Comparar las concentraciones de interleucina-15 en pacientes con preeclampsia y embarazadas normotensas sanas.
MétodoSe seleccionó un total de 100 pacientes. Se incluyeron 50 pacientes preeclámpticas como los casos (grupo A) y un grupo control seleccionado por tener una edad y un índice de masa corporal similares al grupo de estudio que consistió en 50 embarazadas normotensas sanas (grupo B). Las muestras de sangre se recolectaron en todas las pacientes antes del parto e inmediatamente después del diagnóstico en el grupo B para determinar las concentraciones de interleucina-15.
ResultadosNo se encontraron diferencias significativas con relación a la edad materna, edad gestacional e índice de masa corporal al momento de la toma de la muestra (p=ns). Se encontraron diferencias estadísticamente significativa en las concentraciones de interleucina-15 entre las pacientes en el grupo de estudio (grupo A; 3,21±0,79pg/ml) y las pacientes del grupo control (grupo B; 2,26±0,24pg/ml; p<0,05). Se observó una correlación moderada, positiva y significativa con los valores de presión arterial sistólica (r=0,584; p<0,05) y con los valores de presión arterial diastólica (r=0,589; p<0,05).
ConclusionesLas preeclámpticas presentaron concentraciones significativamente más altas de interleucina-15 al compararlo con embarazadas normotensas sanas.
To compare interleukin-15 concentrations in preeclamptic patients and healthy normotensive pregnant women.
MethodA total of 100 patients were selected. Fifty preeclamptic patients were selected as cases (group A) and 50 normotensive pregnant women with a similar age and body mass index to the study group were selected as controls (group B). Blood samples were collected before labor in all patients and immediately after diagnosis in group B to determine interleukin-15 concentrations.
ResultsThere were no significant differences in maternal age, gestational age or body mass index at sample extraction (p=ns). Interleukin-15 concentrations were significantly higher in patients in the study group (group A; 3.21±0.79pg/ml) than in those in the control group (group B; 2.26±0.24pg/ml; p<0.05). There was a moderate, positive and significant correlation with systolic blood pressure values (r=0.584; p<0.05) and diastolic blood pressure values (r=0.589; p<0.05).
ConclusionsInterleukin-15 concentrations were significantly higher in preeclamptic patients than in healthy normotensive pregnant women.
La preeclampsia es un desorden multisistémico del embarazo con manifestaciones clínicas como hipertensión y proteinuria. Aunque la causa del desorden aún es desconocida, los conceptos actuales sugieren una disfunción generalizada del endotelio vascular materno como hallazgo patogénico central1.
La hipótesis de mala adaptación sugiere que la preeclampsia se debe a una inapropiada regulación de la respuesta materna inmune Th2, llevando a una desviación hacia la perjudicial inmunidad Th12,3. El inicio de la disfunción endotelial en la preeclampsia es desconocido, pero se ha demostrado que las citokinas producen activación de los neutrófilos y de la adhesión celular al endotelio produciendo daño vascular4. Se conoce que las citokinas juegan un papel principal no solo en la señalización del sistema inmune, sino también en la ovulación, implantación, placentación y parto5.
La interleucina (IL) 15 fue inicialmente descrita como factor activador de los linfocitos T y tiene similitud estructural a la IL-26,7. Es una citokina pleitrófica, ya que induce la proliferación de las células T y la maduración de las células B6. Se expresa en numerosos tejidos y células humanas normales incluyendo monocitos activados7. La expresión por células no inmunes sugiere que tienen actividad mas alla del sistema inmune6,7. Las concentraciones séricas están incrementadas en condiciones inflamatorias como lupus eritematoso sistémico y enfermedades alérgicas8,9. La presencia de IL-15 en la interfase materno-fetal indica que esta tiene un papel durante el embarazo, pero en la actualidad es poco comprendido7. Aunque se conoce que las citokinas, incluyendo IL-6 e IL-10, están alteradas en la preeclampsia10,11, existe poca información sobre las concentraciones en las preeclámpticas.
El objetivo de la investigación fue comparar las concentraciones de interleucina 15 en pacientes con preeclampsia y embarazadas normotensas sanas.
