La Organización Mundial de la Salud recomienda implantar sistemas específicos de vigilancia de la evolución de serotipos de Streptococcus pneumoniae en aquellas regiones donde se ha instaurado la vacunación1. En la actualidad se conocen 92 serotipos de neumococo2,3 encuadrados en 46 serogrupos. La nomenclatura para su clasificación viene definida por un número (que designa el serogrupo) y, en ocasiones, por una letra mayúscula (para serogrupos con varios serotipos). El método de referencia para el serotipado de S. pneumoniae es el test de Quellung4. Consiste en una reacción de precipitación entre antisueros específicos y el antígeno polisacárido de la bacteria que hace visible microscópicamente su cápsula. Debido a su laboriosidad y subjetividad suele efectuarse en laboratorios especializados. En la actualidad se dispone de una técnica de aglutinación por látex (Pneumotest-Latex; Statens Serum Institut, Dinamarca) para el serogrupado/serotipado parcial de neumococo5. Esta técnica llega a identificar 8 serotipos (en los que el serotipo y serogrupo coinciden) y, aunque en el resto sólo se consigue la identificación a nivel de serogrupo o conjunto de serogrupos, puede resultar muy útil como método inicial de tipado6. La inmunidad generada por la vacunación es específica de serotipo7. Por ello en los sistemas de vigilancia de la enfermedad neumocócica la matización entre serotipo y serogrupo es un aspecto trascendental8. Recientemente se ha lanzado una nueva versión del método de aglutinación por látex (Pneumococcus 7-valent Latex Kit [P7VLK]; Statens Serum Institut) especialmente diseñada para detectar e identificar los serotipos 4, 6B, 9V, 14, 18C, 19F y 23F, incluidos en la vacuna conjugada 7 valente (VC7V). Esta técnica incluye un pool común de antisueros frente a los 7 polisacáridos vacunales y las suspensiones individuales de cada tipo o factor. El objetivo de este estudio fue evaluar esta nueva técnica. Se empleó una colección de 111 cepas invasoras de S. pneumoniae que habían sido previamente serogrupadas/serotipadas mediante Pneumotest-látex con confirmación de factores específicos de serotipo por el test de Quellung. Las cepas fueron seleccionadas por corresponder a serotipos cubiertos por la VC7V (n=56), por pertenecer a serotipos relacionados pero no cubiertos por la VC7V (serotipos 6A, 7F, 9N, 18F, 19A, 23A y 23B; n=35) o por tratarse de otros serotipos no incluidos en la VC7V pero que son frecuentes en nuestro entorno8 (serotipos 1, 3, 5 y 8; n=20). Las determinaciones con P7VLK, se realizaron siguiendo las recomendaciones del fabricante. La tabla 1 muestra los resultados de serotipado obtenidos con P7VLK. Esta técnica resultó muy específica para detección de cepas cubiertas por la VC7V. Sin embargo, 9 de las 56 cepas cubiertas por la VC7V no fueron correctamente serotipadas (sensibilidad 83,9%). Cinco de estas cepas no fueron detectadas como serotipos VC7V (resultados falsos negativos con el pool común frente a polisacáridos vacunales). Las otras 4 cepas sí fueron detectadas como vacunales (resultados positivos con el pool común frente a los 7 polisacáridos) pero no fueron identificadas correctamente a nivel de serotipo. Los fallos se dieron en cepas de los serotipos 18C, 19F, 9V y 6B. Dada su sencillez esta técnica quizá pudiera aplicarse en la investigación rápida y preliminar de fracasos de la VC7V (la detección de un fallo por esta vacuna muy posiblemente sea cierta) en laboratorios que carezcan de un sistema más completo de serotipado. No obstante, su falta de sensibilidad para la detección de ciertos serotipos (especialmente 19F y 18C) y las reacciones cruzadas entre otros (especialmente 6B y 9V) restringen su uso como método definitivo de despistaje (algunos fracasos vacunales podrían pasar desapercibidos o ser equívocamente atribuidos a otros serotipos). El inminente advenimiento de nuevas vacunas conjugadas frente a un rango más amplio de serotipos7 y la necesidad de monitorizar los posibles reemplazos por cepas no vacunales9 constituyen limitaciones aún más importantes de esta técnica y hacen desaconsejar en la actualidad su empleo como método único de serotipado.
Resultados de serotipado obtenidos con Pneumococcus 7-valent Latex Kit
| Serotipos No V7V | N.o cepas probadas | N.o cepas negativas por Pneumococcus 7-valent Latex Kit |
| 1 | 5 | 5 |
| 3 | 5 | 5 |
| 5 | 5 | 5 |
| 8 | 5 | 5 |
| 18F | 5 | 5 |
| 19A | 5 | 5 |
| 23A | 5 | 5 |
| 23B | 5 | 5 |
| 6A | 5 | 5 |
| 7F | 5 | 5 |
| 9N | 5 | 5 |
| Total cepas No V7V | 55 | 55 |
| Especificidad para la detección de serotipos cubiertos por la VC7V | 100% (55/55) | |
| Serotipos V7V | N.o cepas probadas | N.° cepas identificadas por Pneumococcus 7-valent Latex Kit |
| 4 | 8 | 8 |
| 14 | 8 | 8 |
| 18C | 8 | 5* |
| 19F | 8 | 6** |
| 23F | 8 | 8 |
| 6B | 8 | 6*** |
| 9V | 8 | 6**** |
| Total cepas V7V | 56 | 47 |
| Sensibilidad para la detección e identificación de serotipos cubiertos por la VC7V | 83,9% (47/56) | |
Dos de los 3 fallos en la identificación del serotipo 18 se debieron a la no detección de la cepa como vacunal y 1 a una identificación incorrecta como serotipo 6B.
Los 2 fallos en la identificación del serotipo 19F se debieron a la no detección de la cepa como vacunal.
A la Subdirección General de Promoción de la Salud y Prevención de la Comunidad de Madrid y a los Servicios de Microbiología de los hospitales públicos y privados que colaboran en el Sistema de Vigilancia de la Enfermedad Invasora por Streptococcus pneumoniae en esta Región.
