Los estafilococos coagulasa negativos (SCN) comprenden un amplio número de especies distintas de Staphylococcus aureus, llamadas así por su incapacidad para coagular el plasma debido a la falta de producción de la enzima coagulasa1. Tradicionalmente se consideraban inocuos o patógenos oportunistas poco virulentos al encontrarse como comensales en la piel, pero con el avance de la medicina y la utilización de métodos diagnósticos y terapéuticos invasivos, los SCN se han convertido en patógenos de primer orden. S. epidermidis, S. haemolyticus, S. lugdunensis, S. saprophyticus son las especies de SCN más frecuentemente asociadas a infección en humanos2. La utilización cada vez más generalizada de sistemas automáticos o semiautomáticos de identificación bacteriana, con un amplio número de pruebas, ha contribuido a que se identifiquen mejor en la práctica diaria de los laboratorios las distintas especies de estafilococos coagulasa negativos, y se conozca mejor su papel en la etiología de diferentes procesos infecciosos. S. lugdunensis es una especie de SCN descrito por primera vez por Freney et al3 en 1988; el término lugdunensis deriva de Lugdunum, nombre latino de Lyon, ciudad donde se aisló por primera vez. S.lugdunensis forma parte de la microbiota de la piel y además es un patógeno humano infrecuente pero no raro. Las especiales características de virulencia, microbiológicas, clínicas y de sensibilidad a antimicrobianos de esta especie la hacen única y diferente de otros SCN. S. lugdunensis se comporta más como S. aureus que como un típico SCN en muchos aspectos, principalmente por su gran virulencia y por su capacidad para producir infecciones supuradas4. Con el objetivo de conocer las características clínico-microbiológicas de los S. lugdunensis aislados en nuestro laboratorio hemos realizado este estudio en el cual se recogen los aislamientos obtenidos durante un periodo de 8 años. Se presentan aquí el número de muestras en las que se han aislado, la procedencia de las mismas, y el tipo de infección. Así mismo, se informa el patrón de sensibilidad antibiótica que presentaron nuestros aislados.

Se ha realizado un estudio retrospectivo de los aislamientos de S. lugdunensis obtenidos desde enero de 2004 a diciembre de 2011 de pacientes atendidos en nuestro hospital, tanto en consultas como en hospitalización. El procesamiento de las muestras para cultivo bacteriano se realizó según el protocolo establecido en nuestro laboratorio. En exudados, abscesos y líquidos estériles se realizó cultivo en los siguientes medios: Agar Sangre, Agar Chocolate + Polyvitex en atmósfera de 10% de CO2, Agar Macconkey, caldo cerebro-corazón (BHI) a 35°; y agar Schaedler y Schaedler con Neomicina-Vancomicina 5% de sangre de cordero en atmósfera anaerobia (Biomerieux). Se realizó extensión para observación microscópica con tinción de Gram. Las muestras de sangre se inocularon en frascos de hemocultivo para aerobios y anaerobios (Bactec plus) y se incubaron en el sistema Bactec 9120 (Becton –Dickinson). La resiembra de los frascos positivos se realizó en agar Sangre y agar Chocolate en atmósfera de 10% de CO2 y medios para anaerobios. Las muestras de orina se sembraron con asa calibrada para cultivo semicuantitativo en agar Sangre y agar Cled. Se valoraron para su identificación y antibiograma aquellos estafilococos con posible relación causal con el cuadro infeccioso según criterios microbiológicos: cocos grampositivos, catalasa positivos, con crecimiento abundante en presencia de exudado purulento; todos los aislamientos procedentes de líquidos estériles y los aislados en dos o más muestras en el caso de hemocultivos, con el fin de descartar los posibles contaminantes epiteliales. La identificación bioquímica y el antibiograma se realizó mediante los paneles deshidratados para grampositivos CIM/Combo del Sistema semiautomático MicroScan (Siemens) Estos paneles utilizan pruebas convencionales y cromogénicas. La identificación se basa en la detección de cambios de pH, utilización de sustratos y crecimiento en presencia de agentes antimicrobianos, después de 24 h de incubación a 35°C. Las pruebas de sensibilidad a antimicrobianos que utiliza este sistema son una miniaturización de la prueba de sensibilidad por dilución. Después de inocular y rehidratar con una suspensión estandarizada de microorganismos y de incubar a 35°C, 24 h, se determina la menor concentración antimicrobiana que muestra inhibición del crecimiento bacteriano (CMI). Los aislamientos identificados por el programa Biotype lookup en el programa LabPro Information Manager (Siemens) con un porcentaje de probabilidad ≥90% fueron aceptados como especies correctamente identificadas. Durante los años que comprende el estudio se identificaron por el mismo procedimiento (paneles para Gram Positivos, MicroScan) 3 cepas de S. lugdunensis correspondientes a los controles de calidad externa de la Sociedad Española de Enfermedades infecciosas y Microbiología (control mensual junio 2006, enero 2008 y agosto 2010). En algunos aislamientos se realizó también pruebas rápidas de aglutinación en portaobjetos para determinación del factor de afinidad por el fibrinógeno (Clumping factor), de la proteína A y de polisacáridos capsulares de S. aureus (Pastorex Staph-plus, Bio-Rad). Se revisaron las historias clínicas de los pacientes con aislamientos de S. lugdunensis considerándose los siguientes datos: edad, sexo, tipo de muestra, localización, servicio de procedencia, enfermedad de base, si estaba ingresado o no en el momento de la toma de muestra, y existencia de cirugía previa reciente.

