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Vol. 29. Núm. 10.
Páginas 948-954 (enero 2004)
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Vol. 29. Núm. 10.
Páginas 948-954 (enero 2004)
Importancia de las proteínas G heterotriméricas en la biología molecular del cáncer de próstata
Importance of heterotrimeric g proteins in prostate cancer molecular biology.
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J.C. Prieto Villapun*, R.M. Solano Haro*, M.J. Carmena Sierra*, M. Sánchez-Chapado**,***,1
Autor para correspondencia
msanchez.hupa@salud.madrid.org

Prof. M. Sánchez-Chapado Departamento de Cirugía. Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares (Madrid)
* Departamento de Bioquímica y Biología Molecular
** Departamento de Cirugía, Universidad de Alcalá
*** Servicio de Urología, Hospital Universitario Príncipe de Asturias. Alcalá de Henares
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Resumen
Objetivo

Profundizar en el conocimiento de la implicación de las subunidades αs y αi de las proteínas G heterotriméricas en el cáncer prostático humano.

Métodos

Tejido prostático de 9 pacientes sometidos a prostatectomía radical por cáncer prostático y 5 controles sometidos a cistoprostatectomía por carcinoma de vejiga. Se analizó la expresión de subunidades αs y αi (mRNA por RT-PCR y proteína por Western-blot), funcionalidad (actividad adenilil ciclasa, AC) y posibilidad de mutaciones (análisis de restricción enzimática y secuenciación del cDNA).

Resultados

A nivel de mRNA, se detectó la expresión de subunidades αs, αi1, αi2 y αi3 en tejidos sanos y cancerosos. A nivel de proteína, la expresión de subunidades αs y αi1,2 disminuyó (25% y 40%, respectivamente) en cáncer de próstata. También disminuyó la expresión de αi3,0, mientras que la de ß no se modificó. La actividad basal AC en membranas de adenocarcinoma fue 40% inferior al control. La digestión con enzimas de restricción Eag I o AlwN I no permitió localizar mutaciones en αs. Sin embargo, la digestión a nivel de αi2 con BstU I sirvió para observar en tejido canceroso un cambio de Gln205 (triplete CAG) a Pro (CCG).

Conclusiones

La funcionalidad y expresión de las subunidades de las proteínas G heterotriméricas están modificadas selectivamente en el adenocarcinoma prostático humano, concurriendo además alguna mutación puntual. La sustitución observada de Glu205 por Pro puede conllevar que la proteína αi2 resultante tenga muy baja actividad GTPasa y, por tanto, se encuentre estabilizada en su forma activa.

Palabras clave:
Cáncer de próstata
Proteínas G
Expresión
Mutaciones
Abstract
Objective

To deep in the knowledge of the involvement of G-protein αs and αi subunits in human prostate cancer.

Methods

Prostate tissue from 9 patients undergoing radical prostatectomy for prostate cancer and 5 controls undergoing cystoprostatectomy for bladder carcinoma. G-protein αs and αi subunits were studied for expression (mRNA by RT-PCR and protein by Western-blot), functionality (adenylyl cyclase activity, AC) and possibility of mutations (analysis with restriction enzymes and cDNA sequentiation).

Results

At mRNA level, the expression of αs, αi1, αi2 y αi3 was detected in healthy and cancerous tissues. At protein level, the expression of αs y αi1,2 diminished (25% and 40%, respectively) in prostate cancer. The expression of αi3/0 also diminished, whereas that of ß subunit was not modified. Basal AC activity in adenocarcinoma membranes was 40% inferior to the control. Digestion with restriction enzymes Eag I or AlwN I did not allow to locate mutations in αs. However, digestion at αi2 level with BstU I enzyme served to observe a change of Gln205 (CAG triplet) to Pro (CCG).

Conclusions

The functionality and expression of heterotrimeric G proteins are selectively modified in human prostate adenocarcinoma, occurring in addition some punctual mutation. The observed substitution of Gln205 by Pro may result in a low GTPase activity for αi2 that, therefore, is stabilized in its active form.

Key words:
Prostate cancer
G proteins
Expression
Mutations

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