El sarampión es una enfermedad vacunable y de Declaración Obligatoria1 que se encuentra sujeta a un Plan de Eliminación en España2. En nuestro medio el sarampión ha dejado de ser una patología pediátrica, pasando a dar lugar a brotes, frecuentemente de origen importado y que afectan cada vez más a individuos adultos3. Pese a la interrupción de la transmisión endémica continuada, la incidencia de la infección en Europa ha aumentado en los últimos años, asociada a descensos en las coberturas vacunales4. La sospecha clínica, que se basa en la presencia de exantema maculopapular acompañado de tos, coriza o conjuntivitis, requiere confirmación de laboratorio1,2. El diagnóstico serológico mediante detección de IgM específica resulta difícil en sujetos previamente inmunizados, en los que pueden aparecer resultados falsos negativos, y su uso se complementa mediante el empleo de técnicas de amplificación molecular por reacción en cadena de la polimerasa de transcripción reversa (RT-PCR)5. El Laboratorio de Referencia e Investigación en Enfermedades Víricas Inmunoprevenibles del Centro Nacional de Microbiología (LRIEVI-CNM) cuenta con una técnica de RT-PCR convencional (no en tiempo real) múltiple que permite detectar de manera simultánea a los virus de sarampión, rubéola y parvovirus B196,7. Aunque existen algunas técnicas de RT-PCR en tiempo real para sarampión disponibles en el mercado8, se dispone de poca información sobre la utilidad de nuevos kits. El objetivo de este trabajo fue valorar el rendimiento de un kit de RT-PCR en tiempo real (Measles Virus Real Time RT-PCR Kit; Shanghai ZJ Bio-Tech Co.) para el diagnóstico de la infección por el virus del sarampión. Se procesaron 250 muestras de exudado faríngeo obtenidas a partir de pacientes con sospecha de sarampión recibidas entre 2012 y 2019 en el Laboratorio Regional de Salud Pública de la Comunidad de Madrid. Todas las muestras fueron ensayadas por Measles Virus Real Time RT-PCR Kit y por el método de referencia de RT-PCR del LRSR-CNM6,7. Se efectuaron extracciones independientes de los ácidos nucleicos para su empleo en la técnica de RT-PCR evaluada y en la de referencia. Para la extracción en la técnica Measles Virus Real Time RT-PCR Kit; Shanghai ZJ Bio-Tech Co. se empleó el equipo Qiagen EZ1 en combinación con kits EZ1 (Qiagen GmbH). Para cada muestra, se partió de un volumen inicial de 200 μl y tras completar el proceso de extracción se añadieron 5 μl de ARN a 20 μl de la mezcla maestra (volumen final para la reacción de RT-PCR de 25 μl). La extracción para la técnica de referencia de RT-PCR convencional múltiple se usó QIAsymphony DSP Virus/Pathogen Midi Kit (Qiagen GmbH); volumen de muestra 400 μl y 40 μl de elución; 72 muestras resultaron positivas por el método de referencia y 57 de ellas fueron también positivas por la técnica evaluada. Entre las 188 muestras negativas por el procedimiento de referencia, 187 (10 de ellas positivas a parvovirus B19 y dos a rubéola) también aportaron resultados negativos por Measles Virus Real Time RT-PCR Kit. La tabla 1 muestra los resultados de sensibilidad y especificidad de la técnica en estudio expresados en términos de porcentaje con sus intervalos de confianza del 95% (IC 95%). A pesar de estar incluida en el calendario sistemático de vacunación, el sarampión ocasiona esporádicamente brotes9. En el contexto del Plan Nacional de Eliminación del Sarampión, se considera preciso llegar a la identificación rápida de todos los casos sospechosos con criterios de alta especificidad2. Una limitación de este estudio estriba en que las muestras no se procesaron por la técnica evaluada y la de referencia partiendo de la misma elución. Esto pudo condicionar diferencias no atribuibles a la RT-PCR y motivadas realmente por fallos en la extracción. La técnica de RT-PCR en tiempo real aquí valorada es sencilla, presenta una excelente especificidad y una aceptable sensibilidad. El número de falsos negativo de esta técnica comercial puede repercutir en su aplicación clínica, máxime dada la elevada contagiosidad del sarampión. Sin embargo, puede resultar adecuada para la dar una respuesta ágil en la confirmación de las sospechas, siempre que se investiguen los casos negativos por un método definitivo más sensible como la técnica del LRIEVI-CNM empleada en este trabajo.
Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.