Durante el periodo de estudio se obtuvieron 27 aislados de S. lugdunensis de 27 pacientes con edades comprendidas entre 5 meses y 84 años (media de 48 años), 14 fueron mujeres y 13 varones (tabla 1). El 74% de las muestras procedían de pacientes ingresados, y el resto, de pacientes atendidos en consultas externas. Las muestras cultivadas fueron: abscesos9, exudados de herida9, líquido articular3, sangre2, líquido peritoneal1, exudado ótico1, exudado nasal1 y orina1 (tabla 2). En 20 casos (74%) el cultivo fue puro y en 7 casos se aisló junto a otros microorganismos (tabla 1). La procedencia de las muestras por servicios se describe en la tabla 2, destacando que el 71% de las mismas proceden de servicios quirúrgicos (Ginecología, Traumatología y Cirugía). En relación con los antecedentes personales o enfermedades de base, en 15 casos (55,5%) existían antecedentes de cirugía o traumatismo reciente, y en 5 casos procesos tumorales (1 de mama, 3 ginecológicos, y 1 de colon). Los 27 aislamientos procedentes de muestras clínicas, así como los 3 controles de calidad estudiados por los paneles para gram positivos de MicroScan mostraron biotipos acordes con una probabilidad de identificación correcta ≥90%, a pesar de que estos paneles no incluyen la producción de ornitina descarboxilasa (ODC), cuya positividad es característica de esta especie junto con la positividad de la prueba de la pirrolinodil-β-naftilamina (PYR), si incluida en estos paneles, habiendo resultado esta última positiva en el 100% de los aislados. El 100% fermentó el carbohidrato D-trehalosa, el 95% la D-manosa, y el 67% la α-lactosa. En 8 casos se realizó la prueba para detectar el factor de afinidad por el fibrinógeno (clumping factor), resultando positivo débil solo un aislamiento (12,5%). La mayoría de las cepas fueron sensibles a los antibióticos estudiados (tabla 3). En 7 cepas (26%) se observó resistencia a penicilina y ampicilina. No hubo ninguna cepa resistente a oxacilina, fosfomicina, eritromicina, y clindamicina mostraron unos niveles de resistencia de 18,5, 14,8, y 7,4% respectivamente.

