Marcaje de ceftizoxima con 99mTc

Se presenta un nuevo método de marcaje de antibióticos con 99mTc. Una cefalosporina de 3.ª generación de amplio espectro (ceftizoxima). Material y métodos: Se han utilizado 2,5 mg de ceftizoxima, 6,25 mg de ditionito sódico en una solución tampón (pH 11,4) como agente reductor y 300 MBq de 99mTc. El pH final se ajustó a 8,4 con NaOH 0,1N. La solución resultante fue hervida a 100ºC durante 5 min. La pureza radioquímica se valoró usando ITLC-SG/MEK, ITLC-SG/ 0,9% NaCl y HPLC fase reversa. La actividad biológica se valoró mediante la técnica de difusión en agar impregnadas con E. Coli de discos conteniendo 10,5 µg de antibiótico marcado y sin marcar. El mantenimiento de la actividad biológica fue evaluado por el diámetro de inhibición de los halos obtenidos tras 24 horas de incubación. Resultados: La eficiencia de marcaje fue de 94,9 ± 2,4% (n = 20) y el compuesto mantuvo la estabilidad hasta 6 h. La cromatografía HPLC mostró 5 picos: dos a 1,7-2,0 min corresponden al compuesto derivado de la ceftizoxima (CDC) (82%-83% de la absorbancia y alrededor del 90% de la radioactividad), otro a los 4,7 min corresponde a la ceftizoxima intacta (6% de la absorbancia). Los dos picos restantes, aparecen a los 3,8 y 6,7 min y representan alrededor del 7-8% de la absorbancia. La actividad biológica del CDC respecto al antibiótico no marcado fue del 83%. Conclusiones: 1) El método de marcaje descrito da lugar a una modificación de la estructura de la ceftizoxima. 2) El 99mTc se une a la nueva especie formada con un elevado rendimiento de marcaje y aceptable estabilidad. 3) El 99mTc-CDC mantiene 83% de la actividad antibiótica original y podría ser utilizado para la detección de infección in vivo.

Aim of the study: A new method to label antibiotics with 99mTc, using a third generation, wide spectrum cephalosporine (ceftizoxime), is presented. Material and methods: 2.5 mg of ceftizoxime, 6.25 mg sodium dithionite in sodium bicarbonate buffer (pH=11.4) as a reductor agent, and 300 MBq of 99mTc were used. The final pH was adjusted to 8.4 with NaOH 0.1N. Radiochemical purity was assessed using ITLC-SG/MEK, ITLC-SG/0.9% NaCl and reverse phase HPLC. Biologic activity was assessed with the agar diffusion technique soaked with E. Coli in disks containing 10.5 µg labelled and non-labelled antibiotic. The maintenance of antibiotic activity was assessed by the diameter of the inhibition halos measured after 24 hours of incubation at 37ºC. Results: The labelling efficiency was 94.9 ± 2.4% (n = 20) and the complex was stable up to 6 h post-labelling. The HPLC chromatography showed five peaks: two of them at 1.7-2.0 min, which corresponds to the ceftizoxime derived product (82%-83% of the absorbance and about 90% of the radioactivity) and a third one at 4.7 min which corresponds to the intact ceftizoxime (6% of absorbance). The remaining two peaks appeared at 3.8 and 6.7 min and represented about 7%-8% of the absorbance. The antibiotic activity of the ceftizoxime-derived compound (CDC) was 83% of the unlabelled one. Conclusions: 1) The labelling method of ceftizoxime described causes a modification in its structure. 2) The 99mTc binds to the newly formed compound with high labelling efficiency and an acceptable shelf life stability. 3) The 99mTc-CDC maintains 83% of the original antibiotic activity and could be used for the detection of in vivo infection.