Staphylococcus lugdunensis se ha mostrado, desde su descripción en 1988, como uno de los estafilococos coagulasa negativos con mayor capacidad patógena1. Desde entonces se ha estudiado la sensibilidad frente a diversos antimicrobianos de algunas series de aislados, sobre todo, con los métodos de dilución en agar2,3 y microdilución en caldo4,5, y sólo en contadas ocasiones se han hecho estudios comparativos entre diversas técnicas6–8. El estudio de la sensibilidad a penicilina se ha determinado mediante el empleo de la prueba de betalactamasa, tras inducción o no, con resultados diversos. Asimismo, se ha analizado, en algunos casos, la utilidad de diversos sistemas comerciales automatizados7,9–12, aunque generalmente se han analizado series de estafilococos coagulasa negativos con escasa representación de S. lugdunensis.

El objetivo de nuestro estudio es analizar y comparar la sensibilidad a penicilina y oxacilina de 60 aislamientos clínicos de S. lugdunensis mediante cuatro métodos de sensibilidad antimicrobiana.

En los últimos años, las normas de interpretación de resultados obtenidos en pruebas de sensibilidad antimicrobiana, han sufrido diversas modificaciones en relación con los estafilococos, especialmente S. aureus y S. lugdunensis (NCCLS hasta el año 2004 y CLSI a partir de dicho año).

Hasta el año 2004, las normas para el estudio de sensibilidad a oxacilina y penicilina de aislados de S. lugdunensis se asimilaban a las establecidas para el conjunto de los estafilococos coagulasa negativos (ECN)15.

Tras el hallazgo, en diversos estudios3,12,16, de discrepancias entre los resultados de resistencia a oxacilina y ausencia del gen mecA en distintas especies de ECN, entre los que se incluía S. lugdunensis, se propuso asimilar la interpretación de los resultados de S. lugdunensis a los de S. aureus, de forma que una CMI ⩽2μg/ml determina la sensibilidad a oxacilina y una CMI ⩾4μg/ml, la resistencia17. Además, en 2006 se recomendó el empleo del método de difusión con disco de 30μg de cefoxitina18 en vez del disco de oxacilina para la detección de resistencia a oxacilina en S. lugdunensis, y en 2007, se modificó la medida del halo de lectura del disco de cefoxitina de 20 a 22mm13.

Ninguno de los aislamientos estudiados en nuestro trabajo presentaba el gen mecA. En la literatura inglesa solamente se hallan referidos dos aislamientos de S. lugdunensis mecA positivos; uno de ellos relacionado con una bacteriemia por catéter (caracterizado por PCR y con una CMI a oxacilina >256μg/ml en E-test)19. El otro mostraba un resultado sensible en el método de dilución en agar con cefoxitina, aunque sí era resistente en el mismo método con oxacilina (no se indicaba CMI)20.

Mateo et al7 usaron el método Vitek 2 para estudiar una serie de 17 aislamientos de S. lugdunensis; hallaron que 13 de de ellos presentaban valores de CMI entre 0,5 y 2μg/ml, pero eran mecA negativos, lo que coincidía con los resultados referidos por otros autores10,11,16 puesto que se aplicaban las normas vigentes hasta el año 200415.

En este estudio se hallaron dos aislamientos con CMI ⩾4μg/ml mediante el sistema Vitek 2, que luego no se confirmaron por MIC en caldo ni presentaban el gen mecA, lo que determinó que se trataba de una falsa resistencia.

Tanto el método de difusión con disco de cefoxitina como el E-test mostraron resultados de sensibilidad a oxacilina en todos los aislados, concordantes con el método de MIC en caldo.

Por otra parte, las normas de interpretación para la lectura de resultados de sensibilidad a penicilina en estafilococos han permanecido estables desde 2004 hasta hoy (CLSI 2007), de forma que son sensibles aquellos con CMI ⩽0,12μg/ml y resistentes los de CMI ⩾0,25μg/ml. Las normas actuales indican que los aislamientos de S. aureus resistentes a penicilina son productores de betalactamasa y los que tienen una CMI ⩽0,03μg/ml son betalactamasa negativos, por otra parte, en los casos con CMI entre 0,06 y 0,12μg/ml se recomienda hacer la prueba de inducción de betalactamasa.

Para analizar los resultados de sensibilidad a penicilina obtenidos en nuestro trabajo hemos aplicado estas normas a los aislamientos de S. lugdunensis incluidos en este estudio, teniendo en cuenta que en esta especie no se considera de modo específico la interpretación de los resultados de los ensayos con penicilina.

De esta forma, hallamos que un 40% de nuestros aislamientos eran productores de betalactamasa, lo que supone un mayor porcentaje que el referido por otros autores4–9, esto podría atribuirse a una cuestión epidemiológica, aunque hay que tener en cuenta que en el presente trabajo no se ha estudiado la relación clonal de los aislamientos. Por otra parte, la prueba de inducción con oxacilina ha sido poco utilizada6,9, aunque en nuestro trabajo sólo cuatro aislados dieron resultado positivo tras la aplicación de esta prueba.

De los dos aislamientos sensibles a penicilina en Vitek 2 y resistentes en MIC caldo, uno era productor de betalactamasa, lo que podría explicar este resultado, pero el segundo resultó ser betalactamasa negativo incluso tras inducción, lo que permitiría pensar en un mecanismo de resistencia diferente. Otros 10 aislamientos con resultados discrepantes presentaron CMI cercanas al límite de sensibilidad en casi todos los casos (tabla 2).

Aunque se recomienda aplicar la prueba de betalactamasa tras inducción a los estafilococos con CMI a penicilina de 0,06–0,12μg/ml, todos los aislamientos incluidos en nuestro estudio que presentaron dichos valores de CMI fueron betalactamasa negativos, tal como señalan también Zbinden et al9. Además, los aislamientos resistentes a penicilina en Vitek 2 y sensibles en MIC en caldo (tabla 2) también fueron betalactamasa negativos, incluso tras inducción.

De los datos obtenidos en este trabajo, podríamos concluir que no hemos hallado ningún aislamiento resistente a oxacilina y que la producción de betalactamasa es una característica de frecuencia variable en S. lugdunensis. Por otra parte, la sensibilidad a oxacilina se puede estudiar de forma fiable por el sistema Vitek 2, el método E-test y el método de difusión con disco de 30μg de cefoxitina; este último es el método más sencillo y económico. En relación con los resultados de penicilina obtenidos mediante el sistema Vitek 2, podría proponerse la realización de una prueba de betalactamasa tras inducción en los aislamientos con CMI a penicilina ⩾0,25μg/ml, dado que se hallaron 9 (15%) aislamientos con este valor de CMI y todos fueron betalactamasa negativos, y según las normas CLSI se los habría considerado como resistentes.

En resumen, este trabajo ha tratado de establecer los métodos más adecuados para evaluar la resistencia a oxacilina y penicilina en S. lugdunensis, mediante el estudio de un número apreciable de aislamientos, aplicando las últimas normas del CLSI.