MétodoSe seleccionó a un total de 100 pacientes. Se incluyó a 50 pacientes preeclámpticas los casos (grupo A) y un grupo control seleccionado por tener edad e índice de masa corporal similares al grupo de estudio, que consistió en 50 embarazadas normotensas sanas (grupo B). Todas las pacientes eran primigestas. El comité de ética del hospital aprobó el estudio.
La preeclampsia se definió como la presión arterial sistólica de 140mm de Hg o más, o presión arterial diastólica de 90mm de Hg o más, confirmada por 6h o más de diferencia, mientras que la proteinuria se definió como 300mg o más de proteína en una muestra de 24h, o 1-2 cruces de proteinuria en un examen cualitativo después de las 20 semanas de gestación.
Los criterios de exclusión fueron antecedentes de enfermedad hipertensiva preexistente (antes de las 20 semanas), enfermedad cardíaca o renal, diabetes mellitus, habito tabáquico, embarazo múltiple y tratamiento con medicamentos que puedan alterar las concentraciones de IL-15.
Las muestras de sangre (10ml) se recolectaron en todas las pacientes antes del parto e inmediatamente después del diagnóstico en el grupo de casos de la vena antecubital y se las dejó coagular a temperatura ambiente. Posteriormente, fueron centrifugadas a 1.000g por 15 minutos a los 60 minutos de tomada la muestra y almacenadas con posterioridad a -80°C. Se utilizó una prueba de inmunoabsorbencia ligada a enzima para la medición cuantitativa de la IL-15 en cada muestra. Todas las mediciones fueron hechas por duplicado y el promedio de las 2 mediciones fue el resultado final. La sensibilidad fue de 2pg/ml. El coeficiente de variación intra e inter-ensayo fue menor del 10%.
Los valores obtenidos se presentaron como promedio±desviación estándar. La prueba de la t de Student para muestras no relacionadas se utilizó para el análisis de los grupos y para comparar las variables continuas. Los coeficientes de correlación entre la IL-15 y la presión arterial sistólica y diastólica se evaluaron usando la prueba de Pearson. La precisión de la IL-15 para el diagnóstico de preeclampsia se presenta en función de la sensibilidad, la especificidad, el valor predictivo positivo, el valor predictivo negativo y la precisión. Se utilizó el análisis operador-receptor para determinar el mejor valor de corte. Se consideró p<0,05 como estadísticamente significativa.
ResultadosLas características generales de los dos grupos de pacientes se muestran en la tabla 1. No se encontraron diferencias significativas con relación a la edad materna, la edad gestacional y el índice de masa corporal al momento de la toma de la muestra (p=ns). Se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos en los valores promedio de presión arterial sistólica y diastólica (p<0,05).
Características generales
| Grupo APreeclámpticas(n=50) | Grupo BControles(n=50) | p | |
| Edad materna, años | 22,3±2,6 | 21,3±3,8 | ns |
| Edad gestacional, semanas | 36,9±1,9 | 37,3±2,0 | ns |
| Indice de masa corporal, Kg/m2 | 27,6±1,7 | 27,5±1,7 | ns |
| Presión arterial sistólica, mm de Hg | 148,6±11,8 | 103,9±6,8 | <0,05 |
| Presión arterial diastólica | 103,2±8,1 | 73,5±7,7 | <0,05 |
En la tabla 2 se muestran los valores promedio de IL-15. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las pacientes en el grupo A (3,21±0,79pg/ml) y las pacientes del grupo B (2,26±0,24pg/ml; p<0,05). Al realizar la correlación entre las concentraciones de IL-15 y los valores de presión arterial (tabla 3), se observó una correlación moderada, positiva y significativa con los valores de presión arterial sistólica (r=0,584; p<0,05) y con los valores de presión arterial diastólica (r=0,589; p<0,05).
En la figura 1 se muestra la curva operador-receptor para la precisión de la IL-15 para el diagnóstico de preeclampsia. Un valor de corte de 2,40pg/ml presentó un valor por debajo de la curva de 0,86 y tiene una sensibilidad del 78,0% (intervalo de confianza del 95% [IC95%]; 66,5-89,4), especificidad del 72,0% (IC95%, 59,5-84,5), valor predictivo positivo del 73,5% (IC95%, 61,7-85,4) y valor predictivo negativo del 76,6% (IC95%, 64,4-88,7) con una exactitud diagnóstica del 75,0%.