S. lugdunensis es más parecido a S. aureus que otros estafilococos coagulasa negativos (SCN) en muchos aspectos incluida su elevada capacidad de virulencia. S. lugdunensis es un comensal de la piel y también un patógeno responsable de infecciones nosocomiales y adquiridas en la comunidad5. Inicialmente fue descrito como agente causal de endocarditis de evolución agresiva y fulminante6–9. Posteriormente se ha observado que produce con más frecuencia infecciones de piel y abscesos5,10–12. En nuestra serie 20/27 (74%) de las infecciones afectaban a piel o tejidos blandos, de las cuales en 15 casos existían antecedentes de cirugía reciente o traumatismo. Esto viene a corroborar el papel de S. lugdunensis como agente causal de patologías relacionadas con la piel y tejidos blandos, siendo la alteración de la barrera natural que constituye la piel, por trauma o cirugía, una de las causas más frecuentes de inicio de la infección. Esta circunstancia ha sido también descrita por otros autores12–15. S. lugdunensis se ha relacionado también con abscesos de mama14,16–18, en nuestro caso hubo 4 abscesos de mama, uno de los cuales se produjo después de haberse realizado una biopsia de mama. Los SCN son la causa principal de bacteriemia adquirida en el hospital, y en la mayoría de los casos el foco de infección es el catéter intravascular2. Esto sucede también en dos de nuestros casos, en los cuales los S. lugdunensis aislados en hemocultivos procedían de dos pacientes ingresados por infarto agudo de miocardio, y en cuyas historias clínicas constaba la presencia de fiebre y hematoma en el punto de inserción del catéter, en ambos casos se retiraron los catéteres pero no se enviaron para el cultivo microbiológico. Uno de ellos evolucionó bien con la retirada del catéter y el tratamiento antibiótico, y en el otro caso se produjo el fallecimiento del paciente atribuible a otras causas. La presencia de bacteriemia por S. lugdunensis asociada a infección de catéter está descrita en otros estudios como el de Ros et al.16 que presentan 5 bacteriemias por S. lugdunensis siendo la infección asociada a catéter la causa más probable de los cinco aislamientos sanguíneos. Ebright et al.19 encuentran que de seis casos de bacteriemia significativa por S. lugdunensis, en 5 casos la causa de la infección fue el catéter (3 hemodiálisis y 2 catéteres intravenosos de larga duración). Se consideran también factores predisponentes para la infección por S. lugdunensis la diabetes, inmunodepresión, neoplasias, insuficiencia renal crónica11–14 En nuestra serie, 5 de los casos (18,5%) tenían neoplasias, otros 5 (18,5%) hipertensión, 4 (15%) diabetes, 3 (11%) prótesis, y 7 (26%) presentaban dos o más de las anteriores. La correcta identificación de S. lugdunensis mediante las pruebas habituales utilizadas en muchos laboratorios no siempre se consigue, debido en parte a la similitud de sus colonias con las de S. aureus y también, por otro lado, a las coincidencias bioquímicas con éste y con otros estafilococos coagulasa negativos. A las 18-24 h de incubación en agar Sangre, S. lugdunensis suele manifestarse como un cultivo generalmente heterogéneo, de diversos tamaños de colonias y diferente expresión de la β-hemólisis; después de 48 h de incubación, se observan colonias mucho más homogéneas, blanco amarillentas, cremosas, con un pequeño halo de β-hemólisis y un fuerte olor. Generalmente la hemolisina actúa de modo sinérgico con la β-lisina de S. aureus y produce una lisis total de los hematíes (sinergia hemolítica)20–22. A diferencia de S. aureus, S. lugdunensis no posee coagulasa libre (prueba de coagulasa en tubo negativa) pero el 60-80% de las cepas producen una forma del enzima ligada a la membrana (clumping factor) que da un resultado positivo en las pruebas rápidas comerciales de aglutinación con látex, lo que puede conducir a errores de identificación. Esta aglutinación suele ser más débil que la que muestra S.aureus4. S. lugdunensis se puede diferenciar de otros SCN por dos pruebas bioquímicas: la producción de ornitina descarboxilasa (ODC), siempre presente en esta especie, y la positividad a la prueba de la pirrolinodil-arilamidasa (PYR). Produce ácido a partir de trehalosa, manosa, maltosa y sacarosa pero no a partir de manitol. La prueba de acidificación de la manosa permite diferenciar esta especie de otras que también son PYR positivas (S. haemolyticus)5. Muchos laboratorios clínicos emplean hoy día equipos comerciales manuales o automáticos para la identificación bacteriana. El Manual of Clinical Microbiology23 indica los sistemas comerciales que incluyen S. lugdunensis en su base de datos, entre los que se encuentra el utilizado en nuestro laboratorio. S. lugdunensis se diferencia también de otros SCN en que permanece susceptible a una amplia variedad de antibióticos incluidas las penicilinas. Se ha comunicado que las tasas de resistencias por producción de betalactamasa oscila entre el 7 y el 24% en Francia, el 15% en Suecia y entre el 12-14% en España, siendo la tasa de resistencia mayor en cepas aisladas en EE. UU. (24-40%)4. En nuestro caso la resistencia a penicilina (26%) es similar a la publicada por otros autores españoles16 e inferior a la publicada recientemente por Batista et al.24 con un 40% de resistencia a penicilina. No hemos tenido ningún aislamiento con resistencia a oxacilina, lo que coincide con otros autores españoles24–26. En resumen, encontramos que S. lugdunensis se ha aislado mayoritariamente de infecciones de piel y tejidos blandos siendo la alteración de la barrera natural que constituye la piel, por trauma o cirugía, una de las causas más frecuentes de inicio de la infección. Aunque mantiene una buena sensibilidad a la mayoría de los antibióticos, su tendencia a producir abscesos y su parecido con S. aureus en muchos aspectos hace necesaria una correcta identificación en el laboratorio.

Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.