15 días, mostraron perfiles indistinguibles. Las 3 cepas de ECVT O157:H7 <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span>, aisladas a partir de un cuarto paciente en el mes de diciembre, mostraron perfiles indistinguibles entre sí, aunque distintos del patrón observado en las 5 cepas anteriores. Al comparar estos perfiles de PFGE obtenidos en cepas de ECVT O157:H7 de origen humano con los de cepas aisladas de animales y de alimentos en estudios previos realizados por nuestro grupo de investigación, el patrón observado en las 3 cepas de ECVT O157:H7 <span class="elsevierStyleItalic">stx<span class="elsevierStyleInf">2</span></span> resultó indistinguible del observado en una cepa de ECVT O157:H7 con el mismo perfil toxigénico aislado a partir de las heces de un jabalí abatido en el mes de noviembre en la misma área de salud (<a class="elsevierStyleCrossRef" href="#fig1">fig. 1</a>).</p><elsevierMultimedia ident="fig1"></elsevierMultimedia><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Aunque no fue posible establecer la fuente de infección en ninguno de los casos, estos resultados ponen de manifiesto el primer brote de infección por ECVT O157:H7 ocurrido en Extremadura y el octavo caso ocurrido en España, y apuntan a un posible papel del jabalí en los casos humanos de infección por ECVT O157:H7 que tienen lugar en la región. Por otro lado, la gravedad de las complicaciones que suelen acompañar a este tipo de infecciones pone en evidencia la necesidad de establecer una vigilancia activa mediante la implantación de protocolos de detección de ECVT O157:H7 en los laboratorios de microbiología clínica de áreas con alta prevalencia del patógeno. En áreas de baja prevalencia, la vigilancia activa debería limitarse al estudio de casos en los que se observe presencia de sangre en heces, brotes de intoxicación alimentaria y casos de pacientes con SUH.</p><span class="elsevierStyleSection elsevierViewall"><span class="elsevierStyleSectionTitle">Financiación</span><p class="elsevierStylePara elsevierViewall">Este estudio se ha financiado con fondos del III Plan Regional de Investigación, Desarrollo e Innovación de la Junta de Extremadura y FEDER (Ref. 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| 2023 Diciembre | 62 | 6 | 68 |
| 2023 Noviembre | 81 | 6 | 87 |
| 2023 Octubre | 136 | 17 | 153 |
| 2023 Septiembre | 67 | 3 | 70 |
| 2023 Agosto | 63 | 2 | 65 |
| 2023 Julio | 86 | 9 | 95 |
| 2023 Junio | 99 | 8 | 107 |
| 2023 Mayo | 82 | 2 | 84 |
| 2023 Abril | 80 | 5 | 85 |
| 2023 Marzo | 78 | 8 | 86 |
| 2023 Febrero | 83 | 3 | 86 |
| 2023 Enero | 61 | 9 | 70 |
| 2022 Diciembre | 50 | 23 | 73 |
| 2022 Noviembre | 82 | 12 | 94 |
| 2022 Octubre | 106 | 14 | 120 |
| 2022 Septiembre | 64 | 21 | 85 |
| 2022 Agosto | 70 | 11 | 81 |
| 2022 Julio | 81 | 16 | 97 |
| 2022 Junio | 62 | 17 | 79 |
| 2022 Mayo | 49 | 15 | 64 |
| 2022 Abril | 56 | 15 | 71 |
| 2022 Marzo | 63 | 12 | 75 |
| 2022 Febrero | 47 | 10 | 57 |
| 2022 Enero | 77 | 12 | 89 |
| 2021 Diciembre | 70 | 19 | 89 |
| 2021 Noviembre | 52 | 18 | 70 |
| 2021 Octubre | 71 | 12 | 83 |