Discusión
En el presente estudio, las pacientes con preeclampsia presentaron concentraciones significativamente más altas de IL-15 en comparación con embarazadas normotensas sanas. Dados los efectos dramáticos de las citokinas, se ha propuesto que el trofoblasto y las células endoteliales maternas son los blancos para la agresión inmune en la preeclampsia, ya que son las sustancias efectoras de esta agresión5. Sankaralingam et al.12 sugieren que la acción de las citokinas es una de las hipótesis más atractivas de la disfunción inmune en este síndrome. Redman y Sargent13 sugieren que los hallazgos clínicos de la preeclampsia son bien descritos por una respuesta inflamatoria materna excesiva. La elevación observada en las concentraciones en la preeclampsia es probablemente debidas a la activación celular secundaria a una respuesta inflamatoria materna exagerada en respuesta a factores placentarios14.
Aunque algunos investigadores han clasificado a la IL-15 como una citokina proinflamatoria7,15–17, otros pocos la han considerado como un co-estimulador de las citokinas tipo 218,19. La IL-15 actúa, junto a la IL-12, para inducir la producción de interferón gamma, IL-10 y factor de necrosis tumoral alfa20,21, mientras que la IL-15 sola para ser un potente estímulo para la producción del factor estimulante de colonias de granulocitos por las células CD56 humanas20,22. Debido a que la IL-15 actúa como un co-estimulador de la producción del interferón alfa por las células natural killer, es esencial para el control del ambiente proinflamatorio.
La IL-15 (pero no la IL-2) ha sido detectada en los macrófagos uterinos, amnios corion y células deciduales, sugiriendo una posible fuente durante el embarazo16,23,24. También está presente en la placenta, la cual puede ser la fuente de la alteración de las concentraciones maternas de citokinas7,15,17. La expresión de IL-15 ha demostrado alcanzar su pico en la mitad de la fase secretora de la menstruación humana normal y es regulada durante la decidualización inducida por progesterona25. Debido a que co-estimula la producción de citokinas por las células natural killer en la sangre periférica, también puede estar involucrada en la producción de citokinas por las células natural killer uterinas, las cuales se han propuesto que regulan los cambios placentarios durante el embarazo26. La IL-15 se expresa en células inmunes y no inmunes6–8. Es producida por monocitos activados y células dendríticas y sus concentraciones se incrementan durante los estados inflamatorios27.
Agarwal et al.17 reportaron disminución en la expresión del ARN mensajero de la IL-15 y en la liberación del IL-15 inmunológicamente reactiva in vitro en la placenta de las preeclámpticas, sugiriendo que la placenta puede no ser la principal fuente del aumento en las concentraciones séricas de IL-15. Se ha propuesto que las células polimorfonucleares pueden ser el origen de esta aumento28.
Los reportes en la investigación médica sobre las concentraciones de la IL-15 y la preeclampsia son escasos28,29. Hu et al.28 encontraron concentraciones significativamente más altas en las preeclámpticas que en los controles y también encontraron diferencias en las concentraciones entre las preeclámpticas leves y las severas. El-Baradie et al.29, utilizando una prueba de ELISA con un limite de detección similar al de la presente investigación, demostraron que un punto de corte de 3,2pg/ml tenia una sensibilidad de 94,4%, especificidad de 89,9% y una precisión total de 91,4%. En la presente investigación se utilizó un punto de corte mas bajo (2,4pg/ml) y se encontraron valores de sensibilidad, especificidad y exactitud diagnóstica un poco menor a lo descrito previamente. Los hallazgos la elevación de las concentraciones séricas de IL-15 corroboran el hecho que la preeclampsia está asociada con una mayor respuesta inflamatoria comparado con el embarazo normal29. Jonsson et al.30 realizaron determinaciones de citokinas en preeclámpticas y no pudieron detectar la presencia de IL-15.
La presente investigación también demostró una asociación positiva y significativa entre las concentraciones de IL-15 y los valores de presión arterial sistólica y diastólica, la cual no había sido reportada previamente. Estos hallazgos demostrarían que la IL-15 tiene relación directa con la preeclampsia y está asociada con una mayor respuesta inflamatoria comparado con el embarazo normal.
Se concluye que las preeclámpticas presentaron concentraciones significativamente más altas de interleucina-15 al compararlo con embarazadas normotensas sanas.
Conflicto de interesesLos autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.
