Vigilancia epidemiológica mediante marcadores moleculares de resistencia frente a antimaláricos en aislados de Plasmodium falciparum importados a Barcelona, España

Fundamento y objetivo: Se han descrito correlaciones convincentes entre mutaciones en determinados genes de Plasmodium falciparum y la resistencia contra antimaláricos. Con la intención de aplicar las técnicas moleculares en los mecanismos de vigilancia epidemiológica en el Hospital Clínic de Barcelona, y para mapear grados potenciales de resistencia, investigamos la presencia de mutaciones en los codones relevantes de genes asociados a resistencias en aislados de P. falciparum importados por viajeros. Pacientes y método: Se analizó mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y restricción con enzimas el genotipo de los genes pfctr, pfmdr1, dhfr, dhps y citocromo B en cepas de P. falciparum aisladas de 53 pacientes diagnosticados en el Servicio de Medicina Tropical con síntomas de malaria después de haber realizado un viaje a zonas endémicas de malaria. Resultados: El 63% de los pacientes presentó un aislado de P. falciparum con la mutación K76T en pfctr. En el 54% de los aislados se encontró Tyr86 en pfmdr1. Las mutaciones en los codones 51, 59 y 108 de dhfr se encontraron en el 33, el 49 y el 44% de los aislados, respectivamente. Las mutaciones en los codones 436, 437 y 540 de dhps se encontraron en el 35, el 35 y el 8,5% de los aislados. El 30% de los viajeros estaba infectado por parásitos que presentaban 3 o más mutaciones en alguno de los codones de dhps y dhfr. Ninguno de los pacientes presentó mutado el codón Tyr268 en el gen del citocromo B. Conclusiones: La alta prevalencia de mutaciones en los aislados importados sugiere el rápido desarrollo y la expansión de resistencias a la mayoría de los antimaláricos comúnmente usados. La concurrencia de más de una mutación en localizaciones diferentes sugiere la expansión de resistencias múltiples, lo que pone así de manifiesto la ineficacia de la monoterapia con los antipalúdicos más comunes.

Background and objective: There have been described compelling correlations between mutations in some Plasmodium falciparum genes and resistance to antimalarial drugs. To apply molecular techniques in the mechanisms of epidemiological surveillance in the Hospital Clínic of Barcelona and to map potential levels of resistance, we investigated the presence of mutations in the relevant codons of genes associated with resistance in P. falciparum isolates imported by travellers. Patients and method: The genes pfctr, pfmdr1, dhfr, dhps and cytocrhome b were analyzed by PCR and enzymatic restriction in P. falciparum isolates from 53 persons attending the Tropical Medicine Department after a trip to a malaria endemic area. Results: 63% of patients were infected with a P. falciparum isolate with the K76T mutation in pfctr. Tyr86 in pfmdr1 was found in 54% of the isolates. Mutations in codons 51, 59 and 108 in dhfr were found in 33%, 49% and 44% of the isolates, respectively. Mutations in codons 436, 437 and 540 in dhps were found in 35%, 35% and 8.5% of the isolates. 30% of travellers were infected by parasites displaying 3 or more mutations in any of the codons of dhps and dhfr. None of the patients had a mutation in the Tyr268 codon of the cytochrome B gene. Conclusions: The high prevalence of mutations in the imported isolates suggests a fast development and expansion of resistance against most of the antimalarial drugs commonly used. The concurrence of more than one mutation in different loci suggests the expansion of multiple resistances.