| 2021 Septiembre | 39 | 11 | 50 |
| 2021 Agosto | 47 | 5 | 52 |
| 2021 Julio | 54 | 15 | 69 |
| 2021 Junio | 55 | 14 | 69 |
| 2021 Mayo | 65 | 15 | 80 |
| 2021 Abril | 157 | 21 | 178 |
| 2021 Marzo | 83 | 17 | 100 |
| 2021 Febrero | 50 | 12 | 62 |
| 2021 Enero | 67 | 16 | 83 |
| 2020 Diciembre | 43 | 10 | 53 |
| 2020 Noviembre | 59 | 5 | 64 |
| 2020 Octubre | 35 | 10 | 45 |
| 2020 Septiembre | 34 | 31 | 65 |
| 2020 Agosto | 32 | 31 | 63 |
| 2020 Julio | 34 | 21 | 55 |
| 2020 Junio | 40 | 12 | 52 |
| 2020 Mayo | 49 | 14 | 63 |
| 2020 Abril | 38 | 6 | 44 |
| 2020 Marzo | 47 | 4 | 51 |
| 2020 Febrero | 31 | 4 | 35 |
| 2020 Enero | 40 | 9 | 49 |
| 2019 Diciembre | 54 | 18 | 72 |
| 2019 Noviembre | 26 | 11 | 37 |
| 2019 Octubre | 26 | 12 | 38 |
| 2019 Septiembre | 29 | 6 | 35 |
| 2019 Agosto | 25 | 3 | 28 |
| 2019 Julio | 38 | 9 | 47 |
| 2019 Junio | 60 | 25 | 85 |
| 2019 Mayo | 227 | 34 | 261 |
| 2019 Abril | 69 | 13 | 82 |
| 2019 Marzo | 15 | 5 | 20 |
| 2019 Febrero | 12 | 9 | 21 |
| 2019 Enero | 14 | 5 | 19 |
| 2018 Diciembre | 14 | 6 | 20 |
| 2018 Noviembre | 28 | 16 | 44 |
| 2018 Octubre | 46 | 8 | 54 |
| 2018 Septiembre | 12 | 5 | 17 |
| 2018 Agosto | 12 | 1 | 13 |
| 2018 Julio | 12 | 3 | 15 |
| 2018 Junio | 13 | 2 | 15 |
| 2018 Mayo | 25 | 2 | 27 |
| 2018 Abril | 15 | 2 | 17 |
| 2018 Marzo | 12 | 1 | 13 |
| 2018 Febrero | 7 | 0 | 7 |
| 2018 Enero | 9 | 1 | 10 |
| 2017 Diciembre | 10 | 0 | 10 |
| 2017 Noviembre | 27 | 2 | 29 |
| 2017 Octubre | 6 | 5 | 11 |
| 2017 Septiembre | 12 | 7 | 19 |
| 2017 Agosto | 12 | 2 | 14 |
| 2017 Julio | 6 | 1 | 7 |
| 2017 Junio | 6 | 18 | 24 |
| 2017 Mayo | 14 | 1 | 15 |
| 2017 Abril | 6 | 1 | 7 |
| 2017 Marzo | 19 | 38 | 57 |
| 2017 Febrero | 14 | 4 | 18 |
| 2017 Enero | 8 | 1 | 9 |
| 2016 Diciembre | 19 | 3 | 22 |
| 2016 Noviembre | 31 | 3 | 34 |
| 2016 Octubre | 40 | 9 | 49 |
| 2016 Septiembre | 39 | 8 | 47 |
| 2016 Agosto | 30 | 4 | 34 |
| 2016 Julio | 16 | 2 | 18 |
| 2016 Junio | 21 | 6 | 27 |
| 2016 Mayo | 18 | 3 | 21 |
| 2016 Abril | 24 | 25 | 49 |
| 2016 Marzo | 31 | 3 | 34 |
| 2016 Febrero | 26 | 4 | 30 |
| 2016 Enero | 22 | 11 | 33 |
| 2015 Diciembre | 21 | 13 | 34 |
| 2015 Noviembre | 24 | 11 | 35 |
| 2015 Octubre | 20 | 17 | 37 |
| 2015 Septiembre | 16 | 10 | 26 |
| 2015 Agosto | 16 | 5 | 21 |
| 2015 Julio | 14 | 5 | 19 |
| 2015 Junio | 7 | 2 | 9 |
| 2015 Mayo | 11 | 4 | 15 |
| 2015 Abril | 7 | 6 | 13 |
| 2015 Marzo | 14 | 8 | 22 |
| 2015 Febrero | 10 | 9 | 19 |
| 2015 Enero | 37 | 0 | 37 |
| 2014 Diciembre | 40 | 3 | 43 |
| 2014 Noviembre | 24 | 3 | 27 |
| 2014 Octubre | 44 | 3 | 47 |
| 2014 Septiembre | 44 | 3 | 47 |
| 2014 Agosto | 28 | 1 | 29 |
| 2014 Julio | 41 | 1 | 42 |
| 2014 Junio | 36 | 2 | 38 |
| 2014 Mayo | 35 | 2 | 37 |
| 2014 Abril | 30 | 4 | 34 |
| 2014 Marzo | 37 | 3 | 40 |
| 2014 Febrero | 34 | 2 | 36 |
| 2014 Enero | 43 | 1 | 44 |
| 2013 Diciembre | 32 | 5 | 37 |
| 2013 Noviembre | 47 | 2 | 49 |
| 2013 Octubre | 50 | 3 | 53 |
| 2013 Septiembre | 24 | 3 | 27 |
| 2013 Agosto | 32 | 3 | 35 |
| 2013 Julio | 25 | 1 | 26 |
| 2010 Febrero | 785 | 0 | 785 |
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