Resistencia genotípica a sulfamidas en pacientes con neumonía por Pneumocystis jiroveci

Fundamento y objetivo: Ante la falta de métodos de cultivo se han tenido que desarrollar técnicas moleculares basadas en la identificación de mutaciones puntuales en el gen de la dihidropteroato sintetasa (DHPS) para reconocer la presencia de cepas de Pneumocystis jiroveci resistentes a sulfamidas. El objetivo de nuestro estudio fue conocer la frecuencia de dichas cepas en nuestro medio, ya que hasta el momento se carecía de información sobre este punto en España. Pacientes y método: Se incluyeron todos los casos de neumonía por Pneumocystis identificados a lo largo de 2 años en nuestro centro. El diagnóstico se realizó mediante una técnica de reacción en cadena de la polimerasa anidada en muestras de lavado broncoalveolar. Se utilizaron los cebadores DHPS-3 y DHPS-4 para amplificar un fragmento del gen de la DHPS y se identificaron las mutaciones relacionadas con resistencia mediante el análisis de polimorfismos de restricción. Resultados: Se pudo amplificar el gen de la DHPS en 9 de los 12 casos identificados (75%), 3 de los cuales (33,3%) presentaban alguna de las mutaciones vinculadas con la resistencia a sulfamidas. Conclusiones: En nuestro medio existen con relativa frecuencia neumonías por P. jiroveci causadas por cepas con mutaciones vinculadas a resistencia a sulfamidas.

Background and objective: The absence of culture methods to recognize the presence of resistance to sulfa or sulfone drugs in Pneumocystis jiroveci has led to develop molecular techniques based on the identification of mutations in the dihydropteroate synthase gene (DHPS). The aim of this study was to determine the frequency of these mutations in our geographical area, since in Spain there is no information concerning this issue. Patients and method: The study included all Pneumocystis pneumonia cases identified in our hospital during two years. Diagnosis was made by nested PCR in bronchoalveolar lavage samples. DHPS-3 and DHPS-4 primers were used to amplify the DHPS gene and mutations associated with sulfa resistance were identified using a restriction fragment length polymorphism assay. Results: In 9 out of the 12 cases identified, DHPS could be amplified (75%) from which 3 (33.3%) showed some mutation linked to sulfa resistance. Conclusions: In our area, we have found a relatively high frequency of pneumonia caused by P. jiroveci's strains with mutations associated with sulfa resistance.